Você está na página 1de 27

1

Ciclo de Krebs
2
Ciclo de
Ciclo de
Krebs
Krebs
Ciclo do Ciclo do cido C cido C trico trico
Ciclo do Ciclo do Citrato Citrato
Ciclo dos Ciclo dos cidos cidos Tricarbox Tricarbox licos licos
Descoberto por Hans
Krebs, em 1937
Ocorre na mitocndria (na matriz mitocondrial)
anfiblico participa tanto do catabolismo
quanto do anabolismo
a via metablica central: interconecta a
degradao e a sntese de protenas, de carboidratos
e de lipdeos
Combustveis metablicos como a glicose derivada
dos carboidratos, aminocidos derivados das
protenas e os cidos graxos derivados dos lipdeos
entram no ciclo para serem oxidados a dixido de
carbono e gua suas energias so transferidas a
carreadores de eltrons e finalmente ao aceptor
terminal que o oxignio
3
Caracter Caracter sticas sticas
um ciclo metab um ciclo metab lico, pois o lico, pois o oxaloacetato oxaloacetato, , que que
inicia a via metab inicia a via metab lica, sofre transforma lica, sofre transforma es e es e
regenerado no final do ciclo. regenerado no final do ciclo.
O ciclo de O ciclo de Krebs Krebs ocorre em ocorre em aerobiose. aerobiose.
O sistema enzim O sistema enzim tico do ciclo est tico do ciclo est localizado localizado
nas mitocndrias. nas mitocndrias.
fundo comum no metabolismo dos glic fundo comum no metabolismo dos glic dios, dios,
lip lip dios e dios e prot prot dios dios. .
Caracter Caracter sticas sticas
O Ciclo de O Ciclo de Krebs Krebs tem a caracter tem a caracter stica de stica de
uma uma via via anfib anfib lica lica, isto , isto , degrada a , degrada a
acetila acetila- -CoA CoA em di em di xido de carbono e xido de carbono e gua gua
(catabolismo) mas alguns de seus (catabolismo) mas alguns de seus
intermedi intermedi rios so utilizados para a s rios so utilizados para a s ntese ntese
de outros compostos (anabolismo). de outros compostos (anabolismo).
4
Fun Fun es do Ciclo de es do Ciclo de Krebs Krebs
Oxidar a Oxidar a acetila acetila- -CoA CoA em CO em CO
2 2
e H e H
2 2
O. O.
Como conseq Como conseq ncia desta oxida ncia desta oxida o, o, o o
maior fornecedor de el maior fornecedor de el trons para a trons para a Cadeia Cadeia
Respirat Respirat ria ria e, sendo assim, e, sendo assim, um grande um grande
gerador de energia (ATP). gerador de energia (ATP).
Alguns de seus intermedi Alguns de seus intermedi rios so rios so
precurssores precurssores de compostos bioquimicamente de compostos bioquimicamente
importantes. importantes.
Localiza Localiza o do Sistema o do Sistema
Enzim Enzim tico tico
Matriz
Matriz
Mitocondrial
Mitocondrial
5
A maioria das clulasanimais e
vegetais so normalmente aerbicas
e oxidam completamente seus
combustveis atdixido de carbono
e gua. Nestas condies opiruvato
formado na quebraglicolticada glicose
no reduzido alactatoou a etanol
e CO
2
, como ocorre nas condies
anaerbicas.
Em lugar disso ele oxidado a CO
2
e
H
2
O na fase aerbica do catabolismo,
chamada de respirao.
Glicose 2 lactato +2H
+
G =-47 kcal/mol
Glicose +6O
2
6CO
2
+6H
2
O G =-686 kcal/mol
A oxidao da glicose at CO
2
e H
2
O libera uma quantidade de
energia muito maior que a liberada pela gliclise.
Quando as clulas quebram a glicose anaerobicamente, olactato
formado ainda contm perto de 93 % da energia original.
Isso porque a molcula de cido lctico ainda ser to complexa
quanto a molcula de glicose e de no ter sofrido nenhuma
oxidao final.
