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PRACTICA N 01

BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE BIOLOGA


I.

OBJETIVO:
1.1 Dar a conocer y regular las acciones para proteger la salud de las personas; personal
tcnico, alumnos y docentes, que estn o puedan estar expuestas a riesgos relacionados
con la exposicin a agentes biolgicos, qumicos, fsicos y/o mecnicos.

II. FUNDAMENTO:
El personal que esta relacionado con el trabajo en un laboratorio, cualquiera sea el nivel
del mismo, se encuentra expuesto a ciertos agentes de riesgo y sufrir accidentes que
pueden poner en peligro su vida e incluso el de sus familiares u otras terceras personas.
Motivo por el cual, las personas que se encuentran relacionados con el que hacer diario en
el laboratorio debe conocer ciertas medidas de prevencin que le brinden seguridad para
minimizar los accidentes a este conjunto de medidas se le conoce como BIOSEGURIDAD.
La presente prctica tiene por finalidad dar a conocer estas medidas de prevencin a los
alumnos y, a travs de ellos hacer el efecto multiplicador a la comunidad Universitaria para
que todos en conjunto tengan conocimiento y participen de las medidas de prevencin de
estos accidentes.
III. CONCEPTOS GENERALES:
3.1 DEFINICIN:
Es el conjunto de medidas preventivas, destinadas a proteger la salud del personal de
laboratorio, Docentes y Alumnos, de riesgos laborales procedentes de agentes
fsicos, qumicos, biolgicos y ergonmicos que pueden constituir accidentes de
trabajo o enfermedades profesionales.
3.2 AGENTES DE RIESGO
El personal de Laboratorio diariamente realiza muchas actividades que pueden causar
enfermedad o dao en el o en las personas que trabajan en ambientes cercanos,
incluso en familiares y en la comunidad. Estas enfermedades pueden ser causadas
por:
Agentes Biolgicos: Transmitidos por ingestin, inhalacin, inoculacin y por
contacto directo a travs de piel o mucosas.
Agentes Fsicos y mecnicos: Como las temperaturas extremas, radiaciones
ionizantes, contactos elctricos o conexiones defectuosas y vidrios resquebradizos
de recipientes daados o tubos rotos.
Agentes qumicos: Que pueden ser:
Corrosivos: Que causan destruccin o alteracin de tejidos.
Txicos: Cuyos efectos se manifiestan segn la va de exposicin, generalmente
es por inhalacin. Entre ellos tenemos: formol, benceno, etc.
Carcinognicos: Soluciones como el Mercurio, alfa y beta naftalina.
Inflamables: Como el cido actico, cido clorhdrico
Explosivos: Azida de Sodio, cido Pcrico, etc.
3.3 MEDIDAS PARA DISMINUIR MICROORGANISMOS:
Limpieza: Es un proceso fsico por el cual se elimina de los objetos en uso, las
materias orgnicas y otros elementos sucios, mediante el lavado con agua con o
sin detergente. El propsito de la limpieza no es matar los microorganismos que

contaminan los objetos sino eliminarlos por arrastre, esto es indispensable, antes
de someter el material a desinfeccin o esterilizacin.
Desinfeccin: Es un proceso que compromete medidas intermedias entre limpieza
y esterilizacin, se efecta mediante procedimientos en que se utilizan
principalmente agentes qumicos en estado lquido, la pasteurizacin a 75C y la
irradiacin ultravioleta.
Esterilizacin: Es un proceso que tiene por objeto la destruccin de toda forma de
vida. En los laboratorios se realiza preferentemente por medio del vapor saturado a
presin (Autoclave), por calor seco, incineracin (mechero de gas), y mediante el
uso de agent5es qumicos determinados en forma de lquido o de gas.
Antispticos: Son agentes germicidas, para ser usados sobre la piel y los tejidos
vivos; a diferencia de los desinfectantes que se utilizan sobre objetos inanimados.
Aunque algunos germicidas especficos pueden ser usados para ambos fines
(alcohol 70-90%), su efectividad no es necesariamente la misma en cada caso.
IV.

