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LETCIA FERRARI LEMOS BARROS

Estudo qumico, atividade antimicrobiana e antioxidante das


folhas de Talauma ovata A. St. Hil (Magnoliaceae).

Dissertao

apresentada

como

parte

dos

requisitos para a obteno do Ttulo de Mestre


em Qumica, rea de Concentrao: Qumica
Orgnica, Curso de Ps-Graduao em Qumica,
Departamento de Qumica, Setor de Cincias
Exatas, Universidade Federal do Paran.

Orientadora:
Prof. Dr. Maria lida Alves Stefanello

CURITIBA
2008

ii

A Deus,
por ter me dado fora e sabedoria

Aos meus pais Benedito e Valquria,


Por orientar meus passos e
oportunidade de estudo
Dedico a vocs esse trabalho
Amo vocs!

iii

Alegria no nome
Amor no corao
S pode ser voc
O anjo que me d a mo.

Minha melhor amiga, cmplice, parceira de todos os momentos que a vida nos ps para
enfrentar. Passamos por tudo juntas. Fazem 24 anos e mais os meses de gestao no meu
ventre, que compartilhamos cada dia de nossas vidas.
Ela seguindo o curso natural de todo ser humano, vencendo cada etapa de sua vida,
infncia, adolescncia, etc; com os compromissos devidos.
Bonita por fora, bela por dentro. Letcia segue sua vida vivendo a mxima de SaintExupry no livro O Pequeno Prncipe: s responsvel por aquilo que cativas. Assim
cativou e encontrou espao em seu corao para ser filha, irm, amiga, aluna e colega. Muitas
vezes Me de suas irms e de sua Me. Que criatura abenoada!
Natureza decidida e definida assume suas responsabilidades com garra. Assim tive a
oportunidade de ver minha filha na Universidade Federal do Paran, referncia na Amrica
Latina, crescer, vencer barreiras, definir-se como pessoa e profissional, centrada em seus
objetivos, fazendo suas escolhas com determinao.
Sempre confia em suas convices e experincias que trazem um contedo forte
espiritual que adquiriu atravs dos exemplos familiares. A busca de Deus uma constante em
sua rotina de vida.
H uma festa dentro de mim, sou grata a Deus.
Que Deus te abenoe, minha filha, longos e largos horizontes te esperam!
Te dou minha beno de me, e a amo imensamente.
(Sua Me, Valquria Z. Ferrari)

iv

AGRADECIMENTOS

Ao Departamento de Qumica da UFPR, pela oportunidade concedida;

professora Dr. Maria lida Alves Stefanello pela orientao, compreenso e


confiana depositada durante a realizao deste trabalho.

Ao professor Dr. Renato Mello-Silva (USP) pela coleta e identificao do material


botnico;

Aos professores Dr. Andersson Barison Departamento de Qumica


Universidade Federal do Paran (DQ UFPR) pelas anlises de Ressonncia
Magntica Nuclear e juntamente com Dr. Francisco de Assis Marques (DQ-UFPR)
pelas importantes correes e sugestes durante o Exame de Qualificao;

Ao professor Dr. Marcos Salvador (IB UNICAMP) pela realizao dos testes
antimicrobianos e antioxidante;

Aos colegas de laboratrio Emmanoel Costa, rica Luiz dos Santos, Maria Helena
Verdan e Nelissa P. Vaz pela amizade e auxlio;

s minhas irms Carolina, Ana Paula e Laisa pela amizade, incentivo e exemplo;

minha amiga Carolina Ferraza pela amizade e torcida por meu sucesso;

E a todos aqueles que contriburam direta ou indiretamente para a execuo deste


trabalho.

SUMRIO
LISTA DE ABREVIATURAS.................................................................................... vii
LISTA DE TABELAS................................................................................................. ix
LISTA DE FIGURAS.................................................................................................. xi
LISTA DE ESQUEMAS............................................................................................. xii
LISTA DE ESPECTROS............................................................................................ xiii
RESUMO...................................................................................................................... xvii
ABSTRACT................................................................................................................. xviii
ESTRUTURAS DAS SUBSTNCIAS ISOLADAS................................................. xx
1 INTRODUO........................................................................................................ 1
1.1 A famlia Magnoliaceae e seu metabolismo secundrio......................................... 2
1.1.1 Alcalides..................................................................................................... 3
1.1.2 Terpenides................................................................................................... 6
1.1.3 Lignides...................................................................................................... 8
1.2 O gnero Talauma Juss............................................................................................ 12
1.3 Talauma ovata A. St. Hil. ....................................................................................... 17
2 OBJETIVOS............................................................................................................. 20
3 MATERIAIS E MTODOS.................................................................................... 20
3.1 Procedimentos gerais........................................................................................... 20
3.2 Estudo Fitoqumico............................................................................................. 22
3.2.1 Coleta e identificao do material botnico.................................................. 22
3.2.2 Obteno dos extratos................................................................................... 22
3.2.3 Fracionamento dos extratos em hexano e diclorometano............................. 22
3.2.4 Anlise detalhada do fracionamento das fraes F2-3 e F4 ........................ 24
3.2.5 Transformaes qumicas............................................................................. 25
3.3 Dados fsicos e espectromtricos das substncias isoladas e derivados.................. 32
3.4 Avaliao da atividade antimicrobiana.................................................................... 36
3.5 Avaliao da atividade antioxidante........................................................................ 38
4 RESULTADOS E DISCUSSO............................................................................. 39
4.1 Identificao da substncia To-1............................................................................. 39

vi
4.2 Identificao da substncia To-2............................................................................. 44
4.3 Identificao da substncia To-3 e To-4................................................................. 49
4.4 Identificao da substncia To-5............................................................................. 53
4.5 Identificao da substncia To-6 e determinao estrutural da substncia To-6a.. 58
4.6 Determinao estrutural das substncias To-7, To-7a e To-7b.............................. 68
4.7 Determinao estrutural das substncias To-8, To-8a e To-8b.............................. 84
4.8 Determinao estrutural da substncia To-9 e identificao da substncia To-9a. 100
4.9 Identificao da substncia To-10........................................................................... 109
4.10 Identificao da substncia To-11......................................................................... 112
4.11 Identificao da substncia To-12......................................................................... 117
4.12 Identificao da substncia To-13......................................................................... 122
4.13 Ensaios de atividade antimicrobiana e antioxidante............................................. 127
5 CONSIDERAES BIOSSINTTICAS DAS SUBSTNCIAS ISOLADAS... 129
5.1 Neolignanas............................................................................................................. 129
5.2 Sesquiterpenos......................................................................................................... 129
6 CONCLUSO........................................................................................................... 133
7 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS................................................................... 134

vii

LISTA DE ABREVIATURAS
Act

Acetato de etila

CC

Cromatografia em coluna

CCDC

Cromatografia em camada delgada comparativa

CCDP

Cromatografia em camada delgada preparativa

CH2Cl2

Diclorometano (DCM)

CDCl3

Clorofrmio deuterado

CIM
d
dd
ddd

Concentrao Inibitria Mnima


Dupleto
Duplo dupleto
Duplo duplo dupleto

dl

Dupleto largo

dq

Duplo quarteto

DMSO

Dimetilsulfxido

DPPH

2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl

EE

ter etlico

EP

ter de Petrleo

hex

Hexano

HMBC

Correlao heteronuclear em mltiplas ligaes

viii
HSQC
Hz

Hertz

IV

Infravermelho

J
KBr
m
MeOH
P.f.
p-TsOH
RMN
de 1H
RMN de
13

Correlao heteronuclear em nica ligao

C{1H}

Constante de acoplamento
Brometo de Potssio
Multipleto
Metanol
Ponto de fuso
cido p-toluenosulfnico
Ressonncia magntica nuclear de hidrognio

Ressonncia magntica nuclear de carbono treze

Singleto

sl

Singleto largo

t
TMS
UV

Tripleto
Tetrametilsilano
Ultravioleta
Deslocamento qumico

ix

LISTA DE TABELAS
Tabela 1 - Dados de RMN de 1H (400 MHz),

13

C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC

(400 MHz) em CDCl3 da substncia To-1.


Tabela 2 Dados de RMN de 1H (400 MHz),

C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC

13

(400 MHz) em CDCl3 da substncia To-2.


Tabela 3 Dados de RMN de 1H (400 MHz), HSQC e HMBC (400 MHz) em CDCl3
da substncia To-3 e dados de RMN de 1H (400 MHz) em CDCl3 da substncia To-4.
Tabela 4 Dados de RMN de 1H (400 MHz),

C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC


C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC

13

C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC

(400 MHz) em CDCl3 da substncia To-6a.


Tabela 7 Dados de RMN de 1H (400 MHz),

C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC

13

C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC

(400 MHz) em CDCl3 da substncia To-7a.


Tabela 9 Dados de RMN de 1H (400 MHz),

C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC

13

C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC

(400 MHz) em CDCl3 da substncia To-8.


Tabela 11 Dados de RMN de 1H (400 MHz),

13

C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC

(400 MHz) em CDCl3 da substncia To-8a.


Tabela 12 - Dados de RMN de 1H (400 MHz),

13

C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC

(400 MHz) em CDCl3 da substncia To-8b.


Tabela 13 Dados de RMN de 1H (400 MHz), HSQC e HMBC (400 MHz) em CDCl3
da substncia To-9.
Tabela 14 - Dados de RMN de 1H (400 MHz), 13C{1H} (50 MHz) e HMBC (400 MHz)
em CDCl3 da substncia To-9a.

60
64
70
76

13

(400 MHz) em CDCl3 da substncia To-7b.


Tabela 10 - Dados de RMN de 1H (400 MHz),

55

13

(400 MHz) em CDCl3 da substncia To-7.


Tabela 8 - Dados de RMN de 1H (400 MHz),

50

13

(400 MHz) em CDCl3 da substncia To-6.


Tabela 6 - Dados de RMN de 1H (400 MHz),

46

13

(400 MHz) em CDCl3 da substncia To-5.


Tabela 5 Dados de RMN de 1H (400 MHz),

41

80
86
92
96
102
106

x
Tabela 15 - Dados de RMN de 1H (200 MHz) e

13

C{1H} (50 MHz) em CDCl3 da

substncia To-10.
Tabela 16 - Dados de RMN de 1H (400 MHz),

13

C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC

(400 MHz) em CDCl3 da substncia To-11.


Tabela 17 Dados de RMN de 1H (400 MHz),

13

C{1H} (50 MHz) e HMBC (400

MHz) em CDCl3 da substncia To-12.


Tabela 18 Dados de RMN de 1H (400 MHz),

13

C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC

(400 MHz) em CDCl3 da substncia To-13.

110
114
119
124

Tabela 19 Atividade antimicrobiana do extrato em DCM e das substncias puras

127

Tabela 20 Atividade antioxidante do extrato em DCM e das substncias puras

128

xi

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 Rota biossinttica do cido chiqumico.

Figura 2 Rota biossinttica do cido mevalnico.

Figura 3 Terpenos com atividade biolgica na planta e no homem.

Figura 4 Rota biossinttica dos fenilpropanides.

10

Figura 5 Neolignanas e lignanas com atividade biolgica na planta e no homem.

11

Figura 6 Alcalides isolados de Talauma spp.

14

Figura 7 Terpenides isolados de Talauma spp.

15

Figura 8 Lignides isolados de Talauma spp.

16

Figura 9 Substncias de outras classes isoladas de Talauma spp.

17

Figura 10 Fotos da rvore, folha, flor e fruto de T.ovata

18

Figura 11 Avaliao da capacidade de reduo do radical DPPH de To-1.

128

Figura 12 Radicais de propenil e/ou alilfenis

130

Figura 13 Biossntese proposta para as neolignanas e di-norneolignanas


benzofurnicas isoladas.

130

Figura 14 Biossntese proposta para as neolignanas diarildimetilbutanol isoladas.

131

Figura 15 Biossntese proposta para os sesquiterpenos isolados.

132

xii

LISTA DE ESQUEMAS
Esquema 1 Fracionamento dos extratos em hexano e diclorometano

23

Esquema 2 Obteno da substncia To-13 a partir da subfrao 5-10

26

Esquema 3 Obteno das substncias To-7, To-7a e To-7b a partir da subfrao 17-18 27
Esquema 4 Obteno das substncias To-1 e To-2 a partir da subfrao 19-22

28

Esquema 5 Obteno das substncias To-3, To-4 e To-5 a partir da subfrao 19-22

29

Esquema 6 Obteno das substncias To-6, To-6a, To-8, To-8a, To-8b e To-10 a
partir da subfrao 6-9

30

Esquema 7 Obteno das substncias To-9 e To-9a a partir da subfrao 10-13

31

Esquema 8 Obteno das substncias To-11 e To-12 a partir da subfrao 14-21

31

xiii

LISTA DE ESPECTROS
E1 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-1.

42

E2 - Espectro de RMN de 13C {1H} (50 MHz, CDCl3) da substncia To-1.

42

E3 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-1.

43

E4 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-1.

43

E5 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-2.

47

E6 - Espectro de RMN de 13C {1H} (50MHz, CDCl3) da substncia To-2.

47

E7 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-2.

48

E8 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-2.

48

E9 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-3.

51

E10 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-3.

51

E11 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-3.

52

E12 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-4.

52

E13 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-5.

56

E14 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-5.

56

E15 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-5.

57

E16 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-6.

61

E17 - Espectro de RMN de 13C {1H} (50MHz, CDCl3) da substncia To-6.

61

E18 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-6.

62

E19 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-6.

62

E20 Espectro no UV da substncia To-6a.

65

E21 Espectro no IV da substncia To-6a.

65

xiv
E22 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-6a.

66

E23 - Espectro de RMN de 13C {1H} (50MHz, CDCl3) da substncia To-6a.

66

E24 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-6a.

67

E25 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-6a.

67

E26 Espectro no UV da substncia To-7.

71

E27 Espectro no IV da substncia To-7.

71

E28 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-7.

72

E29 - Espectro de RMN de 13C {1H} (50 MHz, CDCl3) da substncia To-7.

72

E30 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-7.

73

E31 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-7.

73

E32 - Espectro no UV da substncia To-7a.

77

E33 Espectro no IV da substncia To-7a.

77

E34 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-7a.

78

E35 - Espectro de RMN de 13C {1H} (50 MHz, CDCl3) da substncia To-7a.

78

E36 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-7a.

79

E37 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-7a.

79

E38 - Espectro no UV da substncia To-7b.

81

E39 Espectro no IV da substncia To-7b.

81

E40 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-7b.

82

E41 - Espectro de RMN de 13C {1H} (50 MHz, CDCl3) da substncia To-7b.

82

E42 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-7b.

83

E43 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-7b.

83

E44 Espectro no UV da substncia To-8.

87

xv
E45 Espectro no IV da substncia To-8.

87

E46 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-8.

88

E47 - Espectro de RMN de 13C {1H} (50 MHz, CDCl3) da substncia To-8.

88

E48 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-8.

89

E49 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-8.

89

E50 Espectro no UV da substncia To-8a.

93

E51 Espectro no IV da substncia To-8a.

93

E52 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-8a.

94

E53 - Espectro de RMN de 13C {1H} (50 MHz, CDCl3) da substncia To-8a.

94

E54 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-8a.

95

E55 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-8a.

95

E56 Espectro no UV da substncia To-8b.

97

E57 Espectro no IV da substncia To-8b.

97

E58 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-8b.

98

E59 - Espectro de RMN de 13C {1H}(50 MHz, CDCl3) da substncia To-8b.

98

E60 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-8b.

99

E61 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-8b.

99

E62 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-9.

103

E63 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-9.

103

E64 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-9.

104

E65 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-9a.

107

E66 - Espectro de RMN de 13C {1H} (50 MHz, CDCl3) da substncia To-9a.

107

E67 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-9a.

108

xvi
E68 - Espectro de RMN de 1H (200 MHz, CDCl3) da substncia To-10.

111

E69 - Espectro de RMN de 13C {1H} (50 MHz, CDCl3) da substncia To-10.

111

E70 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-11.

115

E71 - Espectro de RMN de 13C {1H} (50 MHz, CDCl3) da substncia To-11.

115

E72 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-11.

116

E73 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-11.

116

E74 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-12.

120

E75 - Espectro de RMN de 13C {1H} (50 MHz, CDCl3) da substncia To-12.

120

E76 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-12.

121

E77 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-13.

125

E78 - Espectro de RMN de 13C {1H}(50 MHz, CDCl3) da substncia To-13.

125

E79 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-13.

126

E80 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-13.

126

xvii

RESUMO
A presente dissertao descreve o estudo fitoqumico e as atividades antimicrobiana e
antioxidante das folhas de Talauma ovata St. Hil. (Magnoliaceae), conhecida popularmente
como pinha-do brejo ou baguau.
As folhas foram coletadas em janeiro/2003 no Bosque da Biologia (USP-SP).
A frao hidroalcoolica do extrato em hexano das folhas foi reunida com o extrato em
diclorometano aps anlise prvia por CCDC e comparao de dados espectrais, mostrando
que ambos possuam compostos semelhantes. O fracionamento cromatogrfico desta mistura
levou ao isolamento de trs novas neolignanas e dez substncias conhecidas pertencentes
classe dos lignides (neolignanas e bis-norneolignanas) e sesquiterpenides. Estas substncias
foram identificadas atravs de anlise dos seus dados espectromtricos (UV, IV, RMN) e
comparao com dados da literatura.
Os compostos conhecidos foram identificados como: as neolignanas (+)-licarina-A
(To-1), (+)-acuminatina (To-2), (+)-aldedo da licarina-A (To-3), (+)-kadsurenina-M (To-4),
(+)-oleiferina-C (To-5) e (+)-oleiferina-A (To-6) e os terpenides (-)-partenolido (To-10), (-)michelenolido (To-11), (-)-11,13-deidrocompressanolido (To-12) e (-)-espatulenol (To-13).
Destes licarina-A, oleiferina-C e partenolido j haviam sido encontrados em estudos anteriores
com a planta.
As novas neolignanas foram identificadas como: (+)-talaumina-A (To-7) (7S*,
8R*,8R* - 3,4: 3,4-bis-(metilenodioxi)-lignana-7-ol), (+)-talaumina-B (To-8) (7S*,
8R*,8R* - 3,4- dimetoxi- 3,4-metilenodioxi-lignana-7-ol), talaumina-C (To-9) (7S, 8R ,8R
3, 4 : 3,4- tetrametoxi-lignana-7-ol).
As substncias novas e a conhecida oleiferina-A foram acetiladas com anidrido actico
e piridina, rendendo os correspondentes acetatos, que so inditos. As novas neolignanas
tambm foram submetidas reao de ciclizao, rendendo os correspondentes derivados
ariltetralnicos, sendo que os derivados da talaumina-A e talaumina-B so inditos.
A atividade antimicrobiana do extrato em diclorometano e das substncias
isoladas foi avaliada contra vrias cepas de bactrias e fungos. O extrato mostrou fraca
atividade contra algumas cepas de Staphylococcus sp e Candida sp. Dentre as substncias
puras apenas licarina-A, talaumina-A e partenolido foram ativas. As duas primeiras

xviii
apresentaram moderada atividade antifngica contra cepas de Cndida sp e partenolido
mostrou-se moderadamente ativo contra algumas cepas de Staphylococcus sp.
As neolignanas majoritrias licarina-A, acuminatina e talaumina-A foram testadas para
atividade antioxidante. Apenas a primeira apresentou atividade moderada.
ABSTRACT
This work describes the phytochemical study and antimicrobial and antioxidant
activities of leaves of Talauma ovata St. Hil., a Brazilian plant known as bagua or pinhado-brejo.
Leaves were collected in So Paulo, SP, Brazil, in January 2003. Dried and powdered
material was extracted, at room temperature, with hexane and dichloromethane, successively.
The hexane extract was submitted to partition between hexane and MeOH-H2O (9:1) and the
hydro-alcoholic layer was combined with dichloromethane extract. Chromatographic
fractionation of this mixture yielded three new neolignans with along ten known compounds.
Their structures were elucidated by extensive spectroscopic methods including 1D (1H and
13

C) and 2D NMR (HSQC and HMBC) experiments as well as comparison with literature.
The known compounds were identified to be the neolignans: (+)- licarin-A (To-1) and

their bis-norneolignan aldehyde (To-3), (+)-acuminatin (To-2), (+)-kadsurenin M

(To-4),

(+)-oleiferin-C (To-5) and (+)-oleiferin-A (To-6); and the terpenes: (-)-parthenolide (To-10),
(-)-michelenolide (To-11), (-)-11,13-dehydrocompressanolide (To-12) and (-)- spathulenol
(To-13). The compounds licarin-A, oleiferin-C and parthenolide have ever been previously
reported in T. ovata.
The new neolignans were identified as (+)-talaumin-A (To-7) (7S*, 8R*,8R* - 3,4:
3,4-bis-(methylenedioxy)-lignan-7-ol), (+)-talaumin-B (To-8) (7S*, 8R*,8R* - 3,4dimethoxy- 3,4-methylenedioxy-lignan-7-ol) and (+)-talaumin-C (To-9) (7S, 8R ,8R 3, 4 :
3,4- tetramethoxy-lignan-7-ol).
The new compounds and the known oleiferin-A were submitted to acetylation with
acetic anhydride in pyridine, followed by usual work-up, yielding the respective acetates,
which are new. The new neolignans also were submitted to cyclization acid catalyzed to give
the respective aryltetraline derivatives. The compounds obtained from talaumin-A and
talaumin-B are new, while talaumin-C yielded the known isogalbulin (To-9a).

xix
The antimicrobial activity of dichloromethane extract and isolated compounds were
evaluated against several bacteria and fungi. The extract showed weak activity against some
strains of Staphylococcus sp and Candida sp. Among pure compounds evaluated licarin-A and
talaumin-A exhibited moderate activity against strains of Candida sp, while parthenolide was
active against Staphylococcus sp.
The major neolignans licarin-A, acuminatin and talaumin-A were also evaluated for
antioxidant activity. Only the first one showed moderate activity.

xx
ESTRUTURAS DAS SUBSTNCIAS ISOLADAS

9
8
6

HO

O 4'

8
6

2'

5
4

H3CO

5'

OCH3

6'

1'

O
6
5
4

H3CO

5'

OCH3

OCH3

A
O 4

7'
1'

5'

8
8'

6
6'

A
9'

3'

5'

To-5

7'
1'

5
6'

8'

2'

4'

3'

OCH3

To-6

9'

2'

4'

9'
8'

7'

1'

OH

OH

7'

To-4

To-3

6'

C
B
2'
O 4' 3'
OCH3

1'

To-2

7'

6'

5'

C
B
2'
O 4' 3'
OCH3

To-1

C
B
2'
O 4' 3'
OCH3

9'
8'

HO

7'

OCH3

1'

3'

OCH3

6'

5'

OCH3

xxi

7'
1'

5
6'

9'

8'
7'
1'

5
6'

4'

To-6a

To-7

OCOCH3
O

O 4

8'

6
7'
1'

5
6'
5'

A
9'

6'

3'

5'

7'
1'

A
O

6
5

9'

7'
1'

B
5'

To-7b

2'

OCOCH3
7

OCH3

OCH3

To-8

8
8'

6
6'

3'

4'

8'

6'

3'

OH
3

9'

2'

4'

To-7a

8'

C
O

2'

4'

4'

OCH3

3'

5'

OCH3

9'

2'

3'

2'

5'

8'

A
O

OH

OCOCH3

7'
1'

5'

9'

2'
3'

4'

OCH3
To-8a

OCH3

xxii

H3CO

A
H3CO

B
6

6'

H3CO
8'

7'
1'

OH

2'

5'

7'
1'

H3CO

8
8'

7'
1'

6'
5'

To-9

OCH3

OCH3

To-8b

H3CO 3

3'

4'

9'

2'

5'

4'

8'
6
6'

3'

9'

H3CO

1
2

9'

2'
3'

15

OCH3

4'

10
5

9
8

14

Ha

11

To-9a

To-10

Hb
Ha
1
2
3
15

10
5

9
14
6

Ha
11

12

10
1
4

15

OH

10

Ha
11

12

13

Hb

HO

1
5

To-12

7
11

13

To-13

9
8

14

O
To-11

9
8

13

Hb

Hb
Ha 15

14

Hb

12

OCH3

13

12

1
1. INTRODUO

As plantas so uma fonte importante de produtos naturais biologicamente ativos,


muitos dos quais se constituem em modelos para a sntese de um grande nmero de frmacos.
Estes produtos encontrados na natureza revelam uma gama quase que inacreditvel de
diversidade em termos de estrutura e de propriedades fsico-qumicas e biolgicas
(BRESOLIN & FILHO, 2003).
Ao se estudar uma planta com relao s suas caractersticas qumicas, deve-se
considerar a existncia de dois grupos distintos de metablitos, que so importantes para o seu
desenvolvimento: os metablitos primrios e os metablitos secundrios ou produtos naturais.
Os metablitos primrios so encontrados em todos os sistemas vivos, essenciais ao
crescimento e vida, como os aminocidos, monossacardeos, cidos carboxlicos, lipdeos
entre outros. Os metablitos secundrios so produtos de metabolismo especfico,
relacionados aos processos adaptativos e geralmente com efeitos biolgicos. So
biossintetizados a partir de metablitos primrios, e apresentam distribuio restrita a certas
plantas e microrganismo (s vezes caracterstico de um dado gnero ou espcie). So
caracterizados por uma enorme diversidade qumica, como por exemplo, os alcalodes,
esterides, terpenides, flavonides, lignides entre outros (VERPOORTE, 2000).
Os metablitos secundrios no so necessariamente produzidos em todas condies, e
na grande maioria dos casos, a funo desses compostos e seus benefcios para o organismo
ainda so desconhecidos. Sabe-se que alguns compostos desenvolvem importantes funes na
planta, tais como: defesas contra plantas parasitas e patgenos (vrus, bactrias, fungos e
insetos). Por outro lado, metablitos secundrios das plantas podem facilitar a interao
animal-planta produzindo pigmentos ou substncias volteis, cuja funo atrair os
polinizadores (DEWICK, 2002).
O metabolismo secundrio, principalmente de vegetais, estudado pela qumica de
produtos naturais. Essa uma rea bastante abrangente, pois envolve determinao estrutural
dos metablitos secundrios, a sua formao no organismo (biossntese), a sua ocorrncia no
reino vegetal (quimiossistemtica) e a sua importncia para a sobrevivncia da planta
(ecologia qumica). Os metablitos secundrios tambm so importantes para o homem, pois
muitos apresentam propriedades farmacolgicas enquanto outros podem ser utilizados como
aromatizantes, conservantes, corantes, entre outros. Em qualquer caso, o conhecimento da

2
estrutura da substncia fundamental. Por isso a identificao ou determinao estrutural das
substncias presentes em uma dada espcie sempre a primeira etapa em qualquer estudo
dentro da qumica de produtos naturais.
A composio qumica de uma planta produto de fatores genticos, isto , da
presena de enzimas para a produo de compostos especficos, e de fatores ambientais,
resultando na biodiversidade, que pode ser definida como a variedade e variabilidade
existentes entre organismos vivos e as complexidades ecolgicas nas quais eles ocorrem,
como clima, tipo de solo, presena de poluentes, presena de animais e de outras espcies
vegetais (HARBONE, 1982).
Esses fatores influenciam o desenvolvimento, a disperso e a adaptao das espcies ao
meio ambiente. Dentro das limitaes impostas pelo seu aparato enzimtico, uma espcie pode
produzir um nmero maior ou menor de substncias dependendo dessa presso ambiental.
Alm disso, deve-se considerar que, nas angiospermas, os diferentes rgos possuem funes
diferentes na planta, o que tambm pode levar a diferenciao qumica entre as diferentes
partes da planta.
Por essas razes, o estudo qumico de uma dada espcie no pode se limitar a um nico
rgo ou um nico exemplar. Isso particularmente aplicvel a plantas que possuem uma
grande rea de disperso.
O conjunto de dados morfolgicos e fitoqumicos tm resultado em uma excelente
ferramenta para a caracterizao de famlias, tribos e gneros de espcies vegetais. A presena
ou ausncia de certos produtos naturais tem sido amplamente utilizada para construir uma
classificao quimiotaxonmica, sempre tentando estabelecer uma correlao da qumica com
a morfologia das plantas.
1.1 A famlia Magnoliaceae e seu metabolismo secundrio

uma famlia de plantas dicotilednea pertencente ordem Magnoliales. composta


por 12 gneros e cerca de 220 espcies, largamente distribudas pelas regies tropicais e
subtropicais da sia e Amrica. Os maiores gneros so Magnolia (80 spp), Talauma (50 spp)
e Michelia (45 spp), que so facilmente diferenciados por seus caracteres vegetativos, florais e
frutferos (TRINTA & SANTOS, 1996; CRONQUIST,1981).

