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ANLISES
TOXICOLGICAS
1. FINALIDADES (para qu?)
2 TOXICANTE (oqu?) 2. TOXICANTE (o qu?)
3. AMOSTRA (onde?)
4. MTODO (como?)
1. FINALIDADES
1.1 PREVENIR intoxicaes: anlises de
controle ou monitorizao
- monitorizao teraputica (quantitativas)
- monitorizao biolgica da exposio ocupacional ou
ambiental (quantitativas)
- controle da farmacodependncia (qualitativas, exceo
para cafena)
- controle de contaminantes em alimentos
(quantitativas)
1.2 DIAGNSTICO de intoxicaes agudas e
crnicas (fatais ou no)
. anlises de urgncia (quali ou quantitativas)
. anlises para diagnstico diferencial (quali ou
quantitativas)
. anlises forenses ( aspecto legal, quali e/ou
quantitativas)
PODEM SER para deteco de substncias
qumica suspeita OU desconhecida
2. TOXICANTE
Necessidade de conhecimentos de toxicocintica e
toxicodinmica
Substncia qumica inalterada
Produto de biotransformao
Alterao enzimtica ou outro parmetro bioqumico
ou hematolgico
Podem estar presentes em quantidades muito
pequenas: mg,g, ng, pg (ppm, ppb, ppt)
3. AMOSTRA
Escolha depende: finalidade da anlise e natureza do analito
Sangue/ plasma/ urina/ vsceras e rgos (intoxicaes agudas,
fatais ou no)
Amostras biolgicas no usuais: cabelo, unha, ar exalado, leite
materno tecidoadiposo materno, tecido adiposo
Substratos no-biolgicos: erva, p, alimentos diversos, gua, ar,
entre outros.
Cuidados na coleta e conservao
de amostras biolgicas:
quantidade, horrio,
anticoagulante/conservante,
vasilhame, tempo e temperatura de
conservao, etc.
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1. AMOSTRAS BIOLGICAS
CONVENCIONAIS
- Pequeno nmero de interferentes endgenos
- Apresenta concentraes detectveis de
URINA
Apresenta concentraes detectveis de
xenobiticos e seus produtos de biotransformao
- Amostra de escolha para triagem toxicolgica
- Resultado obtido: indicativo da presena da SQ
(correlao baixa com os efeitos)
1. AMOSTRAS BIOLGICAS
CONVENCIONAIS
- Possibilidade de correlao com os efeitos
- Os achados no sangue + conhecimento de
toxicocintica= inferncia sobre o momento do uso,
SANGUE
,
quantidade de substncia introduzida e possveis
alteraes fisiolgicas e/ou psquicas
- Perodo de deteco curto
- Soro: composio completamente inalterada
1. AMOSTRAS BIOLGICAS
CONVENCIONAIS
- Amostras de sangue post-mortem
* redistribuio quando cessados os fenmenos vitais
podem modificar os valores encontrados
SANGUE
*puno na veia subclvia e/ou femoral (probabilidade de
contaminao por difuso de outras regies
significativamente menor)
1. AMOSTRAS BIOLGICAS
CONVENCIONAIS
- sangue mais viscoso (pequenos cogulos)- alquota que
seja representativa
SANGUE
- Alcoolemia: cuidado com
resultados superestimados
2. AMOSTRAS BIOLGICAS NO
CONVENCIONAIS
SALIVA
- Determinao de frmacos e drogas de abuso
-Estudos de farmacocintica, monitorizao
teraputica e verificao do uso de drogas ilcitas
2. AMOSTRAS BIOLGICAS NO
CONVENCIONAIS
-Vantagens: facilidade na obteno, permite
coleta assistida semcontrangimento no
SALIVA
coleta assistida, sem contrangimento, no
invasiva
-Permite traar paralelos com a concentrao
sangunea
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2. AMOSTRAS BIOLGICAS NO
CONVENCIONAIS
- Reflete a frao livre da substncia no plasma
- Perodo de deteco curto: do instante que a
b t i i i l t t
SALIVA
substncia cai na circulao sangunea at quatro
meias-vidas aps a administrao
- Quantidade disponvel frequentemente baixa e
pode diminuir dependendo do estado patolgico e
emocional e alguns frmacos
2. AMOSTRAS BIOLGICAS NO
CONVENCIONAIS
- Representa a frao no-ionizada e no ligada s
protenas plasmticas
B f l li (i i d
SALIVA
-Bases fracas se acumulam na saliva (ionizadas no
retornam para o plasma)
- Viscosidade varivel
- Volume da amostra secretada
2. AMOSTRAS BIOLGICAS NO
CONVENCIONAIS
Exposio recente,
eliminao

AR EXALADO
Analitos volteis
Perodo de deteco curto
* Quantidade de amostra,
anlise rpida
2. AMOSTRAS BIOLGICAS NO
CONVENCIONAIS
SUOR
- Coleta atravs de coletores sweat patch
- Vantagens: coleta no invasiva, indolor, sem
constrangimento, assistida
2. AMOSTRAS BIOLGICAS NO CONVENCIONAIS
