El desciframiento completo del genoma humano inaugura una

nueva era de la medicina Diario EL PAS - 15 Abril 2003

El Proyecto Genoma, despus
de 13 aos de investigacin y
una inversin superior a los
3.000 millones de euros,
anunci ayer el desciframiento
completo del ADN humano. El
logro, alcanzado tres aos
despus de trazarse el primer
borrador del genoma, fue
saludado por los jefes de
Estado y Gobierno de los
pases que participan en esta
iniciativa pblica
EE UU, Reino Unido,
Alemania, Francia, China y
Japn; como "una
aportacin fundamental al
conocimiento de la especie
humana, que permitir
avances revolucionarios".
Como ejemplos de este
nuevo horizonte mdico, los
cientficos citaron, aunque
con prudencia, la bsqueda
de los genes de la buena
salud, los frmacos a la
carta o los superanlisis de
sangre.

BBC: Mircoles, 5 de septiembre de 2012
Cientficos publicaron el
anlisis ms detallado del
genoma humano hasta la
fecha.

El equipo dijo que encontr
que una parte mucho
mayor de lo que se pensaba
del cdigo gentico es
activa biolgicamente.
Los cientficos descubrieron,
en efecto, que las largas
tiras de ADN que haban
sido calificadas como
"basura" son cruciales para
detallar la forma en que
nuestro genoma funciona.
El 80% de nuestro genoma
realiza una funcin
especfica y hasta ahora la
atencin se ha centrado en
genes codificadores de
protenas, que representan
slo 2% del genoma.
05 MARZO 2014
Venter, de 67 aos, se ha
asociado con el pionero de
clulas madre Robert Hariri, y
el fundador de X Prize
Foundation, Peter Diamandis,
para formar Human Longevity
Inc, una empresa que va a
utilizar tanto la genmica y
terapias con clulas madre,
para encontrar tratamientos
que permitan a los adultos
estar sanos el mayor tiempo
posible.

Craig Venter, el cientfico
estadonunidense que trabaj
para mapear el genoma
humano hace ms de una
dcada, y cre la vida
sinttica en 2010, se encuentra
ahora en una bsqueda para
tratar las enfermedades
relacionadas con la edad.

Dra. Pilar Surez Tirado
FMH UNPRG 2013
OBJETIVOS
1. Definir Mutacin gnica y polimorfismo.
2. Comprender las bases moleculares de la
mutacin.
3. Diferenciar Tipos de mutaciones gnicas.
4. Sealar mecanismos de mutaciones. Tasa de
mutaciones.
5. Indicar tipos de agentes mutgenos.
6. Explicar mecanismos de reparacin del DNA.
7. Sealar enfermedades humanas relacionadas con
defectos en los mecanismos de reparacin.


VARIACIN GENTICA
Los seres humanos tienen secuencia de ADN
nuclear idntica en 99.9%

Variacin gentica + ambiente

Variacin fenotpica

SALUD ENFERMEDAD
Variabilidad gentica:
Se genera durante reproduccin sexual
Segregacin aleatoria de los
cromosomas de cada
progenitor a los gametos.

Intercambio de material gentico
durante la recombinacin
MUTACIN
Cualquier cambio en la secuencia de bases o en la
organizacin del ADN.



HISTORIA

En 1901
el botnico holands
Hugo de Vries,
primero
en utilizar el trmino
mutacin,
lo aplic a cambios
en los caracteres
de una especie.

En 1910 el estadounidense Thomas Hunt
Morgan
realiz
investigaciones
en Drosophila y
observ que las
mutaciones
pueden provocar
cambios muy
pequeos.


HISTORIA
En 1929 el bilogo estadounidense Germann Joseph
Muller observ que la tasa de mutaciones
aumentaba mucho con los rayos x.

En 1943 Salvatore Luna y Max Delbrck
disearon una metodologa para calcular la tasa de
mutacin.

En 1951 57, B. Mc Clintock descubri los
transposones.





En 1960, M. Kimura
desarroll la teora de
la evolucin biolgica
que se basa en
el efecto neutral
de la mayor parte de los
cambios en el ADN.
Polimorfismos.
Reloj molecular.
GEN
Fragmento de ADN de 20 30 kb que funciona
como una unidad y codifica para un producto
determinado, ya sea un ARN o una protena.

Definiciones
Locus Alelos Genotipo Polimorfismo
Homocigoto - heterocigoto


ESTRUCTURA DEL ADN
MUTACIN GNICA
Todo cambio permanente en la secuencia
de bases del ADN de un organismo.
Cambios estables y heredables en la
secuencia de un gen.
Cambios moleculares que afectan
segmentos de ADN menores a unas 10
megabases.
Son submicroscpicos.
ORIGEN de las mutaciones
Errores en la replicacin del ADN
ADN polimerasa: un error c/104 nucletidos.

