UNIVERSIDAD SEOR DE SIPAN

CURSO: Biologa Molecular y Celular

Docente: Enrique Llontop

ALUMNO: Quispe Mestanza Franklin Andree

FACULTAD: Ciencias de la Salud

ESCUELA PROFECIONAL: Medicina Humana

AO: 2014.







El gen supresor de tumores p53, est directamente implicado en detener la formacin y
desarrollo de tumores. Es el gen ms frecuentemente mutado en cncer humano. Se
activa cuando la clula sufre daos en su DNA o cuando es sometida a estrs celular.
Bajo estas condiciones, p53 sufre un proceso de activacin post-tradicional y muchos
de sus residuos son modificados por fosforilacin, acetilacin o sumolizacin. En
condiciones normales p53 est presente en bajos niveles en todas las clulas. Cuando
la clula es agredida por agentes externos, p53 activa sus funciones que conlleva la
parada del ciclo celular, la reparacin del DNA por dao o la entrada en apoptosis.
Estos procesos son en gran medida dependientes de la capacidad de p53 de activar la
transcripcin de determinados genes.
La protena p53, denominada as por su peso molecular (53Kdaltons), se ha
convertido en objeto de estudio intenso cuando se observ que un alto porcentaje de
los cnceres humanos contenan mutaciones en p53(1-3). La protena p53 juega un
papel crucial en la regulacin de la proliferacin celular y en la respuesta de la clula a
estmulos de estrs; p53 induce tanto la parada del ciclo celular que previene la
replicacin de DNA daado, como la activacin de la apoptosis para eliminar clulas
defectuosas(4). De hecho, la prdida del gen p53 genera animales viables pero
altamente susceptibles a padecer cncer, como es el caso de los ratones TP53-nulos(5,
6). En humanos, las mutaciones de p53 se localizan mayoritariamente en clulas
somticas, con mutacin de un alelo y perdida completa de la protena salvaje. La
presencia de mutantes de p53 en lnea germinal se asocian con el sndrome Li-
Fraumeni, una predisposicin hereditaria a padecer cncer a edad temprana.
Los estudios que se estn llevando a cabo ahora en numerosos laboratorios, y a los
que pretende contribuir este trabajo, se centran principalmente en descifrar
mecanismos en los cuales est implicada la funcin de p53 para prevenir el cncer,
cuales son las seales que activan a la protena para elaborar futuras estrategias
teraputicas y su papel como modulador de la apoptosis(3, 4, 8-10).
p53 es una protena supresora de tumores
Los genes supresores de tumores son genes que evitan la transformacin tumoral.
En estado salvaje su activacin impide la transformacin celular inducida por
oncogenes como c-myc o ras, y mantiene una correcta tasa de crecimiento celular
impidiendo los procesos de divisin celular inadecuados permitiendo una correcta
homeostasis del organismo. En condiciones en los cuales un gen supresor deja de
funcionar correctamente puede ser responsable de la formacin de tumores. En la
actualidad se han descrito ms de 30 genes considerados supresores de tumores, de
los cuales, la mitad aproximadamente, se han encontrado mutados o deleccionados en
cnceres humanos. El primer gen descrito que codificaba una protena supresora de
tumores fue p53. Descubierto en 1979, p53 fue considerado durante una dcada como
uno nuevo oncogn capaz de inducir transformacin celular o tumores- ya que
inicialmente el gen p53 descubierto era una forma mutada e inactiva de p53 y por lo
tanto cooperaba con otros oncogenes en los procesos de transformacin celular.
Posteriormente se descubri como p53 formaba parte de la nueva familia de
protenas supresoras de tumores que tenan en comn su papel anti-tumoral y la alta
frecuencia con que aparecan mutadas en tumores .Otros miembros supresores de
tumores son el retinoblastoma (Rb) (retinoblastomas y sarcomas), Brca1 y Brca2,
(cncer de mama y tero), p16
INK4a
(melanomas), APC (Adenomatous Polyposis Coli,
poliposis adenomatosa familiar o cncer de colon), etc.
La mayora de las mutaciones de estos genes supresores son recesivas y la prdida
total de funcin requiere generalmente (p53 es la excepcin) la inactivacin de ambas
copias cromosmicas. Las mutaciones en p53 son diferentes que las que se
encuentran en la mayora de los supresores tumorales. Los genes Rb y APC, por
ejemplo, se inactivan normalmente por mutaciones (nonsense) sin sentido que
generan un codn de terminacin y la protena truncada o inestable; sin embargo, en
p53 ms del 70% de las mutaciones son las denominadas de (msense) diferente
sentido que provocan el cambio en una base en un codn y que cambia un
aminocido . En el caso de p53, la protena salvaje tiene una corta vida media y es
muy difcil de detectar mediante tcnicas que utilicen anticuerpos anti-p53, mientras
que las protenas p53 mutantes, presentes en tumores humanos, al cambiar solo un
nico aminocido genera siempre una protena con cambios conformacionales que
incrementan su estabilidad y por lo tanto su acumulacin y fcil deteccin de la
protena p53 (17). Aunque en la mayora de los casos la mutacin se produce
inicialmente en uno de los dos alelos, la protena p53 mutante, anula la expresin del
alelo salvaje (perdida de heterocigosidad) (18) siendo esta p53 mutante la nica que
se expresa lo permite su fcil deteccin mediante tcnicas inmunohistoquimicas (3,
10, 13).
p53, guardin del genoma:
La protena p53 se encuentra en un estado latente y no-funcional en las clulas no
expuestas a agresiones. En condiciones de agresin o dao celular, p53 se activa,
incrementa sus niveles, principalmente aumentando la vida media de la protena y
genera una respuesta que conduce a una parada del ciclo celular y a la reparacin del
posible dao, aunque si este est muy extendido p53 provoca la entrada de la clula
en apoptosis (19-22). De este modo, p53 disminuye la probabilidad de que se generen
clones celulares llevando defectos genticos (mutaciones, delecciones, inversiones) y
acta como guardin del genoma (8, 23). La protena p53 se ha implicado tambin
en procesos de reparacin de DNA daado, cuando se produce la escisin de
nucletidos, actuando como modulador; sin embargo el papel de p53 en estos
procesos es ms dudoso. Asimismo se ha observado cmo la prdida de p53 conduce a
un incremento en la inestabilidad genmica debida a un descenso en la tasa de
reparacin del DNA durante la recombinacin homloga, sugiriendo un papel para
p53 en el proceso (24-26). Bajo condiciones de activacin de p53, es posible detectar
fcilmente, utilizando tcnicas basadas en anticuerpos anti-p53, la protena p53
salvaje y por lo tanto funcional, lo que indica que la deteccin de p53 no est
siempre asociada a la presencia de mutaciones.