DEL AMBIENTE DEL LABORATORIO:


4.1 El laboratorio debe estar adecuadamente ventilado e iluminado, y los servicios de
agua, luz y gas deben funcionar satisfactoriamente.
4.2 El espacio de la mesa del laboratorio donde se manipula el material de trabajo (ms
aun si la muestra biolgica es infecciosa) debe estar ubicado en un lugar alejado de
la puerta de entrada y si es necesario se le denomina AREA CONTAMINADA.
4.3 Las mesas de trabajo deben confeccionarse de un material slido con superficies
lisas impermeables y resistentes a las sustancias corrosivas.
4.4 Solo se colocarn los equipos y materiales necesarios en la de trabajo.
4.5 Las paredes y pisos deben ser lisos para facilitar la limpieza con soluciones
desinfectantes como pirosan, cresol, etc. No deben barrer el piso en seco ni encerarlo.
4.6 Para el sistema de desage solo se debe eliminar los agentes biolgicos o qumicos
previamente descontaminados, neutralizados o inactivados.
4.7 Se debe evitar la presencia de insectos rastreros o roedores, recomendndose la
fumigacin peridica del ambiente
4.8 Los pasadizos deben ser amplios para permitir el libre transito de las personas.
4.9 Se debe contar con un extintor dentro del ambiente. Este debe ser recargado cada
ao.

V.

NORMAS PERSONALES:
4.1

El estudiante utilizar un mandil o guardapolvo blanco, y deber llevarlo puesto


antes de ingresar al laboratorio, como una medida de proteccin.

4.2

Las sesiones prcticas se iniciarn a la hora indicada y solo se permitir una


tolerancia mxima de 5 minutos.
Los estudiantes trabajarn en equipo y en la mesa que se le asign al inicio del
semestre.
Si se tiene el pelo largo, es conveniente tenerlo recogido.
En el laboratorio est terminantemente prohibido hacer ruido, movimientos
innecesarios, fumar, tomar bebidas, comer.
Cada grupo de prcticas se responsabilizar de su zona de trabajo y de su material.
Los materiales y equipo de laboratorio debern ser manipulados cuidadosamente.
Cualquier dao o prdida de stos, es de responsabilidad exclusiva del grupo que lo
utiliza y debern ser repuestos en la siguiente sesin prctica.
Al concluir la prctica, el estudiante deber dejar limpio los materiales, equipos y la
superficie de la mesa de trabajo.

4.3
4.4
4.5
4.6
4.7

4.8

VI.

NORMAS DE UTILIZACIN DE PRODUCTOS QUMICOS:

