Se ha observado que las reacciones antgeno-anticuerpo se ven potenciadas al reducir la
fuerza inica del medio de reaccin. La fuerza inica es uno de los factores ms impor- tantes que determina la tasa y la cantidad de captacin de anticuerpos por parte de los eritrocitos. El uso de medios de reaccin de baja fuerza inica permite disminuir el tiem- po de incubacin y potenciar las reacciones de los anticuerpos sin incrementar las reacciones inespecficas. PRINCIPIO REDIAR LISS Preservante es utilizado para reducir la fuerza inica del medio de reaccin en los procedimientos de deteccin e identificacin de anticuerpos y en las pruebas de compatibilidad. La presencia de este reactivo refuerza la interaccin antgeno-anticuerpo durante la incubacin. A diferencia de otras soluciones de baja fuerza inica para resus- pensin celular, este reactivo presenta la ventaja de evitar el deterioro de los antgenos durante 28 das. Los glbulos rojos resuspendidos en esta solucin pueden ser utilizados para tcnicas en lmina, tubo, microplaca o gel. REACTIVO Se provee listo para su uso. REDIAR LISS Preservante est diseado para ser utilizado como medio de resuspensin celular. Contiene Glicina, NaCl, Glucosa, Inosina, Adenina, Na 2 HPO 4 , KH 2 PO 4 , EDTA, NaOH. Adems contiene Sulfametoxazol (0,003 g/l) y Trimetroprima (0,0006g/l) como preservantes. OBTENCIN Y PREPARACION DE LAS MUESTRAS Las muestras deben ser obtenidas por una tcnica asptica. Para la tcnica en micropla- ca se recomienda la toma de muestras con anticoagulante. En los procedimientos de deteccin e identificacin de anticuerpos y en las pruebas de compatibilidad se debe utilizar suero fresco. Si la prueba se demorara, la muestra se conservar a 2-8C por no ms de 48 hs. Los sueros conservados por ms de 48 horas o los plasmas provenientes de muestras con anticoagulantes pueden ser usados; sin embargo, esto podra provocar fallas en detectar los anticuerpos dependientes del complemento. Los eritrocitos a emplear en la prueba podrn ser glbulos rojos reactivos comerciales, muestras obtenidas con anticoagulante o clulas de muestras coaguladas. PROCEDIMIENTO Materiales Provistos: REDIAR LISS Preservante Materiales Adicionales Requeridos no provistos: Tubos de ensayo (12x75 mm o 10x75 mm), solucin salina de fuerza inica normal, micropipetas, incubador o bao termosta- tizado a 37C, ayuda ptica, centrfuga, cronmetro, reactivo antiglobulina humana y clu- las sensibilizadas con IgG. Preparacin de la suspensin globular para tcnica en microplaca: 1) Centrifugar la muestra de sangre anticoagulada durante 5 minutos a 3500 r.p.m. 2) Tomar 10 l de glbulos rojos del paquete celular. 3) Resuspender los glbulos rojos en 0,5 ml de REDIAR LISS Preservante. 4) Homogeneizar, obteniendo as una suspensin al 2% en solucin de baja fuerza inica. NOTAS 1) Si se desea preservar los glbulos rojos durante 28 das, lavar previamente 3 veces con una solucin que no contenga azida de sodio. La azida de sodio, an en volmenes extremadamente pequeos, acortar dramticamente la vida de los glbulos rojos. 2) Si se utiliza una tcnica en gel, debern seguirse las instrucciones del elaborador para preparar las suspensiones. 3) Los glbulos rojos suspendidos en esta solucin conservadora debern ser almace- nados a temperaturas entre 2 y 8C cuando no se estn utilizando. 4) Para una correcta conservacin de la muestra se recomienda el uso de frascos o tubos estriles. 5) Los eritrocitos permanecen estables durante un mnimo de cuatro semanas luego de ser suspendidos en esta solucin, pero pueden ser conservados durante perodos mayores si las condiciones de almacenamiento son ptimas. PRECAUCIONES PARA EL USO Y LA ELIMINACIN No usar el producto en caso de observarse turbidez. Para uso diagnstico in-vitro. No congelar. No emplear ms all de la fecha de caducidad. ALMACENAMIENTO Conservar entre 2-8C. BIBLIOGRAFA 1. Low B. and Messeter L. Antiglobulin test in low ionic strength salt solution for rapid anti- body screening and crossmatching. Vox Sang 1974; 26:53. 2. Moore HC. And Mollison PL. Use of a low ionic strength medium in manual tests for antibody detection. Transfusion 1976; 16:291. ELABORADO POR: INVERCLYDE BIOLOGICALS 4 Teal Court, Strathclyde Business Park, Bellshill Lanarkshire, ML4 3NN, Scotland IMPORTADO y FRACCIONADO POR: FELSAN S.R.L. Palpa 3811, (C1427EBG) C.A.B.A., Argentina. Director Tcnico: Roque Luis Espinosa. Consultas Tcnicas: laboratorio@felsan.com.ar PRODUCTO DE DIAGNSTICO DE USO IN VITRO AUTORIZADO POR LA ADMINISTRA- CIN NACIONAL DE MEDICAMENTOS Y TECNOLOGA MDICA. Certificado N 5915/06 MANUAL DE INSTRUCCIONES REDIAR
LISS Preservante Solucin potenciadora de baja fuerza inica