Estructura de la protena p53
El gen que codifica la protena p53 se encuentra localizado en el brazo corto del
cromosoma 17 (17p1.3) y est constituido por 11 exones, de los cuales el exn 1
contiene una secuencia no-codificante; en el exn 2 existen dos sitios putativos de
inicio de la transcripcin y el exon 11 contiene el codon de terminacin y una gran
secuencia no codificante. Este gen da lugar a una protena de 393aa que puede
dividirse en tres dominios funcionales: un dominio amino-terminal (N-), implicado
en la activacin transcripcional (residuos 1-70) y donde se localiza una sub-regin rica
en prolinas que contiene 5 copias (en p53 humano) de la secuencia PXXP (residuos 20-
97); un dominio central que contiene la zona de unin al DNA especfica de
secuencia y que es la regin ms conservada de la protena (residuos 100-300); y
un dominio carboxilo-terminal (C-) donde hay una regin flexible (residuos 300-
325), una zona de tetramerizacin (residuos 325-356) y un extremo bsico (363-393).


La protena p53 se une al DNA en forma de tetrmero. La formacin de esta estructura
cuaternaria depende de la correcta activacin de p53 y de las modificaciones post-
traducionales de la regin de tretamerizacin. Es en la formacin del tetrmero donde juega
un papel esencial la regin C-terminal (27). Pero aunque la funcin de p53 depende de su
tetramerizacin la regin donde se concentran la mayora de las mutaciones presentes en
tumores humanos es en la regin de unin al DNA. La regin central, situada entre los aa 94 y
289, contiene 4 de los 5 dominios ms conservados evolutivamente (I-V) y es la zona ms
importante de la protena ya que es el dominio de unin especfica al DNA.
El estudio del espectro de mutantes de p53 indica una fuerte presin selectiva para
mutaciones localizadas predominantemente en el dominio de unin a DNA de la
protena (3). Casi el 90% de las mutaciones presentes en tumores humanos se
localizan entre los exones 4-9 , correspondientes a la regin de unin al DNA donde
existen punto calientes de mutacin, que pueden causar en p53 tanto perdida de
funcin supresora de tumores como ganancia de funcin oncognica, y que modifican
el repertorio de genes que son controlados por p53 como factor de transcripcin(28).
Esta dualidad podra ser una explicacin de la alta frecuencia de mutaciones de p53 en
cnceres humanos. Existe, sin embargo, mucha variacin entre la presencia de
mutantes de p53 dependiendo del tumor. En la actualidad existe bases de datos con
las mutaciones que se han encontrado en p53 que contiene ms de 14.000 entradas y a
la que se puede acceder a travs de internet (http://www.iarc.fr/p53)(1). Las
numerosas sustituciones de bases alteran la conformacin de p53 y su capacidad
transactivadora especfica, con lo cual ha sido posible establecer en algunos casos la
correlacin entre distintos mutantes y cambios funcionales de la protena. El espectro
de mutaciones de p53 proporciona informacin sobre las regiones funcionales crticas
que cuando estn mutadas contribuyen al proceso de carcinognesis. El hecho de que
la mayora de las mutaciones estn en la regin central de unin especfica al DNA,
sugiere que la regin transactivadora es de especial importancia para la supresin
tumoral.

Activacin de p53.
Teniendo en cuenta que p53 es una protena con funciones crticas para la clula,
no es de extraar que su actividad est regulada por mecanismos mltiples. La
protena p53 inactiva se localiza en el citoplasma a baja concentracin y tiene
una vida media relativamente corta, de unos 20 minutos. Bajo estas condiciones, la
protena p53 debe recibir seales o sufrir modificaciones que la activen convirtindola
en protena funcional (3). Las seales o sucesos que conducen a la activacin de p53
estn principalmente asociados a situaciones de estrs celular tal como ocurre cuando
daamos el DNA por irradiaciones ionizantes o por ultravioleta, al reducir el contenido
de nucletidos inhibiendo rutas metablicas de sntesis (ocurre con muchas drogas