6
Apenas pela remoo de todos os
tomos de hidrognio dos tomos
de carbono da glicose, ou outros
combustveis orgnicos, e sua
substituio pelo oxignio com
formao de CO
2,
ocorre a liberao
de toda a energia livre biologicamente
disponvel nestas molculas.
Passos sucessivos na oxidao do
metano atCO
2.
A medida que os
4 tomos de H so removidos do
tomo de carbono, um por vez,
ocorre uma perda gradativa de
energia livre.
Energia livre da oxidao de
compostos contendo um nico
carbono
7
A respirao celular ocorre em 3 estgios principais:
No primeiro estgio as molculas orgnicas combustveis- carboidratos, cidos
graxos e, tambm, alguns aminocidos- so oxidados e liberam fragmentos de 2
carbonos, os gruposacetil daacetil-coenzima A.
No segundo estgioestes gruposacetil so lanados no ciclo do cido ctrico, o
qual os degrada enzimaticamente liberando tomos de H ricos em energia e,
tambm, molculas de CO
2
,o produto de oxidao final dos combustveis
orgnicos.
No terceiro estgioda respirao os tomos de H so separados em prtons (H+)
e e
-
ricos em energia. Oseletronsso transferidos ao longo de uma cadeia de
molculas transportadoras de e
-
, a cadeia respiratria, atO
2
molecular, o qual
reduzido para formar H
2
O. Durante este processo de transporte de eltrons
ocorre a liberao de grandes quantidades de energia, a qual conservada na
forma de ATP em um processo denominadofosforilao oxidativa.
Catabolismo das protenas, gorduras e
Carbodratosnos 3 estgios da respirao:
1) Oxidao dos cidos graxos, glicose e
algunsaasproduzemacetil-CoA.
2) Oxidao dos gruposacetil no ciclo do
cido ctrico incluem 4 passos nos quais
Os eltrons so retirados.
3) Os eltrons retirados pelo NADH e FADH2
So levados para os carreadores de eltrons da
cadeiamitocondrial, onde ultimamente o O2
reduzido a H2O. Esse fluxo de eltrons
impulsiona a produo de ATP.
8
O ciclo do cido ctrico um sistema
enzimtico circular
Huma diferena fundamental entre agliclise
e o ciclo do cido ctrico:
-aglicliseocorre atravs de umasequncialinear
de passos catalisados enzimaticamente.
-o ciclo do cido ctricofunciona de maneira circular:
uma volta do ciclo inicia-se pela doao feita peloacetil-COA
de seu grupoacetil ao composto de 4 tomos de carbono denominado
oxaloacetato, resultando na formao docitrato, um composto
com 6 tomos de carbono. Ocorre, ento, a transformao do
citratoemisocitrato, uma molcula que tambm possui 6 tomos
de carbono, o qual desidrogenado, com a perda de CO2,
resultando na formao de -cetoglutarato, um composto com
5 tomos de carbono.
9
O ciclo do cido ctrico um sistema
enzimtico circular
Com nova perda de CO2 o -cetoglutaratotransforma-se em
succinato, um composto com 4 tomos de carbono. Atravs de
trs passos catalisados enzimaticamente, osuccinatotranformado
emoxaloacetatoo composto com 4 tomos de carbono com o qual
o ciclo foi iniciado. Ooxaloacetato, assim, regenerado aps
uma volta do ciclo e estpronto para reagir com outra molcula
deacetil-COA e iniciar uma nova volta.
Continuao...
Em cada volta do ciclo um grupo
acetil (2 carbonos) entra nele e duas
molculas de CO2 so eliminadas.
Em cada volta, uma molcula de
oxaloacetatoempregada para a
sntese decitrato, mas depois de uma
srie de reaes ooxaloacetato
regenerado novamente.
No ocorre, portanto, nenhum consumo deoxaloacetatopela
operao do ciclo do cido ctrico; teoricamente apenas uma
molcula deoxaloacetatosuficiente para a oxidao de um
nmero infinito de gruposacetil.
