LISTA DE FIGURAS

Figura 1 ..............................................10
Figura 2 - ..........................................11
Figura 3 - ...............................................12
Figura 4 -.....................................................................12

























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RESUMO





























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SUMRIO

1 INTRODUO ................................................................................................ 3
2 OBJETIVOS .................................................................................................... 5
2.1 OBJETIVO GERAL ................................................................................... 5
2.2 OBJETIVOS ESPECFICOS ..................................................................... 5
3. MATERIAL E MTODOS ............................................................................... 6
3.1 Teste de Molish Reao geral dos carboidratosError! Bookmark not
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3.2 Identificao de carboidratos redutores ..... Error! Bookmark not defined.
3.3 Diferenciao entre aldoses e cetoses ...... Error! Bookmark not defined.
3.4 Hidrlise da sacarose ................................. Error! Bookmark not defined.
4 RESULTADOS E DISCUSSO ........................ Error! Bookmark not defined.
4.1 Teste de Molish .......................................... Error! Bookmark not defined.
4.2 Identificao de carboidratos redutores ..... Error! Bookmark not defined.
4.3 Diferenciao entre aldoses e cetoses ...... Error! Bookmark not defined.
4.4 Hidrlise da sacarose ................................. Error! Bookmark not defined.
5 CONCLUSO ................................................... Error! Bookmark not defined.
6 REFERNCIAS ................................................ Error! Bookmark not defined.









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1 INTRODUO

Protenas so polmeros cujas unidades constituintes fundamentais so
os aminocidos. Os aminocidos, por sua vez, molculas orgnicas que
possuem ligadas ao mesmo tomo de carbono um tomo de hidrognio, um
grupo amina, um grupo carboxlico e uma cadeia lateral (ARAUJO, 1999).
Quando se aquece a uria a 100C, forma-se um produto que recebeu
o nome de Biureto e ocorre a liberao de amnia. O Biureto reage com ons
cpricos, em meio alcalino, formando um produto de colorao violceo.
Observando a semelhana do Biureto com as protenas (ligaes
peptdicas), aplicou-se a tcnica do Biureto para dosagem de protenas
(ATKINS; JONES, 2001).
Os aminocidos componentes de uma protena podem ser
genericamente caracterizados se, aps sua hidrlise, efetuarmos a reao
da ninhidrina. A ninhidrina (hidrato de tricetoidrindeno) reage com
aminocidos produzindo cor prpura. uma reao inespecfica quanto
identidade do aminocido, sendo a reao dependente da presena de
grupos amina livres (ARAUJO, 1999).
Os sais de metais pesados (Pb, Hg, Ag, Cu) causam a desnaturao de
protenas, isto , modificam a sua conformao natural com a atividade
biolgica (conformao nativa) para uma conformao no natural
biologicamente inativa (desnaturada). As molculas proticas desnaturadas
precipitam. Os sais de metais pesados, portanto, precipitam as protenas por
desnaturao (MAHAN; MYERS, 2002).
A desnaturao um rearranj o da conf ormao protei ca
numa manei ra no natural e de escassa ou nul a f uno
bi ol gi ca. Esse f enmeno pode ser acompanhado atravs de
modi f i caes das propri edades f si co-qumi cas da protena,
como a sol ubi l i dade: uma protena desnaturada i nsol vel em
gua e preci pi ta em sol uo. Al m de val ores extremos de pH, a
desnaturao pode ser causada por mui tos agentes f si cos,
como temperaturas el evadas e rai os UV, e qumi cos, como sai s
de metai s pesados e sol ventes orgni cos. Conf orme veremos a
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segui r, ci dos f ortes como o ci do tri cl oroacti co (TCA),
desnaturam as prot enas, preci pi tando-as (COELHO et al , 1980).
































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2 OBJETIVOS

2.1 OBJETIVO GERAL

Determinao qualitativa de aminocidos bem como a pesquisa da
ligao peptdica.

2.2 OBJETIVOS ESPECFICOS

Promover a reao de biureto e ninhidrina
Realizar a precipitao de protenas
Desnaturao das protenas















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3 MATERIAL E MTODOS

3.1 Reao do biureto

Foi preparada uma srie de trs tubos contendo, respectivamente, 1mL
de soluo de ovoalbumina 2%; 1mL de soluo de gelatina 1%; 1mL de
H2O destilada. Na qual foram medidas usando-se trs pipetas Pasteur, uma
para cada soluo citada anteriormente. Em seguida, foi adicionado em cada
tubo 1mL do reagente de Biureto, medidos com auxlio de uma pipeta
Pasteur. Aps a adio do reagente de Biureto agitou-se levemente os
tubos.


3.2 Reao da ninhidrina

Foi preparada uma srie de dois tubos contendo, respectivamente, 1mL
de soluo de ovoalbumina 2%; 1mL de H2O destilada. Na qual foram
medidas usando-se duas pipetas Pasteur, uma para cada soluo citada
anteriormente. Em seguida, foi adicionado em cada tubo 0,5 mL de soluo
de ninhidrina 2%, medidos com auxlio de uma pipeta Pasteur. Aps a
adio da soluo de nihidrina, foi levado para aquecimento em banho-maria
60C e retirado em seguida.