quimioteraputicas), por hipoxia, por activacin de oncogenes que disparan altos
ndices mitticos, o por cambios en molculas redox en la clula(9, 29) Estos
estmulos provocan un rpido incremento en los niveles de protena p53 en la clula,
tanto por el aumento en la estabilidad de la protena como por su activacin
bioqumica a travs de fosforilaciones y acetilaciones(4), todo lo cual permite a la
protena actuar como un factor de transcripcin, unirse al DNA a regiones
determinadas por secuencias de bases especificas localizadas en regiones promotoras
y regular sus genes. La duracin y la cintica del aumento de los niveles altos de
protena difieren segn cual haya sido el factor productor de la activacin de p53(3).
La seales y las rutas de activacin de p53 son complejas y todava en fase de estudio
La induccin de la protena p53 en respuesta a daos en el DNA est regulada post-
traducionalmente, con la estabilizacin de p53 como parte fundamental del proceso
(22, 30). La deteccin de roturas en el DNA es una de las primeras seales que lleva a
la induccin de p53(31). Este hecho se corrobor con estudios usando microinyeccin
nuclear de DNA. Los resultados sugeran que daos de cadena simple superiores a 30
nucletidos y una sola rotura de doble cadena eran suficientes para inducir parada del
ciclo celular dependiente de p53 (32). Tras el dao se produce un rpido incremento
en los niveles de p53 en la clula; este aumento se debe principalmente a cambios en
la vida media de la protena y al aumento en la traduccin de su mRNA. El aumento en
los niveles de p53 suele ser proporcional al dao producido en el DNA, siendo, por
ejemplo, diferente para distintas dosis de irradiacin. De esta manera tambin vara la
respuesta celular: bajos niveles de p53 debidos a poco dao en el DNA inducen la
parada del ciclo celular, altos niveles de p53 debidos a un gran dao en el DNA hacen
que la clula entre en apoptosis (33).
La clula tiene sistemas que actan como sensores para reconocer el dao que se
produce en el DNA, roturas de cadena, o escisiones provocadas, por ejemplo, por
dmeros de timidina durante la irradiacin con UV. Entre estos sensores se encuentra
la protena ATM (mutada en la ataxia telangiectasia) cuya funcin normal est
implicada en los procesos de sealizacin tras daos en el DNA hasta los moduladores
del incremento de p53 y la consiguiente parada de ciclo celular, aunque manda
tambin seales a otras protenas efectoras distintas de p53 (34).
La protena p53 tambin es capaz de unirse por si misma a extremos de DNA, sitios
de reparacin de DNA o loops internos de deleccin (35). Es posible que tanto p53
como la protena que detecta el dao en el DNA estn localizadas en el lugar de
reparacin del dao del DNA, donde pueden darse seales cruzadas de fosforilacin u
otras seales de activacin, que produjeran una respuesta final en la clula, como
sera la parada del ciclo celular.
La situaciones de hipoxia pueden elevar los niveles de p53 (36) Aunque todava se
desconocen los mecanismos que se desencadenan en hipoxia y las rutas que se
activan, es probable que representen otro sistema por el cual la p53 previene la
formacin de tumores. Muchos tumores comienzan a replicarse hasta llegar a un
tamao crtico donde, al faltarles el aporte de nutrientes de los vasos sanguneos,
necesitan de factores angiognicos para sobrevivir. La hipoxia que se da en el lugar del
tumor en ese momento puede activar su p53 que eliminara esas clulas. Se ha
descrito que la troboespondina, un factor anti-angiognico, tiene un gen regulado por
p53; este factor tambin reducira la vascularizacin del tumor (37).
Finalmente el descenso de los niveles de ribonucletidos a un punto crtico es capaz
tambin de activar p53. La necesidad de mantener unos niveles adecuados para la
replicacin del DNA y la progresin del ciclo celular parece estar controlado por p53,
aunque las protenas implicadas en el proceso an se desconocen (29).

