E-Mail karger@karger.ch www.karger.com F O C U S 2012 Nestec Ltd., Vevey/S. Karger AG, Basel 02506807/12/06070019$38.00/0 Prof. Steven H. Zeisel, MD PhD Nutrition Research Institute University of North Caroline at Chapel Hill 500 Laureate Way, Kannapolis, NC 28081 (USA) Tel. +1 704 250 5003, E-Mail steven_zeisel@meddent. unc.edu Reimpreso con permiso de: Ann Nutr Metab 2012;60(suppl 3):19-25 DOI: 10.1159/000337310 Las interacciones entre genes y dieta subyacen la individualidad metablica e inuyen en el desarrollo cerebral: implicaciones en la prctica clnica derivada de estudios sobre el metabolismo de colina Steven H. Zeisel Nutrition Research Institute, University of North Carolina at Chapel Hill, Kannapolis, N.C. , USA Palabras clave Colina Desarrollo Polimorfsmo de nucletido nico Epigentica Metilacin Antecedentes Uno de los mecanismos subyacentes a la individualidad metablica es la variacin gentica. Los polimorfsmos de nucletido nico (PNU) en genes de rutas metablicas pueden crear inefciencias metablicas que alteran los re- querimientos dietticos para, y las respuestas a, los nutrien- tes. Estos PNU pueden detectarse mediante perflamiento gentico y las inefciencias metablicas que ocasionan, pueden detectarse mediante perflamiento metabolmico. Los estudios sobre los requerimientos dietticos de colina ilustran lo tiles que pueden ser estas estrategias, ya que estos requerimientos estn infuidos por PNU en genes im- plicados en el metabolismo de colina y folato. En adultos, estos PNU determinan si las personas desarrollan hgado graso, dao heptico y muscular al ingerir dietas con bajo contenido de colina. Debido a que la colina es muy impor- tante para el desarrollo fetal, estos PNU pueden identifcar mujeres que requieren ingerir ms colina durante el emba- razo. Algunas de las actividades de colina estn mediadas por mecanismos epigenticos que permiten el retorno de rutas metablicas durante etapas tempranas de la vida. Copyright 2012 Nestec Ltd., Vevey/S. Karger AG, Basel Introduccin El obsttrico y el pediatra cuidan a las madres y a los infantes durante un periodo en que las interacciones entre la dieta y los genes tienen efectos muy importantes en el desarrollo del nio que modulan el estado de salud en etapas posterio- res de la vida. 1 Los cientfcos recin comienzan a compren- der cules componentes de la dieta tienen dichos efectos, y cules mecanismos subyacen a estos efectos. Mientras tanto, se torna aparente que la expresin gnica modula las rutas metablicas y las personas pueden tener grandes diferencias La variacin metablica es una fuente de discor- dancia (ruido) que debe considerarse en el diseo de estudios de investigacin en nutricin humana. Los polimorfsmos genticos modifcan los requeri- mientos dietticos al crear inefciencias metablicas. El perflamiento nutrigentico puede ayudar a los clnicos a identifcar personas con inefciencias metablicas. La dieta materna e infantil puede alterar las marcas epigenticas que controlan la expresin gnica a lo largo de la vida. Mensajes clave Zeisel Reimpreso con permiso de: Ann Nutr Metab 2012;60(suppl 3):1925 20 en el metabolismo, que refejan a menudo inefciencias en las rutas metablicas causadas por la variacin gentica. Estas nuevas bases de conocimientos estn en evolucin y, en menos de una dcada, el catlogo de importantes interacciones entre genes y nutrientes deber ser tan grande que se utilizar en la prctica clnica diaria. Variacin gentica y expresin gnica Cuando se secuenci el genoma humano, se pens que los cientfcos comprenderan las causas genticas de las enferme- dades; desafortunadamente, la biologa subyacente era mucho ms complicada que lo esperado. A pesar de que los humanos compartimos mucho del cdigo gentico, hay numerosas ma- neras en que las personas diferen: algunas de estas diferen- cias son resultado de la variacin metablica. Los humanos heredan, de sus ancestros, una lectura equvoca de los genes (denominado polimorfsmos de nucletido nico o PNU); se conocen ms de un milln de PNU y cada persona tiene alrededor de 50 000 de ellos. 