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Universidade Federal de Santa Catarina

Departamento de Engenharia Sanitria e Ambiental


Qualidade da gua II
Professores: Rejane Helena Ribeiro da Costa e Rodrigo Mohedano









Relatrio de Microscopia














Joo Fernando Ferri da Silva
Florianpolis, 10 de outubro de 2014

















































1. INTRODUO


Microscopia ptica um procedimento muito utilizado que foi e ainda
responsvel por diversas das mais importantes descobertas sobre a vida, pois,
possibilitou o ser humano ter um aumento de 1000 vezes na observao de
amostras, indo assim muito alm da restrio da viso humana que pode enxergar
com um alcance perto de 0,1mm.Os microscpios pticos so os instrumentos
utilizado para a ampliao, eles possuem uma srie de lentes multicoloridas e
ultravioleta, so constitudo por uma parte mecnica, que suporta e permite controlar
e por uma parte ptica que faz a ampliao.
Existem inmeras aplicaes para o microscpio ptico, e na rea
da engenharia sanitria e ambiental no diferente, tambm importncia e
amplamente utilizado. Algumas dessas utilidades merecem destacadas como:
Monitoramento e diagnostico ambiental; por meio do acompanhamento de
organismos indicadores e da diversidade microbiana do meio, monitoramento de
sistemas de tratamento biolgico; acompanhando microrganismos indicadores e
demais organismos que exercem funes especficas no tratamento, e tambm para
sade pblica; servindo como ferramenta na identificao de organismos
patognicos como vrus e bactrias.














2. Equipamento


Durante a aula de microscopia foram utilizados o microscpio ptico
comum, o microscpio ptico invertido e a lupa estereoscpica. Alm desses
existem o microscpio ptico de florescncia, o microscpio eletrnico de
transmisso, microscpio eletrnico de varredura e o microscpio ptico digital.

2.1 Microscpio ptico comum

Esse modelo de microscpio possui um jogo de lentes que possibilita a
ampliao para at 1000 vezes. Para anlises nesse microscpio, a amostra deve
ser preparada entre uma lmina e uma lamnula, achatando a amostra, o que as
vezes pode no ser til quando se deseja estudar a morfologia dos organismos
presentes.
Ele composto por uma parte mecnica: p ou base, coluna ou brao,
mesa, charriot, tubo ou canho, revlver ou ptico. E por uma parte ptica composta
por: condensador, diafragma, lentes objetiva, lentes oculares.

2.2 Microscpio ptico invertido

Esse equipamento semelhante ao microscpio ptico comum, porm,
suas lentes objetivas localizam-se abaixo de onde sero colocadas as amostras,
sendo assim no necessria a utilizao de lminas e lamnulas, a amostra
acondicionada em uma espcie de frasco que permite que ela no seja esmagada,
preservando a morfologia natural do organismo a ser observado.




2.3 Lupa estereoscpica

um equipamento que no possui uma capacidade de ampliao to alta
quanto aos outros equipamentos anteriormente citados, porm utilizado quando se
deseja obter resultados mais rpidos.

2.4 Microscpio ptico de fluorescncia

A amostra iluminada por raios de determinado comprimento de onda, a
imagem observada o resultado da radiao eletromagntica.
Permite observar microrganismos capazes de fixar substncias
fluorescentes (fluoro cromos). A luz UV, ao incidir nessas partculas, provoca a
emisso de luz visvel e observa os microrganismos a brilhar em fundo escuro.


2.5 Microscpio Eletrnico de Transmisso (MET)

No microscpio eletrnico a imagem transportada por um feixe de
eltrons. O MET dirige o feixe de eltrons para o objeto, cuja imagem se deseja
aumentar e uma parte dos eltrons atravessa o objeto, formando uma imagem
aumentada. Permite ampliaes do objeto at um milho de vezes.


2.6 Microscpio Eletrnico de Varredura (MEV)

Cria uma imagem ampliada da superfcie do objeto onde no
necessrio cortar o objeto para se observar, no necessita de grandes preparativos.
Podendo ampliar os objetos 100 mil vezes ou mais, sendo muito til dado que
permite obter imagens tridimensionais da superfcie do objeto.



2.7 Microscpio ptico Digital

um equipamento que permite que a imagem vista em microscpio seja
digitalizada e passe para o computador. interessante quando se deseja obter
imagens e fotos da amostra, porm sua preciso no muito alta.