3
No Brasil so encontradas algumas espcies de Talauma, Magnolia e Michelia. Dessas
somente Talauma nativa, enquanto que, as outras foram trazidas e so cultivadas como
ornamentais (LOZANO-CONTRERAS, 1990).
A famlia Magnoliaceae tem atrado grande interesse de muitos botnicos, por ser
considerada uma das mais primitivas de todas as angiospermas (rvore com flor), um registro
fssil que mostra uma longa histria evolutiva de 100 milhes de anos (KIM et al., 2001).
Diversos estudos qumicos mostraram que a famlia Magnoliaceae produz
principalmente alcalides, sesquiterpenos e lignides (LE RAY et al., 1989; OGURA et
al.,1978; VIEIRA et al., 1998).
1.1.1

Alcalides

Constituem um vasto grupo de metablitos com grande diversidade estrutural,


representando cerca de 20% das substncias naturais descritas.
Embora o primeiro alcalide conhecido tenha sido isolado de humanos, as fontes mais
reconhecidas so os microorganismos, os animais marinhos e principalmente os vegetais
superiores, onde so encontrados em aproximadamente 14% dos gneros representantes de
todos os grupos vegetais, estando amplamente distribudos em angiospermas e mais restritos
nas talfitas, nas pteridfitas e nas gimnospermas.
Os alcalides so bases orgnicas nitrogenadas, por ter o tomo de nitrognio de
maneira geral oriundo dos aminocidos (alcalides verdadeiros e protoalcalides) e o anel
heterocclico formado fornece a base para sua classificao qumica. Os aminocidos proticos
comumente utilizados na biossntese dos alcalides so: cido asprtico (piridinas,
isoquinolenas),

lisina

(piperidinas,

quinolizidinas),

tirosina

(isoquinolinas,

benzilisoquinolinas, betalanas), triptofano (derivados da triptamina, -carbolinas, indis


complexos) e histidina (imidazis). O aminocido no-protico ornitina d origem aos
alcalides com ncleos pirrolidnicos, pirrolizidnicos e tropnicos. O aminocido fenilalanina
no d origem a muitos alcalides, contudo normalmente a origem de anis aromticos em
alcalides complexos e pode tambm contribuir como fonte de grupamento -amino em
muitas estruturas.

4
Alm dos aminocidos, outros precursores tais como terpenos ou esterides podem ser
tambm incorporados na construo do esqueleto final dos alcalides (pseudoalcalides)
(SIMES et al., 2004).
Os alcalides benzilisoquinolnicos e aporfnicos, freqentemente encontrados em
Magnoliaceae, so biossintetizados a partir do aminocido tirosina vindo da via metablica do
chiquimato (Figura 1) (KUBITZKI et al., 1993; GUINAUDEAU et al., 1975).
Essa classe apresenta um amplo espectro de atividades biolgicas tanto para a planta,
atuando como hormnios reguladores de crescimento, proteo contra a irradiao UV, insetos
e microrganismos, quanto para o homem em aplicaes teraputicas para a sntese de frmacos
(SIMES et al., 2004).
Um dos alcalides mais comuns em Magnoliaceae a liriodenina (16) (Figura 6,
pg. 14) que apresenta atividades como antimicrobiana, sedativa, hipotensiva, analgsica,
antileucemica, antitumoral, entre outras (MONTEIRO et al., 2007; RIOS et al., 1989).

5
H+
PEP
CO 2H

CO2H
PO
ATP

HO

OH

..
OH

PO

OH
cido chiqumico

CO 2H

CO2H
EPSP
sintase

H
PO

O
OH

OH
3-P cido chiqumico

-HOP

HO2C

CO2H

CH2COCO 2H

2,4-eliminao do
cido fosfrico

sigmatrpico

- CO2
CH2COCO2H

cido fenilpirvico
PLP
CO2H
CH2C NH2
H
[O]

fenilalanina

CO2H

PLP
HO2C

CO2H

1,2-eliminao do
cido fosfrico

CO2H

PO

OH

CO2H

OH
EPSP

cido corsmico

cido prefenico

OP

-HOP

Rearranjo [3,3]

OH

NH2

CH2CHCO2H

OH
cido L-arogenico
- CO 2
CH2C

CO 2H
NH2
H

NR
2

2
OH
tirosina

Alcalides
bisbenzilisoquinolnicos

Alcalides benzilisoquinolnicos

acoplamento
[O] oxidativo

NR

Alcalides aporfnicos

Figura 1: Rota biossinttica do cido chiqumico (DEWICK, 2002; DEY & HARBORNE,

1997). (ATP: adenosina trifosfato; PEP: Fosfoenolpiruvato; EPSP: cido 5-enolpiruvilchiqumico 3-fosfato; CO2: descarboxilao; PLP: transaminao; PAL: enzima fenilalanina amnia liase; NADPH: reduo;
[O]:oxidao).

6
1.1.2 Terpenides

Abrangem uma grande variedade de substncias de origem vegetal, sendo encontrados


principalmente em Asteraceae, mas tambm esto presentes em outras famlias, como
Apiaceae, Magnoliaceae e Lauraceae, apresentando importncia ecolgica como defensores de
plantas, assim como para o homem em vrias aplicaes teraputicas importantes.
Os terpenides so derivados de unidades de isopreno (C-5), cuja origem biossinttica
vem da rota do cido mevalnico e so classificados como hemiterpenides (C-5),
monoterpenides (C-10), sesquiterpenides (C-15), diterpenides (C-20), sesterpenides (C25), triterpenides (C-30), esterides (C-18 a C-30) e tetraterpenides, carotenides (C-40)
(Figura 2) (DEWICK, 2002).
O nmero de compostos terpnicos conhecidos ultrapassa a 8.000 que apresentam uma
grande variedade estrutural, podendo ser acclicos, monocclicos e bicclicos, alm de
apresentar hidrocarbonetos insaturados, lcoois, aldedos ou cetonas, lactonas e tropolonas
(SIMES et al., 2004).
O
HO
O
HO

OH O

cido mevalnico
(MVA)

2 x ATP
H

O
O

OH

ADP

OH
ATP
OPP - CO 2

+
H

isomerase

OPP
H
H
isopentenil PP
(IPP)

OPP
dimetilalil PP
(DMAPP)
prenil
transferase

geranil PP
(GPP)

OPP

(C-10)

IPP
(C-15)

farnesil PP
(FPP)

OPP

IPP
(C-20)

geranilgeranil PP
(GGPP)

OPP

Figura 2: Rota biossinttica do cido mevalnico (DEWICK, 2002; DEY & HARBORNE,

1997).

7
Os monoterpenos so constituintes freqentes nos leos essenciais (cerca de 90% dos
leos volteis). Outros terpenides, como os diterpenos, so encontrados apenas em leos
volteis extrados com solventes orgnicos. Os sesquiterpenos, em geral, apresentam funes
protetoras contra fungos e bactrias, enquanto muitos diterpenides do origem aos hormnios
de crescimento vegetal. Os triterpenides e seus derivados, os esterides, apresentam uma
gama de funes. Muitos tm funo de proteo contra herbvoros, alguns so antimitticos,
e outros atuam na germinao das sementes e na inibio do crescimento da raiz
(HARBORNE & BAXTER, 1995).
Os leos essenciais em plantas foram considerados por muito tempo como
desperdcio fisiolgico, ou mesmo produtores de desintoxicao, como eram vistos os
produtos do metabolismo secundrio. Atualmente, considera-se a existncia de funes
ecolgicas, especialmente como inibidores da germinao, na proteo contra predadores, na
atrao de polinizadores, na proteo contra perda de gua e aumento da temperatura.
Existem trabalhos demonstrando que a toxicidade de alguns componentes dos leos
volteis constitui uma proteo contra predadores e infestantes. Os monoterpenos, mentol (1) e
mentona (2), isolado de Mentha arvensis (Lamiaceae), por exemplo, so inibidores do
crescimento de vrios tipos de larvas (SIMES et al., 2004).
Alguns sesquiterpenos como o micheliolido (3), isolado de Michelia compressa
(Magnoliaceae) apresentou atividade citotxica em cultura de clulas de carcinoma de
nasofaringe (OGURA, 1978). O diterpeno, taxol (4), isolado de Taxus brevifolia (Taxaceae),
uma importante droga com propriedade anticancergena que age na inibio da mitose (Figura
3) (DEWICK, 2002).

OH

(1)

(2)

OH H
O
(3)

(4)

Figura 3: Terpenos com atividade biolgica na planta e no homem.

1.1.3 Lignides

Entre os mais importantes grupos de metablitos secundrios vegetais citam-se


tradicionalmente os alcalides, os terpenides e os flavonides, mas recentemente ficou claro
que os lignides tambm ocupam um lugar de destaque, por estar amplamente distribudo no
reino vegetal, apresentando importncia no s para as plantas que as produzem, servindo
como marcadores do processo evolutivo, como para o homem que as extrai ou sintetiza, fato
que j levou a aplicaes teraputicas importantes (GOTTLIEB & YOSHIDA, 1984).
um grupo com uma grande variao estrutural resultando na grande diversidade de
classes encontrados na natureza como lignanas, neolignanas, alolignanas, norlignanas,
oligolignides e heterolignides, sendo as lignanas e neolignanas as classes mais numerosas.
Os lignides so micromolculas cujo esqueleto formado exclusivamente, ou
adicionalmente a outros grupos, pelo grupo fenilpropnico (C6.C3)n, sendo n restrito a poucas
unidades, 1 a 3.

9
Sua ocorrncia na natureza se limita a plantas vasculares que possuem o tecido
enriquecido por ligninas, macromolculas dotadas de um esqueleto em (C6.C3)n, n abrangendo
usualmente muitas unidades, de 2 at talvez 5000, que se depositam nas paredes das clulas
vegetais, conferindo a estas notveis rigidez (GOTTLIEB & YOSHIDA, 1984).
A biossntese dos lignides envolve os metablitos primrios finais da via metablica
do chiquimato. O caminho biossinttico dos arilpropanides, precursores primrios dos
lignides, desenvolve-se a partir da fenilalanina ou da tirosina, pela via redutora, que envolve
a formao de cidos cinmicos, aldedos cinmicos e lcoois cinamlicos. Se o lcool for
convertido a pirofosfato, o ter resultante ser altamente susceptvel ao ataque nucleoflico,
fato conhecido em muitas redues biolgicas. A ao enzimtica de NADPH conduziria aos
alil e propenil fenis. Portanto, quatro monmeros esto envolvidos no acoplamento oxidativo
do processo biogentico dos lignides: cido cinmico, lcool cinmlico, propenilfenis e
alilfenis (Figura 4).
As lignanas so dmeros formados atravs do acoplamento oxidativo de lcoois
cinamlicos entre si ou destes com cidos cinmicos, apresentando o carbono gama (C-9)
oxigenado, enquanto que as neolignanas so dmeros oxidativos de alilfenis e de
propenilfenis, entre si ou cruzados e no apresentam o carbono gama (C-9) oxigenado.
Assim o acoplamento oxidativo entre esses radicais (propenila, alila, cinamoila e
cinamila) seguidos da adio de um ou dois ons hidretos, adio de on hidreto mais hidroxila
inter ou intramolecular e ciclizao e aromatizao, produzem a vrios tipos de neolignanas e
lignanas. Aspectos configuracionais desempenham um papel de grande importncia na
qumica e bioqumica dos lignides. Com algumas excees, possuem dois, trs, cinco e at
mais centros assimtricos. Os grupos arila dos precursores so comumente substitudos por
grupos hidroxila, metoxila e metilenodioxi, por exemplo, guaiacila (3-OCH3, 4-OH), veratrila
(3,4-OCH3), piperonila (3,4-O2CH2), metxi-piperonila (3-OCH3, 4,5-O2CH2), siringila (3,5OCH3) e tri-metxi-fenila (3,4,5-OCH3) (SIMES et al., 2004).

10

CO2H
CH2C NH2
H

CO2H
CH2C NH2
H
[O]

OH
tirosina

fenilalanina
PAL

H
CHO

CO2H
NADPH

cido cinmico

CH2OH

NADPH

aldedo cinmico

H
+

[H]
lcool cinamlico

NADPH
[O]

NADPH
[O]

HO

HO
R
propenilfenol

R
alilfenol

Figura 4: Rota biossinttica dos fenilpropanides (DEWICK, 2002; SIMES et al., 2004).
(PAL: enzima fenilalanina amnia liase; NADPH: reduo; [H]: reduo; [O]: oxidao).

As lignanas foram detectadas em 75 famlias, estando bem representadas em


angiospermas e em poucas gimnospermas. J as neolignanas tm se concentrado em poucos
taxa morfologicamente aparentados como Magnoliales, Laurales e Piperales.

O elevado nmero de lignanas e neolignanas distribudas no reino vegetal leva


suposio de que as propriedades biolgicas dessas substncias sejam essenciais ao
desenvolvimento do prprio vegetal e ao controle deste sobre a vida cincunjacente. Por isso
no de admirar que tambm essas substncias possam ser aproveitadas diretamente pelo
homem ou servindo de modelo para a sntese de frmacos.
Com base em fitoqumica comparada, foi mostrado que os lignides so indicadores do
processo evolutivo em angiospermas e desempenham um papel na adaptao ecolgica. H
evidencias de que esse grupo de substncias esteja envolvido em interaes de plantas com
fungos, insetos ou com outras plantas, e tambm em aplicaes farmacolgicas. Sabe-se que
as neolignanas acumulam em madeiras como resposta a ferimentos mecnicos ou ao ataque de
microrganismos e que exibem propriedades de defesa contra insetos, como o efeito

11
antialimentar induzido pela pipereno (5), isolada de Piper futokadsura Siebold (Piperaceae),
enquanto que no homem algumas neolignanas possuem atividade biolgica comprovada,
como o magnolol (6), que sedativo e honoquinol (7), relaxante muscular, isolados de
Magnolia officinalis; e magnoshinina (8), antiinflamatria, isolada de Magnolia salicifolia

(GOTTLIEB & YOSHIDA, 1984). Muitas outras neolignanas, algumas com atividade
biolgica foram isoladas de Magnoliaceae (SONG E FISCHER, 1999). Recentemente as
neolignanas do tipo 2,5-diaril-3,4-dimetiltetrahidrofurano (Figura 8, pg. 16), isoladas em
Talauma hodgsonii, mostraram moderada, mas interessante atividade antitumoral e

imunomoduladora, provando que este tipo de neolignanas so uma fonte promissora de


compostos bioativos (NASCIMENTO et al., 2004). Algumas lignanas tambm possuem
atividade biolgica comprovada, como siringaresinol (9), com atividade antifngica, que foi
isolada de Michelia champaca (Magnoliaceae); e podofilotoxina (10), antimittico e
antineoplsico, isolada de Podophyllum hexandrum (Berberidaceae) (Figura 5) (MONTEIRO
et al., 2007; SIMES et al, 2004).

OH

H3CO

OH

OCH3

H3CO

OH

OH

OH

O
OCH3

(6)

(5)

(7)

OCH3

OCH3
O

H3CO

OH

OCH3

OCH3

H3CO

(8)

H3CO

O
O
O
O

OCH3

O
H3CO

HO

OCH3

OH

OCH3

OCH3
OCH3

(9)

(10)

Figura 5: Neolignanas e lignanas com atividade biolgica na planta e no homem.

12
1.2 O gnero Talauma Juss

O gnero constitudo por cerca de 50 espcies que vo da sia at o Arquiplogo


Malaio e na Amrica tropical, do sul do Mxico at o Brasil.
Talauma o nico nativo do Brasil, sendo reconhecidas quatro espcies brasileiras: T.
ovata St. Hil., T. sellowiana St.Hil., T. irwiniana G.Lozano-C. e T. amazonica Ducke

(TRNTA & SANTOS, 1996).


A qumica desse gnero ainda pouco explorada, com relativamente poucas espcies
com algum tipo de estudo qumico.
Os primeiros estudos qumicos no gnero foram realizados com T. mexicana,
conhecida como yolloxochitl. Das flores foram extrados leo essencial, o flavonide
quercetina (46), resinas e taninos. Na anlise qumica das sementes e cascas foram
encontrados trs alcalides: talaumina, um alcalide lquido e espesso de cor amarela, de
estrutura desconhecida; aztequina (18), um alcalide do tipo bisbenzilisoquinolnico, cuja
proposta de estrutura qumica foi motivo de controvrsia e at mesmo sua existncia
permanece em dvida; liriodenina (16), um aporfinico e tiramina (45), uma monoamina
derivada do aminocido tirosina. Tambm foram isolados: o esteroide sitosterol (27), a lactona
sesquiterpnica costunolido (23), e as substncias p-hidroxibenzofenona (47), cido trimsico
(48) e quercitol (49). Uma reviso dos estudos qumicos e farmacolgicos conduzidos com
esta espcie foi publicada recentemente (BUCAY, 2002).
T. hodgsonii teve dois estudos qumicos. O primeiro, realizado com folhas, cascas

do tronco e das razes resultou no isolamento dos alcalides aporfnicos liriodenina (16) e
lanuginosina (17), e das lignanas, sesamina (31), fargesina (32) e o ter dimetlico do
pinoresinol (33), alm de sitosterol (27) (TALAPATRA et al., 1977). Posteriormente, em
outro estudo, foram isoladas trs neolignanas do tipo 2,5-diaril-3,4-dimetiltetrahidrofurano:
galbacina (28), talaumidina (29) e ter metlico da talaumidina (30) (VIEIRA et al., 1998).
T. obovata teve apenas um estudo qumico das cascas do tronco, que rendeu os

alcalides aporfnicos asimilobina (11), anolobina (12), xilopina (13) e lanuginosina (17)
(PLANTINET et al., 1985).
As cascas do tronco de T. betongensis forneceram duas lignanas do tipo
tetrahidrofurofuranoide:

aschantina

(34)

yangambina

(35);

um

alcalide

bisbenzilisoquinolinico: cuspidalina (19) e quatro alcalides aporfnicos, comuns em

13
Magnoliaceae: asimilobina (11), anolobina (12), norushinsunina (15) e liriodenina (16) (LE
RAY et al.,1989).
As folhas de T. gitingensis forneceram os alcalides aporfinicos, xilopina (13),
anonaina (14) e liriodenina (16) (NONATO et al., 1990).
As espcies T. gii e T. gloriensis tiveram apenas estudos de leo essencial. Em T. gii
predominam os terpenos nos leos essenciais de folhas e tronco e fenilpropanides nos leos
de cascas e frutos. Os constituintes principais foram cnfora (21), -cariofileno(22), elimicina
(50), metileugenol (51) e safrol (52) (DUNG et al. 1997). O leo das folhas de T. gloriensis
constitudo apenas de terpenos, predominando mirceno (20) e germacrano D (24) (HABER et
al., 2008).

Estudos biolgicos e farmacolgicos foram realizados com algumas dessas plantas. Em


T. mexicana o efeito cardioativo das folhas foi atribudo aos alcalides aztequina (18) e

talaumina (BUCAY, 2002). Em T. gloriensis o leo essencial das folhas mostrou notvel
toxicidade para o teste de letalidade para artemia, mas foi desprovido de atividade citotoxica e
antibacteriana (HABER et al., 2008).
Um estudo in vitro com o extrato diclorometnico das folhas de Talauma hernandezii,
demonstrou uma forte capacidade antioxidante. Este resultado sugere que esta planta pode
prevenir ou retardar a formao de radicais relacionados com estresse oxidativo, e talvez ter
um importante papel na proteo contra danos de funes de membrana (PUERTAS et al.,
2005).

14

Alcalides noraporfnicos

Alcalides oxaporfnicos
O

R1
NH

R2

R3

R1

R4
(11) R1=OH, R2=OCH3, R3=H, R4=H (T.betongensis, T.obovata)

(16) R1=H (T.betongensis, T.mexicana,


T. hodgsonii, T.gitingensis)

(12) R1=R2=OCH2O, R3=H, R4=OH (T.betongensis, T.obovata, T.ovata)


(13) R1=R2=OCH2O, R3=H, R4=OCH3 (T.obovata, T.gitingensis, T.ovata)

(17) R1=OCH3 (T.obovata, T.hodgsonii)

(14) R1=R2=OCH2O, R3=R4=H (T.gitingensis)


(15) R1=R2=OCH2O, R3=OH, R4=H (T.betongensis)

Alcalides bisbenzilisoquinolnicos
H3CO

H3CO

NCH3

HO

HO

NCH3
N

HO
O

O
OCH3

HO

HO
H3CO

(18) T.mexicana

OH

Figura 6: Alcalides isolados de Talauma spp.

(19) T.betongensis

OCH3

15

Terpenides

(20) T.gloriensis

(21) T gii

(22) T.gii

O
O
(23) T.mexicana

(24) T.gloriensis

T.ovata

T.ovata

(25) T.ovata

H
H
HO

(27) T.mexicana
T.hodgsonii

Figura 7: Terpenides isolados de Talauma spp.

(26) T.ovata

16

Neolignanas
Diarildimetiltetrahidrofurano (8.8,7.O.7)

Lignanas
Tetrahidrofurofurano
(8.8,9.O.7,7.O.9)
R4
R5

O
R6

R1

O
O

R2

R1
O
R2

(28) R1=R2=OCH2O (T.hodgsonii)


(29) R1=OH, R2=OCH3 (T.hodgsonii)
(30) R1=OCH3, R2=OCH3 (T.hodgsonii)

R3
(31) R1=R2=R5=R6=OCH2O, R3=R4=H (T.hodgsonii)
(32) R1=R2=OCH3, R5=R6=OCH2O, R3=R4=H (T.hodgsonii)
(33) R1=R2=R5=R6=OCH3, R3=R4=H (T.hodgsonii)
(34) R1=R2=OCH2O, R3=H, R4=R5=R6=OCH3 (T.betongensis)
(35) R1=R2=R3=R4=R5=R6=OCH3 (T.betongensis)

Neolignana
Benzofuranica (7.O.4, 8.5)

Neolignanas
Diarildimetilbutano (8.8)
R
R1

O
R2

OCH3

HO
OCH3
R3
R4

(36) R = H; R1 = R3 = OCH3; R2 = R4 = OH (T.ovata)


(37) R = H; R1 = R2 = OCH2O; R3 = OCH3; R4 = OH (T.ovata)
(38) R = H; R1 = R2 = R3 = R4 = OCH2O (T.ovata)
(39) R = OH; R1 = R2 = R3 = R4 = OCH2O (T.ovata)
(40) R = R4 = OH; R1 = R2 = OCH2O; R3 = OCH3 (T.ovata)
(41) R = OAc; R1 -=R2 = R3 = R4 = OCH2O (T.ovata)
(42) R = OAc; R1 = R2 = OCH2O; R3 = OCH3; R4 = OH (T.ovata)
(43) R = OAc; R1 = R2 = R3 = OCH3; R4 = OH (T.ovata)

Figura 8: Lignides isolados de Talauma spp.

