CURSO DE FSICA DE LA RADIOTERAPIA Septiembre de 2014

AUTORIDAD REGULATORIA NUCLEAR

Radiosensibilizadores:
Nanopartculas














RADIOBIOLOGA Ing. Gabriel Gonzalez Roffo
Ing. Manuel E. Molina
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Modulo de RADIOBIOLOGA

RADIOSENSIBILIZADORES: Nanopart cul as

ndice
Modul o de RADIOBIOLOGA ...................................................................................... 2
RADIOSENSI BI LI ZADORES: Nanopar t cul as ......................................................... 2
1. Introduccin ................................................................................................................................ 3
2. Radiosensibilizadores .................................................................................................................. 4
2.1. Concepto ............................................................................................................................. 4
3. Nanopartculas ............................................................................................................................ 4
3.1. Definicin ............................................................................................................................ 4
3.2. Generalidades ..................................................................................................................... 4
3.3. Nanopartculas metlicas .................................................................................................... 4
4. Conclusiones.............................................................................................................................. 10
5. Bibiliografa................................................................................................................................ 11




RADIOBIOLOGA Ing. Gabriel Gonzalez Roffo
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1. Introduccin
El tratamiento local de los tumores slidos es la terapia ms antigua para el cncer, y su objetivo
es curativo o paliativo segn el estadio de la neoplasia. La ciruga fue el primer tratamiento
disponible, aun hoy es el de eleccin para muchos tipos de tumores, y distintas innovaciones han
mejorado considerablemente la posibilidad de resecar los tumores, los resultados oncolgicos y la
calidad de vida de los pacientes. El conocimiento sobre los patrones de crecimiento e invasin
tumoral ha permitido disear estrategias especficas de radioterapia y ciruga, con criterios
distintos segn el sitio anatmico para definir el tipo de tratamiento necesario y el ancho de la
ventana teraputica, especialmente en el caso de la radioterapia.
Dado que existe sensibilidad a la radiacin por parte de los tejidos sanos cercanos al tumor, es
necesario que la dosis de la energa que se administra a la neoplasia tenga una ventana estrecha.
La principal limitacin de la radioterapia es la falta de control espacial sobre la disposicin de
energa, dado que sta penetra tejidos sanos y los daa, lo que hace ineficaz al sistema de
administracin de energa al tumor.
La radioterapia se est combinando con agentes qumicos y fiscos que aumentan la sensibilidad o
la proteccin a la radiacin, para incrementar la destruccin de clulas tumorales y mejorar as la
respuesta al tratamiento. En muchos casos, sin embargo, no se observan efectos beneficiosos
sobre la eficacia y toxicidad, dado que los productos que actan sobre molculas de las clulas son
eficaces cuando estos blancos estn presentes y son accesibles y estables, lo que depende de la
farmacocintica y farmacogentica de cada paciente. Adems, estos productos no son selectivos,
dado que se distribuyen no slo en el tumor, sino en los tejidos sanos que lo rodean e, incluso, en
rganos distantes.
Un gran avance en el tratamiento local y la radioterapia es la posibilidad de depositar altas dosis
de energa dentro de la masa tumoral sin penetrar o impactar tejidos sanos. La administracin de
productos sistmicos con accin farmacolgica sobre distintos rganos y sistemas, y el uso de
radionucledos, permiten efectos continuos temporales.
Otra alternativa se presenta con la nanotecnologa, que ha facilitado un nuevo perfil de
interaccin entre los materiales y la biologa celular, dado que las clulas captan nanopartculas,
con diferencias segn el tamao, la superficie, la densidad y la forma, que se acumulan en los
lisosomas, pero las divisiones celulares diluyen su concentracin. El uso de metales como
nanopartculas permite no slo la entrada a las clulas, sino la absorcin y el depsito de altas
dosis de energa nicamente en clulas tumorales, y algunos diseos evitan la salida de estas
partculas de las clulas, por lo que se podra administrar el producto en una nica vez.
Idealmente, estas partculas no se deberan degradar o generar nuevos compuestos durante el
tratamiento, para asegurar as la accin oncolgica local.
El objetivo del presente trabajo es la presentacin de los metales utilizados en la actualidad y nos
centraremos en las nanopartculas de Oro empleadas junto con la Radioterapia.