3.3 Precipitao com sais de metais pesados

Preparou-se dois tubos de ensaio contendo 2 mL de soluo de
ovoalbumina 2% em cada um desses tubos, colocados com ajuda de uma
pipeta Pasteur. Na sequncia adicionou-se, em um dos tubos, com uma
pipeta Pasteur, 5 gotas de soluo de cloreto de Mercrio 5% (HgCl2).
Enquanto que no outro tubo foi adicionado, por meio de uma pipeta Pasteur,
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5 gotas de soluo de Acetato de Chumbo (CHCOO)Pb 5% (acetato de
chumbo).

3.4 Efeito de cidos fortes

Em um tubo de ensaio foi colocado, com auxlio de duas pipetas
Pasteur, 1 mL de soluo de ovoalbumina 2% e 3 mL de H
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O destilada. Em
seguida adicionou-se ao tubo, com cautela pela a parede do tubo e com a
utilizao de uma pra e uma pipeta de vidro, 0,5 mL de cido ntrico
concentrado (HNO3), tomando cuidado para que no houvesse qualquer tipo
de agitao. Em seguida foi deixado em repouso.



















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4 RESULTADOS E DISCUSSO

4.1 Reao do biureto

As solues que continhas gelatina e ovoalbumina juntamente com o
reagente de biureto ficaram com uma colorao azul arroxeado, e a que
continha somente gua e o reagente de biureto permaneceu azul, onde resulta,
respectivamente, em solues que contm protenas e na outra a ausncia de
protenas.
A reao do Biureto devida s ligaes peptdicas, dando positiva para
protenas e peptdeos com trs ou mais resduos de aminocidos. A reao
tambm positiva para substncias que contm 2 carbonilas (-CONH
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) ligadas
diretamente ou atravs de um nico tomo de carbono ou nitrognio.
Dependendo da complexidade da protena ou do peptdeo em questo, a cor
do produto de reao a presena do Biureto varia substancialmente: protenas
do colorao violeta, peptdios do colorao rosa (ARAUJO,1999).
Fig 1: Reao de Biureto







Fonte: Dispositivo mvel

4.2 Reao da ninhidrina

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Em relao ao tubo de ensaio contendo ovoalbumina e a soluo de
ninhidrina, ocorreu a formao de uma colorao azul violeta, confirmando a
presena de protenas, peptdeos, aminas primrias ou amnia.
uma reao inespecfica quanto identidade do aminocido, sendo a
reao dependente da presena de grupos amina livres. O aminocido prolina,
na verdade um iminocido, ao reagir com a ninhidrina produz colorao
amarela (MAHAN; MYERS, 2002).
Fig 2: Reao de ninhidrina








Fonte: Dispositivo mvel

4.3 Precipitao com sais de metais pesados
Os ctions de metais pesados como Hg2+, Pb2+, Cu2+, Fe2+, Cd2+ e
Zn2+ formam precipitados insolveis de protenas, denominados de acordo
com o elemento formador (exemplo: proteinato de mercrio, proteinato de
chumbo, etc.). Essa precipitao mais intensa quando o pH est acima do
ponto isoeltrico (pI). Isso porque, acima do pI, a carga lquida sobre a protena
negativa (ver determinao do ponto isoeltrico da casena), favorecendo a
interao com os ctions provenientes do sal.




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Fig 3: Precipitao com sais de metais pesados

Fonte: Dispositivo mvel
Como pode ser observado, houve a precipitao esperada pela ao dos
metais pesados.
4.4 Efeito de cidos fortes
Fig 4: Efeito dos cidos fortes nas protenas








Fonte: Dispositivo mvel
Foi possvel observar a precipitao das protenas utilizadas em soluo,
devido a ao dos cidos utilizados onde esse desnaturaram as protenas em
questo.


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5 CONCLUSO
Nessa aula prtica todos os objetivos foram alcanados, onde se pode
realizar e visualizar as reaes de desnaturao e precipitao de protenas,
bem como identificar a presena das mesmas em solues aquosas.






















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6 REFERNCIAS
ARAJO, J. M. A Qumica de Alimentos Teoria e Prtica. Viosa.
Universidade Federal de Viosa. 2 ed. 1999.

ATKINS, P.; JONES, L; Princpios de Qumica: questionando a vida
moderna e o meio ambiente, Porto Alegre: Bookman, 2001.

COELHO, C. M. L., LASLO, H., BASSO, L. M., MORAES, S. S. Modificaes
e alteraes fsicas e qumicas dos produtos de origem animal. Niteri.
Universidade Federal Fluminense, 1980.

MAHAN, B.M.; MYERS, R.J.; Qumica: um curso universitrio, Ed. Edgard
Blucher LTDA, So Paulo/SP 2002.