* anlise de orgnicos e inorgnicos; capaz de
comprovar ou excluir a suspeita de exposio passada
ou uso crnico de determinada SQ
CABELO
* Perodo de deteco maior que as outras matrizes
(semanas ou meses)
* Facilidade de obteno, coleta no invasiva, assistida
e raramente requer cuidados especiais no transporte e
armazenamento
2. AMOSTRAS BIOLGICAS NO
CONVENCIONAIS
Na dopagem: pequena utilizao (considerar taxa de
incorporao, preparo de amostra e descontaminao
da amostra (lavagem, descolorao, tingimento (podem

CABELO
influenciar a concentrao do xenobiticos)
* Anlise complementar s outras matrizes
* Desvantagens: falta de correlao com a dose,
possibilidade de contaminaes ambientais
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2. AMOSTRAS BIOLGICAS NO
CONVENCIONAIS
* Refletem exposio passada ou crnica
UNHAS
* Vantagens e desvantagens semelhantes ao cabelo,
todavia a quantidade de amostra disponvel escassa
2. AMOSTRAS BIOLGICAS NO
CONVENCIONAIS
* Fludo que se encontra na
cavidade posterior do olho
preenchendo o espao entre o
i t li ti (1 5 3 0
HUMOR VTREO
cristalino e a retina (1,5 a 3,0
mL de cada olho)
* Fludo gelatinoso,
transparente e incolor,
viscoso, 90-98% de gua
2. AMOSTRAS BIOLGICAS NO
CONVENCIONAIS
* Fludo menos sujeito a alteraes qumicas post-
mortem
* E t d b t b l id t l l
HUMOR VTREO
* Estudos bem estabelecidos somente para o lcool
* Anlises post-mortem, relevncia para a Toxicologia
Forense
2. AMOSTRAS BIOLGICAS NO
CONVENCIONAIS
* Possibilidade de coleta em corpos politraumatizados,
carbonizados ou em estado de decomposio
HUMOR VTREO
* Isolado em um compartimento protegido de
contaminao externa e invaso de microrganismos
* SQ= no ligada s protenas plasmticas,
lipossolubilidade adequada
2. AMOSTRAS BIOLGICAS NO
CONVENCIONAIS
Coleta
HUMOR VTREO
2. AMOSTRAS BIOLGICAS NO
CONVENCIONAIS
* Concentrao do xenobitico maior que no sangue e
praticamente no sofremredistribuio post-mortem
FGADO
praticamente, no sofrem redistribuio post-mortem
* Desvantagens: grande quantidade de lipdios,
rapidamente entra em estado de putrefao
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2. AMOSTRAS BIOLGICAS NO
CONVENCIONAIS
* Forma inalterada e ionizada da SQ bsica
CONTEDO ESTOMACAL
* Aps a overdose, a concentrao da SQ pode
continuar alta
* Desvantagens: composio varivel, dependendo do
tipo e da quantidade de alimento presente
2. AMOSTRAS BIOLGICAS NO
CONVENCIONAIS
* Bile: SQ que sofreram conjugao
Morfina: concentraes at 1000 x maior na bile
OUTROS RGOS, FLUDOS E TECIDOS
Morfina: concentraes at 1000 x maior na bile
* Crebro e pulmo: volteis ou xenobiticos
administrados por via pulmonar (crack)
2. AMOSTRAS BIOLGICAS NO
CONVENCIONAIS
* Rins e bao: metais (rins) e verificao de
intoxicao por CN e CO (bao)
OUTROS RGOS, FLUDOS E TECIDOS
Maggots= larvas ou fase imatura de Diptera (insetos)
que se alimentam de organismo morto, podem ser
coletados na ausncia de amostras biolgicas
(morfina, praguicidas)
COLETA, TRANSPORTE E
CONSERVAO DAS
AMOSTRAS-
AMOSTRAGEM
-Para resultados confiveis, o analista deve:
- Assegurar total garantia de inviolabilidade e
integridade sem os quais, a amostra perde seu valor
legal
- Observar deteriorao da amostra/ estabilidade do
analito na amostra
- Estar atento para a correta identificao
- Uma das maiores fontes de erro em anlises
- Tamanho e nmero e localizao dos pontos de coleta
de amostras, procedimentos para reduo da amostra
bruta para laboratorial, tipo de recipiente e como
limp lo proteo contra contaminao (ISO
AMOSTRAGEM
limp- lo, proteo contra contaminao (ISO,
IUPAC, CODEX, AOAC)
- Uma amostra deve ter todas as propriedades do
material original
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- Etapas do processo de amostragem:
1. Identificao da populao de onde a amostra vai
ser retirada
2. Seleo e obteno da amostras
AMOSTRAGEM
2. Seleo e obteno da amostras
3. A reduo da amostra bruta a amostra laboratorial
acompanhada por homogeneizao (slidos-
quarteamento ou dispositivos que reduzem ou
misturam)
- Sistemtica: Ex: toma-se a primeira unidade e em
seguida a quinta, depois a dcima ......