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2. Radiosensibilizadores
2.1. Concepto
Los radiosensibilizantes tienen como objetivo hacer que las clulas sean ms sensibles a los
efectos de la radiacin ionizante favoreciendo el dao producido en el tejido tumoral.
En trminos generales se define un factor de mejora del radiosensibilizante (DEF) de la siguiente
manera:

Si dicha relacin es igual a uno, se entiende que no se genera un beneficio para el paciente, ya
que la dosis con o sin es igual. Mientras que para valores mayores que uno se detecta una ventaja
para poder obtener un determinado efecto con una dosis inferior en presencia del
radiosensibilizador.
3. Nanopartculas
3.1. Definicin
Las nanopartculas estn definidas como partculas microscpicas de entre 1 y 100 m pero se
incluyen partculas de hasta 1 m. En tratamiento de cncer estas partculas proveen una mejor
capacidad de penetracin para las sustancias utilizadas en terapia y diagnsticos con menores
riesgos comparados con las drogas convencionales.
3.2. Generalidades
La distribucin de nanopartculas es influenciada por diferentes parmetros tales como su tamao
y su capacidad de desactivar ciertos factores de clulas cancerosas. Las terapias radiantes de rayos
x y gamma y de partculas de alta energa son empleadas extensivamente para los tratamientos de
la mayora de los tipos de tumores slidos. Desafortunadamente la radiacin ionizante no
discrimina entre clulas normales y tumorales. Por lo tanto, el dao de tejido normal es todava el
factor limitante que reduce las posibilidades de erradicar las clulas tumorales en estas terapias.
La aplicacin de nanopartculas tumor-especficas en radioterapia tiene como objetivo mejorar los
resultados de la radioterapia por medio de la introduccin de mayor toxicidad sobre los tumores y
menor para los tejidos normales.
3.3. Nanopartculas metlicas
Aquellos elementos de la tabla peridica que tienen un alto nmero atmico son potencialmente
tiles para mejorar la distribucin de radiacin en los tejidos, puesto que su densidad de
electrones es alta. Las nanopartculas son capaces de acceder y operar dentro de las clulas,
donde interactan con estructuras subcelulares. El depsito de radiacin dentro de los tejidos se
correlaciona con la capacidad de stos de absorber e interactuar con los rayos X, lo que depende
de la densidad de electrones y la energa administrada. La interposicin de materiales con alta
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densidad de electrones en el camino de los rayos X aumenta la absorcin, en comparacin con el
agua, por lo que el uso de nanopartculas hechas con metales con alta densidad de electrones
podra asociarse con mayor eficacia de la radioterapia. La composicin qumica y la estructura de
las nanopartculas determinan las interacciones entre stas y las radiaciones ionizantes, y las
caractersticas de tamao, forma y superficie afectan la interaccin con los sistemas biolgicos.
Mediante metales moldeados con nanotecnologa, es posible establecer selectividad en espacio
(lugar en la estructura del tumor) y tiempo (accin cuando se activa la radiacin ionizante), a
diferencia de los radionucledos y la quimioterapia.
Para disear algunas de estas nanopartculas, se emplean metales, como oro, platino y rutenio,
que son tratados con sales y agentes reductores, pero algunos autores han cuestionado que las
basadas en oro sean inertes, dado que podra haber interaccin con protenas que contienen
tioles, dado que su superficie es qumicamente activa. Una alternativa son las nanopartculas
creadas con xidos de metales, como el xido de hafnio, que se encuentra en estudio como
agente teraputico, puesto que su absorcin de energa es alta (el nmero atmico del hafnio es
alto), su superficie puede interactuar con las diferentes interfaces sin daarlas y es inerte en
