Es diferencial en base a que los microorganismos capaces de utilizar citrato como

nica fuente de carbono usan sales de amonio como nica fuente de nitrgeno, con la
consiguiente produccin de alcalinidad.
El citrato de sodio es una sal del cido ctrico, un compuesto orgnico simple que
constituye uno de los metabolitos del ciclo de los cidos tricarboxilicos. Generalmente
los microorganismos que emplean el citrato como nica fuente de carbono, utilizan
sales de amonio como nica fuente de nitrgeno. El metabolismo del citrato realizado,
por algunas bacterias se realiza por el ciclo de Krebs y requiere el desdoblamiento del
citrato por la enzima citritasa (citrato-oxalacetato-liasa o citrato desmolasa) en
presencia de magnesio o manganeso y de transportadores como citrato permeasas.

La citritasa acta sobre el citrato produciendo cido oxalacetico y acetato; productos
que son convertidos enzimticamente a piruvato y dixido de carbono. Durante esta
reaccin el medio comienza a alcalinizarse por el CO
2
que se genera, el cual se combina
con el agua y el sodio para formar Carbonato un producto alcalino, este carbonato da
la alcalinidad que produce el cambio de color del indicador de pH del medio de verde a
azul Prusia oscuro (indicador: azul de bromo timol, amarillo a pH< de 6.0 y azul a pH >
de 7.6). El medio incluye citrato como nica fuente de carbono y fosfato de amonio
como nica fuente de nitrgeno.

Tcnica

Inocular el tubo con agar citrato de Simmons realizando siembra por estra tomando
una colonia del microorganismo en estudio. Incubar a 37 grados C por 24 horas.

Interpretacin

El desarrollo de un color azul intenso en 24-48 horas indica una prueba positiva y
revela que el microorganismo en estudio ha sido capaz de utilizar el citrato en el medio
con la formacin de productos alcalinos. La prueba tambin es positiva en ausencia de
color azul si existe crecimiento del microorganismo a lo largo de la estra de
inoculacin.
Con este medio podemos diferenciar entre las coliformes fecales y bacterias de los
grupos Enterobacter y Citrobacter, asi como algunas del grupo Salmonella.

Medio utilizado para la diferenciacin de enterobacterias, en base a la capacidad de
usar citrato como nica fuente de carbono y energa. Fundamento. En el medio de
cultivo, el fosfato monoamnico es la nica fuente de nitrgeno y el citrato de sodio es
la nica fuente de carbono. Ambos componentes son necesarios para el desarrollo
bacteriano. Las sales de fosfato forman un sistema buffer, el magnesio es cofactor
enzimtico. El cloruro de sodio mantiene el balance osmtico, y el azul de bromotimol
es el indicador de pH, que vira al color azul en medio alcalino. El medio de cultivo es
diferencial en base a que los microorganismos capaces de utilizar citrato como nica
fuente de carbono, usan sales de amonio como nica fuente de nitrgeno, con la
consiguiente produccin de alcalinidad. El metabolismo del citrato se realiza, en
aquellas bacterias poseedoras de citrato permeasa, a travs del ciclo del cido
tricarboxlico. El desdoblamiento del citrato da progresivamente, oxalacetato y
piruvato. Este ltimo, en presencia de un medio alcalino, da origen a cidos orgnicos
que, al ser utilizados como fuente de carbono, producen carbonatos y bicarbonatos
alcalinos. El medio entonces vira al azul y esto es indicativo de la produccin de citrato
permeasa.
en los tubos de ensaye se deja solidificar de forma inclinada ya que en agar citrato se
siembran facterias que pueden ser aerobias o anaerobias, asi que la parte en la que se
tiene la inclinacion es la parte aerobia.

los componentes son;
**fosfato de amonio: proporciona una fuente de hidrogeno!!
**magnesio: para ayudar a reacciones metabolicas
**Cloruro de sodio: mantiene el balance osmotico
**CITRATO DE SODIO--el componente principal, sirve para detectar bacterias que
utilizan el citrato como unica fuente de energa.