Con una contribucin escasa de la activada transcripcional tras el estmulo, el
aumento de los niveles de la protena p53 se debe principalmente a una mayor
estabilidad de la protena inducida por regulacin post-transcripcional mediante
fosforilacin, defosforilacin, acetilacin y sumolizacin. Estas modificaciones post-
transcripcionales no solo aumentan la vida media de la protena p53 sino que regulan
su actividad biolgica.
La fosforilacin de residuos en las regiones amino y carboxi-terminal juega un papel
decisivo en la funcin final de la protena de ah la importancia de estudiar con detalle
la quinasas implicadas en la fosforilacin especifica de residuos serinas, treoninas o
tirosinas. En condiciones de reposo de p53, la regin C-terminal se pliega sobre el
dominio central de la molcula y evita su unin al DNA. La acetilacin de residuos de
lisina y la fosforilacin de residuos de serina de esta regin facilita la unin de p53 al
DNA, probablemente al evitar el plegamiento de la molcula, accin que tambin se
puede conseguir mediante anticuerpos, pptidos o drogas que actan sobre esta
regin (38).
En el otro extremo de la molcula, la regin N-terminal, tambin son esenciales las
modificaciones de p53 para su correcta unin al DNA y para la transactivacin de
genes. En este escenario se sabe que la fosforilacin de varios residuos N-terminales,
incluidas las Ser15, ser20, ser37 y ser46 tras radiacin ionizante (IR) y ultravioleta
(UV) son importantes para la estabilizacin de la protena. Sin embargo, el esquema
de la fosforilacin en sus sitios N-terminal es an muy incompleta y desconocemos las
quinasas involucradas especificas de residuos o asociadas al tipo de respuesta
externa. Quinasas como la Casein Kinase I (ser6 y ser9), DNA-PK (ser15 y ser37), ATM
y ATR (ser15), CDK-activating kinase (CAK; ser33), cdk2 y cdc2 (ser315), PKC
(ser378) o la casena Kinase II (ser392), son parte de una lista incompleta de quinasas
que adems se entrecruzan con la actividad fosfatasa que muchas veces esta regulada
por los mismos agentes inductores que para las quinasas (9). La idea que subyace en
este momento es que el diferente grado de fosforilacin de la protena puede ser la
responsable de la adquisicin de una u otra funcin de p53. La radiacin IR
fosforila de novo la ser15 y defosforila la ser376. La acetilacin de la lisina Lys 320 o
Lys382 y su sumolizacin (adicin de un pequeo pptido, tipo ubicuitina) puede
modificar reversiblemente la conformacin de p53 y por lo tanto su funcin.