medios biolgicos. En modelos de xenoinjertos de tumor humano sensible o no a radiaciones, se
observ que la biodisponibilidad intratumoral de este compuesto era alta, as como la
permanencia dentro de la masa tumoral, donde forma racimos en el citoplasma de las clulas, sin
transferencia significativa hacia las clulas normales del entorno. El perfil de seguridad de este
compuesto es bueno, tanto en el tratamiento local-regional como en la administracin sistmica y
cuando es activado por radiacin o no. En varios modelos de xenoinjerto de tumor humano, se
observ una eficacia considerable luego del uso de xido de hafnio activado por radiacin, con un
aumento significativo de la supervivencia.
3.3.1. Nanopartculas de Oro (GNPs)
De las diversas nanopartculas los estudios preclnicos han reportado el efecto radiosensibilizante
de las nanopartculas de oro (GNPs) en conjunto con diferentes haces de fotones. Aunque la
simulaciones con Monte Carlo de GNPs han demostrado una mejora del 60 % de la dosis fsica
para fotones de fuentes de braquiterapia de Ir-192 y tambin con Rayos X del rango de los KV, un
estudio biolgico ha encontrado efectos de sensibilizacin comparables entre energas de Rayos x
del orden de Mv y Kv. Ellos sugieren que la mejora de dosis fsica basada en el incremento de la
absorcin de RX puede no ser el mecanismo principal de sensibilizacin.
Los estudios pioneros realizados por Heinfeld, las nanosparticulas con dimetro de 1,9 m han
sido inyectados por va intravenosa en ratones portadores de tumores mamarios, e irradiados con
rayos x de 250KV. Los resultados han mostrado un 86% de supervivencia a un ao para el mtodo
nuevo comparado con un 20% para el tratamiento con rayos X nicamente. Otro estudio dirigido
por Chang con ratones portadores de tumores de melanoma empleando GNP de 13 m e
irradiados con una nica dosis de 25 Gy con una haz de electrones de 6 MV. Este resulto en una
reduccin significante en el volumen tumoral comparado con el grupo control. Adicionalmente el
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numero de clulas apoptoticas resultantes de las irradiaciones con GNPs fue dos veces mayor que
en los estudios sin estas NPs.
A. Interaccin de los Rayos X y Gamma con GNPs
Se cree que la interaccion de los RXs con las nanopartculas da como resultado la liberacin de
rayos x caracteristicos, de fotoelectrones de la capa k de los atomos de oro y la emisin de
electrones auger. El rango de estos electros es relativamente muy pequeo con respecto a los
fotones y una energa importante es depositaa en las clulas que contienen las nanopartculas o
en proximidad directa con los atomos de oro.
Los resultados controversiales con respecto a la radiosensibilizacion producida por las GNPs podra
ser originados por las diferentes formas en que se llevaron a cabo las investigaciones en trminos
de los siguientes parmetros: forma de las GNPs, tamao, concentracin, tipo de lnea celular y la
calidad de la radiacin. Para abordar el problema, estos parmetros han sido evaluados por Burn.
Se ha determinado que los factores mas eficaces son: gran tamao de la GNP, alta concentracin
molar y haces de 50 KeV con un factor de mejoramiento de dosis (DEF) de 6 veces.
Para comprender las aplicaciones de estas nanopartculasseria necesario comprender la
interaccion de las nanopartculas a nivel celular y su patrn molecular en reacciones bioqumicas y
los mecanismos subsecuentes que conducen a la deposicin de energa en el medio.
La estabilidad de la irradiacin y la citotoxicidad de las GNPs para propsitos de radioterapia fue
evaluado por Zhang. Los resultados de citotoxicidad mostraron que las concentraciones
extremadamente altas de las GNPs pueden provocar una gran cada de la viabilidad de una lnea
celular (K562)mientras que a bajas concentraciones no se vieron afectadas.
Basandose en la energa de los fotones ionizantes, diferentes tipos de interacciones ocurren entre