3. Procedimento de anlise


No microscpio ptico, uma gota da amostra foi colocada entre a
lmina e a lamnula, ento foram acondicionadas na mesa imobilizadas por duas
pinas, para evitar que a lmina se mova durante a anlise. A iluminao ajustada
para obter-se o melhor contraste possvel e ento feita a focalizao, partindo da
lente objetiva de menor ampliao, e seguindo para as lentes de maior ampliao
girando o revlver com as lentes. O macrmetro move a mesa, para uma previa
focalizao. E ento utilizado o micrometro com objetivo de focalizar a imagem de
maneira mais precisa, no entanto o micrmetro possui amplitude de focagem
bastante reduzida. Para focalizar com a objetiva de maior ampliao, deve-se utilizar
uma gota de leo de imerso sobre a lmina com amostra.
A nica diferena no microscpio ptico invertido que para sua
anlise a amostra fica contida em uma garrafa especfica, que facilita na anlise
morfolgica do microrganismo.

4.Aula Prtica


A segunda parte da aula do dia 26 de setembro foi no Laboratrio
Integrado de Meio Ambiente (LIMA) nas dependncias da Universidade Federal de
Santa Catarina (UFSC) com objetivo de observarmos 3 tipos de amostras em
microscpio e identificar os microrganismo ali presentes.
Foram observadas 4 amostras diferentes, a primeira era do Tanque de
Aerao de Lodo Ativado, a segunda do Reator de Batida Sequencial Granular
(RBSG), a terceira amostra de macrfitas que fazem parte das lagoas do LEMNAS e
a ultima do lago que fica em frente ao Restaurante Universitrio (RU).
Na primeira amostra do tanque de aerao foram feitas 3 observaes em
um microscpio ptico, na primeira com um aumento de 100 vezes foi encontrado o
protozorio ciliado Epistylis sp. Na segunda observao teve um aumento de 400
vezes e foi encontrado um pseudocelomado chamado Rotatoria sp. E a ultima
observao com um aumento novamente de 1000 vezes foram encontrados
diversos organismos como bactrias filamentosas, protozorios ciliados (Litonotus
sp.), tecamebas (Arcella sp.) e vermes platelmintos.
Na segunda amostra do RBSG foram feitas 3 observaes no
microscpio invertido, na primeira observao com um aumento de 40 vezes no foi
encontrado nada, a segunda observao teve um aumento de 100 vezes do material
e foi encontrado um protozorio Vorticella convallaria. Na ultima observao com um
aumento de 100 vezes foi encontrado uma bactria chamada Zoogloea.
Na terceira amostra do LEMNAS foi observada com a lupa estereoscpico
e foi com um aumento de 40 vezes apenas para observar o biofilme das razes
formadas na amostra. Em seguida no microscpio ptico foi feito um aumento de
100 vezes e foi observado o protozorio Vorticella convallari.
Na ultima amostra analisada do lago do RU teve que primeiramente ser
filtrada em um filtro de 10 micrometros para concentrar um pouco mais a amostra (o
que ficou retido no filtro foi fitoplncton). Foi ento feita apenas uma observao em
microscpio comum com um aumento de 400 vezes e foi observado diversos
organismos como algas diatomceas, cianobactrias (Microcystis sp.), algas do tipo
Tetraedron, Chlorella, Scenedesmus, Euglena (alga flagelada).
5. Resultados


No tanque de aerao o fato de o microrganismo Epistilys estar presente
pode indicar estabilizao insuficiente do lodo, j a presenas das bactrias
filamentosas pode indicar falta de oxignio no sistema, diminuindo a eficincia do
tratamento.
No RBGS foi encontrado o Zooglea que pode ser associado com meio
cido. Pode-se observar tambm Vorticella convallaria que pode indicar carga
elevada de material orgnico, baixa idade do lodo e alteraes no nvel de
concentrao de oxignio.
No LEMNAS s foi encontrado Vorticella convallaria que pode ser
relacionada com carga elevada de material orgnico e alterao no nvel de
concentrao de oxignio.
No lago do RU foi encontrado grande quantidades de algas, que podem
representar excesso de nutrientes no lago, caractersticas de um lago eutrofizado.