2 Una cantidad considerable de PNU no tiene funcin conocida, pero otros tantos alteran la expresin de genes crticos implicados en el metabolismo. En la regin exnica de un gen que codifca para una protena, un PNU puede ocasionar la sustitucin de un aminocido en la protena; esto produce un cambio en la estructura de la pro- tena y puede desembocar en la prdida o ganancia de cierta funcin. En la regin reguladora del gen que contiene los si- tios de activacin o desactivacin (sitios de unin a factores de transcripcin) que regulan al gen, un PNU puede cambiar la expresin gnica y con ello alterar la cantidad de protena disponible para realizar su funcin en el metabolismo. Con frecuencia, dichos PNU disminuyen la cantidad de protena funcional debido a que inhiben la expresin de los genes, pero algunos PNU pueden incrementar la expresin gnica si se encuentran en una regin defectuosa del gen que en situacio- nes normales acta al inhibir la expresin gnica (Figura 1). Cuando los PNU ocurren en genes crticos para el me- tabolismo, crean inefciencias metablicas que pueden in- fuir sobre los requerimientos y respuestas a un nutriente. Este concepto es familiar en la medicina personalizada, en que los clnicos ahora son conscientes de los efectos de los PNU en los genes del metabolismo farmacolgico. Existen metabolizadores rpidos y lentos del frmaco warfarina que pueden defnirse por PNU, y las dosis de este medicamento necesitan modifcarse en concordancia para una respuesta ptima al mismo. 3 En cuanto a la nutricin, hay PNU que determinan si se cuenta con un metabolismo rpido o len- to de cafena, 4 si se tienen mayores requerimientos dietti- cos de folato, 5 colina, 6, 7 vitamina C, 8 o vitamina D, 8 y si se tienen concentraciones incrementadas de colesterol srico despus de ingerir una comida con alto contenido de grasa. 9 Modulacin epigentica de la expresin de los genes La complejidad gentica va ms all de los efectos de los PNU. Hay marcas (grupos qumicos pequeos) que se agregan a los genes o protenas cromosmicas que pueden modular la ex- presin de los genes. 10 Estas marcas epigenticas se agregan a los genes durante el periodo de inicio cuando una clula pro- genitora comienza a dividirse y al fnal cuando las clulas hijas se diferencian; despus, se copian felmente durante el resto de la vida de la clula. Debido a que la mayora de las clulas progenitoras entran en este periodo crtico durante la vida fe- tal y quiz durante los primeros aos de vida despus del na- cimiento, stos son los periodos de desarrollo infantil cuando las marcas epigenticas son ms susceptibles de infuirse por el ambiente, en especial por la nutricin. 11 Esto es afortuna- do debido a que permite escapar al sistema en desarrollo de la rigidez de codifcacin gentica al cambiar ciertos genes de encendido y apagado, con lo que la expresin gnica en Este concepto es familiar en la medicina personalizada, en que los clnicos ahora son conscientes de los efectos de los PNU sobre los genes del metabolismo farmacolgico. Inefciencias metablicas FT RNAm Figura 1. La lectura gentica equvoca (PNU) puede provocar inefciencias metablicas. Los PNU ocasionan cambios en la com- posicin de los aminocidos de una enzima que provoca el plega- miento equivocado y la poca funcin, o los PNU pueden producir sitios de unin defectuosos de los factores de transcripcin (FT) y la incapacidad para activar la expresin de los genes. Nutrigentica de Colina Reimpreso con permiso de: Ann Nutr Metab 2012;60(suppl 1):1925 21 retorno logra cierta fexibilidad metablica. Si el mundo fuera del tero no satisface las expectativas, los mecanismos epigenticos permiten cierto grado de adaptacin. Como se seal antes, estas marcas epigenticas se vuelven fjas despus de las etapas tempranas de la vida, y el retorno del metabolis- mo que fue til en dichas etapas, puede tornarse problemtico cuando el ambiente o la dieta cambian en etapas posteriores. Se piensa que este es uno de los mecanismos subyacentes de cmo las exposiciones en etapas tempranas de la vida infuyen sobre el riesgo de enfermedades en el adulto. 