Funciones de la protena p53
Los estudios iniciales en ratn con el gen p53 mutado(5) demostraron que la
funcin de p53 no era requerida para una embriognesis normal, aunque
posteriormente se demostr que no todos los embriones deficientes en p53 se
desarrollan normalmente; una pequea fraccin tiene defectos en el cierre del tubo
neural, as como otras anomalas del desarrollo(39, 40).
La protena p53 es un factor de transcripcin que regula la transcripcin de genes
que contienen elementos de respuesta a p53 en sus regiones y que son responsables,
en gran medida, de las funciones asociadas a p53. As, los genes regulados
transcripcionalmente por p53 pueden agruparse dependiendo de las funciones que
realizan. Encontramos que p53 regula genes implicados en la inhibicin del ciclo
celular, en la reparacin del dao en el DNA, en la inhibicin de la angiognesis
(formacin de Novo de vasos) y en la induccin de la apoptosis.
Adems, p53 regula la transcripcin de MDM2, que a su vez regula los niveles de
p53, lo que genera un sistema autoregulable.
El primer gen activado transcripcionalmente por p53 que debemos considerar
es Mdm2, su propio regulador. Tal como mencionbamos, los niveles de la protena
p53 dependen principalmente de la velocidad de degradacin, ms que de la velocidad
a la que se genera nuevo p53. Esta degradacin se regula mediante mecanismos post-
trascripcionales, mediante los cuales la protena p53, que en situaciones basales se
degrada rpidamente, se estabiliza incrementandose su vida media. La degradacin de
p53 es dependiente de la va ubicuitina/proteosoma(41, 42), sistema que marca la
protena con varias copias de un pequeo pptido (ubicuitina), que es ahora
identificada por la maquinaria de degradacin proteosoma. Mdm2 acta como la
ligasa E3 de la ubiquitina, una de las enzimas involucradas en el marcaje de la p53
(43). Mdm2 interacciona con el extremo carboxilo terminal de p53 que contiene el
dominio de transactivacin (44). La induccin de p53 transactiva el promotor de
Mdm2 (45, 46) y cuando se genera la protena Mdm2 esta se une a p53 y la marca
(47).
Otra evidencia que implica a Mdm2 en la estabilizacin de p53 viene de la
observacin de que la protena p19
ARF
de ratn puede estabilizar p53 a travs de su
interaccin con Mdm2(48, 49). Estudios recientes indican que p19
ARF
secuestra a la
protena Mdm2 en el nucleolo, impidiendo que acceda al nucleoplasma donde
degradara a p53, de esta manera p53 permanece activo ms tiempo(50).

Genes asociados con la inhibicin del ciclo celular:
Una de los primeros efectos de la expresin de p53 es una parada del ciclo celular.
La protena p53 estimula directamente la expresin de p21
WAF1/Cip1
un inhibidor de
las kinasas dependiente de ciclina (CDK)(51, 52). Las CDKs se asocian a las ciclinas y
son reguladores claves del ciclo celular. A travs de su efecto negativo sobre varias
CDKs, p21 inhibe las transiciones de G1-S, y de G2-mitosis. Las selecciones homlogas
de p21
ARF
en ratones y lneas celulares humanas han permitido demostrar que esta
protena es un componente crtico de la parada de ciclo celular inducida por p53(53) y
un componente esencial de los efectos de p53 in vivo (54, 55). Otros de los genes
implicados en la parada del ciclo en G2 es Reprimo (56), y 14-3-3s, miembro de una
familia de protenas estructurales, que secuestran el complejo ciclina B1-CDK1 fuera
del ncleo lo que permite el mantenimiento del bloqueo en G2 (57, 58). Otros genes
como el de la Ciclina G, cuya funcin an no es bien conocida ya que no se conocen sus
CDKs (kinasas dependientes de ciclinas)(3, 59), o el IGF-BP3, que genera una protena
de unin al factor IGF (insulin growth factor) que bloquea seales mitognicas(3), son
dos nuevos ejemplos de genes que implicados en inhibir la proliferacin celular
directamente regulados por p53.

Genes regulados por p53 y asociados con la reparacin del dao al DNA.
El principal activador de p53 es la induccin de dao en el DNA. Adems de
contribuir a darle tiempo a la clula para que tome decisiones, parando su ciclo
celular, p53 interviene en procesos de reparacin del dao a travs de la regulacin
de GADD45, protena se une a PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen), subunidad
de la DNA polimerasa d, inhibiendo as la sntesis de DNA(8). Adems regula la
transcripcin de la unidad R2 de la ribonucletido reductasa (60), genes directamente
implicados en la reparacin de DNA, en concreto en la reparacin por escisin de
nucletidos.