(44) T.ovata

17

HO

NH2

HO

HO

OH

HO
O
(46) T.mexicana

(45) T.mexicana

OH

OH
(47) T.mexicana

HO

OH

HO

OH

HO

OH

H3CO
R

OH

OH

(48) T.mexicana

OCH3

(49) T.mexicana

(50) R=OCH3 (T.gii)

O
O

(52) T.gii

(51) R=H (T.gii)

Figura 9: Substncias de outras classes isoladas de Talauma spp.

1.3 Talauma ovata A. St. Hil.


T. ovata uma espcie brasileira, que dentro do gnero Talauma a que possui maior

disperso, ocorrendo em todo o centro-sul do Brasil, nas florestas do Sudeste e Sul,


acompanhando o litoral at o Rio Grande do Sul e na regio dos cerrados perto de rios, onde
habita as florestas de galeria at o norte de Gois, Mato Grosso do Sul, Minas Gerais, Esprito
Santo, Rio de Janeiro, So Paulo, Paran, Santa Catarina e Rio Grande do Sul (TRINTA &
SANTOS, 1996; LOZANO-CONTRERAS, 1990).
uma rvore de grande porte de tronco retilneo, que atinge 20-30 m de altura, 60-90
cm de dimetro (Figura 10A) com ramificaes cimosas, grossas, tortuosas, com copa ampla
e densifoliada. Folhas de 25-30 cm de comprimento, com lminas coriceas, ovadas,
largamente elticas ou obovado-arredondadas, pice obtuso at agudo, fortemente reticuladas e
longamente pecioladas at 6,5 cm de comprimento (Figura 10B). Produz flores grandes,

18
terminais, solitrias, hermafroditas, brancas e aromticas durante os meses de outubro at
meados de dezembro, que so polinizadas por besouros dinastdeos do gnero Augoderia
(Figura 10B). A maturao dos frutos ocorre entre agosto e setembro. Os frutos so grandes e
lenhosos, semelhantes a uma pinha (Figura 10C). Quando maduros se abrem, expondo as
sementes vermelhas, que so consumidas e dispersadas por pssaros, principalmente sabis.
Devido forma do fruto e a preferncia por reas alagadias na beira de rios (matas ciliares),
essa planta recebeu o nome popular de pinha-do-brejo, mas tambm conhecida como
baguau (LORENZI, 2002). As folhas so empregadas na medicina popular para o tratamento
de diabetes e a casca do tronco considerada febrfuga (MORS et al., 2000).
A rvore apresenta caractersticas ornamentais que o recomendam para o paisagismo
em geral. Como planta pioneira adaptada a terrenos brejosos, tima para reflorestamentos
mistos em reas ciliares degradadas destinados recomposio da vegetao. Suas sementes
oleaginosas, com teor de at 40%, poderia ser utilizado como lubrificante ou combustvel. Sua
madeira tem diversas finalidades, entre elas o emprego na industria da caixotaria pequena para
perfumes, brinquedos, espulas, forros, obras internas de carpintaria, lambril, caixo-dedefunto, embalagens e caixotaria em geral (TRINTA & SANTOS, 1996; LORENZI, 2002).

(A)

(B)

(C)

Figura 10 (A) Foto da rvore. (B) Foto da folha e flor. (C) Foto do fruto e semente

de Talauma ovata.

19
Os estudos fitoqumicos j realizados mostraram que a qumica desta espcie bastante
diversificada. O primeiro trabalho publicado foi realizados por pesquisadores americanos, que
isolaram o costunolido (23) a partir das razes (HOFFMAN et al., 1977).
Posteriormente as folhas tambm foram analisadas. A partir de um exemplar do estado
de So Paulo foram isoladas as lactonas sesquiterpnicas costunolido (23) e partenolido (25) e
as neolignanas oleiferina-C (39) e licarina-A (44) (TOMA, 1988).
Um estudo qumico realizado com as cascas do tronco levou ao isolamento de treze
substncias, pertencentes a trs classes diferentes: dois alcalides aporfnicos, anolobina (12) e
xilopina (13); trs sesquiterpenos, costunolido (23), partenolido (25) e ciclocolorenona (26);
oito neolignanas do tipo diarildimetilbutano, c.dihidroguaiartico (36), austrobailignana-6
(37), austrobailignana-5 (38), oleiferina-C (39) e oleiferina-F (40), acetil-oleiferina-C (41),
acetil-oleiferina-F (42) e acetil-oleiferina-G (43) (STEFANELLO et al., 1997; 2002). Alm
disso, foi demonstrado que nas cascas do tronco a presena predominante de sesquiterpenos ou
neolignanas estava relacionada ao local de crescimento da planta. Plantas crescendo ao norte
do Rio Grande, em Minas Gerais, acumulam neolignanas enquanto as plantas que crescem ao
sul acumulam sesquiterpenos, esses dois quimiotipos podem ter se desenvolvido devido ao
isolamento geogrfico das populaes. (STEFANELLO et al., 2005).
Os constituintes volteis dos frutos foram estudados pelo mtodo de aerao, e o
constituinte principal foi identificado como naftaleno (STEFANELLO & MELLO-SILVA,
2005). Vrios sesquiterpenos no oxigenados tambm estavam presentes como constituintes
minoritrios, entre eles o germacrano D (24), que tambm foi encontrado no leo essencial das
folhas de T. gloriensis.
Alguns estudos farmacolgicos tambm foram realizados com T. ovata. O primeiro
estudo foi com o extrato em ter de petrleo das razes, que mostrou atividade citotxica in
vitro. A atividade foi atribuda presena de costunolido (23) (HOFFMANN et al., 1977).

O extrato etanlico das folhas tambm foi avaliado quanto a sua atividade
antidiabtica. Essa atividade no foi comprovada, mas os extratos das folhas mostraram
elevada toxidez relacionada com a presena de alcalides e saponinas. Entretanto os
compostos no foram isolados e identificados (MORATO et al., 1989). possvel que a
indicao popular para o tratamento de diabetes seja um engano causado por um dos nomes
populares atribudos a T. ovata (baguau). Algumas espcies de Myrtaceae (Syzygium cumini
(L.) Skeeels e Eugenia umbelliflora Berg) tambm so conhecidas como baguau e so

20
freqentemente usadas na medicina popular como hipoglicemiantes (TRINTA & SANTOS,
1996).
O leo essencial extrado das folhas apresentou atividade txica para os leuccitos e
atividade antimicrobiana para Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa (APEL et
al., 2006).

O extrato hexnico dos galhos de T. ovata apresentou uma atividade moderada contra
Rhodnis milesi, que um dos vetores na transmisso da doena de Chagas (COELHO et al.,

2006).
2. OBJETIVOS

Realizar o estudo fitoqumico e avaliar as atividades antimicrobiana e antioxidante das


folhas de um exemplar de T. ovata do estado de So Paulo, a fim de contribuir para ampliar o
conhecimento da qumica e das propriedades farmacolgicas desta espcie.
3. MATERIAIS E MTODOS
3.1 Procedimentos gerais

Nas separaes por cromatografia clssica em coluna (CC) utilizou-se Slica-gel 7734
da Merck ou similar. A proporo de slica utilizada para empacotar a coluna foi de
aproximadamente 20 vezes a massa da amostra a ser purificada.
Para a cromatografia em camada delgada, placas cromatogrficas foram preparadas
espalhando-se uma suspenso de slica-gel em gua destilada sobre placas de vidro, usando-se
um espalhador do tipo Quickft. Nas placas de cromatografia em camada delgada comparativa
(CCDC) foi usada a espessura de 0,25 mm e nas preparativas (CCDP), 1,00 mm de espessura.
A Slica-gel utilizada foi 7747 (60PF 254).
As placas foram reveladas sob luz ultravioleta nos comprimentos de onda 254 e 366
nm e soluo de cido sulfrico em etanol a 5% (revelador universal) seguida por aquecimento
(HARBONE, 1998).

21
Foram usados solventes PA da marca Synth, tanto para a eluio como para a
purificao dos compostos. Os solventes foram evaporados sob presso reduzida, usando-se
evaporador rotativo.
As fraes obtidas de colunas foram agrupadas por semelhana aps anlise por
CCDC. O critrio de pureza adotado foi o aparecimento de uma nica mancha quando a
substncia era submetida a CCDC em trs diferentes sistemas de solventes.
As substncias isoladas foram identificadas atravs de tcnicas espectromtricas (RMN
1

de H e 13C{1H}, HSQC, HMBC, UV e IV) bem como comparao com dados da literatura.
Os espectros de RMN de 1H e 13C{1H} obtidos foram registrados em um espectrmetro
Brucker, operando a 200 MHz e a 400 MHz para hidrognio e 100MHz e a 50 MHz para
carbono. O HSQC e HMBC foram registrados no aparelho operando a 400 MHz. Foi usado
aproximadamente 0,5 mL de clorofrmio deuterado como solvente e tetrametilsilano (TMS)
como referncia interna ( = 0 ppm) e ajuste da homogeneidade do campo magntico. Os
deslocamentos qumicos esto expressos em ppm () e so dados em relao ao TMS. As
constantes de acoplamento (J) foram medidas em Hertz (Hz).
Os espectros na regio do infravermelho foram obtidos em pastilhas de Brometo de
Potssio (KBr), em um espectrmetro Ftir Biorad (632,8 nm). As amostras foram previamente
dissolvidas em diclorometano e transferidas torno de 2 a 3 gotas para aproximadamente 150,0
mg de Brometo de Potssio (KBr), a mistura foi macerada em um gral e transferido para o
empastilhador, para ser confeccionado a pastilha.
Os espectros na regio ultravioleta foram registrados em espectrmetro Hewlett
Packard (HP) usando-se como solvente metanol.
As medidas de rotao especfica foram realizadas em polarmetro Rudolph Research,
modelo Autopol III com lmpada de sdio (589 nm) e clorofrmio como solvente,
temperatura de 20C. Os valores de rotao especfica foram calculados utilizando-se a
seguinte frmula

[]D20 =

rotao observada em graus x 100

comprimento da cubeta (dm) x concentrao g/100mL

Os pontos de fuso foram determinados no aparelho Koffer, de Reicheirt (ustria).


A medida da absorbncia dos ensaios para avaliao da atividade antioxidante foram
feitas em um espectrofotmetro com leitor de ELISA da marca Biotek, modelo Quanti em
um comprimento de onda () 517 nm.

22
3.2 Estudo Fitoqumico
3.2.1 Coleta e identificao do material botnico

As folhas de um exemplar de Talauma ovata foram coletadas em janeiro/2003,


cultivado no Bosque da Biologia da USP, So Paulo. A planta foi identificada pelo botnico
Dr. Renato Mello-Silva. Uma exsicata foi depositada no herbrio da USP (UPCB 1820).
3.2.2 Obteno dos extratos

O material fresco foi secado em estufa a 40C e modo. As folhas (442,0 g), foram
extradas, com solventes em ordem crescente de polaridade: hexano, diclorometano e etanol.
A extrao foi sucessiva e a frio. Os extratos resultantes foram filtrados e concentrados em
evaporador rotativo, obtendo-se os seguintes extratos: extrato das folhas em hexano (11,8 g),
extrato das folhas em diclorometano (9,1 g) e extrato das folhas em etanol (35,0 g). A anlise
comparativa por CCDC dos trs extratos (hexano, diclorometano e etanol), mostrou que os
extratos em hexano e diclorometano eram mais ricos em substncias e apresentavam
semelhanas em sua composio, sendo, portanto os extratos escolhidos para a analise.
3.2.3 Fracionamento dos extratos em hexano e diclorometano

O extrato em hexano das folhas, foi redissolvido em hexano e submetido partio


com metanol:gua 9:1. A frao hidroalcoolica (2,9 g) foi reunida ao extrato em
diclorometano, rendendo 12,0 g de material, que foi submetido a uma coluna rpida principal,
eluda com ter de petrleo puro, ter de petrleo: acetato de etila nas propores de 9:1, 8:2,
7:3, 1:1, acetato de etila puro e finalmente metanol puro. Foram recolhidas 7 fraes,
agrupadas em seis ( F1, F2-3, F4, F5, F6 e F7) aps anlise por CCDC e reveladas sob luz
ultravioleta e soluo de cido sulfrico em etanol a 5% seguida de aquecimento. As fraes
F2-3 (3,7 g) e F4 (1,4 g) foram trabalhadas, enquanto que as fraes F1 (0,070 g), F5 (1,0 g),
F6 (1,0 g) e F7 (0,743 g) continham apenas substncias alifticas de cadeia longa e foram
desprezadas (Esquema 1).

23

FOLHAS
(441,8 g)
Extrao a frio

Hexano
(11,77 g)

Etanol
(35,0 g)

Diclorometano
(9,14 g)

Partio

Metanol:H2O 9:1
(2,86 g)
CC

F1
(0,070 g)

F2-3
(3,7 g)

F5
(1,0 g)

F4
(1,4 g)

F6
(1,0 g)

F7
(0,743 g)

CC

1-7
(2,0 g)

8-11
(0,35 g)
CC, CCDP

To-10
(8,8 mg)

To-6
(11,4 mg)
Acetilao

To-8
(8,2 mg)
Acetilao

To-6a
(4,7 mg)

To-8a
(2,6 mg)

To-9
(3,5 mg)

To-11
(3,0 mg)

To-12
(1,2 mg)

Ciclizao

To-8b
(3,8 mg)

To-9a
(2,0 mg)

CC, CCDP

To-13
(7,3 mg)

To-7
(20,0 mg)

Acetilao

To-7a
(6,0 mg)

To-2
(3,0 mg)

To-1
(18,7 mg)

To-3
(2,0 mg)

To-5
(3,0 mg)

Ciclizao

To-7b
(2,0 mg)

Esquema 1 Fracionamento dos extratos em hexano e diclorometano

To-4
(1,5 mg)

24
3.2.4 Anlise detalhada do fracionamento das fraes F2-3 e F4

A frao F2-3 (3,7 g) foi cromatografada em coluna de slica-gel (70,0 g) eluida com
ter de petrleo:acetato de etila nas propores de 7:3 e 1:1 (v/v). Foram recolhidas 34
subfraes agrupadas em trs (1-7, 8-11 e 12-34).
A subfrao 1-7 (2,0 g) foi cromatografada em coluna de slica-gel (40,0 g) eluida com
hexano:acetato de etila nas propores de 9:1, 8:2 e 7:3 (v/v). Foram recolhidas 41 subfraes
agrupadas em sete (1-4, 5-10, 11-15, 16, 17-18, 19-22 e 23-41).
As subfraes 5-10 e 11-15 continham a mesma substncia impura. Escolheu-se para
trabalhar a subfrao 5-10 (65,0 mg), que por CCDP eluida com hexano:acetato de etila 1:0,1.
Obteve-se 7,3 mg da substncia To-13 (Esquema 2) .
A subfrao 17-18 (408,0 mg) foi cromatografada em coluna de slica-gel (8,2 g)
eluida com hexano:acetato de etila 4,5:1,0 (v/v). Foram recolhidas 19 subfraes agrupadas
em trs (1-5, 6-13 e 14-19). A subfrao 6-13 (217,0 mg) foi cromatografada em coluna de
slica-gel (4,3 g) eluida com diclorometano:acetato de etila 5:0,1 (v/v). Foram recolhidas 17
subfraes agrupadas em trs (1-2, 3-5 e 6-17). A subfrao 3-5 (36,0 mg) foi submetida a
uma CCDP eluida com hexano:acetona 8:2 (v/v), obtendo-se 20,0 mg da substncia To-7. Foi
feito uma reao de acetilao com 12,0 mg de To-7, obtendo-se 6,0 mg da substncia To-7a e
uma reao de ciclizao com 8,0 mg de To-7, obtendo-se 2,0 mg da substncia To-7b
(Esquema 3).

A subfrao 19-22 (562,0 mg) foi cromatografada em coluna de slica-gel (11,2 g)


eluida com diclorometano:acetato de etila 5:0,5 (v/v). Foram recolhidas 54 subfraes
agrupadas em quatro (1-2, 3-9, 10-17 e 18-54). A subfrao 3-9 (110,0 mg) foi submetida a
uma CCDP eluida trs vezes sucessivas com diclorometano puro, obtendo-se 10,0 mg de To-2
e 19,0 mg de To-1 (Esquema 4). A subfrao 10-17 (94,0 mg) foi cromatografada em coluna
de slica-gel (1,9 g) eluida com hexano:acetona 8:2 (v/v). Foram recolhidas 19 subfraes
agrupadas em cinco (1-4, 5-8, 9, 10-12, 19). As subfraes 5-8 (17,0 mg) e 10-12 (6,0 mg)
foram submetidas a CCDP eluida com hexano:acetona 8:2 (v/v), obtendo-se 2,0 mg de To-3,
3,0mg de To-5 e 1,5 mg de To-4 (Esquema 5).
A subfrao 8-11 (0,35 g), vinda da frao F2-3, foi agrupada com a frao F4 (1,4 g)
da coluna principal, rendendo 1,75 g de material, que foi cromatografada em coluna de slica-

25
gel (35,0 g) eluida com hexano:acetona nas propores de 8:2 e 7:3 (v/v). Foram recolhidas 55
subfraes agrupadas em cinco ( 1-5, 6-9, 10-13, 14-21 e 22-55).
A subfrao 6-9 (128,0 mg) foi cromatografada em coluna de slica-gel (2,6 g) eluida
com diclorometano:acetona 9,8:0,2 (v/v). Foram recolhidas 73 subfraes agrupadas em
quatro (1-14, 15-24, 25-45, 46-73. As subfraes 15-24 (42,0 mg) e 25-45 (20,0 mg)
continham as mesmas substncias que por CCDP foram eluidas com hexano:acetato de
etila:metanol 8:2:1 (v/v), obtendo-se 8,8 mg de To-10, 11,4 mg de To-6 e 8,2 mg de To-8
(Esquema 6). Com 10,0 mg de To-6 foi feito uma reao de acetilao, obtendo-se 4,7 mg de
To-6a. Com 3,7 mg de To-8 foi feito uma reao de acetilao, obtendo-se 2,6 mg de To-8a e

com 4,5 mg de To-8 foi feito uma reao de ciclizao, obtendo-se 3,8 mg de To-8b.
A subfrao 10-13 (16,0 mg) foi submetida a uma CCDP eluida com ter etlico:ter de
petrleo 3:2 (v/v), gerando 8 manchas (A, B, C, D, E, F, G, H). A mancha E continha 3,5 mg
de To-9 impura. Na espera para a realizao dos experimentos HSQC e HMBC To-9 ciclizou
espontaneamente no tubo. Foi feito uma CCDP eluida com hexano:diclorometano:metanol
5:5:0,5 (v/v), para purific-la, obtendo 1,0 mg de To-9a (Esquema 7).
A subfrao 14-21 (81,0 mg) foi submetida a uma CCDP eluida com hexano:acetona
8:2 (v/v), obtendo-se 3,0 mg de To-11 e 1,2 mg de To-12 (Esquema 8).
3.2.5 Transformaes qumicas

.
Acetilao com anidrido actico e piridina (To-6, To-7 e To-8)

Os compostos To-6 (10,0 mg), To-7 (12,0 mg) e To-8 (3,7 mg) foram dissolvidos,
separadamente, em 0,1 mL de piridina e 1,0 mL de anidrido actico. O frasco foi fechado e
deixado em repouso, a temperatura ambiente, por 24 horas. Aps esse tempo foi adicionado 5
mL de uma soluo aquosa de cido clordrico a 5% e a mistura extrada com diclorometano
(3 vezes 5 mL). A fase aquosa foi desprezada. A fase orgnica foi lavada com gua destilada
(3 vezes 5 mL) e secada com sulfato de sdio anidro. A evaporao do solvente forneceu os
produtos acetilados: To-6a (4,7 mg), To-7a (6,0 mg) e To-8a (2,6 mg).

26
Ciclizao em meio cido (To-7 e To-8)

Os compostos To-7 (8,0 mg) e To-8 (4,5 mg) foram dissolvidos em cerca de 2,0 mL de
diclorometano. O catalisador, cido p-toluenosulfnico (0,5 mg) foi dissolvido no menor
volume possvel de diclorometano e adicionado soluo da amostra. A mistura reacional foi
deixada em repouso temperatura ambiente. Aps duas horas foi verificado atravs de
cromatografia em camada delgada que a reao havia se completado. Foi ento adicionado 2,0
mL de uma soluo de bicarbonato de sdio a 20% e a mistura extrada com diclorometano. A
fase aquosa foi desprezada. A fase orgnica foi secada com sulfato de sdio anidro. A
evaporao do solvente forneceu os produtos ciclizados: To-7b (2,0 mg) e To-8b (3,8 mg).
Os esquemas a seguir correspondem s purificaes por CC e/ou CCDP, resultando no
isolamento das substncias cujas subfraes destacadas o produto natural isolado ou o
derivado.

Esquema 2 Obteno da substncia To-13 a partir da subfrao 5-10


subfrao 5-10
(65,0 mg)
2 CCDP (32,0 mg cada)
hex:act 1:0,1

B
(7,3 mg)
To-13

27
Esquema 3 Obteno das substncias To-7, To-7a e To-7b a partir da subfrao 17-18
subfrao 17-18
(408,0 mg)
CC
hex:act 4,5:1,0

1-5

6-13
(217,0 mg)

14-19

CC
CH2Cl2:act 5:0,1

1-2

3-5
(36,0 mg)

6-17

CCDP
hex:acetona 8:2

A
(20,0 mg)
To-7
Acetilao

To-7a
(6,0 mg)

Ciclizao

To-7b
(2,0 mg)

28
Esquema 4 Obteno das substncias To-1 e To-2 a partir da subfrao 19-22

subfrao 19-22
(562,0 mg)
CC
CH2Cl2:act 5:0,05

1-2

3-9
(110,0 mg)

10-17
(94,0 mg)

18-54

2 CCDP
CH2Cl2 puro (3x)

A
(19,0 mg)
To-1

C
(10,0 mg)
To-2

29
Esquema 5 Obteno das substncias To-3, To-4 e To-5 a partir da subfrao 19-22

subfrao 19-22
(562,0 mg)
CC
CH2Cl2:act 5:0,05

1-2

3-9
(110,0 mg)

18-54

10-17
(94,0 mg)

CC
hex:acetona 8:2

1-4

5-8
(17,0 mg)

10-12
(6,0 mg)

19

CCDP
hex:acetona 8:2

CCDP
hex:acetona 8:2

B
(1,5 mg)
To-4

A
(2,0 mg)
To-3

D
(3,0 mg)
To-5

30
Esquema 6 Obteno das substncias To-6, To-6a, To-8, To-8a, To-8b e To-10 a partir
da subfrao 6-9

subfrao 6-9
(128,0 mg)
CC
CH2Cl2:acetona 9,8:0,2

1-14

15-24
(42,0 mg)

46-73

25-45
(20,0 mg)

2 CCDP (31 mg cada)


hex:act:MeOH 8:2:1

A
(8,8 mg)
To-10

B
(11,4 mg)
To-6

Acetilao

To-6a
(4,7 mg)

C
(8,2 mg)
To-8

Acetilao

To-8a
(2,6 mg)

Ciclizao

To-8b
(3,8 mg)

31
Esquema 7 Obteno das substncias To-9 e To-9a a partir da subfrao 10-13

subfrao 10-13
(16,0 mg)
CCDP
EE:EP 3:2

E
(3,5 mg)
To-9

CCDP
hex: CH2Cl2:MeOH 5:5:0,5

D
(1,0 mg)
To-9a

Esquema 8 Obteno das substncias To-11 e To-12 a partir da subfrao 14-21

subfrao 14-21
(81,0 mg)
2 CCDP (40 mg cada)
hex:acetona 8:2

B
(3,0 mg)
To-11

C
(1,2 mg)
To-12

32
3.3 Dados fsicos e espectromtricos das substncias isoladas e derivados

To-1
(+)-licarina-A: leo amarelo; massa molecular: 326,15186 (C20H22O4)
[
]D20 = +47,68 (C=0,95 g.mL-1; CHCl3); Lit.: +43,5 (Nascimento et al., 2000)

RMN de 1H, 13C, HSQC, HMBC: Tabela 1 pg. 41; E1-4 pg. 42-43

To-2
(+)-acuminatina: leo amarelo; massa molecular: 340,16752 (C21H24O4)
[
]D20 = +25,55 (C=0,45 g.mL-1; CHCl3); Lit.: +8,5 (Nascimento et al., 1999)

RMN de 1H, 13C, HSQC, HMBC: Tabela 2 pg. 46; E5-8 pg. 47-48

To-3
(+)-aldedo derivado da licarina-A: leo amarelo; massa molecular: 314,11544 (C18H18O5)
[
]D20 = +30,0 (C=0,1 g.mL-1; CHCl3); Lit.: +28,6 (Nascimento et al., 1999)

RMN de 1H, HSQC, HMBC: Tabela 3 pg. 50; E9-11 pg. 51-52

To-4
(+)-kadsurenina-M: leo amarelo; massa molecular: 328,1311(C19H20O5)
[
]D20 = +14,0 (C=0,05 g.mL-1; CHCl3); Lit.: +25,1 (Nascimento et al., 1999; 2000)