5.1 Antes de utilizar un compuesto, asegurarse que es el reactivo que se necesita,


fijarse bien en el rtulo.
5.2 Como regla general, no coger ningn producto qumico, el profesor ser el
encargado de proporcionarlo.
5.3 No devolver nunca a los frascos de origen los sobrantes de los productos utilizados
sin consultar con el profesor.
5.4 Es muy importante que cuando los productos qumicos de desecho se viertan en
el lavatorio de desage, debe dejarse que circule por la misma abundante agua
aunque estn debidamente neutralizados.
5.5 No tocar con las manos y menos con la boca, los productos qumicos.
5.6 No pipetear con la boca, utilizar la propipeta, una jeringuilla o bombilla que se
disponga en el Laboratorio.
5.7 Los cidos requieren un cuidado especial, cuando se quiera diluir, nunca echar
agua sobre ellos.
5.8 Los productos inflamables (gases, alcohol, ter, etc.) no deben estar cerca de
fuentes de calor. Si hay que calentar tubos con estos productos, se har al bao
Mara, nunca directamente a la llama.
5.9 Si se vierte sobre el cuerpo accidentalmente cualquier cido o producto
corrosivo, lavar inmediatamente con mucho agua y avisar inmediatamente al
profesor encargado.
5.10 Al preparar cualquier disolucin se colocar en un frasco limpio y rotulado
convenientemente.
VII. NORMAS DE UTILIZACIN DE MATERIAL DE VIDRIO:
6.1 Tener cuidado con los bordes y puntas cortantes de los tubos u objetos de vidrio.
6.2 El vidrio caliente no se diferencia a simple vista del vidrio fro.
Para evitar quemaduras, dejarlo enfriar antes de tocarlo.
6.3 Las manos se protegern con guantes o trapos cuando se introduzca un tapn en
un tubo de vidrio.
6.4 Si se tiene que calentar a la llama el contenido de un tubo de ensayo, observar
cuidadosamente estas dos normas:
Tener sumo cuidado y tener en cuenta que la boca del tubo de ensayo no apunte
a ningn compaero. Puede hervir el lquido y salir disparado, por lo que se
podra ocasionar un accidente.
Para hervir lquidos, calentar por el lateral del tubo de ensayo, nunca por el fondo;
agitando suavemente.
VIII. NORMAS DE UTILIZACIN DE BALANZAS:
6.1 Cuando se determinen masas de productos qumicos con balanza, se colocar papel
de filtro sobre los platos de la misma y si es necesario porque el producto a pesar de
ser corrosivo, se utilizar un vidrio de reloj.
6.2 Se debe evitar cualquier perturbacin que conduzca a un error, como vibraciones
debidas a golpes, aparatos en funcionamiento, soplar sobre platos de la balanza,
etc.

VIII. CUESTIONARIO
4.1

Por qu es necesario llevar puesto el mandil en el Laboratorio?

......

4.2

Qu precauciones debe tenerse en cuenta al abrir un frasco que contenga


cido o gases fuertes?

4.3

Por qu se recomienda que los frascos que contienen reactivos deben estar
debidamente rotulados?
..

4.4

Qu tipo de frascos se prefiere para guardar los reactivos, indique el porqu?

4.5

De los aparatos para esterilizar. Cules de ellos son los ms usados en el


laboratorio de Biologa?
..
..
...
...
...

4.6

Aportes de internet.

PRACTICA N02
RECONOCIMIENTO DE MATERIALES, EQUIPOS E INSTRUMENTAL DE LABORATORIO
I.

OBJETIVOS:
1.1 Conocer los materiales y equipos, que usualmente se utilizan en el laboratorio de
biologa.
1.2 Clasificar los materiales reconociendo rasgos y caractersticas de los mismos.
1.3 Manejar correctamente los materiales y equipos a utilizarse en las prcticas.

II.

FUNDAMENTO:
El Laboratorio de Biologa debe contar con todo el material, instrumental y equipo que
permitan realizar todo tipo de Investigacin con especimenes vivos y no vivos.
El conocimiento de las caractersticas y el uso de cada uno de los instrumentos,
materiales, equipos y reactivos es un requisito fundamental para favorecer el
cumplimiento de las normas de Bioseguridad ya que la mayora de los accidentes se
originan en el desconocimiento del uso de cada material, equipo o reactivo existente
as como de sus caractersticas.

III.

PRINCIPALES MATERIALES DE LABORATORIO :


3.1 Material de Madera:
Gradilla De Madera.
Pinzas de madera.
Porta vasos.
3.2 Material de vidrio:
Probetas graduadas.
Pipetas
Tubos de prueba o ensayo.
Vasos de Precipitacin o Beaker.
Matraz.
Baln.
Frasco gotero para reactivos.
Mechero de vidrio.
Placa de Petri.
Termmetro.
Luna de reloj.
Tubo de ensayo.
Embudos.
Fiola.
Agitador o bagueta.
Bureta.
Lminas porta y cubreobjetos
Frasco con tapa esmerilada.
Lmina excavada.
Embudo de decantacin.
3.3 Material de Porcelana:
Mortero con piln.
Crisol.
Lmina excavada.
3.4 Material de Polietileno:

Pipeta.
Gradilla.
Capuchn para vacutainer.
Vacutainer.
Probetas.
Jeringas Hipodrmicas descartables.
Pizeta o frasco lavador.

