FUNDAMENTO Las protenas debido al gran tamao de sus molculas forman con el agua soluciones coloidales que pueden precipitar formndose cogulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70C o al ser tratadas con soluciones salinas, cidos, alcohol, etc. La coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalizacin por los agentes indicados que al actuar sobre la protena la desordenan por destruccin de sus estructuras secundaria y terciaria.
Prctica No. 6 Coagulacin de las protenas 3
Tcnica: Para ver la coagulacin de las protenas se puede utilizar clara de huevo, para conseguir ms volumen puede prepararse para toda la clase una dilucin de clara de huevo en agua, de forma que quede una mezcla an espesa. 1. Colocar en un tubo de ensayo una pequea cantidad de clara de huevo. 2. Aadir 5 gotas de cido actico y calentar el tubo a la llama del mechero. Anotar observaciones. Tcnica 1. Tomar un tubo de ensayo y poner unos 3 cc. de albmina de huevo. 2. Aadir 2cc. de solucin de hidrxido sdico al 20%. 3. A continuacin 4 5 gotas de solucin de sulfato cprico diluida al 1%. 4. Debe aparecer una coloracin violeta-roscea caracterstica. Reaccin de los aminocidos azufrados Se pone de manifiesto por la formacin de un precipitado negruzco de sulfuro de plomo. Se basa esta reaccin en la separacin mediante un lcali, del azufre de los aminocidos, el cual al reaccionar con una solucin de acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo. Tcnica 1. Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de albmina de huevo (clara de huevo). 2. Aadir 2 cc. de solucin de hidrxido sdico al 20%. 3. Aadir 10 gotas de solucin de acetato de plomo al 5%. 4. Calentar el tubo hasta ebullicin. Si se forma un precipitado de color negruzco nos indica que se ha formado sulfuro de plomo, utilizndose el azufre de los aminocidos, lo que nos sirve para identificar protenas que tienen en su composicin aminocidos con azufre. Prctica No. 6 Coagulacin de las protenas 4
Reacciones coloreadas Reaccin Xantoproteica: Es debida a la formacin de un compuesto aromtico nitrado de color amarillo, cuando las protenas son tratadas con cido ntrico concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas protenas con aminocidos portadores de grupos bencnicos, especialmente en presencia de tirosina. Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un lcali vira a un color anaranjado oscuro. Tcnica: 1. Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de solucin problema (clara de huevo ). 2. Aadir 1 cc. de HNO3 concentrado. 3. Calentar al bao mara a 100: C.. 4. Enfriar en agua fra 5. Aadir gota a gota una disolucin de sosa al 40%. Reaccin de Biuret La producen los pptidos y las protenas, pero no los aminocidos, ya que se debe a la presencia del enlace peptdico (- CO- NH -) que se destruye al liberarse los aminocidos. Cuando una protena se pone en contacto con un lcali concentrado, se forma una sustancia compleja denominada biuret, de frmula: que en contacto con una solucin de sulfato cprico diluda, da una coloracin violeta caracterstica. Resultados Prueba Resultado Coagulacin de protenas Positivo Coagulacin de protenas Positivo Reaccin de los aminocidos azufrados Positivo Reaccin xantoproteica Positivo
Discusin de resultados Mediante esta prctica se observ la coagulacin de las protenas, as como la produccin de azufre ya que, la ovo albumina se encuentra en la clara del huevo que est formada por ms de 385 aminocidos y es la nica protena del huevo que tiene grupos sulfhidrilo (azufre en los aminocidos). Es llamada fosfoglucoprotena (contiene fsforo), es rica en cistena y metionina y es la nica protena del huevo que contiene grupos sulfhidrilo los cuales contribuyen al sabor y olor caractersticos del huevo. Adems Se demostr la presencia de grupos bencnicos al resultar la reaccin xantoproteica positiva. Conclusiones Gracias a esta prctica se pudo conocer la coagulacin de las protenas mediante uso del calor, cido e Hidrxido. El mayor contenido de protena del huevo se encuentra en la Prctica No. 6 Coagulacin de las protenas 5
clara, siendo la de mayor abundancia la albmina. Es de la clara de donde se aslan las protenas para la preparacin de algunos suplementos. La protena del huevo es de alto valor biolgico y digestibilidad, es decir que gran parte de la ingestin de la protena es absorbida (95%), retenida y utilizada por el cuerpo. Adems proporciona todos los aminocidos esenciales, que el cuerpo necesita para llevar a cabo sus funciones.