La apoptosis y genes implicados regulados por p53.
La introduccin de p53 en clulas induce, adems de la parada del ciclo celular (53,
61), apoptosis (62). De nuevo cabe preguntarse cmo funciona p53 en su papel de
inductor de apoptosis.
Existen una batera de genes que son directamente regulados por p53 y cuya
funcin esta directamente implicada en apoptosis. El ms conocido es Bax, un
miembro de la familia Bcl-2 que promueve la apoptosis celular. Est inducido por p53
aunque no en todos los tipos celulares (63). Protenas miembros de la familia de Bcl-2
se han visto que funcionan, al menos en parte, regulando la liberacin de citocromo C
de la mitocondria, un evento observable en la apoptosis dependiente e independiente
de p53 (64, 65). Hay dos grupos de genes reguladores, los anti-apoptticos como Bcl-2
y los pro-apoptticos como Bax. Ambas clases de protenas estn localizadas en las
membranas intracelulares, especialmente de la mitocondria, y se ha visto que
interaccionan entre ellas. El gen Bax tiene sitios de unin a p53 en su promotor y se
regula positivamente en respuesta a dao en el DNA y p53 en varios sistemas
(66). La introduccin de Bax en clulas resulta en una muerte celular rpida que se
puede inhibir por coexpresin de Bcl-2 y Bcl-X. De manera similar, la muerte mediada
por p53 puede ser inhibida por Bcl-2/Bcl-X, lo que es consistente con un papel para
Bax en la va de muerte de p53 (63). Sin embargo, Bax no est implicada siempre en la
apoptosis mediada por p53 (67)y no representa el nico mecanismo de muerte celular
dependiente de p53.
Recientemente, utilizando metodologas de anlisis del genoma como arrayas o
SAGE (Serial Anlisis of Gene Expresin), nuevos genes, directamente regulados por
p53, han sido implicados en apoptosis. Es el caso de una coleccin de genes
denominados genricamente como p53 Induced Genes (PIGs) algunos de los cuales
forman parte de genes implicados en los procesos de oxidacin celular. Es atractivo y
se ha especulado que la apoptosis por p53 es dependiente de la liberacin de especies
reactivas de oxigeno (ROS) a travs de genes como PIG3. Otro genes regulados por
p53 y miembros apoptticos de la familia Bcl2 que adems forma parte de una
subfamilia de protenas denominadas BH3-only, y que son fuertes inductoras de la
apoptosis son NOXA (68) y PUMA (69). Tambin se identific el gen que codifica la
protena p53AIP1 (70), que al igual que Bax, Noxa y los PIGs inducen la apoptosis a
travs de la funcin mitocondrial y que se evidencia por la rpida liberacin al
citoplasma del citocromo C (citoC)(71). El citoC favorece la asociacin de la protena
reguladora APAF1, (tambin regulada por p53 (72)) con la caspasa-9 formando un
complejo el apoptosoma que dispara la cascada apoptotica.
Sin embargo p53 tambin regula genes implicados en rutas de apoptosis vinculadas
con receptores de muerte celular. El receptor de muerte CD95 (Fas/APO-1) es un
miembro de la supe familia de receptores TNF, que media apoptosis mediante su
interaccin con su ligando (FasL), permitiendo la retirada de clulas autorreactivas y
la eliminacin de clulas infectadas por virus y clulas tumorognicas (73-78). Fas es
un mediador de la apoptosis va la activacin de la cascada de caspasas (79). La
identificacin de una secuencia denominada dominio de muerte en el dominio
intracelular de Fas agrupa en la regin submembrana una compleja maquinaria de
activacin de caspasas, y ms especficamente interacciona con la caspasa 8 que es la
que inicia el proceso(80-82). La va de apoptosis a travs del receptor Fas est
relacionada con la transformacin tumoral y es regulada por p53(79, 83-87),
detectndose elementos de respuesta a p53 en la regin promotora del gen Fas(88).
Drogas que daan el DNA son inductores de la expresin de Fas(88, 89) y dependiente
de la expresin de p53 funcional, aunque se sabe que clulas con p53 mutado o sin
p53 pueden expresar Fas constitutivamente(83). Una situacin muy similar ocurre
con DR5 o PIDD (90) miembros tambin de la familia de receptores de muerte con
muy similar respuesta que FAS y tambin regulados por p53.
As p53 puede regular la apoptosis desde dos diferentes ngulos: o regulando
receptores de muerte que activan la ruta de caspasas desde la membrana o activando
la mitocondria y generando la liberacin de citoC, que a su vez es un catalizador de la
ruta de las caspasas y ROS que conducen a la activacin de la apoptosis.
La regulacin de la apoptosis por p53 es muy fina y la activacin de estos genes de
apoptosis transcripcionalmente regulados por unin de p53 en su regin promotora
no es idntica para todos los genes. Se ha propuesto que dependiendo del grado de
activacin de p53, es decir del grado de fosforilacin/ acetilacin /somolizacin, p53
es capaz de inducir genes reguladores, pero el orden exacto de fosforilacin y su
contribucin especfica en la funcin efectora de p53 esta aun por dilucidar. Por
ejemplo, la ser6, ser9, ser15, ser20 y ser37 son fosforilados, por quinasas como ATM,
DNA-PK o Chk2, en respuesta a dao celular y se sabe que regula genes asociados a
reparacin o genes asociados a la regulacin del ciclo celular, mientras que la
fosforilacin de la ser46, por las quinasas p38aMAPK o HIPK2 es funcionalmente
importante ya que contribuye a la activacin de genes apoptticos.
Una alternativa es que p53 puede regular la apoptosis a travs de mecanismos
independientes de la transcripcin(91, 92). En experimentos utilizando inhibidores de
la transcripcin y de la sntesis de protenas p53 puede ser capaz de inducir
apoptosis(93), lo que sugiere que pueden existir mecanismos de apoptosis
independientes de transcripcin y que son regulados por p53. Los mecanismos de
regulacin de p53 no transcripcionales se asocian a la capacidad que tiene de
interaccionar con otras protenas que pueden modificar su funcin. Entre estas estn
protenas virales como la protena del adenovirus Ad E1B 55kD, o del virus de la
hepatitis
HBV X(94), o la reciente interaccin con securina , responsable de la correcta
segregacin cromosmica y que inhiben las funciones de p53(95)(Figura 20). Pero no
todas las protenas que interaccionan con p53 generan inhibicin de las funciones,
ASPP1 y ASPP2 son miembros de una nueva familia que estimula la funcin apotetica
al facilitar la transcripcin de p53 sobre genes implicados en apoptosis como BAS o
PIG3 (96).
En resumen la actividad final de p53 depende, no solo de una enorme potencialidad
de p53 de actuar como factor de transcripcin sobre genes asociados a las funciones
que regula: parada del ciclo celular, reparacin del DNA, angiogenesis o apoptosis, sino
que la respuesta final tambin la dan aquellas protenas con las que interacciona. Sin
duda, la interaccin de p53 con nuevas protenas capaces de regular su actividad y el
espectro de expresin de genes regulados por p53 definirn la funcin de esta
apasionante molcula, que a pesar de los ms de 25 aos de su descubrimiento sigue
siendo objeto de atencin por investigadores bsicos y clnicos y cuyo estudio es uno
de los ejes de investigacin en oncologa.