10
Acetila Acetila- -CoA CoA
+ +
Oxaloacetato Oxaloacetato
Citrato Citrato Cis Cis- -Aconitato Aconitato
Iso Iso- -Citrato Citrato
Oxalo Oxalo- -succinato succinato
Cetoglutarato Cetoglutarato
Succinila Succinila- -CoA CoA
Succinato Succinato
Fumarato Fumarato
Malato Malato
Ciclo Ciclo
de de
Krebs Krebs
Os passos do ciclo do cido ctrico:
11
Origens da Origens da Acetil Acetil- -CoA CoA
Glicognio
Triacilglicerol
Protenas
Glicose
cidos Graxos
Amino cidos
Acetil Acetil- -CoA CoA
Glicogenlise
Gliclise
Piruvato
Corpos cetnicos
Etanol
Liplise
oxidao
Protelise
Desaminao
e transaminao
Origem do grupo acetil apartir de diversos combustveis:
12
Acetil Acetil- -CoA CoA
=
Reaes prprias do ciclo
1. Formao de citrato: Condensao de acetil-CoA e
oxalacetato para formar citrato. Enzima citrato-sintase:
alostrica e inibida por ATP e NADH. A succinil-CoA, uma
substncia que aparece depois no ciclo tambm um inibidor
13
2. Isomerizao do citrato a isocitrato: catalisada
pela aconitase, que requer Fe
2+
3. Formao do -cetoglutarato e de CO
2
:
Primeira oxidao: descarboxilao do isocitrato,
catalisada pela isocitrato-desidrogenase
Ponto de controle do ciclo: controle alostrico da
enzima: inibida por ATP e NADH e ativada por ADP e
NAD
+
14
4. Formao de succinil-CoA e de CO
2
: Segunda Oxidao
Catalisada por um complexo multienzimtico:
-cetoglutarato-desidrogenase, e tambm requer TTP,
cido lipico, FAD e Mg
2+
A remoo de CO
2
torna o ciclo irreversvel
5. Formao de succinato: ocorre a
fosforilao de um GDP a GTP
Enzima: succinil-CoA-sintetase
GTP + ADP GDP + ATP
15
6. Formao de fumarato: oxidao ligada ao FAD
Enzima succinato-desidrogenase: uma protena integral da
membrana mitocondrial interna
7. Formao de malato: enzima fumarase,
catalisa a adio de uma molcula de gua ao fumarato
16
8. Regenerao do oxalacetato: Passo final da oxiadao:
enzima malato-desidrogenase
A oxidao do acetil-CoA pelo ciclo de Krebs resulta:
- na produo de 2 molculas de CO
2
- Um GDP fosforilado GTP
- Um FAD reduzido a FADH
2
- Trs NAD
+
so reduzidos a NADH
17
Reduo do NAD (P) e FAD:
NAD/NADH
FAD/FADH2
18
Balancete Energ Balancete Energ tico tico
3 3 NADred NADred C.R. ~ 9 ATP C.R. ~ 9 ATP
C.R. ~ 2 ATP C.R. ~ 2 ATP 1 1 FADred FADred
1 1 Fosforila Fosforila o o ao ao
n n vel do substrato vel do substrato
1 ATP 1 ATP
TOTAL : ~ 12 ATP TOTAL : ~ 12 ATP
Observao: De acordo com a hiptese quimiosmtica, a sntese de ATP, na
fosforilao oxidativa, acontece no complexo ATP sintase devido ao gradiente de
prtons entre a matriz mitocondrial e o espao intermembrana criado pelo sistema
de transferncia de eltrons e a quantidade de ATP formado por tomo de oxignio
consumido a partir de um NADH de 2,5 e de um FADH
2
1,5. No entanto a medida
real a partir de mitocndrias isoladas de aproximadamente 3 e 2, a partir,
respectivamente do NADH e do FADH
2
.
Por que um ciclo do cido ctrico?
Por que um ciclo to complexo, envolvendo sucessivos intermedirios com
6, 5, e 4 tomos de carbono, necessrio para a oxidao de um simples grupo
acetil com apenas dois tomos de carbono?