RMN de 1H: Tabela 3 pg. 50; E12 pg. 52

To-5
(+)-oleiferina-C: leo amarelo; massa molecular: 342,14676 (C20H22O5)
[
]D20 = +6,0 (C=0,05 g.mL-1; CHCl3); Literatura: +44,0 (Fernandes et al., 1993)

RMN de 1H, HSQC, HMBC: Tabela 4 pg. 55; E13-15 pg. 56-57

33
To-6
(+)-oleiferina-A: leo amarelo; massa molecular: 358,17808 (C21H26O5)
[
]D20 = +35,4 (C=0,5 g.mL-1; CHCl3); Lit.: +41,4 (Fernandes et al., 1993)

RMN de 1H, 13C, HSQC, HMBC: Tabela 5 pg. 60; E16-19 pg. 61-62

To-6a
(+)-acetil-oleiferina-A: slido amorfo; massa molecular: 400,18864 (C23H28O6)
[
]D20 = +81,5 (C= 0,26 g.mL-1; CHCl3)
UV mx (MeOH) (log ): 285 (3,94); 232 (4,24); 208 ( 4,81); E20 pg. 65
IV mx (CH2Cl2) (cm-1): 2960; 2931; 1736; 1516; 1237; 1029; E21 pg. 65

RMN de 1H, 13C, HSQC, HMBC: Tabela 6 pg. 64; E22-25 pg. 66-67

To-7
(+)-talaumina-A (7S*, 8R*,8R* - 3,4: 3,4-bis-(metilenodioxi)-lignana-7-ol): leo incolor;

massa molecular: 342,14676 (C20H22O5); [


]D20 = +27,33 (C=0,15 g.mL-1; CHCl3)
UV mx (MeOH) (log ): 291 ( 3,78); 239 (3,85); 208 (4,59); E26 pg. 71
IV mx (CH2Cl2) (cm-1): 3434; 2962; 2889; 1491; 1248; 1034; E27 pg. 71

RMN de 1H, 13C, HSQC, HMBC: Tabela 7 pg. 70; E28-31 pg. 72-73

To-7a
(+)-acetil-talaumina-A: slido branco; massa molecular: 384,15732 (C22H24O6)
P.f.=50-53C; [
]D20 = +34,3 (C=0,3 g.mL-1; CHCl3)
UV mx (MeOH) (log ): 291,07 (4,12); 239,94 (4,18); 207,99 (4,87); E32 pg.77
IV mx (CH2Cl2) (cm-1): 2962; 2925; 1736; 1488; 1248; 1043; E33 pg. 77

RMN de 1H, 13C, HSQC, HMBC: Tabela 8 pg. 76; E34-37 pg. 78-79

34
To-7b
(-)-isocagaianina : (7R*, 8 R*, 8R* - 3,4: 3,4 bis- (metilenodioxi)-6,7-ciclolignana)

leo incolor; massa molecular: 324,1362 (C20H20O4); [


]D20 = -48,0 (C=0,1 g.mL-1; CHCl3)
UV mx (MeOH) (log ): 293,85 (3,74); 244,15 (3,78); 209,98 (4,53) ; E38 pg. 81
IV mx (CH2Cl2) (cm-1): 2960; 2923; 1486; 1232; 1040; E39 pg. 81

RMN de 1H, 13C, HSQC, HMBC: Tabela 9 pg. 80; E40-43 pg. 82-83

To-8
(+)-talaumina-B (7S*, 8R*,8R* - 3,4- dimetoxi- 3,4-metilenodioxi-lignana-7-ol): leo

incolor; massa molecular: 358,17808 (C21H26O5); [


]D20 = +10,6 (C=0,245 g.mL-1; CHCl3)
UV mx (MeOH) (log ): 287,05 (3,84); 233,94 (4,11); 208,06 (4,68); E44 pg. 87
IV mx (CH2Cl2) (cm-1): 3436; 2960; 2925; 1519; 1247; 1031; E45 pg. 87

RMN de 1H, 13C, HSQC, HMBC: Tabela 10 pg. 86; E46-49 pg. 88-89

To-8a
(+)-acetil-talaumina-B: slido branco; massa molecular: 400,18864 (C23H28O6)
P.f.=77-79C; [
]D20 = +34,0 (C=0,05 g.mL-1; CHCl3)
UV mx (MeOH) (log ): 285,30 (3,83); 228,78 (4,16); 206,10 (4,74); E50 pg. 93
IV mx (CH2Cl2) (cm-1): 2960; 2923; 1722; 1247; E51 pg. 93

RMN de 1H, 13C, HSQC, HMBC: Tabela 11 pg. 92; E52-55 pg. 94-95

To-8b
(-)-ter metlico do iso-otobafenol (7R*, 8 R*, 8R* - 3,4-dimetoxi- 3,4 metilenodioxi-

6,7-ciclolignana): leo amarelo; massa molecular: 340,16752 (C21H24O4)


[
]D20 = -11,7(C=0,12 g.mL-1; CHCl3)
UV mx (MeOH) (log ): 289,39 (3,73); 235,38 (3,93); 208,01 (4,58); E56 pg. 97
IV mx (CH2Cl2) (cm-1): 2957; 2931; 1516; 1486; 1249 ; E57 pg. 97

RMN de 1H, 13C, HSQC, HMBC: Tabela 12 pg. 96; E58-61 pg. 98-99

35
To-9
Talaumina-C (7S, 8R ,8R 3, 4 : 3,4- tetrametoxi-lignana-7-ol):: leo amarelo; massa

molecular: 374,2094 (C22H30O5)


RMN de 1H, HSQC, HMBC: Tabela 13 pg. 102; E62-64 pg. 103-104
To-9a
(-)-isogalbulina (ter dimetlico da isoguaiacina) (7R, 8R, 8R): leo amarelo; massa

molecular: 356,19884 (C22H28O4)


[
]D20 = -62,0 (C=0,05 g.mL-1; CHCl3); Lit.: -49,0 (Konno, 1989)

RMN de 1H, 13C, HMBC: Tabela 14 pg. 106; E65-67 pg. 107-108
To-10
(-)-partenolido: cristais incolores; Massa molecular: 248,1413 (C15H20O3)
P.f.= 105-108C (Acosta et.al., 1993)
[
]D20 = -20,8 (C=0,75 g.mL-1; CHCl3)

RMN de 1H,13C: Tabela 15 pg. 110; E68-69 pg. 111


To-11
(-)-michelenolido: slido amorfo; Massa molecular: 264,1362 (C15H20O4)
[
]D20 = -10,66 (C=0,15 g.mL-1; CHCl3)

RMN de 1H, 13C, HSQC, HMBC: Tabela 16 pg. 114; E70-73 pg. 115-116

To-12
(-)-11,13-dehidrocompressanolido: slido amorfo; Massa molecular: 248,1413 (C15H20O3)
[
]D20 = -56,0 (C=0,05 g.mL-1; CHCl3);

RMN de 1H, 13C, HMBC: Tabela 17 pg. 119; E74-76 pg. 120-121
To-13
(-)-espatulenol: leo incolor; Massa moleclar: 220,18282 (C15H24O)
[
]D20 = -4,1 (C=0,365 g.mL-1; CHCl3).

RMN de 1H, 13C, HSQC, HMBC: Tabela 18 pg. 124; E77-80 pg. 125-126

36
3.4 Avaliao da atividade antimicrobiana

A atividade antibacteriana e antifngica foi determinada in vitro pelo mtodo de


difuso em gar pela tcnica de poo em camada dupla e pelo mtodo de microdiluio
(ANVISA, 2008; OKEKE et al., 2001; NCCLS, 1998; ESPINEL-INGROFF et al., 1995;
NCCLS, 1993; GROVE & RANDALL, 1955) seguindo a adequao de metodologia como
descrita por SALVADOR et al., 2004b; SALVADOR et al., 2003b.
Para a execuo dos ensaios foram utilizadas as bactrias e leveduras, cepas padro e
cepas de campo: gram-negativas Escherichia coli - ATCC 10799 e Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442; gram-positivas Staphylococcus aureus - ATCC 14458; ATCC 6538; ATCC
25923; ATCC 25213; S. aureus penicilinase positivo (7+) cepa de campo e S. aureus
penicilinase negativo (8-) cepa de campo, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228; S
epidermidis (6 ep) cepa de campo, cultivadas por 24 horas a 370C em Mller Hinton

(Difco)-MHb; as leveduras, Candida tropicalis ATCC 157, Candida glabrata - ATCC 30070,
Candida dubliniensis ATCC - 777 e ATCC 778157, cultivadas por 24 horas a 37oC em gar

Sabouraud dextrose.
Na etapa de triagem empregou-se o mtodo de difuso em gar, tcnica do poo,
determinando quais as drogas testes apresentavam ou no efeito antimicrobiano. Para tanto,
procedeu-se o plaqueamento das bactrias onde foram utilizados 20,0 mL de Mller Hinton
Medium (Difco)-MHb, a cerca de 50oC, inoculados (5.106ufc/mL), independentemente, com
as cepas de bactrias em placas de 20 x 150 mm. A seguir foram confeccionados poos com
5,0 mm de dimetro. Para o plaqueamento das leveduras foram utilizados 20,0 mL de gar
Sabouraud dextrose, a cerca de 50oC, inoculados (5.106 ufc/mL), independentemente, com as
cepas de leveduras em placas de 20 x 150 mm. Em seguida foram confeccionados poos com
5,0 mm de dimetro.
Em cada poo foram aplicados 20 L das solues controle (positivo e negativo) e
drogas-teste, solues estas, preparadas em dimetilsufoxido (DMSO)/ gua esterilizada estril
(5:95) nas concentraes de 5,0 mg/mL para o extrato bruto de diclorometano (DCM) e 1,0
mg/mL para as substncias puras na triagem. Como controle positivo foram utilizados
bacitracina (0,20 UI/mL) e cetoconazol (100,0 g/mL) e como controle negativo DMSO/gua
estril (5:95).

37
As placas-testes foram mantidas temperatura ambiente por cerca de 2 horas e depois
incubadas a 370C por cerca de 24/48 horas para as bactrias e leveduras, respectivamente.
Decorrido o perodo de incubao, as zonas de inibio do desenvolvimento microbiano foram
mensuradas em termos de dimetro (halo) e aro da borda do poo a incio do desenvolvimento.
Os experimentos foram realizados pelo menos em duplicata, para cada cepa indicadora
utilizada.
Para as drogas testes que se mostraram ativas na triagem preliminar, procedeu-se
determinao da Concentrao Inibitria Mnima (CIM). Na determinao da CIM, empregouse o mtodo de microdiluio (ANVISA 2008). Em uma placa de microdiluio estril de 96
poos, em poos individuais foi aliquotado 50 L dos caldos Tryptone Soy Broth-TSb (para as
cepas de bactrias) ou Sabouraud dextrose-ASD (para as cepas de Levedura), 50 L das
drogas teste (extrato vegetal ativo, substncias puras (concentrao final de 5 mg/mL para
extrato ou de 1,0 mg/mL ou 0,5 mg/mL para as substncias puras) e controles) e 5 L da
suspenso de microrganismos com turvao equivalente ao padro 0,5 da escala de Mac
Farland, o que corresponde aproximadamente a 106 ufc/mL.
Como controles positivos foram utilizados cetoconazol (100,0 g/mL) e bacitracina
(0,2 UI/mL). Como controle negativo foi utilizado o diluente DMSO/gua estril (5:95), alm
do controle do inculo e do controle do meio de cultura.
Foi considerada como CIM a menor concentrao onde se observou a presena de
inibio do desenvolvimento microbiano (SALVADOR et al., 2002; OKEKE et al., 2001).
Quando em dvida quanto a presena de inibio total, o material foi inoculado (estrias) em
placas contendo meio MHb ou ASD para a verificao se o efeito era biocida ou no.
As placas-testes foram incubadas a 370C por cerca de 24/48 horas para as bactrias e
leveduras, respectivamente. Decorrido o perodo de incubao, os resultados foram expressos
em termos de CIM (mg/mL). Os experimentos foram realizados pelo menos em duplicata,
para cada cepa indicadora utilizada.

38
3.5 Avaliao da atividade antioxidante - Ensaio para avaliao da reduo do radical
DPPH

O radical DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) estvel, de colorao prpura,


porm quando reduzido passa a ter colorao amarela. Atravs deste ensaio foi avaliada a
capacidade das amostras-teste e amostra-padro de reduzir o radical DPPH. Para tanto, o
extrato ou substncias isoladas (5,20 mg para extrato ou 1,30 mg para substncias isoladas)
foram dissolvidos em etanol (1,0 mL), obtendo-se uma soluo estoque. Vrias diluies
foram preparadas em etanol a fim de se obter concentraes finais no ensaio de 3,125 a 100,0
g/mL (extratos) ou de 1,5625 a 100,0 g/mL (substncias puras). Para cada amostra (10,0
L) foram adicionados 100,0 L de etanol, 100,0 L de tampo fosfato (100 mM) e 50,0 L

de soluo de DPPH (250 M). Decorridos 30 min a absorbncia foi medida em


espectrofotmetro (=517 nm) e a porcentagem de reduo do radical foi calculada pela
equao: %reduo = 100 [(Abs. amostra Abs. controle negativo)/Abs. controle DPPH
Abs. controle negativo) x 100] (HUANG; OU; PRIOR, 2005; CUENDET et al., 1997). Como
controle negativo foi utilizado o diluente das amostras e como controle positivo o flavonide
quercetina e/ou Trolox (anlogo da vitamina E) (1,5625 a 50 ppm). Todos os experimentos
foram realizados em triplicata.
Para cada tipo de anlise foi utilizado o teste estatstico mais adequado (por exemplo,
ANOVA e Probite). Os resultados foram apresentados como mdia (coeficiente de variao,
%CV) e IC50: concentrao que inibe 50%.

39
4. RESULTADOS E DISCUSSO

A frao hidroalcoolica do extrato em hexano das folhas de Talauma ovata foi reunida
com o extrato em diclorometano aps anlise prvia por CCDC e comparao de dados
espectrais, mostrando que ambos possuam composio semelhante. O fracionamento
cromatogrfico dessa mistura resultou no isolamento de 13 substncias (To-1 a To-13).
4.1 Identificao da substncia To-1

9
8
5
4

HO

5'

B
O

6'

4'

1'

7'

9'
8'

2'

3'

OCH3

OCH3
To-1

O espectro de RMN de 1H, (Tabela 1; E1) dessa substncia apresentou sinais


referentes a hidrognio de duas metilas, sendo uma ligada a um carbono sp3 ( 1,37, d, J=6,8
Hz) e a outra, mais desprotegida, ligada a um carbono sp2 ( 1,87, dd, J=1,6 e 6,8 Hz).
Tambm foram observados sinais caractersticos de um anel hidrofurnico ( 3,45, dq, J=9,2 e
6,8 Hz; 5,09, d, J=9,2 Hz).
Na regio dos hidrognios metoxlicos, observou-se sinais referentes a duas metoxilas
ligadas a carbono sp2 ( 3,87, s e 3,89, s) e um sinal de hidroxila em ( 5,67, sl).
Na regio dos hidrognios ligados a carbonos sp2, foram observados sinais de
hidrognios olefnicos e , de um grupo propenila ligado ao anel aromtico ( 6,36, dd,
J=1,6 e 15,6 Hz; 6,11, dq, J=6,8 e 15,6 Hz) e cinco hidrognios aromticos, sendo dois em

acoplamento orto e trs em acoplamento meta.

40
O espectro de RMN de 13C{1H} (Tabela 1; E2), mostrou a presena de 20 carbonos,
sendo 2 metlicos, 1 metnico, 2 metoxlicos, 1 oxibenzlico, e 14 que

apresentam

deslocamentos qumicos tpicos de carbonos sp2, sendo que 12 correspondem a 2 anis


aromticos e 2 ao grupo propenila.
A anlise do experimento HSQC (Tabela 1; E3) confirmou as relaes dos
hidrognios com seus respectivos carbonos, enquanto que o HMBC (Tabela 1; E4) mostrou
as correlaes entre o sinal da metoxila em 3,87 (3-OCH3) com 146,6 (C-3); o sinal em
6,97 (H-2) com 93,7 (C-7), 119,9 (C-6) e 145,7 (HOC-4), confirmando que a metoxila e
a hidroxila esto ligados ao anel aromtico A, conhecido como guaiacila (3-OCH3, 4-OH).
Ainda pelo HMBC, observou-se as correlaes entre o sinal da metoxila em 3,89 (3-OCH3)
com 144,1 (C-3); o sinal em 6,77 (H-6) com 45,6 (C-8), 109,3 (C-2), 130,9 (C-7)
e 146,5 (C-4); o sinal em 6,79 (H-2) com 113,3 (C-6), 130,9 (C-7) e 146,5 (C-4),
confirmando que estes sinais correspondem ao anel aromtico C. A estrutura pde ser
confirmada atravs dessas correlaes, conforme mostradas abaixo.

9
8
5
4

HO

5'

B
O

6'

4'

1'

7'

9'
8'

2'

3'

OCH3

OCH3
Segundo estas anlises e comparao com os dados de RMN de 1H e

13

C{1H} e

rotao especfica da literatura (JUHSZ et al., 2000; NASCIMENTO et al., 1999, 2000), foi
possvel identificar essa substncia como uma neolignana benzofuranica (7.O.4, 8.5),
conhecida como (+)-licarina-A, cuja configurao absoluta 7R, 8R. As neolignanas
benzofuranicas so comumente encontradas no gnero Magnolia, sendo licarina-A isolada em
M. kachirachirai (Magnoliaceae) (SONG et al., 1999). Essa substncia j foi encontrada

anteriormente nas folhas de Talauma ovata, porm esses dados no foram publicados (TOMA,
1988).

41
Tabela 1: Dados de RMN de 1H (400 MHz), 13C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC (400 MHz)

em CDCl3 da substncia To-1.

Posio

13

C{1H}

HMBC
1

H-13C
-

(multiplicidade; J em Hz)
-

*
132,0

6,97 (1H; d; 1,2)

108,9

4, 6, 7; 1 (fraco)

146,6

145,7

6,89; m

114,2

1, 2, 3, 7

6,89; m

119,9

1, 2, 3, 7

5,09 (1H; d; 9,2)

93,7

2, 6, 8, 9

3,45 (1H; dq; 9,2 e 6,8)

45,6

1, 7, 9, 5

1,37 (3H; d; 6,8)

17,5

1, 7, 8, 5

132,2

6,79 (1H; sl)

109,3

4, 5, 6, 7; 1, 3(fraco)

144,1

146,5

133,2

6,77 (1H; sl)

113,3

8, 2, 4, 7; 3(fraco)

6,36 (1H; dd; 1,6 e 15,6)

130,9

1, 2, 6, 9

6,11 (1H; dq; 6,8 e 15,6)

123,4

1, 9; 7(fraco)

1,87 (3H; dd; 1,6 e 6,8)

18,3

7, 8; 6(fraco)

3-OCH3

3,87 (3H; s)

55,90

3; 2 (fraco)

4-OH

5,67 (1H; sl)

3-OCH3

3,89 (3H; s)

55,92

3;2(fraco)

* Atribuio inequvoca atravs de anlise do experimento do HSQC

13

125

100

4.0
3.0

75

5'

O 4'

2.0

50

6'

1'
7'

25
17.5

6.765

6.786

6.890

6.894

6.971

18.3

HO
A

1
7

45.6

5
6

55.9

5.0

55.9

93.7

108.9

109.3

113.3

114.0

119.9

123. 4

130.9

132.0

132.2

133.2

144.1

6 .8 0 0

3.06

145.7

3.02

146.5

6 .8 5 0

1.00

6.0
6.00

1.00

E1 - Espectro de RMN de H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-1.


ppm (t1)7.0
0.92

1.04

1.04

1.03
1.15
2.00
0.95

E2 - Espectro de RMN de C { H} (50 MHz, CDCl3) da substncia To-1.

p 1p 5m0 (t1 )
6 .9 0 0
1.03

6 .9 5 0
1.15

.0 0(t1
0 )
p p7 m
2.00

0.95

146.6

1.365

1.382

1.861
1.857

1.878
1.874

3.409

3.425

3.449
3.442

3.466

3.483

3.865

3.887

5.084

5.107

5.673

6.063

6.079

6.102
6.096

6.118
6.112

6.135

6.151

6.342
6.339

6.382
6.378

6.765

6.786

6.971
6.894
6.890

42

9'

2'
8'

3'

OCH3

OCH3

6 .7 5 0

1.0

43

50

100

150

200

ppm (t1)
ppm (t2) 7.0

6.0

5.0

4.0

3.0

2.0

1.0

0.0

E3 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-1.

50

100

150

200

p p m (t1)
p p m (t2 ) 7 .0

6 .0

5 .0

4 .0

3 .0

E4 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-1.

2 .0

1 .0

0 .0

44
4.2 Identificao da substncia To-2

9
8
6
5
4

H3CO

1
2

5'

6'

1'

C
B
2'
O 4' 3'
OCH3

7'

9'
8'

OCH3
To-2

O espectro de RMN de 1H da substncia To-2, mostrou muito semelhante (Tabela 2;


E5) ao da substncia To-1, apresentando sinais referentes a hidrognio de duas metilas, sendo

uma ligada a um carbono sp3 ( 1,39, d, J=6,8 Hz) e a outra, mais desprotegida, ligada a um
carbono sp2 ( 1,87, dd, J=1,6 e 6,4 Hz). Tambm foram observados sinais caractersticos de
um anel hidrofurnico ( 3,46, dq, J=9,6 e 6,8 Hz; 5,12, d, J=9,6 Hz).
Na regio dos hidrognios ligados a carbonos sp2, foram observados sinais de
hidrognios olefnicos e , de um grupo propenila ligado ao anel aromtico (6,36, dd, J=1,6
e 15,6 Hz; 6,11, dq, J=6,4 e 15,6 Hz) e cinco hidrognios aromticos, sendo dois em
acoplamento orto e trs em acoplamento meta.
A diferena entre as duas substncias esta na regio dos hidrognios metoxlicos. O
espectro de To-1 apresenta sinais caracterstico de duas metoxilas e um sinal de hidroxila,
enquanto que o espectro de To-2, apresenta sinais caracterstico de trs metoxilas ( 3,87, s,
3,88, s e 3,90, s).

O espectro de RMN de 13C{1H}, (Tabela 2; E6) mostrou a presena de 21 carbonos,


sendo 2 metlicos, 1 metnico, 3 metoxlicos, 1 oxibenzlico, e 14 que

apresentam

deslocamentos qumicos tpicos de carbonos sp , sendo que 12 correspondem a 2 anis


aromticos e 2 ao grupo propenila.
A anlise do experimento HSQC (Tabela 2; E7) confirmou as relaes dos
hidrognios com seus respectivos carbonos, enquanto que o HMBC (Tabela 2; E8)
comparado com o da substncia anterior, permitiu determinar que duas metoxilas esto ligadas

45
ao anel aromtico A, conhecido como veratrila (3,4-OCH3) e a terceira ao anel aromtico C. A
estrutura pde ser confirmada atravs dessas correlaes, conforme mostradas abaixo.

9
8
6
5
4

H3CO

1
2

5'

6'

1'

C
B
2'
O 4' 3'
OCH3

7'

9'
8'

OCH3

Segundo estas anlises e comparao com os dados de RMN de

13

C{1H} e rotao

especfica da literatura (EL-FERALY et al., 1982; NASCIMENTO et al., 1999), foi possvel
identificar essa substncia como neolignana benzofuranica (7.O.4, 8.3), conhecida como (+)acuminatina, derivada da (+)-licarina-A, por metilao. A acuminatina foi isolada em
Magnolia denudata (Magnoliaceae) (LI et al., 2005).

46
Tabela 2: Dados de RMN de 1H (400 MHz), 13C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC (400 MHz)

em CDCl3 da substncia To-2.

Posio

13

C{1H}

HMBC
1

H-13C
-

(multiplicidade; J em Hz)
-

*
132,6

6,99 (1H; d; 2,0)

109,5

4, 6, 7; 1 (fraco)

149,10

149,11

6,84 (1H; d; 8,0)

110,8

1, 3; 6 (fraco)

6,96 (1H; dd; 2,0 e 8,0)

119,2

2, 4, 7

5,12 (1H; d; 9,6)

93,7

2, 6, 8, 9

3,46 (1H; dq; 9,6 e 6,8)

45,6

1, 7, 9, 5

1,39 (3H; d; 6,8)

17,6

1, 7, 8, 5

132,2

6,79 (1H; d; 1,2)

109,2

3, 4, 6, 7

144,1

146,6

133,2

6,77 (1H; d; 1,2)

113,3

8, 2, 4, 7

6,36 (1H; dd; 1,6 e 15,6)

130,9

2, 6, 9; 1(fraco)

6,11 (1H; dq; 6,4 e 15,6)

123,5

1, 9; 7(fraco)

1,87 (3H; dd; 1,6 e 6,4)

18,4

7, 8; 2(fraco)

3-OCH3

3,87 (3H; s)

55,90

3; 2 (fraco)

4-OCH3

3,88 (3H; s)

55,90

4; 5 (fraco)

3-OCH3

3,90 (3H; s)

55,92

3; 2(fraco)

* Atribuio inequvoca atravs de anlise do experimento do HSQC

125

H3CO

100

4.0

75

3.0

5'

2.0

50

6'
1'

C
B
2'
O 4' 3'
OCH3

7'

1.0

25
17.6

18.4

5
7

45.6

5.0

55.9

93.7

109.2

109.5

110.8

113.3

119.2

123.5

130.9

132.2

132.6

133.2

144.1

3.00

6.0
6 .8 00

2.71

13
6 .8 25

1.05

149.1

6 .8 50

9.01

1.01

7.0
6 .87 5
0.87

6 .9 0 0
0.97

6 .9 2 5

0.95

ppm (t1)
6 .9 5 0

0.93

0.87
0.97
1.14
1.10
1.00

E6 - Espectro de RMN de C { H} (50MHz, CDCl3) da substncia To-2.

