EXPRESIN GNICA

Universidad Nacional de San Cristbal de Huamanga

Facultad de Ciencias Biolgicas
rea de Biotecnologa
Sonia H. Palomino Felices
BI- 542 BIOTECNOLOGA AGROINDUSTRIAL
Molculas complejas que se encuentran en el ncleo y
citoplasma celular.

Polmero de nucletidos




cidos Nucleicos
Funciones:


Transmitir las caractersticas hereditarias de una generacin a
la siguiente.

Dirigir la sntesis de protenas especficas (estructurales y
funcionales)
1.- Pentosa

Nucletido = Pentosa + B N + Fosfato
COMPONENTES DE LOS ACIDOS
NUCLEICOS
2.- BN = Bases Nitrogenadas
Purinas: A y G
Pirimidinas: T, C y U



3.- Fosfato:

(Grupo Fosfato)






H
3
PO
4

Los grupos fosfato pueden unirse a una
Base Nitrogenada:
Si es uno ser monofosfato
Si son dos ser difosfato
Si son tres ser un trifosfato
Nuclesido = Pentosa + Base nitrogenada


Nucletido = Pentosa + Base nitrogenada +
cido fosfrico


Polinucletido = Nucletido + Nucletido +
Nucletido +


Los nucletidos se unen entre si para formar largas cadenas
de polinucletidos, esta unin entre monmeros nucletidos se
realiza mediante enlaces fosfodister entre los carbonos de
las posiciones 3 de un nucletido con la 5 del siguiente
Contiene la informacin gentica de la clula.
Esta organizado en cromosomas lineales en
clulas eucariotas y circulares en procariotas
Para cada especie el nmero de cromosomas es
fijo. (El hombre 23 pares, la mosca de la fruta 4
pares)
ADN
cido Desoxiribonucleco
Localizacin del ADN
El orden en el que aparecen las cuatro bases a lo largo de
la cadena en el ADN, es el orden de las instrucciones del
programa gentico de los organismos
Esquema tridimencional de la Doble Hlice
Esquema de la doble hlice
.
El apareamiento es especfico:
A = T
C G
Ejemplo:

G
T =
T =
C
A =
.
El apareamiento es especfico:
A = T
C G
Ejemplo:

G C
T =
T =
C
A =
.
El apareamiento es especfico:
A = T
C G
Ejemplo:

G C
T = A
T =
C
A =
.
El apareamiento es especfico:
A = T
C G
Ejemplo:

G C
T = A
T = A
C
A =
.
El apareamiento es especfico:
A = T
C G
Ejemplo:

G C
T = A
T = A
C G
A =
.
El apareamiento es especfico:
A = T
C G
Ejemplo:

G C
T = A
T = A
C G
A = T
Muchos cientficos se interesaron en descifrar la estructura del
ADN, entre ellos, Francis Crick, James Watson, Rosalind Franklin
y Maurice Wilkins
EL MODELO DE WATSON Y
CRICK
Rosalind Franklin; Describi que la estructura del ADN tena
dos cadena. Y que los grupos fosfato se encontraban en el
exterior
Watson y Crick, eran investigadores que integraban todos los datos
disponibles en su intento por desarrollar un modelo de la estructura del ADN.
Los datos que se conocan:
Que el ADN era una molcula larga y delgada.
Los datos de las bases proporcionados por Chargaff (A=T y C=G) Las
Purinas y las pirimidinas eran constante para cada especie.
Datos de la difraccin de los rayos X de Franklin y Wilkins.
Los trabajos de Linus Pauling sobre proteinas (forma de hlice
mantenida por puentes de hidrgeno), quien sugiri para el ADN una
estructura semejante.