3.5 Material metlico:


Esptula
Tijeras.
Trpode.
Mechero de Bunsen.
Asa de Kolle o bacteriolgica.
Pinzas.
Bistur.
Estilete.
Rejilla de asbesto.
Gradilla de metal.
Bandejas.
3.6 Otros Materiales:
Papel secante.
Agujas descartables para vacutainer.
Ligadura de goma.
Papel de filtro.
Bistur.
Lancetas hemolet.
Escobilla para lavar tubos.
3.7 Equipos:
Centrfuga.
Bao Mara.
Refrigeradora.
Autoclave.
Cocina elctrica.
Balanza de precisin de triple brazo.
Balanza analtica.
Horno.
Estufa o incubadora.
Microscopio binocular compuesto
Estereoscopio.
Espectrofotmetro.
Cmara de Flujo Laminar.
3.8 Instrumentos:
Lupa.
Micropipeta.
Propipeta.

MATERIAL BSICO DE LABORATORIO

IV. CUESTIONARIO
4.1 Represente esquemticamente el material del Laboratorio que ha observado usted
en laboratorio e indique el uso de cada uno de ellos:

GRADILLA DE MADERA
ESCALA:
USO:
.

PINZAS DE MADERA
ESCALA:
USO:
..

PROBETAS GRADUADAS
ESCALA:
USO:
.

PIPETA
ESCALA:
USO:
..

TUBO DE ENSAYO
ESCALA:
USO:
.

VASO DE PRECIPITACIN
ESCALA:
USO:
.

FRASCO GOTERO
ESCALA:
USO:
..

MATRAZ ERLENMEYER
ESCALA:
USO:
.
.

JERINGA HIPODRMICA
ESCALA:
USO:
.
..

BALON DE BASE PLANA


ESCALA:
USO:
.
.

MECHERO DE VIDRIO
ESCALA:
USO:
.
.

PLACA DE PETRI
ESCALA:
USO:
.
.

TERMOMETRO
ESCALA:
USO:
..

LUNA DE RELOJ
ESCALA:
USO:
.
.

CRISTAIZADOR
ESCALA:
USO:
.
..

EMBUDO DE VIDRIO
ESCALA:
USO:
.

BURETA
ESCALA:
USO:
..

FRASCO CON TAPA ESMERILADA


ESCALA:
USO:
.
.

VARILLA PORTA LMINA


ESCALA:
USO:

LAMINAS PORTA Y CUBRE OBJETOS


ESCALA:
USO:
.
.

LAMINA EXCAVADA
ESCALA:
USO:
.
..

EMBUDO DE DECANTACIN
ESCALA:
USO:
.
.

PAPEL FILTRO
ESCALA:
USO:
..

MORTERO Y PILN
ESCALA:
USO:
.
.

PIPETA VOLUMETRICA
ESCALA:
USO:
.
.

CRISOL
ESCALA:
USO:
.

PIZETA
ESCALA:
USO:
.
..

TIJERA
ESCALA:
USO:
..

MECHERO DE BUNSEN
ESCALA:
USO:
.
.

ESPATULA
ESCALA:
USO:
.
.

TRIPODE
ESCALA:
USO:
.
.

REJILLA DE ASBESTO
ESCALA:
USO:
.
.

BISTUR
ESCALA:
USO:
.
..

ASA DE KOLLE
ESCALA:
USO:
.
.

CAJA COPLIN
ESCALA:
USO:
..

MICROPIPETA Y TIPS
ESCALA:
USO:
.
.

BAO MARA
ESCALA:
USO:
.
.

BALANZA GRANATARIA
ESCALA:
USO:
.
.

AUTOCLAVE
ESCALA:
USO:
.

LUPA
ESCALA:
USO:
..

HORNO

CENTRIFUGA
ESCALA:
USO:
.

ESTUFA/INCUBADORA
ESCALA:
USO:
.
.