150
ppm (t1)
6 .9 7 5
1.14

0 )
p7p.0
m0 (t1
1.10

1.00

149.1

6.771

6.791

6.832

6.852

1.376

1.393

1.862

1.866

1.882
1.878

3.427

3.450
3.444

3.461

3.467

3.478

3.484

3.501

3.874

3.884

3.896

5.106

5.130

6.067

6.083

6.100

6.106

6.116

6.122

6.139

6.155

6.343

6.347

6.382

6.386

6.771

6.791

6.832

6.852

6.945

6.945

6.950

6.950

6.970
6.965

6.985

6.965

6.970

6.985

6.990

6.990

47

9'

8'

OCH3

6 .7 75

E5 - Espectro de RMN de H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-2.


1

0.0

48

50

100

150

200

p p m (t1 )
p p m (t2 )7 .0

6 .0

5 .0

4 .0

3 .0

2 .0

1 .0

0 .0

E7 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-2.

50

100

150

200

p p m (t1 )
p p m (t2 )7 .0

6 .0

5 .0

4 .0

3 .0

E8 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-2.

2 .0

1 .0

0 .0

49
4.3 Identificao das substncias To-3 e To-4

9
8
6
5
4

HO

1
2

OCH3

5'

6'

1'

C
B
2'
O 4' 3'
OCH3

7'

O
6
5
4

H3CO

To-3

1
2

5'

6'

1'

C
B
2'
O 4' 3'
OCH3

7'

OCH3

To-4

O espectro de RMN de 1H da substncia To-3 (Tabela 3; E9) apresentou-se muito


semelhante ao da substncia To-1 com a diferena que os sinais referentes ao grupo propenila
no foram observados. Mas foi observado um sinal caracterstico de um hidrognio de aldedo
( 9,86; s). O espectro de RMN de 1H da substncia To-4 (Tabela 3; E12) mostrou-se muito
semelhante ao da To-3, diferindo pela presena de 3 metoxilas, o que sugere um grupo
veratrila em substituio ao grupo guaiacila de To-3.
A anlise dos experimentos HSQC e HMBC de To-3 (Tabela 3; E10-11) confirmou a
estrutura proposta. Comparao dos dados obtidos com a literatura mostrou que essa
substncia j conhecida, tendo sido isolada de Aristolochia pubescens (NASCIMENTO et.
al., 1999). Esta substncia pode ser considerada derivada da (+)-licarina-A por oxidao do

grupo propenila. Os dados de RMN de 1H de To-4 coincidiram com aqueles apresentados pelo
composto conhecido como (+)-kadsurenina-M (JUHSZ et al., 2000; NASCIMENTO et al.,
1999). Da mesma forma que o composto anterior, este derivado da acuminatina.

50
Tabela 3: Dados de RMN de 1H (400 MHz), HSQC e HMBC (400 MHz) em CDCl3 da

substncia To-3 e dados de RMN de 1H (400 MHz) em CDCl3 da substncia To-4.

To-3
Posio

13

To-4

C{1H}

(multiplicidade; J em Hz)

HMBC
1

13

H- C

(multiplicidade; J em Hz)

131,0

6,94 (1H; dd; 1,1 e 1,6)

108,8

1, 3, 6, 7

6,98 (1H; d; 2,0)

146,7

144,9

6,92; m

114,3

1, 3

6,86 (1H; d; 8,0)

6,92; m

120,0

1, 2, 7

6,96 (1H; s)

5,25 (1H; d; 9,2)

94,9

1, 2, 6, 9

5,27 (1H; d; 9,2)

3,56 (1H; m)

44,8

3,57 (1H; m)

1,45 (3H; d; 6,8)

17,7

7, 8, 5

1,46 (3H; d; 6,8)

131,4

7,38 (1H; d; 1,2)

111,8

3, 4, 6, 7

7,38 (1H; d; 1,6)

145,1

153,2

133,6

120,1

8, 2, 4, 7

7-COH

7,347 (1H; d; 1,2)


7,350
9,86 (1H; s)

190,6

1, 2, 6

7,352 (1H; d; 1,6)


7,355
9,86 (1H; s)

3-OCH3

3,90 (3H; s)

56,03

3,88 (3H; s)

4-OCH3

3,90 (3H; s)

4-OH

5,66 (1H; sl)

18,4

3-OCH3

3,95 (3H; s)

56,13

3,96 (3H; s)

* Atribuio inequvoca atravs de anlise do experimento do HSQC e HMBC

1.457
1.440

3.540

3.564
3.562
3.560
3.558

3.581

3.895

3.954

5.241

5.264

5.664

6.917
6.914

6.941
6.939

7.352
7.349
7.345

7.381
7.378

9.855

51

6.914

6.917

6.939

6.941

7.345

7.349

7.352

7.378

7.381

9
8
6
5
4

HO
7 .2 0

7 .1 0

7 .0 0

6'

1'

7'

C
B
2'
O 4' 3'
OCH3

OCH3

1.67

0.81

0.80

0.80

7 .3 0

5'

6 .9 0

p p m (t1 )

5.0

3.00

1.01

2.61
2.53

1.00

0.98

1.69
0.81

0.80
0.80

0.75

7.5
ppm (t1)

2.5

0.0

E9 - Espectro de RMN de H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-3.

50

100

150

200

p p m (t1 )
10 ).0
pp m (t2

7.5

5 .0

2.5

E10 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-3.

0 .0

52

50

100

150

200

p p m (t1 )
1 0).0
p p m (t2

7 .5

5 .0

2 .5

0 .0

8
6
5
4

H3CO

1
2

1.447

1.464

3.575
3.571
3.569
3.558
3.556
3.553

3.895
3.884
3.592

5.260

5.283

3.958

6.855

6.875

6.875

6.855
6.955

6.974

6.980

6.955

6.980
6.974

7.356
7.354
7.350

7.385
7.382
7.385
7.382
7.356
7.354
7.350

9.857

E11 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-3.

6'

5'

1'

C
B
2'
O 4' 3'
OCH3

7'

OCH3

7.20

7.10

6.90

3.00

5.0

1.08

8.77

0.91

0.95
1.11
0.68

0.74
0.72

0.63

7.5
ppm (t1)

7.00

0.95

7.30

1.11

0.68

0.74

0.72
7.40
ppm (t1)

2.5

E12 - Espectro de RMN de H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-4.

0.0

53
4.4 Identificao da substncia To-5

OH
O

A
O 4

9
8
8'

7'
1'

5
6'

5'

4'

9'

2'
3'

O
To-5

O espectro de RMN de 1H (Tabela 4; E13) apresentou sinais referentes a duas metilas


( 0,76, d, J=6,8 Hz; 1,00, d, J=6,8 Hz), dois hidrognios metnicos ( 1,52, m; 1,74, m),
um sinal de hidroxila ( 1,57, sl), dois hidrognios benzlicos ( 2,37, dd, J=7,6 e 13,6 Hz;
2,44, dd, J=8,0 e 13,6 Hz), um hidrognio carbinlico ( 4,39, dd, J=8,8 e 2,8 Hz), dois

grupos metilenodioxi ( 5,92, s e 5,95, d, J=1,6 Hz; 5,97, d, J=1,6 Hz) e finalmente seis
hidrognios aromticos, sendo quatro em acoplamento orto e dois em acoplamento meta.
A anlise do experimento HSQC (Tabela 4; E14) confirmou as relaes dos
hidrognios com seus respectivos carbonos, enquanto que o HMBC (Tabela 4; E15) mostrou
as correlaes entre o sinal do hidrognio carbinlico em 4,39 (H-7) com 106,5 (C-2) e
119,4 (C-6); o sinal em 6,66 (H-2) com 77,7 (C-7), 119,4 (C-6), 146,5 (C-4) e 147,5
(C-3); os sinais em 5,96 e 5,97 (OCH2O) com 146,5 (C-4) e 147,5 (C-3), confirmando
que estes sinais correspondem ao anel aromtico A. Ainda pelo HMBC, observou-se as
correlaes entre os sinais dos hidrognios metilnicos em 2,37 e 2,44 (H-7) com 14,5
(C-9), 35,3 (C-8), 42,1 (C-8), 108,9 (C-2), 121,3 (C-6) e 134,2 (C-1); o sinal em
6,47 (H-2) com 121,9 (C-6), 145,3 (C-4) e 147,2 (C-3'); o sinal em 5,92 (OCH2O)

com 145,3 (C-4) e 147,2 (C-3), confirmando que estes sinais correspondem ao anel
aromtico B. A estrutura pde ser confirmada atravs dessas correlaes, conforme mostradas.

54

OH
O

A
O

6
5

8
8'

9'

7'
1'

6'
5'

2'
3'

4'

O
Essa estrutura de uma neolignana do tipo 8.8.7-ol, comumente chamada de
diarildimetilbutanol (SIMES et al., 2004). Molculas desse tipo possuem trs estereocentros:
7, 8 e 8, podendo existir oito esteroismeros. As configuraes relativas podem ser
estabelecidas com base no valor da constante de acoplamento dos H-7/H-8 e H-8/H-8.
Analisando o espectro de RMN de 1H foi observado um duplo dupleto em 4,39 que
foi atribudo ao hidrognio carbinlico do C-7, cuja constante de acoplamento H-7/H-8 (J=8,8
Hz) indica uma relao trans entre eles. No foi possvel observar a constante de acoplamento
H-8/H-8 porque os sinais destes hidrognios formam um multipleto. Portanto To-5 pode
apresentar a configurao relativa A ou B.
OH
O

A
7'
1'

5'

8
8'

6
6'

OH

A
9'

2'

3'

A
7R, 8S, 8R

7'
1'

5'

8
8'

6
6'

4'

9'

2'
3'

4'

B
7R, 8S, 8S

Seus dados espectrais e rotao especfica foram comparados com a literatura,


identificando To-5 como a neolignana (+)-oleiferina-C, com configurao absoluta 7R, 8S,
8R (estrutura A) (FERNANDES et al.,1993; 1994). Esta substncia j foi encontrada
anteriormente nas cascas do tronco de Talauma ovata (STEFANELLO et al., 2002).

55
Tabela 4: Dados de RMN de 1H (400 MHz), 13C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC (400 MHz)

em CDCl3 da substncia To-5.

Posio

13

C{1H}

HMBC
1

H-13C
-

(multiplicidade; J em Hz)
-

*
138,1

6,66; m

106,5

3, 4, 6 e 7

147,5

146,5

6,75 (1H; dl; 8,0)

107,6

1, 3 e 4

6,66; m

119,4

1, 2 e 4

4,39 (1H; dd; 2,8 e 8,8)

77,7

2, 6 (fraco)

1,74 (1H; m)

42,1

7 (fraco)

1,00 (3H; d; 6,8)

9,4

7, 8, 8

134,2

6,47 (1H; d; 1,6)

108,9

3, 4, 6

147,2

145,3

6,67 (1H; sl)

107,5

1, 3, 4, 6

6,45 (1H; dd; 1,6 e 5,2)

121,3

2, 4, 5

2,37 (1H; dd; 7,6 e 13,6)

41,4

8, 1, 2, 6, 8, 9

2,44 (1H; dd; 8,0 e 13,6)


8

1,52 (1H; m)

35,3

0,76 (3H; d; 6,8)

14,5

8, 7, 8

7-OH

1,57 (1H; sl)

OCH2O

5,91 (2H; s)

100,0

3, 4

OCH2O

5,96 (1H; d; 1,6)

100,3

3, 4

5,97 (1H; d; 1,6)


*Atribuio inequvoca atravs de anlise dos experimentos do HSQC e HMBC

6.550

3.0

6.443

6.448

6.456

6.460

6.464

6.468

6.661

6.666

6.673

6.735

6.755

6.762

6.764

6.768

6.771

5'

3.0

2.0

5
6'

4'

2.0

1.0

7'
1'
8'

0.0

2.45

4.0

2.51

4.0
6.5 00

3
2

0.80

5.0
6 .600

0.92

5.0
0.85
0.86

6.0
6 .6 50

1.01

0.84

6.0
6.7 00

0.54

6.7 50

0.75

ppm (t1)
0.82

7.0
0.78

0.68

7.0
1.56
0.85

1.01
0.54

0.75
0.82
0.78
0.68

E14 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-5.

8.0(t2)
ppm
1.0

OH
9

9'

2'

3'

O
O

pp m (t1)
6.4 50

E13 - Espectro de RMN de H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-5.


1
0.0

50

100

150

200

ppm (t1)

0.753

0.995
0.770

1.546
1.539
1.529
1.528
1.522
1.511
1.509
1.502
1.012

1.762
1.755
1.745
1.740
1.738
1.733
1.724
1.716

2.339

2.392
2.373
2.357

2.413

2.467
2.447
2.433

4.401
4.394
4.379
4.372

5.914

5.969
5.965
5.960
5.956

6.468
6.464
6.460
6.456
6.448
6.443

6.673
6.666
6.661

6.735

6.771
6.768
6.764
6.762
6.755

56

57

50

100

150

200

p p m (t1 )
8 .0(t2 )
ppm

7 .0

6 .0

5 .0

4 .0

3 .0

2 .0

E15 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-5.

1 .0

0 .0

58
4.5 Identificao estrutural da substncia To-6 e determinao estrutural da substncia
To-6a

OH
O

A
O

8
8'

7'
1'

5
6'

5'

9'

2'
3'

4'

OCH3

OCH3
To-6

O espectro de RMN de 1H (Tabela 5; E16) apresentou sinais referentes a duas metilas


( 0,79, d, J=6,8 Hz; 1,01, d, J=6,8 Hz), dois hidrognios metnicos ( 1,58, m; 1,72, m),
um sinal de hidroxila ( 1,68, sl), dois hidrognios benzlicos ( 2,40, dd, J=7,2 e 14,0 Hz;
2,45, dd, J=8,4 e 14,0 Hz), um hidrognio carbinlico ( 4,37, d, J=8,8 Hz), sinais referentes a
duas metoxilas ligadas a carbono sp2 (s, 3,79 e 3,86), um grupo metilenodioxi ( 5,94, d,
J=1,2 Hz; 5,95, d, J=1,2 Hz) e finalmente seis hidrognios aromticos, sendo quatro em

acoplamento orto e dois em acoplamento meta.


O espectro de RMN de 13C{1H} (Tabela 5; E17), mostrou a presena de 21 carbonos,
sendo 2 metlicos, 1 metilnico, 2 metnicos, 1 carbinlico, 2 metoxlicos, 1 metilenodioxi e
12 que apresentam deslocamentos qumicos tpicos de anel aromtico, sendo que destes, seis
so quaternrios. Pode-se supor a presena de dois anis aromticos trissubstitudos.
A anlise do experimento HSQC (Tabela 5; E18) confirmou as relaes dos
hidrognios com seus respectivos carbonos, enquanto que o HMBC (Tabela 5; E19) mostrou
as correlaes entre o sinal do hidrognio carbinlico em 4,37 (H-7) com 9,6 (C-9), 41,7
(C-8), 107,9 (C-2), 120,2 (C-6) e 137,9 (C-1); o sinal em 6,65 (H-2) com 77,9 (C-7),
106,8 (C-5), 120,2 (C-6), 137,9 (C-1), 146,9 (C-4) e 147,7 (C-3); os sinais em 5,94

e 5,95 (OCH2O) com 146,9 (C-4) e 147,7 (C-3), confirmando que estes sinais

59
correspondem ao anel aromtico A. Ainda pelo HMBC, observou-se as correlaes entre os
sinais dos hidrognios metilnicos em 2,40 e 2,45 (H-7) com 14,3 (C-9), 35,2 (C-8),
41,7 (C-8), 111,8 (C-2), 120,9 (C-6) e 133,6 (C-1); o sinal em 6,47 (H-2) com

41,4 (C-7), 110,9 (C-5), 120,9 (C-6), 133,6 (C-1), 147,1 (C-4) e 148,7 (C-3'); o
sinal em 3,79 (OCH3) com 111,8 (C-2) e 148,7 (C-3); o sinal em 3,86 (OCH3) com
110,9 (C-5) e 147,1 (C-4), confirmando que estes sinais correspondem ao anel aromtico
B. A estrutura pde ser confirmada atravs dessas correlaes, conforme mostradas abaixo.

OH
O

A
O 4

6
5

8
8'

7'

9'

1'
6'
5'

2'
3'

4'

OCH3

OCH3

Os espectros de RMN de 1H, HSQC e HMBC da substncia To-6 mostraram-se muito


semelhantes ao da substncia To-5, diferindo somente nos substituintes do anel aromtico B.
Da mesma forma que a substncia anterior, a constante de acoplamento H-7/H-8 (J=8,8 Hz)
indica uma relao trans entre eles. Seus dados espectrais e rotao especfica foram
comparados com a literatura, identificando To-6 como a neolignana (+)-oleiferina-A, com
configurao absoluta 7R, 8S, 8R, tendo sido isolada pela primeira vez nas folhas de Virola
oleifera (Myristicaceae) (FERNANDES et al.,1993; 1994).

60
Tabela 5: Dados de RMN de 1H (400 MHz), 13C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC (400 MHz)

em CDCl3 da substncia To-6.

Posio

13

C{1H}

HMBC
1

H-13C
-

(multiplicidade; J em Hz)
-

*
137,9

6,65 (1H; d; 2,0)

107,9

1, 3, 4, 5, 6, 7

147,7

146,9

6,73 (1H; d; 8,4)

106,8

1, 3, 4; 6, 7 (fraco)

6,65 (1H; dd; 2,0 e 8,4)

120,2

2, 4, 5, 7

4,37 (1H; d; 8,8)

77,9

1, 2, 6, 8, 9

1,72 (1H; m)

41,7

1, 7, 9; 9, 8(fraco)

1,01 (3H; d; 6,8)

9,6

7, 8, 8

133,6

6,47 (1H; d; 2,0)

111,8

1, 3, 4, 6, 7; 5(fraco)

148,7

147,1

6,74 (1H; d; 8,0)

110,9

1, 2, 3, 4, 6; 7(fraco)

6,57 (1H; dd; 2,0 e 8,0)

120,9

2, 3, 4, 5, 7

2,40 (1H; dd; 7,2 e 14,0)

41,4

8, 1, 2, 6, 8, 9

2,45 (1H; dd; 8,4 e 14,0)


8

1,58 (1H; m)

35,2

1; 7, 8, 9, 9(fraco)

0,79 (3H; d; 6,8)

14,3

8, 7, 8

7-OH

1,68 (1H, sl)

OCH2O

5,94 (1H; d; 1,2)

101,0

3, 4

5,95 (1H; d; 1,2)


3-OCH3

3,79 (3H; s)

55,6

2, 3

4-OCH3

3,86 (3H; s)

55,9

4, 5

*Atribuio inequvoca atravs de anlise do experimento do HSQC

13

100

5
7'
1'

6'

5'
4'

3.0
2.0
1.0

50
9.6

8'

14.3

35.2

6.466

6.471

6.551

6.556

6.571

6.576

6.635

6.639

6.645

6.656
6.650

6.660

6.722

6.734

41.4

41.7

55.6

4.0

55.9

5.0

77.9

101.0

106.8

107.9

110.9

111.8

120.2

120.9

133.6

137.9

3.05

6.0

OH

3.00

146.9

O
2

1.30
1.00
1.21

147.1

6.550

2.12

E17 - Espectro de RMN de C { H} (50MHz, CDCl3) da substncia To-6.

150
ppm (t 1)
6.600

3.01
3.09

7.0
1.00

8.0
ppm (t1)
6.650

2.01

0.94
1.04
2.00
2.02

147.7
6.700
0.94

6.750
ppm (t1)
1.04

2.00

2.02

148.7

6.743

6.754

8
9

9'

2'

3'

OCH3

6.500

OCH3

0.0

E16 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-6.


0.780

0.797

1.000

1.017

1.550
1.543

1.567

1.588
1.585

1.605

1.676

1.717
1.716
1.700
1.693

1.740
1.732

2.381

2.399

2.443
2.433
2.423
2.415

2.457

2.478

3.794

3.859

4.363

4.385

5.951
5.948
5.942
5.939

6.471
6.466

6.556
6.551

6.576
6.571

6.660
6.656
6.650
6.645
6.639
6.635

6.722

6.754
6.743
6.734

61

62

50

100

150

200

p p m (t1 )
0 .0
ppm 1
(t2
)

5 .0

0 .0

E18 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-6.

50

100

150

200

ppm (t1)
ppm 10.0
(t2)

5.0

E19 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-6.

0.0

63
Apesar de ser uma substncia conhecida, o derivado acetilado ainda no havia sido
preparado. Por essa razo To-6 foi submetida a uma reao de acetilao com anidrido actico
em piridina, na qual o grupo hidroxila foi substitudo pelo grupo acetato (To-6a).
A formao do acetato foi confirmada no espectro de RMN de 1H do derivado, no qual
observou-se que o H-7 foi desprotegido de cerca de 1,1 ppm de acordo com o esperado
(SILVERSTEIN, 2006). Tambm foi observado o sinal do grupo acetato ( 1,99, s).
No espectro de IV foi observada a presena de uma banda de absoro caracterstica de
grupo carbonila de ster em 1736 cm-1. Os dados espectrais de RMN de 1H, 13C{1H}, HSQC,
HMBC, UV e IV (Tabela 6; E20-25) confirmaram a formao do produto To-6a, que
indito.

OCOCH3

OH
O

A
O 4

8'

6
6'

7'
1'

5'

9'

Anidrido Actico
Piridina

3'

OCH3

2'

4'

OCH3

To-6

O 4

8'

6
6'

7'
1'

5'

9'

2'
3'

4'

OCH3

OCH3

To-6a

64
Tabela 6: Dados de RMN de 1H (400 MHz), 13C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC (400 MHz)

em CDCl3 da substncia To-6a.

Posio

(multiplicidade; J em Hz)
-

13

C{1H}

*
133,6

HMBC
1

H-13C
-

6,62 (1H; d; 1,6)

107,5

4, 6, 7; 1, 5, 3 (fraco)

147,6

147,1

6,72 (1H; d; 8,0)

107,9

1, 3, 4

6,68 (1H; dd; 1,6 e 8,0)

121,3

2, 4, 5, 7; 3 (fraco)

5,50 (1H; d; 10,0)

79,3

1, 2, 6, 8, 8, 9, OCOCH3

1,88 (1H; m)

39,2

1, 7, 9, 7, 9; 8(fraco)

0,92 (3H; d; 6,8)

14,0

7, 8, 8

133,3

6,46 (1H; d; 2,0)

111,7

3, 4, 6, 7; 1(fraco)

148,7

147,1

6,76 (1H; d; 8,4)

110,8

1, 3, 4, 6; 2(fraco)

6,55 (1H; dd; 2,0 e 8,4)

120,9

2, 4, 5, 7; 3 (fraco)

2,43 (2H; m)

41,2

8, 1, 2, 6, 8, 9

1,57 (1H; m)

34,4

7, 9, 7; 1, 8, 9 (fraco)

0,82 (3H; d; 6,8)

9,6

8, 7, 8; 1(fraco)

3-OCH3

3,80 (3H; s)

55,6

3; 2(fraco)

4-OCH3

3,87 (3H; s)

55,9

4; 5(fraco)

OCH2O

5,94 (1H; d; 1,2)

101,0

3, 4

21,2

7, OCOCH3

170,4

5,95 (1H; d; 1,2)


OCOCH3

1,99 (3H; s)

*Atribuio inequvoca atravs de anlise do experimento do HSQC

65

1.0

0.8

OCOCH3
7

A
O

Absorbncia

0.6

8'

6
7'
1'

5
6'

B
5'

0.4

9'

2'
3'

OCH3

4'

OCH3
0.2

0.0
200

225

250

275

300

325

350

Comprimento de onda (nm)

E20 Espectro no UV da substncia To-6a.

100
90

70
60
50

1516

1736

40

1029

2960
2931

Transmitncia (%)

80

30

1237

20
10
4000

3500

3000

2500

2000

1500
-1

Com prim ento de onda (cm )

E21 Espectro no IV da substncia To-6a.

1000

500

E23 - Espectro de RMN de C { H} (50MHz, CDCl3) da substncia To-6a.

13

150

100

2.0

50

5
6

6'
7'
1'

5'

9.6

14.0

21.2

6.454

6.459

6.541

6.546

6.562

6.566

6.626
6.622

6.673
6.669

34.4

39.2

41.2

3.0

55.6

55.9

79.3

101.0

4.0

102.3

107.5

107.9

110.8

111.7

120.9

121.3

133.3

133.6

147.1

147.6

3.02
3.05

5.0
1.27

6.0
6 .5 0 0

1.03
3.02

148.7
6 .5 5 0

2.24

3.03
3.06

170.4
6 .6 0 0
0.98

1.01

7.0
1.01

6 .6 5 0

2.02

0 0)
p p m 2(t1
6 .7 0 0
1.00

0.98
1.01
1.00
1.05
1.00
1.09

8.0
ppm (t1)
1.05

1.00

1.09

6 .7 5 0
p p m (t1 )
6.693
6.689

6.712

6.732

6.745

6.766

0.928
0.911
0.827
0.810

1.986
1.904
1.879
1.855
1.604
1.581
1.565
1.542

2.477
2.460
2.443
2.429
2.408
2.395
2.374

3.798

3.869

6.566
6.562
6.546
6.541
6.459
6.454
5.950
5.947
5.943
5.940
5.514
5.489

6.626
6.622

6.766
6.745
6.732
6.712
6.693
6.689
6.673
6.669

66

OCOCH3
8

4'

8'
9'

2'

3'

OCH3

OCH3

6 .4 5 0

E22 - Espectro de RMN de H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-6a.