- Por julgamento: com base no julgamento prvio ou
por na experincia, seleciona-se unidades ou pores
de umlote
TIPOS OU PLANOS DE AMOSTRAGEM
de um lote
- Por convenincia: facilidade de obteno, custo,
rapidez etc
- Restritiva: retirada da parte mais acessvel devido a
dificuldades de atingir a amostra toda.
1. AMOSTRAS BIOLGICAS
- Urina:
* De acordo com o analito, observar o frasco quanto s
caractersticas constituio, tamanho, limpeza,
necessidade de conservantes
* De acordo com a toxicocintica da substncia:
horrio da coleta
* Antes: lavagem das mos e do orficio uretral
1. AMOSTRAS BIOLGICAS
- Sangue:
* Local da coleta deve ser limpo
* Evitar hemoconcentrao ou hemodiluio
* Uso/ Escolha do anticoagulante: depende do analito Uso/ Escolha do anticoagulante: depende do analito
* Tubos de coleta vcuo: tampa pode liberar material
que interfere em algumas anlises
* Agulha: pode interferir na anlise de metais
TRANSPORTE E ARMAZENAMENTO DE
SANGUE E URINA
- Armazenamento: 4C ou -20C
-Se anlise no for realizada imediatamente: verificar
estabilidade do analito
- Se necessidade de re-anlise: congeladores especiais
(-80 C) ou sob nitrognio lquido (-130 C em mdia)
VMITOS
-Anlise at 12 horas aps a exposio, armazenadas
sob refrigerao a 4C ou congeladas a -15 C
- Recipientes transportados em sacos plsticos duplos,
selados em temperatura nunca maior que 4C
- Informaes diversas (sintomatologia, perodo entre
a ingesto e o aparecimento dos sintomas, alimentos
ingeridos nas ltimas 24 horas)
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HUMOR VTREO
- Amostra coletadas, em separado, para cada olho
- Perfurao do globo ocular com agulha fina, acoplada
emseringa em seringa
- Coleta-se, geralmente, 2 a 3 mL conservado com
fluoreto de sdio 0,5 a 2,0%
BILE
- Poro representativa e cerca de 10 a 20 g de tecido
heptico
TECIDOS
- Se a vescula biliar foi extrada previamente: coletar a
amostra por aspirao do ducto biliar (agulha e seringa)
- Cuidados no manuseio e armazenamento das amostras
(evitar contaminao cruzada)
- Identificadas e encaminhadas com protocolo (local, data
e hora da coleta, idade, estimativa da hora do bito etc)
- Orientao marcada no sentido da raiz para as pontas
CABELO
- Coleta na parte posterior da
cabea, fios menos superficiais
(cerca de 0,3 cm de distncia da
pele), 200 mg de amostra
- Armazenamento em sacos plsticos vedados,
identificado com informaes
- Necessidade de limpeza prvia (ex: metais: lavagem
com soluo diluda de Triton X-100)
-Tipo de frasco e modo de coletar:
depende do analito e matriz (guas,
superficiais, profundas,
subterrneas, sedimentos etc)
- De maneira geral: 2000 a 4000 mL.
Armazenamento nunca em
GUA
Armazenamento nunca em
temperatura superior a 4C
- Informaes devem ser registradas:
ponto de amostragem e
profundidade, temperatura da gua,
condies metereolgicas etc
ALIMENTOS
-Tamanho da amostra: verificar
armazenamento (a granel ou embalado
em caixas, latas e outros recipientes)
- Quando a embalagem nica ou
pequenos lotes: todo material
-Lotes maiores: 10 a 20% do n de
embalagens do lote ou 5 a 10% do
peso total do alimento a ser analisado.
Lotes muito grandes, toma-se a raiz
quadrada do n de unidades do lote
(homogeneidade da amostra?)
-
Fatores a serem considerados na amostragem
- Fatores que influenciam na composio de
alimentos de origem vegetal (ex: constituio gentica;
solo, clima, irrigao, temperatura; parte do alimento:
casca ou polpa etc) e animal (ex: contedo de gordura;
parte do animal; alimentao do animal; idade do
ALIMENTOS
parte do animal; alimentao do animal; idade do
animal etc)
- Fatores que influenciam no ps-colheita (perda ou
absoro de umidade; decomposio qumica e
enzimtica (vitaminas, pigmentos); contaminao
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4. MTODO
cromatografia em camada delgada, clssica ou de
alta eficincia (triagem; anlises qualitativas)
cromatografia gasosa (detectores de ionizao de
chama, captura de eltrons ou de chama alcalina,
fotomtrico de chama, espectrmetro de massa)
cromatografia lquida de alta eficincia (CLAE ou
HPLC), detector de ultra-violeta, arranjo de diodo
ou de fluorescncia
espectrofotometria, especialmente no visvel
espectrofotometria de absoro atmica (metais)
imunoensaios