Introduo -

MICROBIOLOGIA
Biossegurana em Laboratrio
de Microbiologia
o conjunto de medidas necessrias para manipulao adequada
de agentes biolgicos, qumicos, genticos, fsicos.
Para prevenir a ocorrncia de acidentes
Reduzir o risco de contaminao das amostras e dos manipuladores
Equipamentos de proteo
individual - EPIs
Jaleco
Sapatos fechados
Luvas
Mscaras
Touca
Limpeza e organizao de material e laboratrio
Vidraria e equipamentos de
laboratrio
Utilizao de autoclave: utilizada para esterilizar
atravs do calor mido sob presso
Bico de Bunsen
utilizado no laboratrio como fonte de calor para
diversas finalidades: Aquecimento de solues; forma
uma proteo entre manipulador e o material.
Placas de Petri
Placa de Petri: recipiente cilndrico, achatado, de
vidro ou plstico utilizada para a cultura de
microorganismos.
Julius Richard Petri que a inventou em 1877
Meios de Cultura
Os meios de culturas so preparaes qumicas que
possuem em sua formulao, nutrientes necessrios
para que os microorganismos possam multiplicar-se
permitindo seu estudo.
De acordo com a finalidade bacteriolgica ou
micolgica os meios especiais podem ser
classificados em:
MEIOS DE PR-ENRIQUECIMENTO - para amostras que
sofreram algum tipo de tratamento (trmico ou
qumico).
Ex. gua peptonada, caldo lactosado /isolamento de
Salmonelas de leite emp.
MEIOS DE ENRIQUECIMENTO - quando proporcionam
nutrientes adequados ao crescimento de
microrganismos presentes usualmente em baixos
nmeros ou de crescimento lento.
Ex. Caldo Tetrationato e Selenito-Cistina para cultivo de
Salmonelas (lquidos), Caldo Tioglicolato para
Clostridium perfringens
DIFERENCIAIS -
Quando contm substncias que permitem estabelecer diferenas
entre microrganismos muito parecidos
Eosina Azul de Metileno - diferencial para
coliformes,
gar Mac Conkey para a diferenciao de
enterobactrias,
gar sangue, gar Baird-Parker para
isolamento e diferenciao de cocos Gram
positivos
Diferentes Meios de Cultivos
SELETIVOS - os que contm
substncias que inibem o
desenvolvimento de determinados
grupos de microrganismos,
permitindo o crescimento de
outros.
Ex.: meios com antibiticos para
isolamento de diversos
microrganismos (TSC, SFP, meio de
Blaser, etc.).
Diferentes Meios de Cultivos
MEIOS DE TRIAGEM - meios que avaliam
determinadas atividades metablicas permitindo
caracterizao e identificao presuntiva de
muitos microorganismos (gar trplice acar e
ferro,uria, etc.);
IDENTIFICAO - prestam-se para a realizao de
provas bioqumicas e verificao de funes
fisiolgicas de organismos submetidos a
identificao
meios Oxidao/Fermentao, gar Citrato,
Caldo nitrato, meio semi-slido, caldo triptofano,
meio de Sulfito Indol Motilidade, etc.;
Meios de cultura
CONTAGEM - empregados para a determinao
quantitativa da populao microbiana (gar de
ContagememPlacas, gar Batata Dextrose)
ESTOCAGEM OU MANUTENO - utilizados para
conservao de microrganismos no laboratrio
(gar Sabouraud, Meios com leite, gar suco de
tomate, gar sangue, gar Simples, meio semi-
slido).
Preparao de meio
gua
Escolha de um meio
Pesar o meio
Preparar em um bcker
Erlenmeyer
Autoclave
Histria da Microbiologia
Estudo dos microorganismos
Microrganismos so as formas de vida que,
originalmente, s poderiam ser vistas com o auxlio do
microscpio ptico (microscpio eletrnico).
Bactrias, Fungos, Vrus, Protozorios, Algas
unicelulares, Virides e Prions.
Histria da Microbiologia
Esta rea do conhecimento teve seu incio com os relatos de
Robert Hooke e Antony van Leeuwenhoek, que desenvolveram
microscpios que possibilitaram as primeiras observaes de
bactrias e outros microorganismos.
Van Leeuwenhoek seja considerado o "pai" da microbiologia, os
relatos de Hooke, descrevendo a estrutura de um bolor.
Esquema do microscpio construdo por Robert Hooke e um esquema
de um fungo.
(Adaptado de Tortora et al., Microbiology - 8 ed)
Rplica do microscpio construdo por Leeuwenhoek e de suas ilustraes, descrevendo os "animlculos"
observados
Pasteur (1822-1895)
1850: Pasteur resolve problemas da indstria francesa
de vinhos e estabelece a primeira teoria microbiana
da fermentao
PASTEURIZAO
TINDALIZAO
John Tyndall
Mtodo de esterilizao que utiliza vapor de gua
Povos antigos usavam a fermentao para
a produo de:
vinhos: Grcia
kiu (cerveja de arroz): China (2300 a.c.)
sak(vinho de arroz fermentado): Japo (500a.c.)
shoyu (molho de soja)
leite fermentado
koumiss: leite de camelo fermentado
Teoria microbiana das
doenas
Robert Koch (1843-1910):
rival de Pasteur na descoberta do agente do
carbnculo (antraz):
descobriu a bactria Bacillus anthracis em 1876
Primeiro pesquisador a provar que um germe era causador
da doena, fazendo o mesmo mais tarde com a
tuberculose.
necessidade de separar diferentes espcies de
microrganismos para estudos
TCNICAS DE ISOLAMENTO
Alemes:
conceito de meio de cultura: colnias embatatas
isolamento
meios: caldos, leite, frutas, etc.