1

1.0
0.0

67

50

10 0

15 0

20 0

ppm (t1 )
p pm (t2)

5.0

0.0

E24 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-6a.

50

100

150

200

ppm (t1)
ppm (t2)

5.0

E25 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-6a.

0.0

68
4.6 Determinao estrutural das substncias To-7, To-7a e To-7b

OH
O

A
O

8
8'

6
7'
1'

5
6'

B
5'

9'

2'
3'

4'

O
To-7

O espectro no UV (E26) apresenta mximo de absoro em 291 nm, um segundo


mximo em 239 nm e um terceiro em 208 nm. Esses dados so tpicos do cromforo benzeno
substitudo.
O espectro no IV (E27) mostra uma banda larga 3434 cm-1, indicando a presena do
grupo hidroxila na molcula.
O espectro de RMN de 1H apresentou sinais referentes a duas metilas ( 0,61, d, J=7,2
Hz; 0,87, d, J=7,2 Hz), dois hidrognios metnicos (1,82, m; 2,32, m), dois hidrognios
benzlicos ( 2,14, dd, J=10,8 e 13,2; 2,84, dd, J=3,6 e 13,2 Hz), um hidrognio carbinlico
( 4,41, d, J=9,6 Hz), dois grupos metilenodioxi ( 5,92, s; 5,95, s) e finalmente seis
hidrognios aromticos, sendo quatro em acoplamento orto e dois em acoplamento meta. O
sinal da hidroxila encontra-se encoberto pelo multipleto de um dos hidrognios metnicos em
1,81.
O espectro de RMN de

13

C{1H}, mostrou a presena de 20 carbonos, sendo 2

metlicos, 1 metilnico, 2 metnicos, 1 carbinlico, 2 metilenodioxi e 12 que apresentam


deslocamentos qumicos tpicos de anel aromtico, sendo que destes, seis so quaternrios.
Pode-se supor a presena de dois anis aromticos trissubstitudos.
A anlise do experimento HSQC confirmou as relaes dos hidrognios com seus
respectivos carbonos, enquanto que o HMBC mostrou as correlaes entre o sinal do
hidrognio carbinlico em 4,41 (H-7) com 11,4 (C-9), 35,2 (C-8), 45,0 (C-8), 107,0

69
(C-2), 120,4 (C-6) e 138,5 (C-1); o sinal em 6,86 (H-2) com 76,9 (C-7), 120,4 (C-6),
138,5 (C-1), 147,0 (C-4) e 147,8 (C-3); o sinal em 5,95 (OCH2O) com 147,0 (C-4) e
147,8 (C-3), confirmando que estes sinais correspondem ao anel aromtico A. Ainda pelo

HMBC, observou-se as correlaes entre os sinais dos hidrognios metilnicos em 2,14 e


2,84 (H-7) com 17,7 (C-9), 35,2 (C-8), 45,0 (C-8), 109,5 (C-2), 121,9 (C-6) e
136,0 (C-1); o sinal em 6,72 (H-2) com 37,2 (C-7), 107,92 (C-5), 109,5 (C-2),
121,9 (C-6), 136,0 (C-1), 145,4 (C-4) e 147,4 (C-3'); o sinal em 5,92 (OCH2O) com
145,4 (C-4) e 147,4 (C-3), confirmando que estes sinais correspondem ao anel aromtico

B. A estrutura pde ser confirmada atravs dessas correlaes, conforme mostradas abaixo.
OH

OH
O 3

A
O

6'
5'

8
8'

6 7'

9 0,61

9'0,87

2'

8'
1'

B
5'

3'

To-7

7'

6'

4'

HO 4

1'

H3CO 3

4'

9 0,61

9'

0,89

2'
3'

O
mirystargenol-A

Os espectros de RMN de 1H, 13C{1H}, HSQC e HMBC da substncia To-7 (Tabela 7;


E28-31), mostraram-se muito semelhantes aos da substncia To-5, diferindo principalmente

no deslocamento qumico dos grupos metila, cujos valores correspondem aos de uma
neolignana com uma estereoqumica diferente. Estes valores so compatveis com uma
estereoquimica relativa trans-cis, como no composto mirystargenol-A, que possui
configurao 7S, 8R, 8R (NAKATANI et al., 1988). Portanto To-7 apresenta configurao
relativa 7S, 8R, 8R, sendo um diastereoismero da oleiferina-C. Essa substncia est sendo
descrita pela primeira vez e recebeu o nome comum de (+)-talaumina-A.

70
Tabela 7: Dados de RMN de 1H (400 MHz), 13C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC (400 MHz)

em CDCl3 da substncia To-7.

Posio

(multiplicidade; J em Hz)
-

13

C{1H}

HMBC
1

*
138,5

H-13C
-

6,86 (1H; s)

107,0

3, 4, 6, 7; 1 (fraco)

147,8

147,0

6,76 (1H; s)

107,85

1, 2, 3, 4, 7

6,77 (1H; s)

120,4

1, 2, 4, 7

4,41 (1H; d; 9,6)

76,9

1, 2, 6, 8, 9, 8

1,82; m

45,0

7; 1, 8, 9, 7, 9(fraco)

0,61 (3H; d; 7,2)

11,4

7, 8, 8

136,0

6,72 (1H; d; 1,6)

109,5

1, 2, 3, 4, 6, 7; 5(fraco)

147,4

145,4

6,73 (1H; d; 7,6)

107,92

1, 2, 3, 4, 6

6,65 (1H; dd; 1,6 e 7,6)

121,9

2, 3, 4, 7

2,14 (1H; dd; 10,8 e 13,2)

37,2

8, 1, 2, 6, 8, 9

2,84 (1H; dd; 3,6 e 13,2)


8

2,32 (1H; m)

35,2

7, 1(fraco)

0,87 (3H; d; 7,2)

17,7

8, 7, 8

7-OH

1,81; m

OCH2O

5,92 (2H; s)

100,7

3, 4

OCH2O

5,95 (2H; s)

101,0

3, 4

*Atribuio inequvoca atravs de anlise do experimento do HSQC

71

1.0

OH

0.8

0.6

Absorbncia

8'

6
7'
1'

5
6'

B
5'

0.4

9'

2'
3'

4'

O
0.2

0.0
200

225

250

275

300

325

350

Comprimento de onda (nm)

E26 Espectro no UV da substncia To-7.

90
80

60

2889

40

2962

50
3434

Transmitncia (%)

70

10
4000

1491

20

3500

3000

2500

2000

1500
-1

Com prim ento de onda (cm )

E27 Espectro no IV da substncia To-7.

1248

1034

30

1000

500

75

6
8'

6'
7'
1'

5'
4'

2.0
1.0

50

25
11.4

17.7

35.2

37.2

45. 0

76.9

100.7

101.0

107.0

107.9

109.5

120.4

121.9

136.0

138.5

145.4

147.0

O
4

2.88

100
1

3.0

3
2

2.88

147.4

1.82

13

4.0
0.96

125
6.700

0.96

5.0
0.96

6.0
6.750
1.00

6.800
1.96

0.96

ppm7.0
(t1)
6.850
0.85

ppm (t1)
1.00

1.00

E29 - Espectro de RMN de C { H} (50 MHz, CDCl3) da substncia To-7.

0 (t1 )
p1p5m
1.92
1.92

0.96
1.88
0.82
0.96
0.96

147.8

6.645
6.641

6.662

6.664

6.726
6.722

6.741

6.762

6.765

6.857

0.617
0.599

0.883
0.865

1.856
1.849
1.838
1.831
1.820
1.814
1.807
1.803
1.797
1.790
1.779
1.772

2.106

2.138
2.132

2.165

2.349
2.339
2.331
2.322
2.315
2.305
2.298
2.288

2.860
2.851
2.828
2.818

4.394

4.418

5.919

5.954

6.664
6.662
6.645
6.641

6.765
6.762
6.741
6.726
6.722

6.857

72

OH
9

9'

2'

3'

O
O

6.650

0.0

E28 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-7.

73

50

100

150

200

p p m (t1 )
.0 (t2 )
p p8m

7 .0

6 .0

5 .0

4 .0

3 .0

2 .0

1 .0

0 .0

E30 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-7.

50

100

150

200

p p m (t1 )
p p8m.0 (t2 )

7 .0

6 .0

5 .0

4 .0

3 .0

E31 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-7.

2.0

1 .0

0 .0

74
Para confirmar a proposta estrutural, To-7 foi submetida a duas reaes: uma
acetilao com anidrido actico em piridina, na qual o grupo hidroxila foi substitudo pelo
grupo acetato (To-7a) e uma reao de ciclizao (To-7b).
A formao do acetato foi confirmada no espectro de RMN de 1H do derivado, no qual
observou-se que o H-7 foi desprotegido de cerca de 1,2 ppm de acordo com o esperado
(SILVERSTEIN, 2006). Tambm foi observado o sinal do grupo acetato ( 2,09, s).
No espectro de IV houve o aparecimento de uma banda de absoro caracterstico de
grupo carbonila de ster em 1736 cm-1e desaparecimento da banda do grupo hidroxila.
Os dados espectrais de RMN de 1H,

13

C{1H}, HSQC, HMBC, UV e IV (Tabela 8;

E32-37) confirmaram a formao do produto To-7a, que tambm indito.

OCOCH3

OH
O

A
O

8
8'

6
7'
1'

5
6'

B
5'

9'

O 4
Anidrido Actico
Piridina

3'

O
O

2'

4'

To-7

8'

6
7'
1'

5
6'
5'

B
4'

9'

2'
3'

O
To-7a

A ciclizao das neolignanas tipo diarildimetilbutanol leva a formao de ariltetralinas.


A reao se d em meio cido, ocorrendo inverso de configurao em C-7 (SN2). Os dados
espectrais de RMN de 1H,

13

C{1H}, HSQC, HMBC, UV e IV (Tabela 9; E38-42)

confirmaram a formao do produto To-7b que tambm indito. Observou-se no espectro de

75
RMN de 1H o desaparecimento do sinal do hidrognio carbinlico, surgindo em seu lugar o
sinal de um hidrognio dibenzlico ( 3,61, d). Alm disso, foram observadas mudanas
significativas nos deslocamentos qumicos dos grupos metila e apenas cinco hidrognios
aromticos, dois dos quais como singletos. No espectro de RMN de 13C{1H} foi observado um
sinal em 51,2 ppm, caracterstico do carbono dibenzlico das ariltetralinas.
No espectro de IV houve o desaparecimento da banda de absoro caracterstico do
grupo hidroxila.

OH
O

A
O

8
8'

6
7'
1'

5
6'

B
5'

9'

p-TsOH
CH2Cl2

2'
3'

O 4

B
6
6'
5'

To-7

4'

8
8'

9'

7'
1'

C
4'

2'
3'

O
To-7b

76
Tabela 8: Dados de RMN de 1H (400 MHz), 13C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC (400 MHz)

em CDCl3 da substncia To-7a.

Posio

(multiplicidade; J em Hz)
-

13

C{1H}

*
134,1

HMBC
1

H-13C
-

6,83 (1H; d; 1,4)

107,5

3, 4, 6, 7; 1 (fraco)

147,7

147,2

6,76 (1H; d; 7,8)

108,0

1, 2, 3, 4

6,82 (1H; dd; 1,4 e 7,8)

121,3

2, 3, 4, 7

5,59 (1H; d; 10,4)

77,9

1, 2, 6, 8, 9, 8, OCOCH3

2,02 (1H; m)

43,0

7, 9; 9(fraco)

0,61 (3H; d; 7,2)

11,3

7, 8, 8

135,5

6,61 (1H; d; 1,6)

109,4

3, 4, 6, 7

147,4

145,5

6,73 (1H; d; 8,0)

107,9

1, 3, 4

6,57 (1H; dd; 1,6 e 8,0)

121,9

2, 4, 7; 3 (fraco)

2,11 (1H; dd; 10,8 e 12,8)

37,2

8, 1, 2, 6, 8, 9

2,76 (1H; dd; 3,2 e 12,8)


8

2,00 (1H; m)

35,6

7, 9; 8, 7, 9(fraco)

0,88 (3H; d; 6,4)

17,5

8, 7, 8

OCH2O

5,93 (2H; s)

100,7

3, 4

OCH2O

5,95 (1H; d; 1,4)

101,0

3, 4

21,3

7, OCOCH3

170,2

5,96 (1H; d; 1,4)


OCOCH3

2,09 (3H; s)

*Atribuio inequvoca atravs de anlise do experimento do HSQC

77
OCOCH3
1.0

0.8

O 4

7'
1'

5
6'
5'

0.4

8
8'

0.6

Absorbncia

9'

2'
3'

4'

O
0.2

0.0
200

225

250

275

300

325

350

Comprimento de onda (nm)

E32 Espectro no UV da substncia To-7a.

100
90

70
60
2962
2925

50
1736

Transmitncia (%)

80

1488

1043

40

20
4000

1248

30

3500

3000

2500

2000

1500
-1

C om prim ento de onda (cm )

E33 Espectro no IV da substncia To-7a.

1000

500

10 0

75
2.0

50

25

5
6'

5'

11.3

O 4

17.5

6.559
6.555

6.579
6.575

6.608
6.605

6.719

6.739

6.752

6.771

6.827
6.823
6.807
6.803

6.832

6.835

21.3

35.6

3.0

37.2

43.0

77.9

100.7

101.0

107.5

107.9

108.0

109.4

121.3

121.9

134.1

135.5

145.5

147.2

147.4

147.7

4.0

O
2

2.94

E35 - Espectro de RMN de C { H} (50 MHz, CDCl3) da substncia To-7a.

13
6.600

3.05

5.0
6.650

1.98
4.00

125
6.700

0.98

0.98

6.0
6.750

0.98

6.800

0.98

ppm (t1)
0.98

150
1.00

7.0
0.98

0.95

p p1m7 5(t1 )
1.94
1.96

0.98
0.98
0.98
0.98
0.98
0.95

170.2

0.665
0.647

0.883
0.867

2.029
2.023
2.012
2.005
1.998
1.992
1.985
1.975
1.967

2.135
2.108
2.103
2.085
2.076

2.779
2.771
2.747
2.739

5.598
5.572

5.960
5.957
5.955
5.951
5.926

6.608
6.605
6.579
6.575
6.559
6.555

6.835
6.832
6.827
6.823
6.807
6.803
6.771
6.752
6.739
6.719

78

OCOCH3
7

A
6

4'

7'
1'
8'

9'

3'

2'

ppm (t1)
6.550

E34 - Espectro de RMN de H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-7a.


1
1.0
0.0

79

50

100

150

200

ppm (t1)
7.0
ppm (t2)

6.0

5.0

4.0

3.0

2.0

1.0

0.0

E36 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-7a.

50

100

150

200

p p m (t1 )
p p m (t27).0

6 .0

5 .0

4 .0

3 .0

2 .0

E37 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-7a.

1 .0

0 .0

80
Tabela 9: Dados de RMN de 1H (400 MHz), 13C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC (400 MHz)

em CDCl3 da substncia To-7b.

Posio

(multiplicidade; J em Hz)
-

13

C{1H}

*
129,3

HMBC
1

H-13C
-

6,56 (1H; sl)

108,3

3, 4, 6, 7

145,7

145,8

6,31 (1H; sl)

109,3

1, 3, 4, 7

130,7

2,44 (1H; dd; 7,6 e 16,4)

35,4

1, 2, 6, 8, 9, 8

2,85 (1H; dd; 5,6 e 16,4)


8

2,02 (1H; m)

28,8

0,89 (3H; d; 6,8)

16,0

7, 8, 7, 8

141,1

6,48 (1H; d; 1,6)

107,6

3, 4, 6; 7 (fraco)

147,4

145,6

6,70 (1H; d; 8,0)

110,1

1, 3, 4, 6

6,51 (1H; dd; 1,6 e 8,0)

122,2

2, 4, 5, 7

3,61 (1H; d; 6,4)

51,2

1, 5, 6, 8, 1, 6, 8, 9

1,89 (1H; m)

40,7

0,89 (3H; d; 6,8)

15,5

7, 8, 7, 8

OCH2O

5,85 (2H; s)

100,5

3, 4

OCH2O

5,91 (1H; d; 1,4)

100,8

3, 4

5,92 (1H; d; 1,4)


*Atribuio inequvoca atravs de anlise do experimento do HSQC

81

1.0

0.8

0.6

A
O

Absorbncia

B
6

8'

7'
1'

6'

9'

2'
3'

5'

0.4

4'

O
0.2

0.0
200

225

250

275

300

325

350

Comprimento de onda (nm)

E38 Espectro no UV da substncia To-7b.

100
90

70
60

1232

40

1040

50
2960
2923

Transmitncia

80

1486

30
20
4000

3500

3000

2500

2000

1500
-1

Comprimento de onda (cm )

E39 Espectro no IV da substncia To-7b.

1000

500

100

75

50

25
15.5

2.0

16.0

28.8

35.4

3.0

40.7

51.2

6.40

6.10

E41 - Espectro de RMN de C { H} (50 MHz, CDCl3) da substncia To-7b.

13

4.0
1.00
1.16

5.0
6.50

1.08

6.0
6.60
1.00

ppm (t1)6.70

1.02

125

1.00

7.0
ppm (t1)

100.5

4'

100.8

5'

107.6

108.3

7'
1'
6.305

6.481

6.485

1.0

1.875
0.897
0.896
0.880
0.879

2.408
2.043
2.040
2.036
2.030
2.025
2.018
2.012
2.005
2.000
1.994
1.987
1.915
1.908
1.899
1.892
1.882

2.427

2.449

2.468

2.834
2.821

2.862
6.495

6.499

2.876
6.514

3.615
3.599

5.854

5.916
5.913
5.910
5.906

6.305

6.485
6.481

6.499
6.495

6.519
6.514

6.561

6.692

6.712

6.519

6.561

6.692

6.712

109.3

8'

110.1

6'
8

122.2

129.3

130.7

141.1

A
7

0.92

145.6

O 4
1

1.12

1 50
p pm (t1)

1.00

1.00

145.7

1.90
0.91
1.00

145.8

1.00

0.92
1.12
1.00
1.00

147.4

82

9'

2'

3'

O
O

6.30

0.0

E40 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-7b.

83

50

100

150

200

pp m (t1)
8.0 (t2)
ppm

7.0

6.0

5.0

4.0

3.0

2.0

1.0

0.0

E42 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-7b.

50

100

150

200

p p m (t1)
.0 (t2 )
p p8m

7 .0

6 .0

5 .0

4 .0

3 .0

2 .0

E43 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-7b.

1 .0

0 .0

84
4.7 Determinao estrutural das substncias To-8, To-8a e To-8b

OH
O

A
O

6
5

8
8'

7'
1'

6'

B
5'

9'

2'
3'

4'

OCH3

OCH3
To-8

O espectro no UV (E44) apresenta mximo de absoro em 287 nm, um segundo


mximo em 234 nm e um terceiro em 208 nm. Esses dados so tpicos do cromforo benzeno
substitudo.
O espectro no IV (E45) mostra uma banda de absoro em 3436 cm-1, indicando a
presena do grupo hidroxila na molcula.
O espectro de RMN de 1H apresentou sinais referentes a duas metilas ( 0,63, d, J=7,2
Hz; 0,89, d, J=6,8 Hz), dois hidrognios metnicos ( 1,83, m; 2,36, m), um sinal de
hidroxila ( 1,76, sl), dois hidrognios benzlicos ( 2,18, dd, J=10,4 e 13,2 Hz; 2,88, dd,
J=3,6 e 13,2 Hz), um hidrognio carbinlico ( 4,42, d, J=9,6 Hz), sinais referentes a duas

metoxilas ligadas a carbono sp2 ( 3,87, s e 3,88, s), um grupo metilenodioxi ( 5,96, s) e
finalmente seis hidrognios aromticos, sendo quatro em acoplamento orto e dois em
acoplamento meta.
O espectro de RMN de 13C{1H} mostrou a presena de 21 carbonos, sendo 2 metlicos,
1 metilnico, 2 metnicos, 1 carbinlico, 2 metoxlicos, 1 metilenodioxi e 12 que apresentam
deslocamentos qumicos tpicos de anel aromtico, sendo que destes, seis so quaternrios.
Pode-se supor a presena de dois anis aromticos trissubstitudos.
A anlise do experimento HSQC confirmou as relaes dos hidrognios com seus
respectivos carbonos, enquanto que o HMBC mostrou as correlaes entre o sinal do
hidrognio carbinlico em 4,42 (H-7) com 11,4 (C-9), 35,0 (C-8), 45,1 (C-8), 106,9
(C-2), 120,4 (C-6) e 138,5 (C-1); o sinal em 6,87 (H-2) com 77,0 (C-7), 120,4 (C-6),

85
138,5 (C-1), 147,0 (C-4) e 147,8 (C-3); o sinal em 5,96 (OCH2O) com 147,0 (C-4) e
147,8 (C-3), confirmando que estes sinais correspondem ao anel aromtico A. Ainda pelo

HMBC, observou-se as correlaes entre os sinais dos hidrognios metilnicos em 2,18 e


2,88 (H-7) com 17,9 (C-9), 35,0 (C-8), 45,1 (C-8), 112,4 (C-2), 121,0 (C-6) e

134,8 (C-1); o sinal em 6,76 (H-2/H-6) com 37,2 (C-7), 112,4 (C-2) e 121,0 (C-6);
os sinais das metoxilas em 3,87 (4-OCH3) com 111,0 (C-5) e 147,0 (C-4) e 3,88 (3OCH3) com 112,4 (C-2) e 148,7 (C-3), confirmando que estes sinais correspondem ao
anel aromtico B. A estrutura pde ser confirmada atravs dessas correlaes, conforme
mostradas abaixo.

OH
O

A
O

8
8'

6
7'
1'

5
6'

B
5'

9'

2'
3'

4'

OCH3

OCH3

Os espectros de RMN de 1H, 13C{1H}, HSQC e HMBC da substncia To-8 (Tabela


10; E46-49), mostraram-se muito semelhantes ao da substncia To-6, diferindo somente no

deslocamento qumico dos grupos metila, o que sugere a mesma situao observada entre a
To-5 e To-7. Portanto To-8 deve ser um diastereoismero da oleiferina-A, com a configurao
relativa 7S, 8R, 8R. Essa substncia est sendo descrita pela primeira vez e foi denominada
(+)-talaumina-B.

86
Tabela 10: Dados de RMN de 1H (400 MHz),

13

C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC (400

MHz) em CDCl3 da substncia To-8.

Posio

(multiplicidade; J em Hz)
-

13

C{1H}

HMBC
1

*
138,5

H-13C
-

6,87 (1H; sl)

106,9

3, 4, 6, 7; 1, 5 (fraco)

147,8

147,0

6,79; m

107,9

1, 2, 3, 4

6,79; m

120,4

1, 2, 4, 7

4,42 (1H; d; 9,6)

77,0

1, 2, 6, 8, 9, 8

1,83 (1H; m)

45,1

7, 9, 7, 9(fraco)

0,63 (3H; d; 7,2)

11,4

7, 8, 8

134,8

6,76; m

112,4

6, 7

148,7

147,0

6,76; m

111,0

6,76; m

121,0

2, 7

2,18 (1H; dd; 10,4 e 13,2)

37,0

8, 1, 2, 6, 9; 8(fraco)

2,88 (1H; dd; 3,6 e 13,2)


8

2,36 (1H; m)

35,0

9, 7, 9(fraco)

0,89 (3H; d; 6,8)

17,9

8, 7, 8

7-OH

1,76 (1H; sl)

4-OCH3

3,87 (3H, s)

55,8

4, 5

3-OCH3

3,88 (3H, s)

55,9

2, 3

OCH2O

5,96 (2H; s)

101,0

3, 4

*Atribuio inequvoca atravs de anlise do experimento do HSQC

87

1.0

OH
O

0.8

A
O

Absorbncia

0.6

8
8'

9'

7'

1'

6'

0.4

5'

2'
3'

OCH3

4'

OCH3

0.2

0.0
200

225

250

275

300

325

350

Comprimento de onda (nm)

E44 Espectro no UV da substncia To-8.

70

60

55

40
4000

3500

3000

2500

2000

1500
-1

Comprimento de onda (cm )

E45 Espectro no IV da substncia To-8.

1247

1519

45

2960
2925

1031

50

3436

Transmitncia (%)

65

1000

500

1'

( f1 )
6 .7 5 0

5'
4'

3.0
2.0

50

E47 - Espectro de RMN de 13C {1H} (50 MHz, CDCl3) da substncia To-8.
11.4

6'

17.9

8'

29.7

7'

35.0

37.0

45.1

55.8

55.9

77.0

101.0

106.9

107.9

111.0

112.4

120.4

3.00

121.0

3.02

138.5
134.8

1.00
1.05

100
4.0

1.18

147.0

1.01

147.8

1.00

5.0
6.00

1.05

6.0
0.95

6 .8 0 0
1.02

p1
p5
m0 (t1 )
2.01

0.95
1.06
1.02
1.09
1.00

7.0
1.06

6 .8 5 0
1.02

ppm
1.09

1.00

148.7

6.736

6.741

6.757

6.769

6.771

6.788

6.793

6.804

6.810

6.868

ppm (f1)
1.0

E46 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-8.