11 La marcacin epigentica es un proceso tan importante que la naturaleza ha evolucionado mltiples rutas de reforzamiento para estos procesos. Los grupos metilo agregados a nucletidos de cito- sina en el DNA actan para atraer un grupo de protenas a su alrededor, y estas protenas en capuchn bloquean el acceso de factores de transcripcin que deben unirse al DNA para activar la expresin gnica; con ello la metilacin del DNA por lo general inhibe la expresin de los genes (Figura 2). En con- diciones normales, el DNA est enrollado de manera estrecha alrededor de una serie de protenas llamadas histonas, y los grupos metilo agregados a las lisinas en estas protenas infu- yen cun estrecho es el empaquetamiento del DNA en estas espirales. Cuando el DNA est enrollado de manera frme, se bloquea el acceso de los factores de transcripcin que deben unirse a l para la expresin gnica; entonces, por lo general la expresin de los genes se inhibe por la metilacin de las histonas. La metilacin del DNA y de las histonas estn re- guladas por rutas que interactan entre ellas, y es usual que se coordinen para producir seales inhibidoras reforzadoras. La complejidad no termina aqu. Los cientfcos han descubierto que existe un tercer mecanismo para el control epigentico de la expresin de genes, los microRNA que se unen a secuencias complementarias de DNA gentico y bloquean el acceso a los factores de transcripcin necesarios para activar los genes. 12 La dieta es un potente modulador de las marcas epigenti- cas, en especial durante la vida prenatal y posnatal temprana. Las dietas ricas en colina, metionina, folato y vitaminas B 6 y B 12
incrementan la metilacin de DNA e histonas, alteran la expre- sin gentica y pueden provocar cambios permanentes en el desarrollo. El consumo de dietas ricas en estos nutrientes a rato- nas embarazadas alter la sealizacin del factor de crecimiento parecido a insulina, 13 el color del pelo, 14, 15 el peso corporal, 14, 16
e incluso el rizado de la cola 17 en su descendencia. Despus se discute cmo la colina diettica durante el embarazo en ratones infuye la neurognesis y angiognesis en el cerebro fetal. 18, 19 Algunos ejemplos concretos pueden ayudar a solidifcar las implicaciones de la investigacin en la prctica clnica. Un ejemplo excelente de cmo los mecanismos nutrigenticos in- fuyen en el desarrollo se encuentra en la investigacin recien- te sobre el nutriente colina. Genes, variacin metablica y requerimiento para y respuestas a colina El estudio de la colina proporciona informacin sobre un sistema variado de mecanismos nutrigenticos que tienen relevancia clnica para el desarrollo infantil. La colina, un nu- triente encontrado en diversos alimentos (en especial en el huevo, la leche y las carnes; vase la lista del US Department of Agriculture de alimentos que contienen colina en www.nal. usda.gov/fnic/foodcomp/Data/Choline/Choln02.pdf), es im- portante para formar el neurotransmisor acetilcolina, para la produccin de los fosfolpidos de membrana fosfatidilcolina y esfngomielina, y es una fuente importante de grupos metilos [revisado en la ref. 20]. Figura 2. Regulacin epigentica de la expresin de los genes. En condiciones normales, los genes se expresan cuando los factores de transcripcin (FT) se unen al DNA y activan el gen (panel izquierdo). Un mecanismo para controlar la expresin gnica utiliza la metilacin de citosinas en el DNA. Cuando la metilacin est presente, se atrae en protenas al sitio metilado, y esto bloquea el acceso a los factores de transcripcin y el gen no puede activarse. FT FT Protenas de unin a metilo Citosina metilada RNAm RNAm Zeisel Reimpreso con permiso de: Ann Nutr Metab 2012;60(suppl 3):1925 22 Durante varios aos, los cientfcos en nutricin pensaron que los humanos satisfacan sus necesidades de colina a travs de una ruta metablica, presente principalmente en el hgado, el cual forma fosfatidilcolina (una fuente de colina) a partir de fosfatidiletanolamina, que utiliza Sadenosilmetionina como donador de grupos metilo. Esta ruta est codifcada por el gen PEMT. 21 Sin embargo, cuando se prob esta idea en experi- mentos, se observ que los hombres, las mujeres posmeno- pusicas y algunas mujeres premenopusicas desarrollaron dao heptico y/o muscular cuando se les administr una die- ta con bajo contenido de colina. 