Robert Koch:
gar-gar e a cultura pura
Julius Petri: placa para cultura
Paul Erlich: colorao das clulas
Joseph Lister: fenol como primeiro
desinfetante, tcnicas asspticas
Classificao dos seres vivos
Linnaeus (sc. XVIII): Embora no tenha sido o primeiro a
tentar classificar os seres vivos, Linnaeus considerado o
"pai" da taxonomia moderna. Seus estudos so
considerados os pilares da taxonomia botnica e
zoolgica, pois foi o primeiro estudioso a utilizar o sistema
binomial de classificao.
De acordo com Linnaeus, os seres vivos podiam ser
classificados em dois reinos: Animal e Vegetal.
Haeckel (1866): Incluso do reino Protista, para classificar
"animais" e "vegetais" unicelulares. Haeckel apresentou
um esquema que representaria a rvore da vida,
classificando os seres vivos em trs reinos: Plantae,
protista e animalia
Whittaker (1969): Props um novo sistema de
classificao, onde os seres vivos seriam
agrupados em cinco reinos, sendo
separados principalmente pelas
caractersticas morflogicas e fisiolgicas:
Monera: Procariotos
Protista: Eucariotos unicelulares -
Protozorios (sem parede celular) e Algas
(com parede celular)
Fungi: Eucariotos aclorofilados
Plantae: Vegetais
Animalia: Animais
Classificao dos seres vivos, de
acordo com Whittaker (1969)
Em 1985 foi descoberto um organismo, denominado
Epulopiscium fischelsoni que, a partir de 1991, foi
definido como sendo o maior procarioto j descrito,
exibindo cerca de 500 m de comprimento.
Esta bactria foi isolada do intestino de um peixe
marinho.
em 1999, outro relato descreve o isolamento de uma
bactria ainda maior, isolada na costa da Nambia -
Thiomargarita namibiensis, pode ser visualizada a olho
n, atingindo at cerca de 0,8 mm de comprimento e
0,1 a 0,3 mm de largura.
Estudos com bactrias
primitivas
cultivo de bactrias pr-histricas, visando a busca de
compostos com atividade antimicrobiana ou de
interesse comercial.
Inseto de onde foi retirada a bactria (provavelmente Bacillus),
de 135 milhes de anos
Principais funes dos
microorganismos na natureza
Papel nos processos geoqumicos, tais como o ciclo do
carbono e do nitrognio, sendo genericamente
importantes nos processos de decomposio de
substratos e sua reciclagem.
O carbono encontra-se na atmosfera primariamente
como CO2, sendo utilizado pelos organismos
fotossintetizantes, para sua nutrio. A energia para o
desenvolvimento da vida na Terra derivada, em
ltima anlise, a partir da luz solar. Esta captada pelas
plantas e microorganismos fotossintetizantes (algas e
bactrias), que convertem o CO2 em compostos
orgnicos, atravs da reao:
CO2 + H2O => (CH2O)n + O2
componentes da microbiota residente de
animais e plantas,
diversos produtos microbiolgicos naturais
tais como: vinho, cerveja, queijo, picles,
vinagre, antibiticos, pes, etc.
processos biotecnolgicos, envolvendo
engenharia gentica, que permitem a
criao de novos microrganismos, com as
mais diversas capacidades metablicas.
vrios microorganismos, incluindo
fungos, bactrias e protozorios a
utilizam, como fonte de carbono e
energia. Destes microorganismos, muitos
encontram-se no trato intestinal de
vrios herbvoros e nos cupins.
Muitos compostos txicos podem ser
degradados por microrganismos, dentre
eles, policlorados, DDT, pesticidas.
Microorganismos como
agentes de doenas
Os microorganismos, eventualmente provocamdoenas no homem,
outros animais e plantas.
Apesar dos enormes avanos em relao ao tratamento de doenas
infecciosas, estas vm se tornando novamente um tema
preocupante, em virtude do crescente surgimento de linhagens
bacterianas cada vez mais resistentes s drogas.
Importncia da
Microbiologia
Microbiologia Molecular
Aplicada: processos industriais, controle de doenas,
de pragas, produo de alimentos, etc.
reas de estudo:
Odontologia: Estudo de microrganismos associados
placa dental, crie dental e doenas periodontais.
Estudos com abordagem preventiva.
Medicina, Fisioterapia e Enfermagem: - Doenas
infecciosas e infeces hospitalares.
Nutrio: - Doenas transmitidas por alimentos,
Controle de qualidade de alimentos, Produo de
alimentos (queijos, bebidas).
Biologia: - Aspectos bsicos e biotecnolgicos.
Produo de antibiticos, hormnios (insulina, GH),
enzimas (lipases, celulases), insumos (cidos, lcool),
Despoluio (Herbicidas - Pseudomonas, Petrleo), Bio-
filme (Acinetobacter), etc.
BIOTECNOLOGIA - Uso de microrganismos com
finalidades industriais, como agentes de
biodegradao, de limpeza ambiental, etc.
Bibliografia Bsica
JAWETZ, Ernest; LEVINSON, Warren. Microbiologia
mdica e imunologia. Porto Alegre: Artmed, 2008.
MURRAY, Patrick R. Microbiologia clnica. 2 ed. Rio
de Janeiro: MEDSI, 2002. 392 p.
TRABULSI, Luiz Rachid. Microbiologia. So Paulo:
Atheneu, 2004.