0.623

0.641

0.877

0.894

1.759

1.811

1.835

2.145
1.859

2.171

2.179

2.204

2.338

2.355

2.373

2.399

2.856

2.865

2.889

2.898

3.869

3.884

4.409

4.433

5.962

6.736

6.741

6.757

6.771
6.769

6.788

6.793

6.804

6.810

6.868

88

OH
9

9'

2'

3'

OCH3

OCH3

0.0

89

50

100

150

200

ppm (t1)
10.0
ppm
(t2)

5.0

0.0

E48 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-8.

50

10 0

15 0

20 0

pp m (t1)
.0)
p pm10(t2

5 .0

E49 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-8.

0.0

90
Para confirmar a proposta estrutural, To-8 foi submetida a duas reaes: uma
acetilao com anidrido actico em piridina, na qual o grupo hidroxila foi substitudo pelo
grupo acetato (To-8a) e uma reao de ciclizao (To-8b).
A formao do acetato foi confirmada no espectro de RMN de 1H do derivado, no qual
observou-se que o H-7 foi desprotegido de cerca de 1,2 ppm de acordo com o esperado
(SILVERSTEIN, 2006). Tambm foi observado o sinal do grupo acetato ( 2,08, s).
No espectro de IV houve o aparecimento de uma banda de absoro caracterstico de
grupo carbonila de ster em 1722 cm-1. A banda do grupo hidroxila quase desapareceu,
restando uma banda fraca que pode ser atribuda umidade na amostra.
Os dados espectrais de RMN de 1H,

13

C{1H}, HSQC, HMBC, UV e IV (Tabela 11;

E50-55) confirmaram a formao do produto To-8a, que tambm indito.

OH
O

A
O

8
8'

6
7'
1'

5
6'

B
5'

O 4
9'
Anidrido Actico
Piridina

2'

OCOCH3
7

OCH3

OCH3
To-8

8
8'

6
7'
1'

5
6'

B
5'

3'

4'

9'

2'
3'

4'

OCH3

OCH3
To-8a

A ciclizao levou a formao de um produto indito (To-8b) que foi confirmado pelos
dados espectrais de RMN de 1H, 13C{1H}, HSQC, HMBC, UV e IV (Tabela 12; E56-61).
Observou-se no espectro de RMN de 1H o desaparecimento do sinal do hidrognio
carbinlico, surgindo em seu lugar o sinal de um hidrognio dibenzlico ( 3,67, d). Alm
disso, foram observadas mudanas significativas nos deslocamentos qumicos dos grupos
metila e apenas cinco hidrognios aromticos, dois dos quais como singletos. No espectro de

91
RMN de 13C{1H} foi observado um sinal em 51,0 ppm, caracterstico do carbono dibenzlico
das ariltetralinas.
No espectro de IV houve a diminuio da intensidade da banda de absoro
caracterstica do grupo hidroxila. A banda fraca observada deve ser decorrente da presena de
umidade.

OH
O

A
O

8
8'

6
7'
1'

5
6'

B
5'

9'

p-TsOH
CH2Cl2

H3CO 4

2'

B
6

7'
1'

6'

OCH3

OCH3
To-8

C
5'

3'

4'

H3CO

4'

O
To-8b

8'

2'
3'

9'

92
Tabela 11: Dados de RMN de 1H (400 MHz),

13

C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC (400

MHz) em CDCl3 da substncia To-8a.

Posio

(multiplicidade; J em Hz)
-

13

C{1H}

*
134,0

HMBC
1

H-13C
-

6,85 (1H; d; 1,6)

107,5

6, 7

147,7

147,2

6,77 (1H; d; 8,0)

108,0

1, 4

6,79; m

121,3

2, 7

5,67 (1H; d; 10,4)

77,9

1, 2, 6, 8; 8, OCOCH3 (fraco)

2,02 (1H; m)

43,2

7, OCOCH3 (fraco)

0,67 (3H; d; 6,8)

11,2

7, 8, 8

134,4

6,68; m

112,3

1, 6

147,4

145,5

6,79 (1H; d; 8,8)

108,0

1, 3; 6(fraco)

6,68; m

121,0

1, 2(fraco)

2,08 (1H; dd; 2,8 e 13,2)

37,0

1, 2, 6, 8, 9

2,80 (1H; dd; 3,2 e 13,2)


8

2,02 (1H; m)

35,7

7 (fraco)

0,88 (3H; d; 6,4)

17,6

8, 7, 8

3-OCH3

3,88 (3H, s)

55,7

4-OCH3

3,87 (3H, s)

55,9

OCH2O

5,96 (1H; d; 1,4)

101,1

3, 4

21,4

OCOCH3

170,2

5,97 (1H; d; 1,4)


OCOCH3

2,08 (3H; s)

*Atribuio inequvoca atravs de anlise do experimento do HSQC

93

1.0

0.8

OCOCH3
7

Absorbncia

A
O

0.6

8'
6
6'

0.4

7'
1'

5'

9'

2'
3'

OCH3

4'

OCH3

0.2

0.0
200

225

250

275

300

325

350

Comprimento de onda (nm)

E50 Espectro no UV da substncia To-8a.

80

Transmitncia (%)

70

60

50

4000

3500

3000

2500

2000

1247

30

1722

2960
2923

40

1500
-1

C o m p rim e n to d e o n d a (c m )

E51 Espectro no IV da substncia To-8a.

1000

500

100

50

E53 - Espectro de RMN de 13C {1H} (50 MHz, CDCl3) da substncia To-8a.
4

6.651

6.656

6.669
6.664

6.672

6.677

6.760

6.780

6.802

6.820

6.824

6.834

5
6'

2 .0

6
7'
1'

5'

11.2

17.6

21.4

35.7

37.0

3 .0

43.2

55.7

4 .0

55.9

77.9

101.1

107.5

108.0

111.0

112.3

121.0

121.3

134.0

134.4

147.1

147.2

O
2

3.01

5 .0
3.07

6 .0
2.15
4.01

150
6 .7 0 0

1.09

147.7
6 .7 5 0

6.06

7 .0
1.00

p p m (t1 )
148.7

6 .8 0 0

2.00

2.01
2.02
1.08
1.01

8 .0
p p m (t1 )
2.01

6 .8 5 0
p p m (t1 )
2.02

1.08

1.01

170.2

6.839

6.850
6.843

6.854

0.675
0.658

0.884

0.901

1.986
1.978

2.012

2.036

2.102
2.095
2.083
2.070
2.064

2.789
2.782

2.822
2.814

3.877
3.867

5.657

5.683

5.967
5.963
5.962
5.959

6.780
6.760
6.677
6.672
6.669
6.664
6.656
6.651

6.802

6.854
6.850
6.843
6.839
6.834
6.824
6.820

94

OCOCH3
8
8'

4'

9'

2'

3'

OCH3

OCH3

6 .6 5 0

1 .0

E52 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-8a.

95

50

100

150

200

p p m (t1 )
.0 )
p p m8(t2

7 .0

6 .0

5 .0

4 .0

3 .0

2 .0

1 .0

0 .0

E54 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-8a.

50

10 0

15 0

20 0

ppm (t1 )
.0
p pm8(t2)

7.0

6.0

5.0

4 .0

3.0

2.0

E55 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-8a.

1.0

0 .0

96
Tabela 12: Dados de RMN de 1H (400 MHz),

13

C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC (400

MHz) em CDCl3 da substncia To-8b.

Posio

(multiplicidade; J em Hz)
-

13

C{1H}

*
128,4

HMBC
1

H-13C
-

6,59 (1H; sl)

111,2

3, 4, 6, 7

147,1

147,4

6,34 (1H; sl)

113,3

1, 3, 4, 7

129,3

34,6

1, 2, 8, 9, 8

2,45 (1H; dd; 8,0 e 16,4)


2,84 (1H; dd; 5,6 e 16,4)
2,02 (1H; m)

28,4

0,90 (3H; d; 6,8)

16,6

7,7

141,3

6,49 (1H; d; 1,6)

109,4

4, 6; 3,7(fraco)

147,3

145,5

6,70 (1H; d; 8,4)

107,6

1, 3, 6; 4(fraco)

6,49 (1H; dd; 1,6 e 8,4)

122,1

4, 5; 2, 3(fraco)

3,67 (1H; d; 5,6)

51,0

1, 5, 8, 1, 6, 8, 9; 2(fraco)

1,90 (1H; m)

40,9

0,91 (3H; d; 7,2)

15,3

8, 8

3-OCH3

3,69 (3H; s)

55,8

3, 4

4-OCH3

3,87 (3H; s)

55,7

3, 4

OCH2O

5,92 (2H; s)

100,8

3, 4

*Atribuio inequvoca atravs de anlise dos experimentos do HSQC e HMBC

97

1.0

H3CO

0.8

Absorbncia

A
H3CO 4

0.6

B
6

7'
1'

6'

0.4

8
8'

9'

2'
3'

5'

4'

O
0.2

0.0
200

225

250

275

300

325

350

Comprimento de onda (nm)

E56 Espectro no UV da substncia To-8b.

95

Transmitncia (%)

90

85

80

2931

1516
1486

2957

70

65
4000

3500

3000

2500

2000

1500
-1

C om prim ento de onda (cm )

E57 Espectro no IV da substncia To-8b.

1249

75

1000

500

E59 - Espectro de RMN de C { H} (50 MHz, CDCl3) da substncia To-8b.

13

100

5'
4'

2.0
1.0

50
15.3

8'

16.6

6'

7'
1'

28.4

34.6

3.0

B
8

40.9

6 .3 0

51.0

4.0

55.7

55.8

5.0

100.8

107.6

109.4

111.2

6.0

113.2

122.1

128.4

141.3

H3CO 4

6.32

145.5

6 .4 0

1.06
1.18

147.1

H3CO

1.28

147.1

6 .5 0

1.16

1 5 )0
p p m (t1

4.12
3.04

7.0
ppm (t1)
2.01

0.89
1.94
1.00
0.98

147.3
6 .6 0
0.89

p p m (t16) .7 0
1.94

1.00

0.98

147.4

6.335

6.473

6.478

6.483

6.487

6.494

6.498

6.587

6.688

6.709

1.919
1.880
0.917
0.908
0.899
0.891

2.046
2.026
2.008
1.987

2.868
2.855
2.827
2.813
2.477
2.457
2.436
2.416

3.689
3.679
3.665

3.866

5.917

6.498
6.494
6.487
6.483
6.478
6.473
6.335

6.587

6.709
6.688

98

9'

2'

3'

E58 - Espectro de RMN de H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-8b.


1

0.0

99

50

100

150

200

p p m (t1 )
8 .0)
p p m (t2

7 .0

6 .0

5 .0

4 .0

3 .0

2 .0

1 .0

0 .0

E60 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-8b.

50

100

150

200

p p m (t1 )
8 .0)
p p m (t2

7 .0

6 .0

5 .0

4 .0

3 .0

2 .0

E61 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-8b.

1 .0

0 .0

100
4.8 Determinao estrutural da substncia To-9 e identificao estrutural da substncia
To-9a

OH
H3CO

A
H3CO

8
8'

6
6'

7'
1'

5'

9'

2'
3'

4'

OCH3

OCH3
To-9

A substncia To-9 foi obtida acompanhada de outra no identificada. Apesar disso foi
possvel identifica-la, atravs da observao dos sinais principais e comparao com as
anteriores (To-7 e To-8).
O espectro de RMN de 1H (Tabela 13; E62) mostrou claramente sinais referentes a
duas metilas ( 0,63, d, J=6,8 Hz; 0,90, d, J=6,8 Hz), um hidrognio carbinlico ( 4,47, d,
J=9,6 Hz), quatro grupos metoxilas ( 3,87, s; 3,88, s; 3,89, s e 3,91, s) e finalmente seis

hidrognios aromticos, sendo quatro em acoplamento orto e dois em acoplamento meta. Na


regio dos hidrognios metnicos e benzlicos foram observados vrios multipletos
correspondentes tanto a To-9 como ao outro composto, no sendo possvel fazer atribuies
devido sobreposio dos sinais. O deslocamento qumico dos grupos metila foi similar
queles observados para To-7 e To-8, indicando a mesma estereoqumica relativa.
A anlise do experimento HSQC (Tabela 13; E63) confirmou as relaes de alguns
hidrognios com seus respectivos carbonos, enquanto que o HMBC (Tabela 13; E64) mostrou
as correlaes entre o sinal do hidrognio carbinlico em 4,47 (H-7) com 109,3 (C-2) e
119,3 (C-6); o sinal em 6,91 (H-2) com 76,9 (C-7), 119,3 (C-6) e 149,1 (C-3),

101
confirmando que estes sinais correspondem ao anel aromtico A. Ainda pelo HMBC,
observou-se as correlaes entre os sinais dos hidrognios em 6,77 (H-2) com 36,8 (C-7),
121,0 (C-6), 148,6 (C-4) e 147,1 (C-3'); o sinal em 6,80 (H-5) com 134,7 (C-1),

confirmando que estes sinais correspondem ao anel aromtico B. A estrutura pde ser
confirmada atravs dessas correlaes, conforme mostradas abaixo. Como as anteriores, esta
substncia tambm indita na literatura e recebeu o nome de (+)-talaumina-C.

OH
H3CO

A
H3CO 4

8
8'

6
6'

7'
1'

5'

9'

2'
3'

4'

OCH3

OCH3

102
Tabela 13: Dados de RMN de 1H (400 MHz), 13C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC (400

MHz) em CDCl3 da substncia To-9.

Posio

(multiplicidade; J em Hz)
-

13

C{1H}

HMBC

*
137,0

H-13C
-

6,91 (1H; d; 1,2)

109,3

3, 6, 7

149,1

148,5

6,83; m

110,6

6,83; m

119,3

4,47 (1H; d; 9,6)

76,9

2, 6, 8

1,90; m

45,1

0,63 (3H; d; 6,8)

11,3

7, 8, 8

134,7

6,77 (1H; d; 1,6)

111,4

3, 4, 6, 7

147,1

148,6

6,80; m

112,6

1,3

6,75; m

121,0

1,90; m

36,8

2,91 (1H; dd; 3,8 e 13,1)


8

1,90; m

35,0

0,90 (3H; d; 6,8)

17,8

8, 7, 8

7-OH

1,90; sl

3-OCH3

3,87 (3H; s)

56,2

4-OCH3

3,88 (3H; s)

56,2

4-OCH3

3,89 (3H; s)

56,2

3-OCH3

3,91 (3H; s)

56,2

*Atribuio inequvoca atravs de anlise dos experimentos do HSQC e HMBC

0.621

0.638

0.889

0.906

1.841

1.883

1.908

2.883

2.893

2.916

2.926

3.872

3.890
3.886

3.905

4.452

4.476

6.753
6.749

6.769

6.794

6.821
6.816

6.842

6.851
6.847

6.871
6.867

6.916
6.913

103

OH
H3CO

A
H3CO 4

8
8'

6'

7'
1'

5'

9'

2'
3'

OCH3

4'

OCH3

2 .0

1 .0

3.00

3 .0

3.09

4 .0

3.08

5 .0

1.13

6 .0

12.00

7 .0

1.00

4.96
0.96

p p8m.0(t1 )

0 .0

E62 - Espectro de RMN de H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-9.

50

100

150

200

ppm (t1)
8.0(t2)
ppm

7.0

6.0

5.0

4.0

3.0

2.0

E63 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-9.

1.0

0.0

104

50

100

150

200

ppm (t1)
8.0(t2)
ppm

7.0

6.0

5.0

4.0

3.0

2.0

E64 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-9.

1.0

0.0

105
Durante a obteno dos espectros bidimensionais da mistura contendo To-9, esta
ciclizou espontaneamente, como comum com esta classe de neolignanas (LOPES et al.,
1984).
A ciclizao levou a formao de To-9a que foi confirmado pelos dados espectrais de
RMN de 1H, 13C{1H} e HMBC (Tabela 14; E65-67).
Observou-se no espectro de RMN de 1H o desaparecimento do sinal do hidrognio
carbinlico, surgindo em seu lugar o sinal de um hidrognio dibenzlico ( 3,69, d). Alm
disso, foram observadas mudanas significativas nos deslocamentos qumicos dos grupos
metila e apenas cinco hidrognios aromticos, dois dos quais como singletos. No espectro de
RMN de 13C{1H} foi observado um sinal em 50,9 ppm, caracterstico do carbono dibenzlico
das ariltetralinas.

OH
H3CO 3

A
H3CO

8
8'

6
7'
1'

5
6'

B
5'

H3CO

9'

2'

H3CO

A
CDCl3

B
6

7'
1'

6'
5'

OCH3

OCH3

To-9

3'

4'

8'

9'

2'
3'

4'

OCH3

OCH3

To-9a

Seus dados espectrais e rotao especfica foram comparados com a literatura,


identificando To-9a como a neolignana conhecida (-)-isogalbulina (ter dimetlico da
isoguaiacina) que apresenta configurao absoluta (7R ,8R, 8R) (KONNO et al.,1989).
Como a ciclizao ocorre com inverso de configurao no C-7, podemos afirmar que a
substncia To-9 tem a configurao absoluta 7S, 8R, 8R. provvel que as demais
neolignanas ciclizadas tambm tenham essa configurao absoluta, pois apresentaram o
mesmo sinal de rotao especfica.

106
Tabela 14: Dados de RMN de 1H (400 MHz),

13

C{1H} (50 MHz) e HMBC (400 MHz) em

CDCl3 da substncia To-9a.

Posio

(multiplicidade; J em Hz)
-

13

C{1H}

HMBC

*
128,4

H-13C
-

6,60 (1H; sl)

110,9

4, 6, 7

147,0

147,1

6,34 (1H; sl)

112,1

1, 3, 7

129,4

34,7

1, 2, 8, 9, 8(fraco)

2,46 (1H; dd; 8,0 e 16,4)


2,86 (1H; dd; 5,6 e 16,4)
2,03 (1H; m)

28,6

0,91 (3H; d; 6,8)

16,5

7, 8, 7, 8

139,7

6,58 (1H; d; 2,0)

110,5

4 , 6; 3(fraco)

148,5

146,9

6,75 (1H; d; 8,4)

113,1

1, 3; 4(fraco)

6,51 (1H; dd; 2,0 e 8,4)

121,3

2, 5(fraco)

3,69 (1H; d; 5,6)

50,9

5, 6, 1, 6, 8; 8, 9(fraco)

1,94 (1H; m)

40,7

0,92 (3H; d; 7,2)

15,4

7, 8, 7, 8

4-OCH3

3,67 (3H; s)

55,77

3-OCH3

3,80 (3H; s)

55,8

3-OCH3

3,86 (3H; s)

55,9

4-OCH3

3,87 (3H; s)

55,70

*Atribuio inequvoca atravs de anlise do experimento do HMBC

H3CO 3

7'
1'

6'
5'

8'

3'

OCH3

6.55 0

6.50 0

6.45 0

6.400

6 .350

3.0

6.09

4.0

1.21
1.61

5.0

1.54

6.0

1.12

4.01
3.00
6.03

0.92
1.10
0.98
0.97
1.13
7.0
ppm (t1)

OCH3

0.92

6.60 0

1.10

6.6 50

0.98

0.97

1.13
6.7 00

9'

2'

4'

pp6.750
m (t1)

0.926
0.918
0.908
0.901

9
8

A
H3CO 4

2.050
2.039
2.031
2.014
1.993
1.960
1.953
1.943
1.928
1.921

2.495
2.474
2.453
2.433

2.890
2.876
2.849
2.835

6.344

3.804
3.698
3.684
3.673

3.874
3.856

6.344
6.494

6.499

6.515

6.519

6.573

6.519
6.515
6.499
6.494
6.578

6.599

6.735

6.756

6.756
6.735
6.599
6.578
6.573

107

2.0

1.0

0.0

200
ppm (f1)

150

100

13

50

E66 - Espectro de RMN de C { H} (50 MHz, CDCl3) da substncia To-9a.

15.4

16.5

28.6

34.7

40.8

50.9

55.7

55.8

55.8

55.9

121.3

128.4

E65 - Espectro de RMN de H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-9a.

108

50

100

150

200

p p m (t1 )
p p m (t2 )

5 .0

E67 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-9a.

0 .0

109
4.9 Identificao estrutural da substncia To-10

1
2
3

15

10
5

9
14
6

8
7

Ha
11

12

13

Hb

O
To-10

O espectro de RMN de 1H da substncia To-10 (Tabela 15; E68), apresenta sinais


caractersticos de lactona sesquiterpnica ( 3,87, t, J=8,8 Hz), com uma ligao dupla
exocclica ( 5,63, d, J=3,2 Hz; 6,33, d, J=3,6 Hz), duas metilas, sendo uma mais
desprotegida, com deslocamento qumico caracterstico de metila ligada a carbono sp2 ( 1,31,
s; 1,72, s). Alm disso, pode ser observado o sinal de um hidrognio olefnico ( 5,22, dd,
J=2,6 e 11,8 Hz).

O espectro de RMN de 13C{1H} (Tabela 15; E69), mostrou a presena de 15 carbonos,


sendo 2 metlicos, 4 metilnicos, 1 metnico, 3 ligados a oxignio, 4 com deslocamentos
qumicos tpicos de carbonos sp2 e 1 do grupo carbonila de ster.
Dados de RMN de 1H e

13

C{1H} da literatura (ACOSTA et al., 1993; WONG et al.,

2002), mostraram que To-10 uma lactona sesquiterpnica do tipo germacranolido, conhecida
como (-)-partenolido, tendo j sido isolado anteriormente das cascas do tronco de Talauma
ovata (STEFANELLO et al., 2002) e de outras espcies de Magnoliaceae (ACOSTA et al.,

1993; OGURA et al., 1978).

110
Tabela 15: Dados de RMN de 1H (200 MHz) e 13C{1H} (50 MHz) em CDCl3 da substncia
To-10.

Posio

13

C{1H}

(multiplicidade; J em Hz)
1

5,22 (1H; dd; 2,6 e 11,8)

134,6

2a

2,17 (1H; m)

30,6

2b

2,43 (1H; m)

3a

1,21 (1H; m)

3b

2,17 (1H; m)

61,5

2,79 (1H; d; 8,8)

66,3

3,87 (1H; t; 8,8)

82,4

2,80 (1H; m)

47,6

8a

1,73 (1H; m)

24,1

8b

2,17 (1H; m)

9a

2,17 (1H; m)

9b

2,35 (1H; m)

10

125,2

11

139,2

12

162,2

13a

5,63 (1H; d; 3,2)

121,2

13b

36,3

41,2

6,33 (1H; d; 3,6)

14

1,72 (3H; s)

16,9

15

1,31 (3H; s)

17,2

150

125

100

75

50

25
16.9

17.2

24.1

30.6

2.0

36.3

41.2

47.6

3.0

61.5

66.3

4.0
1.76
3.13

5.0
4.24

E69 - Espectro de RMN de C { H} (50 MHz, CDCl3) da substncia To-10.

13

12

82.4

O
11

4.18

175

O
7

1.14
0.93

200

6.0

121.2

15
5
8

2.06

p p m ( t1 )

4
14

125.2

3
10

134.6

139.2

1.00

7.0
ppm (t1)
1.00

1.00

169.2

Ha

13

Hb

1.0
0.0

E68 - Espectro de RMN de 1H (200 MHz, CDCl3) da substncia To-10.

1.198
1.169

1.717
1.685
1.308
1.256
1.233

2.142
2.133
2.118
2.108
1.768
1.761
1.747

2.338
2.310
2.242
2.233
2.208
2.198
2.177

2.402
2.398
2.377
2.370

2.854
2.848
2.836
2.830
2.816
2.794
2.791
2.772
2.752
2.736
2.467
2.463
2.438

3.826

3.869

3.912

5.193
5.180

5.252
5.239

5.642
5.626

6.343
6.325

111

112
4.10 Identificao estrutural da substncia To-11

1
2
3
15

O
10
5

9
14
6

8
7

Ha
11

12

13

Hb

O
To-11

O espectro de RMN de 1H da substncia To-11 (Tabela 16; E70), mostrou-se muito


semelhantes ao da substncia To-10, apresentando sinais caractersticos de lactona
sesquiterpnica ( 3,95, t, J=8,8 Hz), com uma ligao dupla exocclica ( 5,63, d, J=3,2 Hz;
6,36, d, J=3,6 Hz).
A principal diferena entre as duas substncias est no deslocamento qumico dos
grupos metila, onde To-11 apresenta as duas metilas com deslocamentos qumicos muito
semelhantes ( 1,35, s; 1,41, s). Alm disso, foi observado o sinal de um hidrognio ligado a
um grupo epxido ( 2,86, dd, J=1,4 e 10,8 Hz) em substituio ao hidrognio olefnico
presente na substncia anterior
O espectro de RMN de 13C{1H} (Tabela 16; E71), mostrou a presena de 15 carbonos,
sendo 2 metlicos, 4 metilnicos, 1 metnico, 5 ligados a oxignio, 2 com deslocamentos
qumicos tpicos de carbonos sp2 e 1 do grupo carbonila de ster.
A anlise do experimento HSQC (Tabela 16; E72) confirmou as relaes dos
hidrognios com seus respectivos carbonos, enquanto que o HMBC (Tabela 16;
E73) mostrou as correlaes entre o sinal dos hidrognios metlicos em 1,35 (CH3-14) com

40,1 (C-9), 60,7 (C-10) e 63,7 (C-1); o sinal em 1,40 (CH3-15) com 35,1 (C-3), 60,5
(C-4) e 64,6 (C-5); o sinal em 2,49 (Hb-9) com 25,9 (C-8), 47,7 (C-7), 60,7 (C-10) e
63,7 (C-1); o sinal em 2,86 (H-1) com 23,9 (H-2); o sinal em 2,91 (H-5) com 35,1 (C-

3), 47,7 (C-7), 60,5 (C-4) e 81,7 (C-6). Ainda pelo HMBC, observou-se as correlaes
entre os sinais do hidrognio 3,95 (H-6) com 25,9 (C-8), 60,5 (C-4) e 64,6 (C-5) e dos

113
hidrognios geminais da dupla exocclica em 5,63 (Ha-13) e 6,36 (Hb-13) com 47,7 (C7), 138,8 (C-11) e

168,8 (C-12). A estrutura pde ser confirmada atravs dessas

correlaes, conforme mostradas abaixo.