BALANZA GRANATARIA

REFRIGERADORA
ESCALA:
USO:
.
..

GRADILLA DE MADERA
ESCALA:
USO:

.....

ESPECTROFOTOMETRO
ESCALA:
USO:
.
.

PINZAS DE MADERA
ESCALA:
USO:
.
.

TUBO DE ENSAYO
ESCALA:
USO:

VASO DE PRECIPITACIN
ESCALA:
USO:

PRACTICA N 03
LIMPIEZA, DESINFECCIN Y ESTRILIZACIN DEL MATERIAL DE LABORATORIO

I.

OBJETIVOS:
1.1

Conocer la diferencia que existe entre limpieza,


desinfeccin
y esterilizacin.
1.2 Entender la importancia de la sepsia en el trabajo del
laboratorio.
1.3 Conocer y realizar lo diferentes mtodos de limpieza desinfeccin
esterilizacin.
II.

FUNDAMENTO:
El material de laboratorio ya sean utilizados o limpios, deben limpiarse de tal forma
que se elimine toda huella de desecho, para evitar la precipitacin de los agentes
limpiadores.

Las muestras utilizadas en el laboratorio (agua estancada, orina, heces, partes de la


planta, rganos de animales, etc.) frecuentemente son infectantes por eso que los
recipientes deben descontaminarse adecuadamente antes de su limpieza, para as
mantener la pureza de la muestra y obtener resultados confiables en las practicas.
III.

MATERIALES Y EQUIPOS
3.1
3.2
3.3
3.4

IV.

Materiales de vidrio ,metal y madera


Autoclave, horno, mechero bunsen y mechero de vidrio
Desinfectantes
Agua corriente

PROCEDIMIENTO
4.1

LIMPIEZA Y ESTERILIZACIN DEL MATERIAL DE VIDRIO:


El material de vidrio de uso comn (tubos de ensayo, vasos de precipitacin,
cristalizadores, placas petri, etc.) puede tenerse limpio y en perfecto estado para
su uso, lavndolo simplemente con agua corriente y dejando escurrir boca abajo.
Cuando est seco se limpia con una toalla de felpa previamente lavada tres
veces, para evitar que pequeas pelusas queden adheridas a las paredes de
cristal. Sin embargo cuando se han utilizado reactivos o colorantes lquidos que
contengan polvos en suspensin, el material se debe poner dentro de un
recipiente para enjuagarlo con agua corriente y quitar las partculas adheridas
con escobillones o pinceles, segn sea necesario. Despus se coloca en agua
jabonosa que se debe preparar con trozos de jabn corriente o con detergente,
en una proporcin de un gramo por litro.
Cuando el material, despus del lavado mencionado, queda, opaco, debe
dejrsele en el agua jabonosa, cuando menos durante una hora. Despus se
lava con agua corriente, se le deja escurrir boca abajo y se limpia por ltimo con
un pao afelpado ligeramente hmedo.
Las pipetas y goteros deben lavarse en agua jabonosa y con agua corriente,
sobre todo cuando se han tomado muestras de aguas o lquidos contaminados.
Cuando restos de estos lquidos han quedado en las pipetas y goteros
obstruyndolos, se recomienda limpiar su interior con escobillones finos o
pinceles, utilizando agua tibia de jabn, y enjuagando despus con agua
corriente. Despus se dejan por lo menos una hora en otra agua jabonosa ms
caliente. Al cabo de este tiempo, se hacen funcionar las pipetas y goteros,
enjuagando enseguida el interior con agua acidulada. Por ltimo se lavan con
agua destilada y se dejan secar escurriendo o se puede acelerar en esta estufa
de desecacin.
TCNICAS BSICAS PARA LA LIMPIEZA DEL
MATERIAL:
Frmula del Agua Acidulada:

Agua destilada.3 partes.

cido clorhdrico..1 parte.