Sistema de edicin ADN polimerasa un error c/107

Errores en la reparacin de ADN
Procesos qumicos espontneos, mutgenos

Mecanismos de reparacin del ADN
1 nucletido incorrecto c/1010
TIPOS DE MUTACIONES
A. Sustituciones de nucletidos
(m.puntuales)
m. silenciosas
m. de cambio de sentido(mis-sense)
m. sin sentido (non-sense)
m. del procesamiento del ARN
m. de regiones reguladoras
B. Deleciones e inserciones

Deleciones e inserciones de pequeo
nmero de bases
Deleciones, inversiones, fusiones y
duplicaciones ms extensas
Insercin de elementos L1 o Alu
Expansin de secuencias repetidas
Tasa de mutaciones
La tasas varan con un rango de 10^(-4) a
10^(-6) mutaciones por locus por generacin.
Es probable que 1 de cada 40 personas haya
recibido un gen mutado nuevo de uno de sus
progenitores.
INFLUYEN:
1. Tamao gnico
2. Puntos calientes 5- C G 3
3. Repeticiones de tripletes
4. Nmero y extensin de intrones
5. Edad y sexo de progenitor con mutacin
6. Mecanismo de la mutacin

^
Gen de la DISTROFINA de
enorme tamao 2.9 Mpb














En cromosoma X
Puntos calientes de mutacin: CG
En los mamferos, cerca del 80% de los
dinucletidos CG son metilados

Desaminacin 5-
Metilcitosina


Puntos calientes de Mutacin
Gametognesis y mutagnesis
Consecuencias de las
mutaciones
Produccin de una protena distinta de la esperada
o su falta de produccin.

Malformaciones congnitas.
Alteraciones funcionales o trastornos
metablicos.
En clulas somticas puede producir cncer
En clulas germinales puede trasmitirse a la
descendencia

Consecuencias
Acondroplasia
Cncer
Efectos fenotpicos de las
mutaciones
Prdida de funcin: en relacin con
dosis gnica
desencadenan fenotipos recesivos,

Ganancia de funcin: altera la protena,
adquiere nueva funcin
desencadenan fenotipos dominantes
Prdida de la funcin

Mutaciones en el propio gen: puntuales, deleciones o
inserciones, alteraciones de las secuencias de ayuste,
mutaciones que afectan la estabilidad del ARNm.

Mutaciones que afectan a los elementos que regulan
la expresin gnica: m. del promotor, gen que se
mueve de su posicin original.

Prdida de funcin: Fibrosis qustica
F. Chopin
Gen de gran tamao,
250 kb, 27 exones,
regulador de
transmembrana (CFTR)
En cromosoma 7q
300 mutaciones
diferentes
F 508 : delecin de 3
bases, prdida de
fenilalanina.

Ganancia de funcin
Mutacin que altera la protena y adquiere
nueva funcin.
Ej. alelo Pittsburg de alfa 1 antitripsina

Por sobreexpresin del gen.
Ej. C-Myc en neuroblastoma

Por efecto dominante negativo.
Ej. mutacin en 1 de 3 cadenas colgeno

NEUROBLASTOM
A:
tumor de clulas
de
de la cresta neural
neural
Distintas mutaciones en un mismo gen
pueden originar tanto una ganancia como
una prdida de funcin.


GEN: androgen receptor
LOCALIZACIN CROMOSMICA:
Xq11-q12

Atrofia muscular espinobulbar
INCIDENCIA: 1/50,000
HERENCIA: Ligada al X
Mutacin: Expansin CAG

Sndrome de feminizacin
testicular
Mutacin: puntuales, delecin
completa o parcial.

TIPOS DE MUTACIONES Y SUS
EFECTOS
TIPOS DE MUTACIONES Y SUS
EFECTOS

Sustitucin de bases

Cambio de un par de bases
en la secuencia de un gen.
Una transicin consiste en
el cambio de una base
prica por otra prica, y
simultneamente de una
pirimdica por otra
pirimdica.
Una transversin es el
cambio de una base prica
por una pirimdica y a la
inversa.
Anemia de clulas falciformes
a) Proceso inicial : tautomerizacin
Cada una de las cuatro bases puede aparecer
en las clulas en una de dos formas denominadas
tautmeros, debido a reacomodamientos de
protones y electrones en las molculas que
ocasionan cambios en la posicin de los tomos de
hidrgeno; ambas formas se hallan naturalmente en
equilibrio.