WATSON Y CRICK (1953)
Estructura:
El conocimiento de la estructura de los cidos nucleicos
permiti la elucidacin del CODIGO GENETICO
La determinacin del mecanismo y control de la sntesis
de las protenas y el mecanismo de transmisin de la
informacin gentica de la clula madre a las clulas
hijas.
Las BN son las que contienen la informacin gentica y
los azcares y los fosfatos tienen la funcin estructural
formando el esqueleto del polinucletido.
En el caso del ADN las bases son dos purinas y dos
pirimidinas. A,G,T y C.
En el caso del ARN son 4 BN: A y G (purinas) y C y U
(pirimidinas).
purina
pirimidina
pirimidina
purina
FORMACIN DE LA DOBLE HLICE
ADN PROCARITICO
El ADN Eucaritico

Se presenta en dos formas:
CROMATINA:
Que es la forma no empaquetada ("uncoiled") y tiene
un 50% de protenas.
CROMOSOMAS :
Que son ADN y protenas empaquetados (coiled") y se
forman durante los primeros estados de la divisin celular.

El ADN de cada cromosoma es una larga cadena de
ADN bicatenario.
En las clulas humanas, el ADN tiene 2 metros de
largo y se encuentra empaquetado en 46 cromosomas
y en total contiene unos 30,000 genes.
Las protenas asociadas al ADN se conocen
colectivamente con el nombre de histonas.
ARN
Acido Ribonucleco
Acta como molcula intermediaria
A su vez existen:

ARNm: Lleva la informacin gentica
al ribosoma
ARNt: Adapta el lenguaje de los
nucletidos al de los aminocidos
ARNr: Componentes estructurales y
catalticos del ribosoma
La ribosa es el azcar que interviene en la composicin
de los nucletidos (tambin llamados ribonucletidos)
que forman el cido ribonucleico (ARN);
Las bases nitrogenadas son la adenina, la guanina, la
citosina y el uracilo.
El ARN mensajero (ARNm) es una molcula en forma de cinta, producto de
la transcripcin del ADN y portadora del cdigo necesario para sintetizar
las protenas mediante una reaccin llamada traduccin. Cada hebra de
ARNm tiene dos extremos, llamados 5' y 3', que determinan el sentido de
lectura.
Los ARN de transferencia (ARNt) son pequeas estructuras en forma de
hoja de trbol que llevan cada una un aminocido para integrarlo en una
protena en fase de sntesis. Para ello se fija a un codn del ARNm
(sucesin de tres elementos especficos del aminocido de que se trate)
por medio de un anticodn (que es el 'negativo' del codn).
La fijacin se produce por medio de los ribosomas, que 'leen' el ARN y se
encargan de dirigir la sntesis de protenas.
Los ARN ribosmicos (ARNr) son los componentes principales de
los ribosomas.
En la estructura de un ribosoma intervienen cuatro molculas de
ADN de distinto tamao.
La subunidad mayor (o subunidad 60 s) lleva los ARN 5 s, 28 s y 5,8
s, mientras que la pequea (o subunidad 40 s) slo lleva un ARN 18
s. (Las denominaciones, por ejemplo, 5 s y 18 s, proceden de los
experimentos de centrifugacin en tubo de ensayo de las
subunidades ribosmicas y las molculas de ARN; durante la
centrifugacin, los elementos ms pesados se acumulan en el fondo
del tubo y forman el sedimento; el nmero corresponde al
coeficiente de sedimentacin de cada componente.)
Dogma central de la biologa molecular
TRANSCRIPCION
Es la sntesis de una molcula de ARNm
complementaria a una de las dos hebras del ADN
molde, catalizada por la ARN polimerasa que tiene
alta afinidad por un promotor.
Transcripcin
Promotores:

Son secuencias precisas ubicadas en el ADN, donde la ARN
polimerasa se une para iniciar la transcripcin.

Se encuentran frecuentemente muy cerca y hacia arriba
(upstream) del punto en que se inicia la transcripcin,
en el extremo 5.

Son ms de 100 los promotores identificados y secuenciados
en E. coli.
Un promotor procariota estndar tiene tres partes:

a) El punto de inicio (starpoint) de la transcripcin de la
secuencia de ADN, que se representa como +1 y casi siempre es una
guanina o adenina.
b) Una secuencia consenso cercana al punto de inicio.
c) Otra secuencia consenso ms alejada del punto de inicio.
El enlazamiento de la ARN polimerasa provoca una fusin de la doble
hlice del ADN, lo que a su vez induce la ruptura de los enlaces de
hidrgeno entre los pares de bases formndose la llamada burbuja de
transcripcin que tiene una longitud de 17 pares de bases.