Cuando las pipetas y goteros se han utilizado con sustancias grasas, es
conveniente despus de lavados, enjuagarlos con ter sulfrico o con
alcohol de 70%.
Las opacidades que muestran los objetos de vidrio despus de haberlos
manipulado, se quitan fcilmente, utilizando alcohol de diversas
graduaciones: 50% al 96%. Si la porta y el cubreobjetos despus de
utilizarlos presentan restos de colorantes y, al mismo tiempo, se

encuentran unidos por medio de blsamo de Canad, pueden lavarse con


la mezcla de Lemning I.
Frmula de la mezcla de Lemning I:

Bicarbonato de Potasio100 gr.

Agua corriente.1000 ml.

cido sulfrico concentrado100 ml.


Que se prepara de la siguiente manera: Se disuelve el bicarbonato en el
litro de agua corriente. Se deja enfriar la solucin y se agrega gota a gota
agitando con una varilla de vidrio (agitador), el cido sulfrico concentrado.
Los portaobjetos se sumergen en esta mezcla durante tres das. Despus
se lavan con agua corriente y se pasan a la II mezcla de Lemning.
Frmula de Lemning II:
Agua corriente.....................................................50 ml.
Hidrxido de Sodio solucin saturada10 gotas.
Deben permanecer en la mezcla de Lemning II durante 24 horas para
lavarlas despus con agua corriente y colocarlas en alcohol de 70%, del
cual se sacarn cuando sean utilizadas.
Otra tcnica para el lavado de preparados microscpicos desechados es la
mezcla de AxA.
Frmula de mezcla de AxA:
Alcohol de 96%........................................1 Parte.
Xilol.1 Parte.
Agua Corriente..1 parte.
Se colocan los preparados microscpicos en la mezcla de AxA en la que
permanecern durante 24 horas. El alcohol eliminar los colorantes
alcohlicos y la grasa adherida durante el manejo. El xilol separar al
portaobjetos del cubreobjetos; el agua eliminar a los colorantes acuosos y
al membrete. Despus se lavarn con agua destilada y por ltimo, se
mantendr en un recipiente con alcohol al 70 %.En el caso de tcnicas a
base de nitrato de plata, el enjuague con agua destilada es muy importante
para evitar las precipitaciones de estas sales.

OTRAS TCNICAS BSICAS PARA LA LIMPIEZA


DEL MATERIAL:
Para material de Cristalera Nuevo:
Se lava con agua jabonosa.
Se enjuaga con agua corriente.
Se enjuaga con alcohol acidulado.
Se deja escurrir y se lava con agua destilada.
Se seca con un lienzo limpio.
Para material de cristalera usado:
I.
Dicromato de Potasio..5 gr.
II.
cido sulfrico al 5% en agua destilada.250 ml.
Para material de vidrio como pipetas, lminas porta, cubreobjetos,
etc.
Se emplea la mezcla sulfocrmica, en la cual se deja reposar el material
durante 24 horas, luego se lava en agua jabonosa y se enjuaga en agua

corriente durante 24 horas. Se coloca en agua destilada durante 24


horas. Finalmente se mantiene por tiempo indefinido, en un recipiente
cerrado con alcohol al 70%.
Frmula de la Mezcla Sulfocrmica:
Dicromato de Potasio20 gr.
cido sulfrico concentrado.20 ml.
Agua destilada.250 ml.
Cuando el material de vidrio pierde su transparencia debido al uso y a los
cambios climticos, se recomienda que una vez lavado y enjuagado con
agua corriente, se coloque en una solucin de alcohol acidulado (con cido
actico) al 2%, o en alambre de fierro al 3%, durante 24 horas cuando
menos. Despus basta frotarlo con la yema de los dedos para completar la
limpieza. Finalmente se hace un enjuague con agua destilada.
4.2 ESTERILIZACIN:
Este proceso consiste en matar y destruir todos los microorganismos o cualquier
espora que pudiera interferir en la destruccin completa provocando
contaminaciones en los cultivos o infecciones en los organismos. Este proceso
de esterilizar el material debe llevarse a cabo con gran responsabilidad y en
forma meticulosa, sobre todo si se trabaja con seres humanos.
Estril, esterilizar o esterilizacin se refiere a la ausencia o destruccin completa
de los microorganismos y no se usan en sentido relativo. Una sustancia o un
objeto estn estriles, pero no semiestriles o casi estriles.
Como mtodos principales de esterilizacin se utilizan el calor seco en hornos, el
calor hmedo en autoclave, as como diferentes tipos de radiacin, entre los
cuales la luz ultravioleta, rayos gamma y los rayos X. En todos estos casos lo
primero que se debe hacer es lavar el material, enjuagndolo luego con agua
destilada. Una vez seco, se envuelve con papel limpio, grueso, flexible,
resistente a altas temperaturas (como el papel de manila o papel kraff) y en
algunos casos, a la humedad (como las hojas de estao o aluminio). Esto se
hace para que al sacar el material de la esterilizadora, se pueda conservar por
un tiempo ilimitado en condiciones de asepsia. As, slo debe desenvolverse
cuando se vaya a usar.