A molcula do cido actico, embora simples e pequena, muito resistente
oxidao do tomo de carbono do seu grupometila, condies muito drsticas,
incompatveis com o ambiente celular, so necessrias para oxidar diretamente
o acetato a duas molculas de CO
2
. Assim, as clulas usam um caminho menos
direto, mas mais fcil, para obterem a oxidao do acetato, um caminho que
envolve uma energia livre de ativao muito menor:
as clulas aprenderam a combinar o cido actico com outra molcula
(oxaloacetato) e obter um produto (citrato) muito mais susceptvel
desidrogenaoe descarboxilaoque o acetato.
19
CONTROLE DO CICLO
O primeiro controle
est fora do ciclo: produo
de Acetil-CoA a partir do
piruvato pelo complexo
piruvato-desidrogenase
Os 3 pontos de controle do
ciclo:
- Citrato-sintase
- Isocitrato-desidrogenase
- Complexo -
cetoglutarato-desidrogenase
Controle do ciclo: ATP/ADP e NADH/NAD
+
A caracterstica recorrente no metabolismo de ativao/inibio por ATP/ADP
e NADH/NAD
+
reflete o modo pelo qual uma clula pode ajustar-se a um
estado de atividade ou de repouso. Quando uma clula estmetabolicamente
ativa, ela usa ATP e NADH em uma velocidade maior, produzindo muito
ADP e NAD
+.
Por outro lado, a clula em repouso tem nveis bastante altos de
ATP e NADH. Consequentemente, as relaes ATP/ADP e NADH/NAD
+
so altas nas clulas em repouso, e elas no necessitam manter um alto nvel de
oxidao e produo de energia, fazendo com que o excesso de ATP e NADH
sirva como um sinal para desligar as enzimas responsveis por reaesoxidativas.
20
Inibi Inibi o do Ciclo de o do Ciclo de Krebs Krebs
Numerosos compostos podem inibir o Numerosos compostos podem inibir o
C.K..Trs inibi C.K..Trs inibi es so bem caracter es so bem caracter sticas: sticas:
Fluoracetato Fluoracetato
Arsenito Arsenito
cido cido Malnico Malnico
Fluoracetato Fluoracetato
O O fluoracetato fluoracetato, uma substncia que no , uma substncia que no
intrinsicamente intrinsicamentet t xica, forma com o xica, forma com o
oxaloacetato oxaloacetato, o , o fluorocitrato fluorocitrato,numa rea ,numa rea o o
catalisada pela catalisada pela citrato citratosintetase sintetase. Esta . Esta
substncia substncia um composto extremamente um composto extremamente
t t xica por inibir competitivamente a xica por inibir competitivamente a
aconitase aconitase. . um t um t pico exemplo de pico exemplo de
s s ntese letal. ntese letal.
21
S S ntese Letal ntese Letal
Fluoracetato Fluoracetato
CH CH
3 3
- -COOF COOF
+
+H
2
O
citrato citrato sintetase sintetase
Inibidor
aconitase aconitase
CO CO- -COOH COOH
CH CH
2 2
- -COOH COOH
oxaloacetato oxaloacetato
CH CH
2 2
- -COOH COOH
CH CH
2 2
- -COOH COOH
HO HO- -C C- -COOH COOH
citrato citrato
F F- -CH CH
2 2
- -COOH COOH
CH CH
2 2
- -COOH COOH
HO HO- -C C- -COOH COOH
fluorcitrato fluorcitrato
cido cido Malnico Malnico
A A succinato succinato
desidrogenase desidrogenase inibida inibida
competitivamente pelo competitivamente pelo
cido cido malnico malnico. .