22 24 Este dao tisular se resol- vi con rapidez cuando se reintrodujo colina a la dieta. La ma- yora de las mujeres premenopusicas eran diferentes: cuando recibieron dietas con bajo contenido de colina durante perio- dos de hasta siete semanas, no desarrollaron dao muscular ni heptico. 22 Por qu estas mujeres son resistentes a la defcien- cia de la colina? La explicacin yace en la ruta para la sntesis endgena de fosfatidilcolina (Figura 3); la expresin del gen PEMT se encuentra incrementada por los estrgenos. 25 Es in- teresante que esta activacin del gen comienza en concentra- ciones de estrgenos presentes en mujeres premenopusicas y es mxima en las concentraciones mximas de estrgenos alcanzadas durante el embarazo. 25 Esto es destacable para la prxima discusin sobre por qu la colina es importante para el desarrollo fetal. Entonces, por qu algunas mujeres preme- nopusicas (alrededor de 44%) 22 an requieren ingerir colina a pesar de contar con esta ruta activada por estrgeno para formar colina? Se debe a que tienen uno o ms PNU que in- crementan el requerimiento diettico de este nutriente? 6,7 Por ejemplo, un PNU en un gen importante para el metabolismo del folato (MTHFD1) disminuy la disponibilidad de metilte- trahidrofolato y cre una demanda adicional de betana (un metabolito de colina) un donador alternativo de grupos meti- lo necesario para la formacin de metionina a partir de homo- cistena. 7 Esta derivacin de la formacin de colina en betana disminuy la capacidad de colina para formar membranas y acetilcolina (Figura 3). Las personas con dos alelos variantes para MTHFD1 tuvieron una probabilidad 85 veces mayor de desarrollar hgado graso cuando recibieron una dieta con bajo contenido de colina. 7 Otro PNU de inters se encontr en el gen PEMT; el PNU previene la activacin de este gen por es- trgeno, con lo que evita la expresin incrementada de este gen que se presenta en mujeres premenopusicas en condicio- nes normales. 26 Las mujeres con este PNU tuvieron una pro- babilidad 24 veces mayor de desarrollar hgado graso cuando recibieron una dieta con bajo contenido de colina. 7 Este PNU en PEMT es muy frecuente, ya que alrededor de 20% de la po- blacin en Carolina del Norte tiene dos alelos variantes. 6 El efecto acumulativo de los PNU en los genes de co- lina y las rutas metablicas de un carbono fue crear inef- ciencias en la modulacin de colina. Esto podra detectarse como cambios en las molculas pequeas producidas por el metabolismo. Se analiz el plasma a travs de mtodos de perflamiento metabolmico en personas alimentadas con una dieta estandarizada que contena colina. Las diferencias en los metabolitos plasmticos en esta dieta inicial predije- ron con precisin quines podran desarrollar hgado graso cuando se les administra una dieta con bajo contenido de colina; 27 de este modo, las personas con PNU ya presentaban diferencias metablicas antes de recibir dicha dieta. Los me- tabolitos alterados no se restringieron a los cambios obvios esperados en los metabolitos implicados directamente con colina y el metabolismo de un carbono, sino adems inclu- yeron cambios en el metabolismo de cetocidos, carnitina, lpidos y aminocidos. 27 Colina y desarrollo fetal La evidencia muestra que los sistemas especfcos en mu- jeres estn diseados para liberar colina para el feto y el lactante, lo que sugiere que este nutriente es importante para el desarrollo humano normal. Primero, como se sea- l antes, las mujeres jvenes tienen una capacidad especial para formar fosfatidilcolina que sirve para amortiguar dis- cordancias en la ingesta diettica. 25,26 Segundo, los sistemas de transporte en la placenta y la glndula mamaria liberan grandes cantidades de colina de la madre hacia el feto y al lactante, respectivamente. 28,29 Esto ocasiona concentracio- nes plasmticas y tisulares de colina que son mucho mayo- res en el feto y el lactante que en los adultos. 