Estados moleculares de las bases : normal (A - G - T -
C) y tautomerizado (A* - G* - T* - C*).

Apareamientos errneos
Apareamientos errneos
Transicin
Transversin

b) Proceso inicial : despurinizacin

Es la ms comn de las lesiones espontneas
Implica la interrupcin del enlace glucosdico entre la
base y la desoxirribosa, y la prdida posterior de un
residuo de G A del ADN

Despurinizacin
Los sitios sin purinas no pueden especificar una base
complementaria a la purina original durante la
replicacin, conduciendo por lo tanto a una mutacin :

c) Proceso inicial : desaminacin

Afecta a las bases que poseen grupo amino (A y C). La
desaminacin de la C (por ej.), produce U (uracilo)

Esta base modificada queda en condiciones, durante la
replicacin del ADN, de aparearse con la adenina,
originndose, por lo tanto, una transicin
(C-G T-A).

En el caso de ser la adenina la base afectada, sta se
convierte en hipoxantina (H) que queda en condiciones
de aparearse con la citosina, generndose tambin
como mutacin final una transicin
(A-T G-C).

d) Proceso inicial : dmeros de pirimidinas

Son producidos por las radiaciones UV. Consisten en la
unin de dos pirimidinas (principalmente timinas)
contiguas, o sea ubicadas en la misma cadena de ADN.

Los dmeros de pirimidinas causan transiciones y/o
transversiones al reducir la fidelidad de la replicacin.
Una situacin es la siguiente :

Mutaciones de cambio de fase
Estas mutaciones modifican el nmero de pares de
bases.
Ellas no slo alteran el codn correspondiente
como en los casos anteriores, sino que pueden alterar
totalmente el mensaje gentico,
hasta el extremo de producirse una protena
biolgicamente inactiva, que si es una enzima vital,
ocasiona la muerte de la clula o individuo.

a) Proceso inicial : lazo en el ADN
durante la replicacin

Durante la replicacin ocurre en una de las hebras un
lazo o doblez que la ADN polimerasa pasa por alto, y que
dar origen a una delecin si se produce en la hebra
molde.

Mientras que dar origen a una adicin si ocurre en la
hebra nueva; se eliminarn o aadirn tantos nucletidos
como estn includos en el lazo.

b) Proceso inicial : sobrecruzamientos
desiguales

Aunque pueden ocurrir a nivel de genes
(estrictamente mutacin gnica), se presenta
un caso ms comn, que es el de
apareamientos errneos durante la profase
meitica en zonas del cromosoma donde
existan secuencias repetidas; los bloques de
estas secuencias queden desplazados,
generndose adiciones y deleciones.

Sobrecruzamiento desigual

Mutaciones inducidas
Agente mutagnico, acelerador de la tasa
espontnea de mutacin.

Es decir que la induccin de mutaciones, en
general, no produce mutaciones especficas de un
gen, sino una mayor frecuencia de todo tipo de
mutaciones.
AGENTES QUMICOS CAUSANTES
DE MUTACIONES
AGENTES FSICOS CAUSANTES DE
MUTACIONES
RADIACIONES IONIZANTES
Rayos csmicos, X, , ,electrones,
neutrones, protones.
De penetrancia elevada.
Origina pares inicos muy reactivos ADN
Libera radicales que actan en ADN
Produce rotura de las hebras de ADN
Desastre de Chernobyl
Abril 1986 Ucrania: accidente nuclear
ms grave de todos los ocurridos en el
mundo entero

RADIACIONES NO IONIZANTES
UV
Poco penetrantes
Efecto: dmeros de pirimidinas
AGENTES FSICOS CAUSANTES DE
MUTACIONES
Rayos
ultravioleta

Reparacin del ADN
ADN polimerasa produce un error cada
10^4 nucletidos
Sistema de edicin reduce 1 error cada
10^7 nucletidos
Sistema de reparacin 1 error cada
10^10 nucletidos
Procesos qumicos que con ms
frecuencia producen
mutaciones:

Oxidaciones por radicales libres:
formacin de 8-oxoguanina, se une a T
Reacciones hidrolticas:
forma sitios apurincos (AP)
Daos oxidativos en el ADN
Enfermedades
Anemia de Fanconi
Sndrome de Cockayne
Xeroderma pigmentoso
Sndrome de Bloom
Sndrome de Werner
Cncer colorectal hereditario no
polipsico

Xeroderma pigmentoso
Anemia de Fanconi