los fotones y las GNPs. El efecto fotolectrico es el proceso predominante para fotones de energa
de entre 10 a 500 KeV. Para fotones de energas mayores a 500 KeV se observan el efecto
Compton, y en dicho interaccion los atomosexitados pueden dar lugar a la emisin de fonones. En
la emisin de fonones, la energa de excitacin fluye hacia la red husped como calentamiento de
baja temperatura. Este proceso se denomina enfriamiento.
Para energas de los fotones mayores a 1.02 MeV, se observa el efecto de produccin de pares.
Como consecuencia de estos procesos, se espera que la interaccion de Rayos X y gamma con
atomos de oro entreguen una energa considerable en forma de electrones libres y energticos y
energa trmica.
B. Modelacin por Monte Carlo del efecto de mejora de dosis de las GNPs
Se simul una fuente de Braquiterapia de Ir-192 (con fotones de 380 keV) usando fantomas de
agua y las GNPs de 100 m. Es sabido que en la interaccin fotoelctrica, el coeficiente de
atenuacin se incrementa significantemente para las energas mayores a la de ligadura de la capa
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K (para Oro de 80,7 keV). En el estudio de Zhang, se explica que la mejora de dosis es debida al
hecho de que los fotoelectrones de 300 keV poseen un alcance de 85 m, mucho mayor al
dimetro de la GNPs. Con lo cual tienen la posibilidad de depositar la energa en el agua o medio
que los rodea.
En el estudio de Cho, fue empleado el mtodo de MC para evaluar el DEF de GNPs irradiadas con
Rayos X de 140 keV, 4 y 6 MeV y Rayos Gamma de Ir 192. El DEF = 2 fue obtenido para Rayos X de
140 keV con una concentracin de 7 mg de oro/gr de tumor asumiendo que no haba oro fuera del
mismo. El DEF para los haces de 4 y 6 MeV se encontraron en un rango de 1,01 y 1,07
dependiendo de la cantidad de oro dentro del tumor y de la calidad del haz. Para el Ir192 se
obtuvo un DEF entre 1,05 y 1,31, dependiendo de la concentracin de oro.
En otro estudio de Cho, la viabilidad del uso de las GNPs en radioterapia (GNRT) usando fotones de
baja energa fue estudiada por simulaciones de Monte Carlo. Fuentes de Braquiterapia de Rayos X
de 50 keV, I125 y Yb169 fueron empleados para calcular el DEF macroscpico (MDEF), definido
como la dosis promedio en la regin del tumor con y sin la presencia de las GNP durante la
irradiacin del tumor. Se ha encontrado un incremento de la dosis en el tumor del 40% usando 50
keV, I125 y Yb169 con las GNPs. Para tumores cargados con 18 mg de Oro/gr, los MDEF fueron de
116%, 92% y 108% para 125 I, 50 keV y Yb169 respectivamente, a una distancia de 1 cm desde el
centro de la fuente. Mientras que para la concentracin de 7 mg de Oro/gr de tumor, esta se
decremento a un 68%, 57% y 44% respectivamente para las misma fuentes. Se concluy que la
GNRT usando las fuentes de braquiterapias es viable y podra ser aprovechada para braquiterapia
con fotones de baja energa. Especialmente para las fuentes de Yb169 que adems poseen una
elevada tasa de dosis.
C. Sensibilizacin de las GNPs en lneas celulares y modelos animales.
En el primer estudio de Hainfeld, las GNPs fueron empleadas para aumentar la toxicidad de la
radioterapia en las clulas cancergenas en ratones. Los Ratones con cncer subcutneo de mama
fueron divididos en tres grupos. El primero recibi una inyeccin de GNPs previo a la irradiacin
con Rayos X de 250 keV. El segundo grupo solo recibi radiacin, y el tercer grupo solo se le
inyectaron las GNPs. La tasa de sobrevida a un ao fue de 86% para el primer grupo; contra un
20% para los que solo fueron irradiados; y 0% para el ltimo grupo. El incremento de la
radiosensibilidad fue atribuido a la mejora de absorcin producida por el elevado Z de las GNPs.
En el estudio de Chang, se report un incremento en la apoptosis y en el DEF para la combinacin