30, 31 Desafortu- nadamente para la madre, esta demanda adicional de colina proporcionada al producto incrementa los requerimientos Homocistena Metionina Betana Colina Membranas FE PEMT Fosfatidilcolina Estrgeno Figura 3. Los PNU pueden incrementar los requerimientos die- tticos de colina. En humanos, los PNU en el gen MTHFD1 au- mentan la demanda de betana como donador de metilos, con lo que incrementan el requerimiento diettico de colina. Otro PNU en el gen PEMT previene la activacin de este gen por estrgeno, con lo que disminuye la produccin endgena de fosfatidilcolina (una fuente de colina) en el hgado y aumenta el requerimiento diettico de colina. Ambos PNU son frecuentes. FE = fosfatidi- letanolamina. Nutrigentica de Colina Reimpreso con permiso de: Ann Nutr Metab 2012;60(suppl 1):1925 23 de colina de la madre y es posible que exceda la capacidad de produccin endgena de colina en el hgado. 32 En roedores, la disponibilidad de colina para el feto es muy importante para el desarrollo cerebral (de manera es- pecfca del hipocampo). Esta rea del cerebro es importante para la funcin de la memoria. Si las roedores embarazadas se alimentan con una dieta complementada con colina, su descendencia muestra un desempeo 30% mayor en pruebas de memoria visual-espacial y auditiva 3335 y esta mejora dura toda su vida. Por el contrario, cuando las roedores embara- zadas se alimentan con dietas con bajo contenido de colina, su descendencia presenta una memoria visual-espacial y au- ditiva disminuidas. 36 Los fetos de madres alimentadas con dietas suplementadas con colina tienen casi el doble de la tasa de neurognesis en el hipocampo en comparacin con los fe- tos de madres alimentadas con una dieta con bajo contenido de colina. 18,37,38 Adems, los fetos de madres alimentadas con una dieta complementada con colina tienen la mitad de la tasa de apoptosis (muerte celular programada) neuronal en el hi- pocampo en comparacin con los fetos de madres alimenta- das con una dieta con bajo contenido de colina. 18,37,38 De este modo, la ingesta de una dieta rica en colina durante el embara- zo incrementa la proliferacin neuronal y disminuye la muerte neuronal en el cerebro fetal. Esto podra explicar los efectos observados en la funcin de la memoria. Parece que las cifras bajas de colina ocasionan la diferenciacin y maduracin ms temprana de las neuronas, lo que acorta el periodo durante el cual pueden dividirse. 18,39 Agregado a la infuencia sobre la neurognesis cerebral, la disponibilidad de colina tiene efectos similares en la angiognesis del cerebro. Los fetos de madres alimentadas con una dieta complementada con colina tienen ms vasos sanguneos en el hipocampo en comparacin con los fetos de madres alimentadas con una dieta con bajo conte- nido de colina. 19
Cmo podra infuir la colina diettica materna so- bre el cerebro fetal? Como se seal antes, la colina es una fuente importante de grupos metilos necesarios para la marcacin epigentica del DNA y las histonas. Algunos de estos genes que controlan el ciclado celular estn regula- dos de modo epigentico. Por ejemplo, un gen que codifca para un inhibidor del ciclado celular (CDKN3) se expresa cuando el gen esta submetilado, y se suprime cuando el gen est metilado. 40,41 Los fetos de madres alimentadas con una dieta complementada con colina tienen ms DNA altamen- te metilado en CDKN3 en el hipocampo en comparacin con los fetos de madres alimentadas con una dieta con bajo contenido de colina. 40 Cuando CDKN3 est muy metilado, el gen no se expresa y se retira un importante freno del ci- clado celular, lo que da paso a la neurognesis incrementa- da observada en el cerebro fetal suplementado con colina. De esta manera, la dieta materna cambia las marcas epige- nticas en el cerebro fetal que, a su vez, cambian la estruc- tura y funcin cerebrales. ste no es el nico ejemplo de dichos efectos epigenticos en el feto ocasionados al alterar la dieta materna. Se cuenta con una cepa de ratones que tiene un gen que codifca para colas rizadas; este gen est regulado por epigentica y se suprime cuando se metila. Cuando las ratonas embarazadas se alimentan con dietas ricas en colina y metionina, su descedencia tiene colas ms rectas y, cuando las hembras embarazadas se alimentan con una dieta con bajo contenido de colina su descendencia tie- ne colas rizadas de manera permanente. 