Los sustratos para la ARN polimerasa son los 5-trifosfatos de
ribonucletido ATP, GTP, CTP y UTP. Se requiere la presencia de un in
metlico, ya sea Mg
2+
o Mn
2+
, como cofactor. La reaccin est
impulsada por la hidrlisis del pirofosfato que se libera.


La cadena de ARNm crece en direccin 53.

Cuando la longitud del tramo hbrido ADN-ARN se
aproxima a 12 pares de bases, el extremo 5 de la
cadena de ARN creciente se disocia de su hebra de
ADN complementario y vuelve a formarse el ADN doble,
liberndose el factor sigma.

La ARN polimerasa contina a lo largo del molde de
ADN hasta que encuentra una seal de terminacin, lo
que hace que el ARN se disocie del ADN molde.

Topologa tpica de una molcula
de ARNm eucariota

El ARNm consta de las siguientes partes:

1) Regin no traducida 5 (extremo protegido con una 7-metil
guanosina).
2) Codn de iniciacin (AUG).
3) Regin codificadora (codones para los Aas).
4) Codn de terminacin (UAA, UGA o UAG).
5) Regin no traducida 3 (con una cola de 20-250 nucletidos
de adenina, poliadenilacin).
Maduracin: El ARNm precursor contiene tanto exones como intrones. Se trata,
por tanto, de un ARNm no apto para que la informacin que contiene sea
traducida y se sintetice la correspondiente molcula proteica. En el proceso de
maduracin un sistema enzimtico reconoce, corta y retira los intrones y las
ARN ligasas unen los exones, formndose un ARNm maduro
TRADUCCION

Es el proceso que tiene lugar en los ribosomas, mediante el
cual los codones o tripletes del ARNm, que son palabras
en un lenguaje (secuencia de nucletidos) se convierten o
traducen por medio del ARNt, que tiene funcin de un
intrprete, a otro lenguaje (secuencia de aminocidos),
conservando el mismo significado. El cdigo gentico acta
como un diccionario y los codones de inicio y terminacin
son los signos de puntuacin.
NUCLEOTIDOS AMINOACIDOS
(ribosomas)
(ARNt)
Dogma central de la biologa molecular
El Cdigo Gentico:

Es una tabla que establece todas las combinaciones de
tres bases nitrogenadas del ARNm (tripetes o codones)
que codifican para los aminocidos comunes presentes
en la estructura primaria de
una protena, despus de la traduccin.

Comprende 64 codones. De ellos, 61 tripletes
corresponden a los aminocidos comunes, mientras
que 03 tripletes codifican para la terminacin de
la cadena.

Puesto que hay 20 aminocidos y 61 tripletes que los
codifican, es evidente que el cdigo es muy
degenerado.

Solamente el triptfano y la metionina estn
codificados por un solo triplete.

Los otros 18 aminocidos vienen codificados por dos o
ms tripletes. La leucina, arginina y serina son
especificados por 06 codones cada uno.

El nmero de codones para un aminocido
determinado est correlacionado con su frecuencia de
aparicin en las protenas.
ARN de Transferencia

* Cada ARNt es especfico para un slo aminocido, aunque
puede descodificar ms de un codn.
* Un aminocido se une a su ARNt correspondiente por
medio de la enzima aminoacil-ARNt sintetasa.
* Esta enzima cataliza la reaccin de aminoacilacin, que es
importante porque:
(a) Forma el enlace aminoacil-ster entre el aminocido
y el ARNt; y
(b) Al hidrolizarse este enlace, proporciona la energa que
se requiere para formar el enlace peptdico.