PROCESOS FSICOS DE ESTERILIZACIN:


En trminos generales, cada forma de esterilizacin se elige de acuerdo a la
naturaleza del material con el que se va a trabajar; as tenemos esterilizacin
de procesos fsicos como calor, radiaciones y filtracin.

Esterilizacin mediante Calor:


Esterilizacin por flameado, es la esterilizacin al calor directo de la
llama, la cual se origina por la combustin de una sustancia gaseosa,
lquida o slida (gas propano, alcohol, carbn) cuando arden mezcladas
con el oxgeno del aire, produciendo partculas incandescentes. A este
tipo de esterilizacin son sometidas las asas de Kolle, bisturs, pinzas y
otros instrumentos.

Esterilizacin Fraccionada:
Llamada tambin Tindalizacin, es el mtodo de esterilizacin por calor
hmedo, al que se someten sustancias como glcidos, protenas,
(sueros). Etc. que por otros mtodos podran destruirse o alterarse sus
componentes.

La Tindalizacin, consiste en un calentamiento a 100C


aproximadamente y durante 10 minutos, repitiendo la operacin a las 24
horas y 48 horas, o sea en tres etapas, este mtodo emplea el
esterilizador de Arnold.

Esterilizacin por vapor a Presin:


Llamado Autoclavado, es otro mtodo de esterilizacin a calor hmedo
y a presin (vapor saturado) al que se someten medios lquidos o
preparaciones de cualquier sustancia que puede sufrir deterioro con el
calor seco. ejm. Medios de cultivo.
Los equipos donde se realiza esta esterilizacin se llaman autoclaves
2
que operan a una temperatura de 121C ya 15 libras /pulg de presin
durante 15 minutos.

Esterilizacin por aire caliente:


Es un procedimiento de esterilizacin con calor seco o aire caliente, se
recomienda cuando no se desea o no se requiere que el vapor a presin
tenga contacto completo o directo con el material a esterilizar, como
artculos de vidrio de laboratorio (cajas de Petri, pipetas), aceites, polvos
y otras sustancias similares. El aparato que se emplea para este tipo de
esterilizacin es un horno especial elctrico de gas domstico de cocina,
generalmente a la temperatura usada es de 180C por 1 hora.

Esterilizacin por incineracin o Cremacin:


Mtodo que se emplea para destruir microorganismos presentes en
animales de experimentacin en laboratorios, esqueletos contaminados
y otros materiales de desecho infectados: como producto final se obtiene
cenizas. Para la cremacin se emplea muflas y los crematorios.
ESTERILIZACIN MEDIANTE RADIACIONES
La radiacin es una forma de energa radiante, calrica, electromagntica
emitida y propagada en forma de onda por los ncleos de algunos tomos.
Las radiaciones (rayos X, rayos gamma y rayos ultravioleta) son
empleados para esterilizar, debido a que al actuar sobre los organismos
vivos, les producen cambios qumicos perjudiciales (mutaciones) y los
mata.