17 Tanto para el de- sarrollo cerebral como para el rizado de la cola, la afnacin epigentica que ocurri cuando las clulas progenitoras se dividan se volvi fja una vez que las clulas se diferencia- ron y se copiaron con fdelidad en todas las siguientes divi- siones celulares; de tal modo, el efecto en la descendencia persisti en etapas ulteriores de la vida. Los efectos de la colina durante el embarazo pueden no limitarse al desarrollo del hipocampo. Es interesante que algunas de las anormalidades caractersticas del desarro- llo del sndrome fetal por alcohol en ratas se encontraron disminuidas si las hembras embarazadas consuman colina en suplementos. 42 La colina es importante para el cierre del tubo neural, 43,44 y un estudio de casos y controles basado en la poblacin en 440 casos y 400 controles en Califor- nia encontr que el riesgo de defectos del tubo neural en el lactante disminua de manera signifcativa en mujeres em- barazadas que consuman dietas en el cuartil ms alto para contenido de colina y betana en comparacin con quie- nes consuman el cuartil ms bajo para estos nutrientes. 45
De este modo, la ingesta materna de una dieta rica en colina durante el embarazo incrementa la proliferacin neuronal y disminuye la muerte neuronal en el cerebro fetal. Desafortunadamente, es difcil llevar a cabo estudios prospectivos controlados de asignacin aleatoria en humanos, y no se cuenta con estudios de poder suciente que demuestren el efecto de la colina durante el embarazo en la funcin hipocmpica humana en lactantes. Zeisel Reimpreso con permiso de: Ann Nutr Metab 2012;60(suppl 3):1925 24 Se han realizado observaciones similares sobre el riesgo de hendiduras orofaciales. 46 Estos estudios son la primera evidencia de que la colina es importante para el desarrollo cerebral normal en humanos, y debido a que el cierre del tubo neural implica la neurognesis y la migracin, estos datos sugieren con fuerza que los efectos de la colina en la neurognesis y apoptosis que ocurren en roedores pueden ser sufcientes para tener importancia en humanos. Es des- afortunado que los estudios prospectivos controlados de asignacin aleatoria sean difciles de llevar a cabo en huma- nos, y no se cuenta con estudios con poder adecuado que demuestren un efecto de colina durante el embarazo en la funcin hipocmpica humana en lactantes. Un estudio ob- servacional 47 inform no haber encontrado relacin alguna entre las concentraciones de colina en sangre del cordn y los puntajes de pruebas intelectuales en nios de cinco aos de edad, pero estas pruebas no se disearon para detectar diferencias sutiles en la funcin del hipocampo y es posible que la colina en sangre de cordn no refeje la dieta materna con precisin. Son necesarios ms estudios para considerar las complejas interacciones entre dieta, variacin gentica y epigentica que dan paso a los efectos mediados por coli- na en el desarrollo cerebral. Es posible que slo las madres (o los hijos?) con inefciencias metablicas inducidas por PNU sean sensibles a la ingesta diettica de colina. Slo un estudio controlado de asignacin aleatoria con el diseo y poder adecuados podr determinar si la suplementacin con colina tiene efectos benfcos sobre el desarrollo de la memoria en humanos. Conclusiones El estudio de los requerimientos humanos de colina y de las actividades de colina en el desarrollo cerebral proporciona ejemplos de cmo pueden disearse e interpretarse los estu- dios sobre variacin metablica. La elucidacin de los factores que ocasionan la individualidad metablica prometen refnar nuestro conocimiento acerca de cmo la nutricin infuye so- bre la salud. Reconocimientos Para este artculo se recibi apoyo de becas provenientes de los National Institutes of Health (DK55865 y DK56350). Declaracin de confictos de inters Ninguno de los autores inform contar con confictos de inte- rs en relacin con el contenido de este artculo. La redaccin de este artculo recibi fondos de Nestl Nutrition Institute. Dr. Zeisel recibi fondos de apoyo de Balchem y the Egg Nutrition Research Center para estudios distintos a los descritos en este artculo. El Dr. Zeisel pertenece al consejo asesor cientfco de Solae, American Pistachio Growers, Dupont, Metabolon y GenoVive. 1 Barker DJ: Maternal nutrition, fetal nutrition, and disease in later life. Nutrition 1997; 13: 807813. 