Etapas de la Traduccin
(Ciclo del Ribosoma)

* Las etapas fundamentales son tres:
1) Iniciacin
2) Alargamiento; y
3) Terminacin.
* Todas las etapas requieren energa metablica que
proviene de la hidrlisis del ATP o GTP.
* Todos los componentes pueden reciclarse.

1) Iniciacin

Hay mecanismos para diferenciar un codn AUG iniciador
de otro AUG interno: en bacterias, el ARNt iniciador
transporta una metionina formilada; en eucariotas slo
transporta una metionina.
Otro detalle es que en bacterias el codn AUG iniciador
est precedido por la Secuencia de Shine-Dalgarmo
extremo 5 del ARNm, rico en purinas; y complementario al
extremo 3 del ARNr 16S); mientras que en eucariotas, el
codn AUG iniciador est casi siempre dentro de una
secuencia contexto (5CCA/GCCAUGG3).
Los factores de iniciacin (IF, de 03 tipos) de procariotas
son diferentes a los de eucariotas (IF, de 10 tipos).
2) Alargamiento

- El ribosoma se mueve a lo largo del ARNm en direccin 53,
descodificando cada triplete y ensamblando la cadena del
polipptido en la secuencia correcta.
- Es un proceso cclico: se descodifica un codn o triplete y se
adiciona un aminocido al polipptido creciente.
- Se requieren factores de alargamiento (EF), protenas especficas
bastante similares entre procariotas y eucariotas.

3) Terminacin

Cuando el ribosoma encuentra un codn de terminacin en
el extremo 3 del ARNm, se suspende el alargamiento.
La cadena completa del polipptido se desprende junto con el
ltimo ARNt y las subunidades ribosmicas.
Participan factores de terminacin (RF), que son diferentes
en procariotas y eucariotas.

Esquema del proceso de traduccin en procariotas
Control Gentico de formacin de proteinas
en Procariotas

El sistema de control gentico mejor conocido es el
modelo del opern de la expresin gentica
propuesto originalmente por Jacob y Monod en 1961.

Un opern viene a ser un grupo de genes contigos
en el genoma bacteriano, que se transcriben regulados
por un solo promotor dando origen a un
ARNm policistrnico.


Regulador Promotor Operador Gen 1 Gen 2 Gen 3

a) El gen regulador, que codifica al represor (una protena
interna) y tiene su propio promotor.
b) Una secuencia de nucletidos denominada promotor
la cual es el punto de unin de la ARN polimerasa,
con los siguientes elementos:
Los elementos de un opern son:
3 ADN 5
Secuencia 35 Secuencia 10 +1
______ TTGACA _______TATAAT ______ Inicio

Una secuencia de nucletidos denominada operador, la
cual es el punto de unin de la protena represora.

Los genes estructurales, que codifican para enzimas
especficas, las cuales normalmente se transcriben una a
continuacin de la otra dentro de la misma unidad de
transcripcin.

Aparentemente hay una sola ARN polimerasa.

La Secuencia de Shine-Dalgarmo, ubicada en el ARNm es
propia de procariotas y ayuda en la unin a los ribosomas.

La transcripcin es un proceso que est acoplado a la
traduccin.
Control Gentico de formacin de proteinas en
Eucariotas

No ha sido hallado un equivalente directo al modelo del
opern; tampoco parece existir una regin equivalente al
operador.

La unin de la ARN polimerasa est influida por la presencia
de elementos intensificadores o activadores (enhancers),
que aumentan la tasa de transcripcin.

Cada gen estructural es transcrito de manera
independiente, lo cual da lugar normalmente a un ARNm
monocistrnico.


Los potenciadores aumentan la tasa
transcripcional en eucariotas
Hay tres tipos de ARN polimerasa, siendo la de Tipo II la
equivalente a la ARN polimerasa de procariotas.
Promotores de mayor tamao:

Secuencia -80 Secuencia -25 +1
__ CAAT __ GGGCCGGG __GGGCCGGG __TATA __ Inicio
El gen estructural comprendido en la unidad
Transcripcional es discontinuo; por ello debe ser
entrecortado (splicing) a partir del trnscrito primario.

Expresin gnica en eucariotas