Una clula sin un p53 funcional puede o no volverse cancerosa, y
correspondientemente, una clula con funcin de p53 normal puede llevar
eventualmente a la formacin de un crecimiento canceroso. Como se describe en el
captulo sobre el Cambio Gentico, para volverse cancerosa, varios cambios diferentes
al ADN de una clula deben ocurrir primero. Una de las funciones de p53 es
monitorear el estatus del ADN de la clula. Junto con un grupo adicional de protenas,
p53 ayuda a reconocer y efectuar reparos al ADN daado. Las respuestas hacia el ADN
daado incluyen reparo, cesacin de la divisin celular, y la muerte celular. El dao
al gen p53 s aumenta la probabilidad del desarrollo del cncer. Recuerde, ya que p53
es un supresor de tumor, ambas copias del gen deben ser inactivadas para que los
efectos sean evidentes. Hay varias formas en las que p53 puede ser inactivada:
Mutaciones
Las alteraciones en el gen p53
Provocan varios efectos diferentes en la actividad del gen, dependiendo del lugar
de la alteracin.
1. Mutaciones pueden ocurrir en regiones regulatorias. Estas porciones
del gen controlan qu tan a menudo, y cundo, el gen es transcrito
(esta regin es llamada el promotor). Una mutacin en la regin del
promotor puede resultar en la disminucin o la ausencia de p53 en la
clula.
2. Las mutaciones ocurren en la regin del gen que codifica la protena
puede impactar la expresin del gen (o la actividad de su protena) en
varias maneras:
Una disminucin en la actividad de p53 como un factor de transcripcin.
La expresin de los genes p53 objetivos que seran afectados
incluyen p21 (una protena involucrada en la regulacin del ciclo
celular), Bax (una protena involucrada en la induccin de apoptosis), y
la trombospodina-1 (un inhibidor de la angiognesis)).
Un cambio en p53 que lo hace ms susceptible a la degradacin. Si las
protenas p53 en la clula estn siendo degradadas a una velocidad ms
alta que lo normal stas no podrn realizar sus funciones como
supresores de tumor.
Inactivacin viral
Una de las funciones de p53 es el "guardin" del genoma. La infeccin
de viruses introduce ADN extranjero a las clulas. p53, junto con otras protenas,
es responsable de la respuesta celular a la presencia de ADN extranjero.
Estas respuestas incluyen el paro de la divisin celular y la muerte celular. Para evitar
estas respuestas, varios viruses han evolucionado maneras de inactivar la protena
p53. Un ejemplo de esto es el virus simio 40 (SV40). Al ser infectado con SV40, las
protenas virales son producidas dentro del citoplasma celular. Una de las protenas
producidas es el antgeno T. Una funcin de esta protena es la de inactivar la protena
p53. Otros viruses tales como la Hepatitis y el Papiloma virus Humano producen
protenas similares.
La eliminacin del p53 funcional de la clula aclara el paso de la divisin celular an
en la presencia del dao del ADN. En la absencia del p53, la inestabilidad gentica
probablemente aumentar, tales como el mayor nmero de mutaciones y
la aneuploidia. El aumento del dao gentico lleva a la acumulacin de supresor de
tumor defectivos y oncogenes.
La funcin de p53