2 Crawford DC, Nickerson DA: Definition and clinical importance of haplotypes. Annu Rev Med 2005; 56: 303320. 3 Carlquist JF, Anderson JL: Using pharmacoge- netics in real time to guide warfarin initia- tion: a clinician update. Circulation 2011; 124: 25542559. 4 Cornelis MC, El-Sohemy A: Coffee, caffeine, and coronary heart disease. Curr Opin Lipidol 2007; 18: 1319. 5 Bailey LB, Gregory JF 3rd: Polymorphisms of methylenetetrahydrofolate reductase and oth- er enzymes: metabolic significance, risks and impact on folate requirement. J Nutr 1999; 129: 919922. 6 da Costa KA, Kozyreva OG, Song J, Galanko JA, Fischer LM, Zeisel SH: Common genetic polymorphisms affect the human require- ment for the nutrient choline. FASEB J 2006; 20: 13361344. 7 Kohlmeier M, da Costa KA, Fischer LM, Zeisel SH: Genetic variation of folate-mediated one- carbon transfer pathway predicts susceptibil- ity to choline deficiency in humans. Proc Natl Acad Sci USA 2005; 102: 1602516030. 8 Cahill LE, Fontaine-Bisson B, El-Sohemy A: Functional genetic variants of glutathione S - transferase protect against serum ascorbic acid deficiency. Am J Clin Nutr 2009; 90: 14111417. 9 Mattei J, Demissie S, Tucker KL, Ordovas JM: Apolipoprotein A5 polymorphisms interact with total dietary fat intake in association with markers of metabolic syndrome in Puerto Ri- can older adults. J Nutr 2009; 139: 23012308. 10 Jirtle RL, Skinner MK: Environmental epig- enomics and disease susceptibility. Nat Rev Genet 2007; 8: 253262. 11 Zeisel SH: Epigenetic mechanisms for nutri- tion determinants of later health outcomes. Am J Clin Nutr 2009; 89: 1488S1493S. 12 Shi Y, Zhao X, Hsieh J, Wichterle H, Impey S, Banerjee S, Neveu P, Kosik KS: MicroRNA regulation of neural stem cells and neurogen- esis. J Neurosci 2010; 30: 1493114936. 13 Waterland RA, Lin JR, Smith CA, Jirtle RL: Post-weaning diet affects genomic imprinting at the insulin-like growth factor 2 (Igf2) lo- cus. Hum Mol Genet 2006; 15: 705716. 14 Waterland RA, Jirtle RL: Transposable ele- ments: targets for early nutritional effects on epigenetic gene regulation. Mol Cell Biol 2003; 23: 52935300. 15 Wolff GL, Kodell RL, Moore SR, Cooney CA: Maternal epigenetics and methyl supplements affect agouti gene expression in Avy/a mice. FASEB J 1998; 12: 949957. 16 Waterland RA, Travisano M, Tahiliani KG, Rached MT, Mirza S: Methyl donor supple- mentation prevents transgenerational ampli- fication of obesity. Int J Obes (Lond) 2008; 32: 13731379. 17 Waterland RA, Dolinoy DC, Lin JR, Smith CA, Shi X, Tahiliani KG: Maternal methyl supple- ments increase offspring DNA methylation at Axin fused. Genesis 2006; 44: 401 406. Referencias Nutrigentica de Colina Reimpreso con permiso de: Ann Nutr Metab 2012;60(suppl 1):1925 25 18 Craciunescu CN, Albright CD, Mar MH, Song J, Zeisel SH: Choline availability during em- bryonic development alters progenitor cell mitosis in developing mouse hippocampus. J Nutr 2003; 133: 36143618. 19 Mehedint MG, Craciunescu CN, Zeisel SH: Maternal dietary choline deficiency alters angiogenesis in fetal mouse hippocampus. Proc Natl Acad Sci USA 2010; 107: 12834 12839. 20 Zeisel SH: Choline: critical role during fetal development and dietary requirements in adults. Annu Rev Nutr 2006; 26: 229250. 21 Vance DE, Walkey CJ, Cui Z: Phosphatidyleth- anolamine N-methyltransferase from liver. Biochim Biophys Acta 1997; 1348: 142 150. 22 Fischer LM, daCosta K, Kwock L, Stewart P, Lu TS, Stabler S, Allen R, Zeisel S: Sex and menopausal status influence human dietary requirements for the nutrient choline. Am J Clin Nutr 2007; 85: 12751285. 23 da Costa KA, Gaffney CE, Fischer LM, Zeisel SH: Choline deficiency in mice and humans is associated with increased plasma homocyste- ine concentration after a methionine load. Am J Clin Nutr 2005; 81: 440444. 24 Zeisel SH, da Costa KA, Franklin PD, Alexan- der EA, Lamont JT, Sheard NF, Beiser A: Cho- line, an essential nutrient for humans. FASEB J 1991; 5: 20932098. 25 Resseguie M, Song J, Niculescu MD, da Costa KA, Randall TA, Zeisel SH: Phosphatidyletha- nolamine N-methyltransferase (PEMT) gene expression is induced by estrogen in human and mouse primary hepatocytes. FASEB J 2007; 21: 26222632. 