Rayos Ultravioleta(UV):
La luz ultravioleta mata y destruye solo a los microorganismos que se
encuentran expuestos directamente en la superficie de los objetos,
debido a que los U.V. tienen poca capacidad de penetracin en la
materia.
Las radiaciones U.V. actan directamente sobre los cidos nucleicos
originando enlaces adyacentes de pirimidina formando dmeros de
Timina.

Rayos Roentgen(RX):
Estas radiaciones son letales para microorganismos y formas
superiores de vida, debido a que tienen considerable energa,
capacidad y penetracin, produciendo mutaciones. No son de uso
prctico en el laboratorio por el elevado costo en producirlos.

Rayos Gamma:
Son similares a los rayos X, pero tienen una mayor capacidad de
penetracin por su menor longitud de onda. Son letales para todas las
formas de vida incluso los microorganismos.

Los rayos gamma se usan para esterilizar alimentos empacados o


materiales de considerable volumen o grosor, debido a su poder de
penetracin en materiales que no pueden ser esterilizados por los
mtodos anteriores, por ejm. Los libros, fardos de algodn, etc.

4.3

V.

ESTERILIZACIN MEDIANTE FILTRACIN


Este mtodo de esterilizacin consiste en el paso de los lquidos a
travs de los filtros con poros de diverso dimetro y la retencin de los
microorganismos que se encuentran suspendidos: esto ocurre cuando
se hace atravesar los lquidos por los poros del filtro.
La filtracin se emplea para esterilizar sustancias termolbiles como
por ejemplo las enzimas, antibiticos, vitaminas y hormonas.
El mtodo se basa en la retencin de los microorganismos por los
filtros, debido a que estos tienen mayor tamao que las partculas de
los lquidos, que pasan a travs de los poros del filtro.

PROCESOS PARA SANEAMIENTO:


Es una serie de actos u operaciones que tienden a reducir la poblacin
microbiana a niveles no peligrosos, mediante agentes qumicos o pasteurizacin
de acuerdo a los requerimientos de salud pblica:

Agentes qumicos:
Los componentes qumicos en concentraciones apropiadas son capaces de
matar o inhibir a los microorganismos. Estos productos tienen muchas
aplicaciones, algunos son usados para lavados bucales, otros para
descontaminar objetos, vehculos, habitaciones. Debido a las grandes
variaciones en el ambiente y a la diversidad de organismos, no es posible
prescribir un solo agente para eliminar o reducir la flora bacteriana, por ello
es importante conocer las sustancias qumicas, sus caractersticas y
aplicaciones como agentes antimicrobianos, por ejemplo: el fenol o cido
fnico, cloroformo, alcohol de 70 a 95%, detergentes, jabones y halgenos
(yodo, cloro) y metales pesados como el mercurio, plata, cobre.

Pasteurizacin:
Es un procedimiento que destruye en forma parcial a los microorganismos
patgenos contenidos en medio fluido o slidos, mediante el empleo de calor
o temperatura por debajo de 100C durante un tiempo determinado (60C
por 30 minutos 85C por 3 minutos).
Son sometidos a este procedimiento la leche, la cerveza, algunas bebidas
gaseosas y vinos.

CUESTIONARIO
5.1

Del material para esterilizar? Por qu se envuelve con papel limpio, grueso y
flexible?
..
..
..
..

5.2

Cmo se efecta la limpieza de una pipeta que se ha usado con aceite?


..
..
...
.

5.3

5.4

Qu solucin empleara para lavar las lminas utilizadas en la prctica?


..
..
...
.
Qu materiales no deben ser esterilizados al calor hmedo?
..
..
..
.....

5.5

Qu materiales deben ser esterilizados al calor seco?


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5.6

Qu es sepsia?
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Qu significa el trmino antisptico?


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5.7

5.8

Qu significa el trmino desinfectante?


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5.9

Por qu causa la esterilizacin debe ser meticulosa?

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5.10 El alcohol se considera un agente esterilizador, explique porqu.


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5.11 Aportes de Internet

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