La protena p53 juega un rol ntegro en la clula y es presente normalmente en todos los
tipos de clulas. La protena se encuentra en el ncleo donde funciona como un factor de
transcripcin. La protena p53 est al centro de una gran red de protenas que "sienten" la
salud celular y el ADN celular. La protena p53 es el conductor de un sistema bien
orquestrado de la deteccin y el control del dao celular. Cuando el dao es sentido, la
actividad de la protena p53 ayuda en la decisin entre reparo y la induccin de la muerte
celular (apoptosis).
Como un factor de transcripcin, p53 estimula la transcripcin de un grupo
de genes objetivos. Entre ellos, p21 es uno de los ms importantes. El producto del
gen p21 es un regulador negativo de lasquinasas dependientes de ciclinas, enzimas que
son crticas en la progresin del ciclo celular y ltimamente la divisin celular.Al estimular
la transcripcin del gen p21, p53 previene la proliferacin celular. Este paro le da a la
clula una oportunidad para hacer reparos, si es posible. Si un dao sustancial al ADN ha
ocurrido p53 puede causar la muerte celular. La muerte de una clula que ha sufrido un
dao sustancial al ADN es beneficial para el organismo porque previene que las clulas
con mutaciones deletreas sean replicadas.
Tal como descrito en la introduccin a esta seccin, todas las clulas cancerosas
contienen mutaciones en combinaciones de supresores de tumor y oncogenes.
El removimiento de un p53 funcional, el "guardin del genoma", de una clula permite la
acumulacin de an ms dao al ADN y la divisin de las clulas que contienen este ADN
daado.
La mutacin de p53:
es uno de los cambios genticos ms frecuentes que se presencia en las
clulas cancerosas. En adicin a las mutaciones que surgen durante el
crecimiento y el desarrollo de los individuos (las mutaciones espordicas),
existen formas de cnceres asociadas con la herencia de la versin daada
del p53
Un tal sndrome, el sndrome familiar de cncer Li-Fraumeni, es asociado
con una gran variedad de cnceres.
1. www.biocancer.com/journal/597/32-gen-p53

2. www.cell.com/cancer-cell/.../S1535-6108(14)00037...

3.themedicalbiochemistrypage.org/es/tumor-suppressors-sp.php