26 Resseguie ME, da Costa KA, Galanko JA, Pa- tel M, Davis IJ, Zeisel SH: Aberrant estrogen regulation of PEMT results in choline defi- ciency- associated liver dysfunction. J Biol Chem 2011; 286: 16491658. 27 Sha W, da Costa KA, Fischer LM, Milburn MV, Lawton KA, Berger A, Jia W, Zeisel SH: Metabolomic profiling can predict which hu- mans will develop liver dysfunction when deprived of dietary choline. FASEB J 2010; 24: 29622975. 28 Sweiry JH, Yudilevich DL: Characterization of choline transport at maternal and fetal inter- faces of the perfused guinea-pig placenta. J Physiol 1985; 366: 251266. 29 Fischer LM, da Costa KA, Galanko J, Sha W, Stephenson B, Vick J, Zeisel SH: Choline in- take and genetic polymorphisms influence choline metabolite concentrations in human breast milk and plasma. Am J Clin Nutr 2010; 92: 336346. 30 Zeisel SH, Epstein MF, Wurtman RJ: Elevated choline concentration in neonatal plasma. Life Sci 1980; 26: 18271831. 31 Ilcol YO, Ozbek R, Hamurtekin E, Ulus IH: Choline status in newborns, infants, children, breast-feeding women, breast-fed infants and human breast milk. J Nutr Biochem 2005; 16: 489499. 32 Zeisel SH, Mar MH, Zhou Z, da Costa KA:Pregnancy and lactation are associated withdiminished concentrations of choline and itsmetabolites in rat liver. J Nutr 1995; 125:30493054. 33 Meck WH, Williams CL, Cermak JM, Bluszta- jnJK: Developmental periods of cholinesensi- tivity provide an ontogenetic mechanismfor regulating memory capacity andage-related dementia. Front Integr Neurosci2007; 1: 7. 34 Meck WH, Williams CL: Metabolic imprint- ingof choline by its availability during gestation:implications for memory and atten- tionalprocessing across the lifespan. Neuros- ciBiobehav Rev 2003; 27: 385399. 35 Meck WH, Smith RA, Williams CL: Pre- and- postnatal choline supplementation produces- long-term facilitation of spatial memory.Dev Psychobiol 1988; 21: 339353. 36 Meck WH, Williams CL: Choline supplemen- tationduring prenatal development re- ducesproactive interference in spatial memo- ry.Brain Res 1999; 118: 5159. 37 Albright CD, Tsai AY, Friedrich CB, MarMH, Zeisel SH: Choline availability altersembry- onic development of the hippocampusand septum in the rat. Brain Res 1999; 113:1320. 38 Albright CD, Friedrich CB, Brown EC, MarMH, Zeisel SH: Maternal dietary cholin- eavailability alters mitosis, apoptosis and the- localization of TOAD-64 protein in the devel- opingfetal rat septum. Brain Res 1999;115: 123129. 39 Albright CD, Mar MH, Craciunescu CN,Song J, Zeisel SH: Maternal dietary cholineavail- ability alters the balance of netrin-1 andDCC neuronal migration proteins in fetalmouse brain hippocampus. Brain Res DevBrain Res 2005; 159: 149154. 40 Niculescu MD, Craciunescu CN, Zeisel SH: Dietary choline deficiency alters global and gene-specific DNA methylation in the devel- oping hippocampus of mouse fetal brains. FASEB J 2006; 20: 4349. 41 Niculescu MD, Yamamuro Y, Zeisel SH: Cho- line availability modulates human neuroblas- toma cell proliferation and alters the methyla- tion of the promoter region of the cyclin-dependent kinase inhibitor 3 gene. J Neurochem 2004; 89: 12521259. 42 Thomas JD, Garrison M, ONeill TM: Perina- tal choline supplementation attenuates behav- ioral alterations associated with neonatal al- cohol exposure in rats. Neurotoxicol Teratol 2004; 26: 3545. 43 Fisher MC, Zeisel SH, Mar MH, Sadler TW: Perturbations in choline metabolism cause neural tube defects in mouse embryos in vi- tro. FASEB J 2002; 16: 619621. 44 Fisher MC, Zeisel SH, Mar MH, Sadler TW: Inhibitors of choline uptake and metabolism cause developmental abnormalities in neuru- lating mouse embryos. Teratology 2001; 64: 114122. 45 Shaw GM, Carmichael SL, Yang W, Selvin S, Schaffer DM: Periconceptional dietary intake of choline and betaine and neural tube defects in offspring. Am J Epidemiol 2004; 160: 102109. 46 Shaw GM, Carmichael SL, Laurent C, Ras- mussen SA: Maternal nutrient intakes and risk of orofacial clefts. Epidemiology 2006; 17: 285291. 47 Signore C, Ueland PM, Troendle J, Mills JL: Choline concentrations in human maternal and cord blood and intelligence at 5 y of age. Am J Clin Nutr 2008; 87: 896902.