1
2
3
15

10
4

14
6

8
7

Ha
11

12

13

Hb

O
Dados de RMN de 1H da literatura (OGURA et al., 1978), mostraram que To-11
tambm germacranolido, conhecido como (-)-michelenolido, tendo sido isolado da casca da
raiz de Michelia compressa (Magnoliaceae). No h dados de
literatura consultada.

13

C para este composto na

114
Tabela 16: Dados de RMN de 1H (400 MHz),

13

C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC (400

MHz) em CDCl3 da substncia To-11.

Posio

13

C{1H}

HMBC
1

H-13C

(multiplicidade; J em Hz)

2,86 (1H; dd; 1,4 e 10,8)

63,7

2a

1,54 (1H; m)

23,9

10; 1, 3 (fraco)

2b

2,19 (1H; m)

3a

1,42 (1H; m)

3b

2,30 (1H; m)

60,5

2,91 (1H; d; 8,8)

64,6

3, 6, 7; 4 (fraco)

3,95 (1H; t; 8,8)

81,7

4, 5, 8

2,74 (1H; m)

47,7

8a

1,60 (1H; m)

25,9

6, 7, 9, 10 (fraco)

8b

2,22 (1H; m)

9a

1,28 (1H; m)

9b

2,49 (1H; dd; 7,8 e 14,3)

10

60,7

11

138,8

12

168,8

13a

5,63 (1H; d; 3,2)

121,3

7, 11, 12

13b

4, 10
35,1

2,15
2, 4; 5 (fraco)

6, 10, 11; 7, 9 (fraco)


40,1

7, 10, 14; 8 (fraco)


1, 7, 10; 8 (fraco)

6,36 (1H; d; 3,6)

14

1,35 (3H; s)

17,4

1, 9, 10,

15

1,40 (3H; s)

17,0

3, 4, 5

*Atribuio inequvoca atravs de anlise do experimento do HSQC

9 0
8 0
( p p m )

7 0

6 0

4
3
0
0

.
.
.
.

5
7
6
5

7
0
5
0

3
0
3
5

4
6
1
2

5 0

3
4

15

2.0

4 0

10
5

3 0

E71 - Espectro de RMN de 13C {1H} (50 MHz, CDCl3) da substncia To-11.
14

1.0

2 0

1 7 . 4 2 6 4
1 7 . 0 2 7 0

2 5 . 9 7 7 1
2 3 . 9 6 5 2

1.546
1.540
1.536
1.528
1.436
1.296
1.404
1.352
1.278
1.423

2.193
2.189
2.182
2.176
1.606
1.603
1.594
1.592

2.458
2.308
2.303
2.297
2.291
2.233
2.229
2.224
2.216
2.212

2.494
2.478

2.843
2.840
2.761
2.757
2.748
2.742
2.739
2.735
2.730
2.720
2.716
2.513

2.900
2.870
2.867

2.922

3.926

3.948

3.970

3 5 . 1 0 4 7

4 0 . 1 0 4 9

4 7 . 6 7 9 2

6
6
6
6

8 1 . 7 3 3 9

1 2 1 . 2 9 1 8

1 3 8 . 8 0 7 4

3.0
1.06
3.12
3.04
0.77
0.93
1.02

1 0 0

1.04
1.02
1.09

1 1 0

1.21

1 2 0

1.22
1.10
1.00

1 3 0

4.0
1.06

1 4 0
2.00
3.12
3.04
0.77

5.0
0.93

1 5 0
2.50
1.02

1 6 0

1.27

6.0
1.04
1.02

1 7 0

1.00

1.02

7.0
ppm (t1)
3.00
1.09

3.50
1.21

4.00
ppm (t1)
1.22

1.10
1.00

1.27

1 6 8 . 8 0 8 7

1.436
1.423
1.404
1.352
1.296
1.278

1.546
1.540
1.536
1.528

3.970
3.948
3.926
2.922
2.900
2.870
2.867
2.843
2.840
2.761
2.757
2.748
2.742
2.739
2.735
2.730
2.720
2.716
2.513
2.494
2.478
2.458
2.308
2.303
2.297
2.291
2.233
2.229
2.224
2.216
2.212
2.193
2.189
2.182
2.176
1.606
1.603
1.594
1.592

5.636
5.628

6.361
6.352

115

9
8
11

13

Ha

12

Hb

1.50

0.0

E70 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-11.

1 0

116

50

100

150

200

ppm (t1)
8.0

7.0

6.0

5.0

4.0

3.0

2.0

1.0

0.0

ppm (t2)

E72 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-11.

50

100

150

200

p p m ( t1 )
8 .0
p p m ( t2 )

7 .0

6 .0

5 .0

4 .0

3 .0

2 .0

E73 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-11.

1 .0

0 .0

117
4.11 Identificao estrutural da substncia To-12

Hb
Ha

14
10
1

2
3
15

9
8

OH

Ha
11

12

13

Hb

O
To-12

O espectro de RMN de 1H da substncia To-12 (Tabela 17; E74) tambm apresentou


sinais caractersticos de uma lactona sesquiterpnica ( 4,06, dd, J=8,8 e 11,6 Hz) com uma
ligao dupla exocclica ( 5,53, d, J=3,2 Hz; 6,240, d, J=3,6 Hz). Alm disso, foi observado
o sinal referente a um nico grupo metila ( 1,32, s) e sinais de uma outra dupla exocclica (
4,98, sl; 5,01, sl).
O espectro de RMN de 13C{1H} (Tabela 17; E75), mostrou a presena de 15 carbonos,
sendo, 1 metlico, 4 metilnicos, 3 metnicos, 2 oxigenados, 4 com deslocamentos qumicos
tpicos de carbonos sp2 e 1 do grupo carbonila de ster.
Pela anlise do HMBC (Tabela 17; E76) mostrou as correlaes entre os sinais do
hidrogniometlico em 1,32 (CH3-15) com 40,2 (C-3), 55,7 (C-5) e 79,7 (C-4), o sinal
dos hidrognios geminais da dupla exocclica em 4,98 (Ha-14) e 5,01 (Hb-14) com 39,3
(C-9) e 44,0 (C-1). Ainda pelo HMBC, observou-se as correlaes entre os sinais dos
hidrognios geminais da dupla exocclica do anel lactnico em 5,53 (Ha-13) e 6,24 (Hb13) com 47,4 (C-7), 138,7 (C-11) e 169,7 (C-12).
A estrutura pde ser confirmada atravs dessas correlaes, conforme mostradas.

118

Hb
Ha 14
2
3

10 9

8
4

15

OH

11

Ha
13

Hb

12

Dados de RMN de 1H e 13C{1H} da literatura (ACOSTA et al., 1993), mostraram que


To-12, tambm uma lactona sesquiterpnica, mas com esqueleto guaiano, conhecida como

(-)-11,13-dehidrocompressanolido.

119
Tabela 17: Dados de RMN de 1H (400 MHz),

13

C{1H} (50 MHz) e HMBC (400 MHz) em

CDCl3 da substncia To-12.

Posio

13

C{1H}

HMBC
1

(multiplicidade; J em Hz)

H-13C

3,03 (1H; m)

44,0

1,82 (2H; m)

26,2

3a

1,82 (1H; m)

40,2

3b

1,94 (1H; m)

79,4

2,38 (1H; t; 11,6)

55,7

4,06 (1H; dd; 11,6 e 8,8)

84,1

2,77 (1H; m)

47,4

8a

1,38 (1H; m)

31,4

9a

2,26 (1H; ddd; 3,6; 7,6 e 13,6)


1,94 (1H; m)

39,3

9b

2,69 (1H; dt; 3,6 e 12,8)

10

148,0

11

138,7

12

169,7

13a

5,53 (1H; d; 3,2)

120,7

7, 11, 12

112,7

1, 9

23,9

3, 4, 5

8b

13b

6,24 (1H; d; 3,6)

14a

4,98 (1H; sl)

14b

5,01 (1H; sl)

15

1,32 (3H; s)

*Atribuio inequvoca atravs de anlise do experimento do HMBC

75

OH

2.0

50

E75 - Espectro de RMN de 13C {1H} (50 MHz, CDCl3) da substncia To-12.
11

12

1.0

25

23.9

26.2

31.4

39.3

15

40.2

10

44.0

47.4

55.7

79.7

84.1

112.7

120.7

138.7

1.323

1.359
1.355

1.369
1.366

1.392
1.388

1.402
1.399

1.794
1.789

1.799

1.804

1.812

1.820

1.829
1.825

1.833

1.843
1.840

1.905
1.890

1.915

1.937
1.921

1.946

1.959

1.970
1.969

2.233
1.980

2.242

2.252

2.263

2.267

2.275

2.285

2.294

2.664
2.406
2.377
2.347

2.673

2.696
2.683

2.705

2.715

2.726

2.734

2.742

2.750

2.757

2.764

2.772

2.779
2.778

2.786

2.794

2.991
2.802

Ha

3.01
1.38

3.0
3.00
2.19

100

1.21
1.17

4.0
1.01
1.09

125

1.13

148.0

2.00
3.01

5.0
1.38

150

1.00

0.91
0.89

6.0
3.00

2.50
2.19

3.00
1.21

1.17

0.84

175
ppm (t1)
1.01

0.83

ppm(t1)
1.09

1.13

ppm (t1)
3.012

3.035
3.034

3.043

3.065
3.064

5.013
4.977
4.090
4.067
4.061
4.039
3.065
3.064
3.043
3.035
3.034
3.012
2.991
2.802
2.794
2.786
2.779
2.778
2.772
2.764
2.757
2.750
2.742
2.734
2.726
2.715
2.705
2.696
2.683
2.673
2.664
2.406
2.377
2.347
2.294
2.285
2.275
2.267
2.263
2.252
2.242
2.233
1.980
1.970
1.969
1.959
1.946
1.937
1.921
1.915
1.905
1.890
1.843
1.840
1.833
1.829
1.825
1.820
1.812
1.804
1.799
1.794
1.789
1.402
1.399
1.392
1.388
1.369
1.366
1.359
1.323
1.355

5.537
5.529

6.245
6.236

120

14

Hb
9

13

Ha
Hb

1.50

0.0

E74 - Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-12.

121

50

100

150

200

ppm (t1)
ppm 7.0
(t2)

6.0

5.0

4.0

3.0

2.0

E76 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-12.

1.0

0.0

122
4.12 Identificao da substncia To-13

Hb
Ha 15
10

2
3

HO

1
5

9
8

7
11

14
13

12

To-13

O espectro de RMN de 1H da substncia To-13 (Tabela 18; E77) apresenta sinais


referentes a trs metilas, sendo uma mais desprotegida devido a presena do grupo hidroxila (
1,04, s; 1,06, s e 1,29, s). Tambm foram observados sinais caractersticos de uma dupla
exocclica ( 4,67, sl e 4,69, sl).
O espectro de RMN de 13C{1H} (Tabela 18; E78), mostrou a presena de 15 carbonos,
sendo, 3 metlicos, 4 metilnicos, 4 metnicos, 2 quartenrios, sendo 1 carbinlico, e 2 com
deslocamentos qumicos tpicos de carbonos sp2, correspondentes a dupla exocclica.
A anlise do experimento HSQC (Tabela 18; E79) confirmou as relaes dos
hidrognios com seus respectivos carbonos, enquanto que o HMBC (Tabela 18;
E80) mostrou as correlaes entre o sinal do hidrognios metlicos em 1,04 (CH3-13) com

20,3 (C-11), 27,6 (C-7), 28,7 (C-12) e 30,0 (C-6), em 1,06 (CH3-12) com 16,4 (C13), 20,3 (C-11), 27,6 (C-7) e 30,0 (C-6), em 1,29 (CH3-14) com 41,8 (C-3), 54,4
(C-5) e 81,0 (C-4). O sinal em 1,31 (H-5) com 20,3 (C-11), 30,0 (C-6), 53,4 (C-1),
81,0 (C-4) e 153,5 (C-10), o sinal em 2,20 (H-1) com 26,8 (H-2), 30,0 (C-6), 54,4 (C5), 106,3 (C-15) e 153,5 (C-10). Ainda pelo HMBC, observou-se as correlaes entre os
sinais dos hidrognios geminais da dupla exocclica em 4,67 (Ha-15) e 4,69 (Hb-15) com
38,9 (C-9) e 53,4 (C-1).
A estrutura pde ser confirmada atravs dessas correlaes, conforme apresentada.

123

Hb
Ha 15
2

HO

14

10

9
8

11
13

12

Segundo estas anlises e comparao com os dados de RMN de 1H e RMN de


13

C{1H}, com os da literatura (KREBS et al., 1990; RAGASA et al., 2003; KOSAR et al.,

2008), foi possvel identificar essa substncia como um lcool sesquiterpnico do tipo
aromadendrano, conhecido como (-)-espatulenol.

124
Tabela 18: Dados de RMN de 1H (400 MHz),

13

C{1H} (50 MHz), HSQC e HMBC (400

MHz) em CDCl3 da substncia To-13.

Posio

13

C{1H}

HMBC
1

H-13C

(multiplicidade; J em Hz)

2,20 (1H; m)

53,4

5, 6; 2, 10, 15 (fraco)

2a

1,63 (1H; m)

26,8

1, 3, 4, 5, 10

41,8

1, 2, 4, 5

1,91 (1H; m)
3a

1,57 (1H; m)

3b

1,78 (1H; m)

81,0

1,31 (1H; m)

54,4

1, 4, 6, 10, 11

0,47 (1H; dd; 9,6 e 11,2)

30,0

4, 12; 1, 7, 8, 11, 13 (fraco)

0,71 (1H; ddd; 6,4; 9,6 e 11,2)

27,6

11, 12; 5, 13 (fraco)

8a

1,02 (1H; m)

24,9

6, 7, 9, 10; 5 (fraco)

8b

1,96 (1H; m)

9a

2,05 (1H; m)

38,9

1, 7, 8, 10, 15

9b

2,42 (1H; ddd; 0,8; 6,4 e 13,6)

10

153,5

11

20,3

12

1,06 (3H, s)

28,7

6, 7, 11, 13

13

1,04 (3H; s)

16,4

6, 7, 11, 12

14

1,29 (3H; s)

26,1

3, 4, 5

15a

4,67 (1H; sl)

106,3

1, 2

15b

4,69 (1H; sl)


*Atribuio inequvoca atravs de anlise do experimento do HSQC

25

16.3

24.8
20.3

26. 1

2.0

26.7

27.5

28.7

13

38.9
29.9

14

1.01

50

1.11

3.0

41.7

1.07
2.77
2.60

75

10

3.06
1.01

4.0

53. 4

1.00

54.3

HO

0.90
1.03

81.0

1.01
0.90
1.00

106.2

1.00

100
0.91

5.0
1.01

1.50
1.11

0.86
0.86

125
1.07
2.77
2.60

6.0
3.06
1.01

2.00
0.90
1.03

E78 - Espectro de RMN de 13C {1H} (50 MHz, CDCl3) da substncia To-13.

150
ppm (t1)
1.01

E77 - Espectro de RMN de H (400 MHz, CDCl3) da substncia To-13.


7.0
ppm (t1)
0.90

2.50
1.00

ppm (t1)
1.00

0.91

153.4

0.730
0.722
0.718
0.707
0.702
0.694
0.678
0.494
0.470
0.466
0.442

1.616
1.579
1.564
1.334
1.308
1.285
1.056
1.041
1.019
1.015
1.001
0.997
0.993
0.746

1.950
1.941
1.928
1.900
1.885
1.798
1.770
1.635

2.023
1.986
1.981
1.965

2.042

2.172
2.061

2.238
2.223
2.213

2.447
2.433
2.431
2.415
2.413
2.400

1.019
1.015
1.001
0.997
0.993
0.746
0.730
0.722
0.718
0.707
0.702
0.694
0.470
0.466
0.442
0.678
0.494

1.041

1.056

1.285

1.308

1.334

1.564

1.579

1.616

1.770
1.635

1.798

1.900
1.885

1.965
1.950
1.941
1.928

1.986
1.981

2.023

2.042

2.061

2.172

2.238
2.223
2.213

4.667
2.447
2.433
2.431
2.415
2.413
2.400

4.693

125

Hb
Ha 15
9
8

11
12

0.50

1
1.0
0.0

126

50

100

150

200

p p m (t1 )
p p8m.0 (t2 )

7 .0

6 .0

5 .0

4 .0

3 .0

2 .0

1 .0

0 .0

E79 Espectro HSQC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-13.

50

1 00

1 50

2 00

ppm (t1)
8.0
ppm (t2)

7.0

6.0

5.0

4.0

3.0

E80 Espectro HMBC (400 MHz, CDCl3) da substncia To-13.

2.0

1.0

0.0

127
4.13 Ensaios de atividade antimicrobiana e antioxidante

No ensaio de atividade antimicrobiana, o extrato em diclorometano das folhas mostrouse fracamente ativo contra algumas cepas de Staphylococcus sp e Candida sp, enquanto que as
substncias isoladas (+)-licarina-A (To-1) e (+)-talaumina-A (To-7) mostraram-se
moderadamente ativas somente contra algumas cepas de Cndida sp; e (-)-partenolido (To10), mostrou-se moderamente ativo contra algumas cepas de Staphylococcus sp (Tabela 19).

No ensaio de atividade antioxidante somente licarina-A apresentou moderada atividade


antioxidante (IC50=56,10ppm) (Tabela 20).
Acuminatina e licarina-A so neolignanas benzofurnicas que diferem entre si apenas
pela substituio no anel aromtico. A primeira tem um grupo veratrila e a segunda um grupo
guaiacila. A neolignana (+)-talaumina-A do tipo diarildimetilbutanol e apresenta dois grupos
piperonila. Licarina-A mostrou moderada atividade antifngica e antioxidante, mas no
apresentou atividade antibacteriana. Esses resultados parecem associados presena da
hidroxila fenlica, uma vez que acuminatina foi completamente inativa. A neolignana
talaumina-A tambm apresentou moderada atividade antifngica, sugerindo que a presena de
um grupo hidroxila (alcolico ou fenlico) pode ser importante para a bioatividade.
Tabela 19: Atividade antimicrobiana do extrato bruto em diclorometano (DCM) e

substncias isoladas de Talauma ovata expressa em termos de concentrao inibitria


mnima - CIM (mg/mL).
Microrganismos

Atividade antimicrobiana (CIM mg/mL)


DCM

To-1

To-2

To-7

To-10

To-11

C-

C+

Staphylococcus aureus penicilinase negativo (8-)

Staphylococcus aureus penicilinase positivo (7+)

Staphylococcus aureus ATCC 25923

0,1
0,1

Staphylococcus aureus ATCC 14458

1
1
5
5
5
5

0,75
0,75
0,75

0,75
0,75
0,75

+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+

Staphylococcus epidermides ATCC 12228


Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442
Escherichia coli ATCC 10799
Candida tropicalis ATCC 157
Candida glabrata ATCC 30070
Candida dubliniensis ATCC 777
C. dubliniensis ATCC 778157

-: Ausncia de inibio do desenvolvimento microbiano, at a maior concentrao avaliada; +:


Completa inibio do desenvolvimento microbiano; C-: controle negativo = solvente DMSO/gua
destilada estril (5:95); C+: controles positivos = bacitracina (0,2 UI/mL) para as bactrias e
cetoconazol (100g/mL) para os fungos; *: no avaliado.

128
Tabela 20: Porcentagem de reduo do radical DPPH do extrato bruto em diclorometano

(DCM) e substncias isoladas de Talauma ovata e controles positivos (quercetina e Trolox).

Amostras

6,25 g/mL

12,5 g/mL

25 g/mL

50 g/mL

100 g/mL

IC50 g/mL

DCM
To-1
To-2
To-7

-2,21 (4,70)
-

17,54 (0,41)
-

30,07 (9,70)
-

46,85 (6,06)
-

72,66 (2,53)
-

56,10 (1,20)a
-

Quercetina*

36,98 (4,12)

45,62 (3,38)

57,39 (1,29)

48,43 (1,40)

Na

13,06 (9,14) b

Trolox*

77,75 (11,53)

79,04 (13,70)

80,50 (2,60)

50,20 (1,80)

Na

2,22 (7,45) c

Dados expressos como mdia (coeficiente de variao, %CV=(desvio padro/media).100) do ensaio


em triplicata; -: no ativo at 100 g/mL; Na: no avaliado; IC50= Concentrao que reduz em
50% o radical DPPH; *: controles positivos. Estatisticas: (a b c), P<0,001. (ANOVA e

Tukeys post-hoc test)

A tiv id a d e a n tio x id a n te
% de reduo do DPPH

100

75

50

25

0
6.25

12.50

25.00

50.00

100.00

C o n c e n tr a o (u g /m L )

Figura 11: Avaliao da capacidade de reduo do radical DPPH de To-1.

129
5. CONSIDERAES BIOSSINTTICAS DAS SUBSTNCIAS ISOLADAS
5.1 Neolignanas

As neolignanas so definidas biogenticamente como derivadas do acoplamento


oxidativo de propenil e/ou alilfenis, no apresentando o carbono C-9 oxigenado (Figura 12).
As diversas possibilidades de combinao entre esses radicais e os rearranjos
posteriores levam a grande variedade estrutural apresentada por essa classe de substncias.
As neolignanas isoladas neste trabalho originam-se do acoplamento oxidativo entre
radicais de propenilfenol. As benzofurnicas se originaram pelo acoplamento de dois radicais
diferentes de propenilfenol (Figura 13) e as diarildimetilbutanol se originaram pelo
acoplamento de dois radicais iguais de propenilfenol (Figura14).
5.2 Sesquiterpenos

Os sesquiterpenos so uma grande classe de substncias derivadas da ciclizao do


pirofosfato de cis-farnesila (53) ou pirofosfato de trans-farnesila (54).

OPP

53

OPP
54

Os sesquiterpenos isolados neste trabalho so derivados do ismero trans e apresentam


esqueletos carbnicos do tipo germacrano, guaiano e aromadendrano (Figura 15).

130

-H

HO

-e

propenilfenol
O

.
-H

HO

-e

alilfenol

Figura 12: Radicais de propenil e/ou alilfenis.

.
.
O

OCH3

OCH3
H

O
OCH3

O
OCH3

O
O

O
To-1

HO

OCH3

To-3

HO

OCH3

OCH3

OCH3

O
O

O
H3CO

To-2
OCH3

OCH3

H3CO

To-4

OCH3

OCH3

Figura 13: Biossntese proposta para as neolignanas e bis-norneolignanas benzofurnicas

isoladas.

131

. .

O
OCH3

OCH3
OH

H3CO

H3CO

[H] HO
[O]
OCH3

OCH3
OH

OH

OH
O

H3CO

H3CO

OCH3

OCH3
To-9 OCH3

To-6 ; To-8 OH

OH
O
O

O
To-5 ; To-7 O

Figura 14: Biossntese proposta para as neolignanas diarildimetilbutanol isoladas.

132

OPP
[O]

OH
HO
[O]

O
[O] O
+

OH

OH

O
To-10

O
[O]

OH
To-13

OH
O
To-12

To-11
O

Figura 15: Biossntese proposta para os sesquiterpenos isolados.

O
O

133
6. CONCLUSO

O estudo fitoqumico das folhas de Talauma ovata resultou na identificao de


dezenove substncias, sendo treze naturais e seis sintticas, pertencentes classe dos lignides
e sesquiterpenides.
Entre as substncias conhecidas identificadas somente (+)-licarina-A (isolada das
folhas), (+)-oleiferina-C e (-)-partenolido (isoladas da casca do tronco) haviam sido
encontradas em T. ovata, sendo as demais inditas no gnero Talauma, mostrando que essa
planta tem uma grande diversidade qumica que pode ser resultado de fatores ambientais,
poca e regio da coleta do material ou parte da planta estudada.
Por essa razo, o estudo fitoqumico de uma dada espcie no pode se limitar a um
nico rgo ou a um nico exemplar. Alm disso, isso pode justificar o uso medicinal de
diferentes rgos da planta para diferentes doenas (apenas as cascas so usadas contra febre).
A

presena

de

lignides

sesquiterpenides

de

grande

importncia

quimiotaxnomica para caracterizar o gnero, pois o nmero de espcies estudadas


relativamente pequeno. Compostos destas classes so de larga ocorrncia na famlia
Magnoliaceae e o seu isolamento em espcies de Talauma confirma a sua classificao
botnica.
A atividade antimicrobiana do extrato e substncias testadas foi fraca a moderada.
Entretanto, no se pode afirmar que a espcie seja intil no controle de infeces, pois a
mesma apresenta uma grande variabilidade qumica. Outros estudos devero ser conduzidos
para avaliar a influncia de outros fatores na bioatividade desta espcie.

134
7. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

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