de GNPs con haces de electrones. La lnea de clulas de melanoma fueron cultivadas y luego
transplantadas dentro de la pata de un ratn. La lnea celular y el ratn portador del tumor fueron
irradiados con una sola dosis de 25 Gy utilizando un haz de electrones de 6 MV en combinacin
con las GNPs. Adems, la acumulacin de GNPs en la lnea celular y en el ratn fueron detectados
y cuantificados. Los resultados de la sobrevida celular mostraron que las GNPs radiosensibilizaron
a las clulas de melanoma de manera significativa. Para los ratones portadores de tumor se revel
que el crecimiento fue retardado en mayor medida comparado al grupo que fue sometido slo a
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Radioterapia (sin GNPs). Adicionalmente, el grado de apoptosis encontrado fue casi de dos veces
mayor para el grupo que posea las GNPs + Radiacin contrastado con el grupo que solo fue
expuesto a la radiacin. Chang emplea GNPs con un tamao promedio de 13 m para beneficiar el
efecto mayor de radiosensibilizacin recomendado por el estudio de Chithrani.
En el estudio de Burn, una solucin de ADN combinada con GNPs fue combinada para investigar la
respuesta de esta molcula clave a la radioterapia con GNPs. El dimetro empleado para las GNPs
fueron de 8,1 20,2 37,5 74 y 92 m y la energa de fotones de 15 a 70 keV. Con una relacin
GNPs:ADN de 1:5 y una energa de 49 keV se observ una relacin lineal entre la prdida de
superenrollado del ADN y el dimetro de la GNPs. Para la GNP de dimetro 92 m se desenroll 3
veces ms que para los de dimetro de 8 m.
En el estudio in vitro de Kong, dos molculas funcionales de GNPs, (GNP+cysteamina y
GNP+tioglucosa) fueron sintetizados y por medio de captacin celular ingresaron a las clulas. Se
observo que las clulas absorbieron mayor cantidad de GNPs funcionales que GNPs simples,
adems se detecto nula o muy baja toxicidad en la clula debido a estos GNPs funcionales. Por
ltimo, al ser irradiadas (200 kV) dos lneas celulares con y sin GNP funcional, se asoci un
aumento de muerte celular en las que posean la molcula funcional.
D. Impacto de la energa de la radiacin
La energa del haz es uno de los factores que ms influencia en la efectividad de la radioterapia. En
radioterapia de tumores cargados con partculas de elevado nmero atmico (GNPs), el concepto
fsico de la interaccin fotoelctrica ha sido utilizada para la eleccin de la energa del fotn. En
otras palabras es fsicamente obvio que la posibilidad de una interaccin fotoelctrica se ve
aumentada cuando la energa del haz es apenas mayor que la energa del electrn de la capa k.
Adicionalmente, los fotoelectrones liberados y los electrones Auger conducen a una deposicin de
energa mayor en la vecindad de la nanopartcula. Sin embargo este concepto puramente fsico no
ha sido demostrado completamente en la prctica. Biston, emple la combinacin de un
sincrotrn y cis-diamminedichloroplatinum en clulas tumorales de rata (glioma) con energas por
encima y debajo de la energa de la capa k de platino (78,4 KeV). Sorprendentemente el resultado
fue igual para ambos casos. La razn sugerida para tal extrao evento fue que para un fotn
incidente con una energa de la capa K toda su energa es gastada para liberar el fotoelectrn de la
capa k y este no recibe energa suficiente para producir un dao excesivo alrededor del material.
Otro factor de influencia que debera ser tenido en cuenta para explicar las discrepancias
observadas es la diferencia de absorcin entre el elemento de elevado Z y el medio que lo rodea.
En la figura 1 se presenta la variacin del coeficiente msico de absorcin de energa relativo de
oro a agua. Los datos fueron obtenidos del NIST. Como se puede observar el valor mximo se
ubica alrededor de los 40 a 50 KeV, lo que significa que el DEF mximo alcanzable con las GNPs
podra ser llevado a cabo con energas del fotn en este rango.