22
Inibi Inibi o Competitiva o Competitiva
FADox FADox FAD FADH H
2 2
succinato succinato
desidrogenase desidrogenase
CH CH
2 2
- -COOH COOH
CH CH
2 2
- -COOH COOH
succinato succinato
COOH COOH
COOH COOH
malonato malonato
CH CH
2 2
CH CH- -COOH COOH
CH CH- -COOH COOH
fumarato fumarato
Arsenito Arsenito
A A descarboxila descarboxila o ooxidativa oxidativado do - -
cetoglutarato cetoglutarato(assim como a do (assim como a do piruvato piruvato), ),
inibida pelo inibida pelo arsenito arsenito(H (H
2 2
AsO AsO
3 3
), que se ), que se
combina com os grupos combina com os grupos - -SH do SH do lipoato lipoato, ,
uma das coenzimas da uma das coenzimas da - -cetoglutarato cetoglutarato
desidrogenase desidrogenase. .
23
Decarboxilao oxidativado piruvatoa acetil CoA no complexo
Piruvato desidrogenase:
O ciclo do cido ctrico no anabolismo
O ciclo do cido ctrico uma fonte de matria-prima
para abiossntesede muitas biomolculas importantes,
mas o suprimento dos componentes do ciclo deve ser
reabastecido para que o ciclo continue em operao.
Em particular, um organismo deve manter o
oxaloacetatoem nveis adequados para permitir a
entrada daacetil-CoA no ciclo.
24
Vias Vias anapler anapler ticas ticas
So rea So rea es que visam aumentar a es que visam aumentar a
concentra concentra o de o de cido cido oxalo oxalo
ac ac tico quando aumenta a tico quando aumenta a
produ produ o de o de acetila acetila- -CoA CoA ou ou
quando h quando h um desvio de um um desvio de um
intermedi intermedi rio do ciclo de rio do ciclo de Krebs Krebs
para outras vias metab para outras vias metab licas. licas.
25
cido cido Pir Pir vico vico
cido cido Oxalo Oxalo
Ac Ac tico tico
cido cido M M lico lico
Acetila Acetila- -CoA CoA
Propionila Propionila- -CoA CoA
Succinila Succinila- -CoA CoA
cido cido M M lico lico
C.K. C.K.
1 1
2 2
3 3
1 1- -Piruvato carboxilase Piruvato carboxilase
2 2- -Enzima Enzima m m lica lica
3 3- -Propionil Propionil- -CoA carboxilase CoA carboxilase
Enzimas Enzimas
Piruvato Carboxilase Piruvato Carboxilase
Enzima Enzima M M lica lica
Propionila Propionila- -CoA Carboxilase CoA Carboxilase
Ativada Ativadaalostericamente alostericamentepela pela
acetila acetila- -CoA CoA. Biotina dependente. . Biotina dependente.
Biotina no dependente Biotina no dependente
Biotina dependente Biotina dependente
26
Esquema geral das reaes catalisadas pelas
enzimas biotina dependentes
ATP ADP
CO
2
Biotina-enzima Biotina-enzima-
CO
2
Substrato
-COOH Substrato
Todas as vias
Metablicas so
Inter-relacionadas
E operamsumul-
taneamente. No
caso das vias
catablicas, os
nutrientes, muitos
dos quais so
macromolculas,
so quebrados
em molculas
menores, como
acares, cidos
graxos eamino-
cidos. Essas
molculas menores
continuam a ser processadas, e os produtos finais do catabolismofreqentemente
entram no ciclo do cido ctrico, que ocupa um papel central no metabolismo.
27
O ciclo do cido ctrico
desenpenhaum papel central
Nas vias anablicas, bem
como no catabolismo.
As vias que do origem
aos acares, aos cidos
graxos e aosaastm
origemapartir de
componentes
do ciclo.
O ciclo do cido ctrico considerado parte do metabolismo
aerbico; contudo, durante as reaes do ciclo no foi
mostrada nenhuma reao da qual o oxignio faa parte.
as reaes do ciclo do cido ctrico esto intimamente
relacionadas cadeia transportadora de eltrons e fosforilao
oxidativa, que conduzem eventualmente ao oxignio.
O ciclo do cido ctrico prov um elo vital entre a energia
qumica de nutrientes e a energia qumica do ATP. Muitas
outras molculas de ATP podem ser geradas como resultado
de um acoplamento ao oxignio, e veremos que isso depende
do NADH e do FADH2 gerados no ciclo do cido ctrico.
O que ser visto na prxima aula...