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Figura 1: Variacin del coeficiente msico de atenuacin relativo de oro a agua con la energa del
fotn.
La aplicacin de fotones de baja energa para radioterapia est asociada con el problema de una
dosis elevada en piel y una rpida cada de la dosis absorbida en profundidad. En las energas de
MV utilizadas en los tratamientos de radioterapia actuales la tasa de absorcin entre el oro y el
agua se vuelve despreciable, como puede ser visto en la figura 1. Sin embargo como otros estudios
lo han demostrado, el efecto de mejora puede ser visualizado en el rango de fotones de MeV. En
altas energas, la interaccin del fotn con la materia produce electrones Compton con un
espectro de energa la cual tiene un coeficiente de absorcin alto con GNPs comparados con el
medio biolgico que lo rodea, como se visualiza en la figura 2.

Figura 2: PDD para 68 KeV, 82KeV y 2MeV con y sin GNPs

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Otra aproximacin para evitar altas dosis en la piel con fotones de energa bajas es la de emplear
GNPs con nuevos desarrollos en fuentes de rayos X miniaturizados que deberas ser insertados
dentro del cuerpo y ubicadas al lado o dentro del tumor empleando tcnicas de laparoscopia y/o
endoscopia.
4. Conclusiones
El concepto del uso de NP para radioterapia ha sido estudiado por muchos investigadores con
experimentos y simulaciones de Monte Carlo durante los ltimos aos.
La emergencia de las nanopartculas de oro con caractersticas biocompatibles han motivado a los
cientficos a investigar sus aplicaciones en conjunto con la radioterapia.
Para optimizar la tcnica de Radioterapia basada en GNP para su aplicacin clnica, se requieren
experimentos biolgicos en lneas celulares y modelos animales para clarificar las diferencias
observadas en la DEF en funcin de la magnitud del efecto de mejora y el impacto del tipo celular
en la radioterapia basada en GNPs.
No se pueden excluir (especialmente con GNPs) que existan efectos farmacolgicos, ya que por
ejemplo los tomos de oro pueden estar en distintos estados de oxidacin, migrar en el citoplasma
y reaccionar con los tioles. Esto disminuira las defensas contra el estrs oxidativo.
La utilizacin de las NPs en Radioterapia es prometedora ya que se sabe que los resultados
mencionados aceptan que las NPs pueden mejorar el fenmeno de la deposicin de dosis en
tumores cargados con NPs. Sin embargo, queda mucho trabajo por hacer, para entender en
profundidad el papel de las NPs, las combinaciones ptimas del tipo de NP, tamao, tipo y calidad
de haz, etc. para distintos tumores.

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5. Bibiliografa
[1] A. Mesbahi - A review on gold nanoparticles radiosensitization effect in radiation therapy of
cancer - ELSEVIER Reports of Practical Oncology & Radiotherapy Volume 15, Issue 6. 2010, Pages
176 - 180. http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S150713671000101X
[2] A. Mesbahi; F. Jamali, N. Gharehaghaji - Effect of Photon Beam Energy, Gold Nanoparticle Size
and Concentration on the Dose Enhancement in Radiation Therapy - BioImpacts 2013.
[3] Y. Prezado - Nanopartculas y radioterapia - Laboratoire Imagerie et Modelisation pour la
Neurobiologie et la Cancrologie (IMNC)-CNRS.
http://www.sefmseprextremadura2013.es/TRABAJOS/Presentaciones%20por%20d%EDas/Miercol
es%2019%20de%20Junio%20de%202013/Comunicaciones_4_Area12_1630a1830/Ponencia/0-
Nanoparticulas%20y%20radioterapia_Yolanda-Prezado.pdf
[4] Pottier A.; Borghi, E; Levy L - New Use of Metals as Nanosized Radioenhancers- Anticancer
Research 34(1B):443-454 - Enero 2014. http://www.bago.com.ar/vademecum/bibliografia/uso-de-
nanoparticulas-para-mejorar-la-trasmision-de-la-radiacion/