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Discrepncia no

Sistema ABO

M.Sc. William R.
Schluch.ng

DISCREPNCIAS
Ocorrem quando resultados esperados
no so observados.
Geralmente so de natureza tcnica

Causas frequentes de erros tcnicos resultando em


discrepncias ABO
1. Identificao inadequada de amostras de sangue, tubos ou
lminas;
2. Suspenso celular muito concentrada ou muito diluda;
3. Erros de transcrio de resultados;
4. Troca de amostras;
5. No observao de hemlise;
6. Falha em acrescentar os reagentes;
7. Falha em seguir instrues do fabricante;
8. Centrfuga descalibrada;
9. Reagentes contaminados ou vencidos;
10. Aquecimento durante a centrifugao.

Repetio do teste com a mesma amostra, utilizando


uma suspenso salina de hemcias.
Rever e corrigir todas as causas de erros tcnicos.

Persistindo a discrepncia:

Obter informaes do paciente:

Idade

Diagnstico e Uso de medicamentos

Histrico transfusional e gestacional

Nveis de imunoglobulinas

As discrepncias ABO podem ser


divididas em quatro grandes categorias:
Grupo I
Grupo II
Grupo III
Grupo IV

Ocorrem entre classificao direta e reversa


Anticorpos de reao fraca ou ausentes
o grupo de discrepncias que mais ocorre!
Quando uma reao da classificao reversa
fraca ou ausente, uma discrepncia grupo I
deve ser suspeita.
Geralmente so muito fortes (4+)

CAUSAS:
Paciente apresenta depresso da produo de
anticorpos ou no pode produzir anticorpos
ABO
!Recm-nascidos;
!Idosos;
!Leucemia com hipogamaglobulinemia (ex: LLC)
!Linfomas com hipogamaglobulinemia (ex: linfomas malignos);
!Drogas imunossupressoras;
!Agamaglobulinemia congnita;
!Imunodeficincias;
!Transplante de medula ssea
!Hipogamaglobulinemia secundria terapia.
!Produzem hemcias diferentes a partir da medula ssea
transplantada.

Depresso da produo de an.corpos

Classificao direta
Paciente

Classificao reversa

Anti-A

Anti-B

Anti-A,B

Clulas
A1

Clulas B

Negativo

+++

++++

Negativo

Negativo

Grupo provvel: B (paciente idoso)

Incubar o soro do paciente com os reagentes A e B


por 15 a 30 minutos a temperatura ambiente.
Se no houver reao
Incubar as misturas soro-clula a 4C por 15 a 30
minutos.
Controle de clulas O deve ser testado (no tem
Ag)
Temperaturas mais baixas aumentam a reatividade
de aglutininas frias (anti-I) que reagem com todas
as hemcias.

QUIMERISMO
Presena de duas populaes celulares em um nico
indivduo
A dificuldade na deteco depende da porcentagem de
clulas em menor quantidade
So tipicamente de campo misto
Numerosos aglomerados celulares
de pequenas dimenses em meio a
um mar de clulas livres

O quimerismo verdadeiro raro e s acontece


em gmeos (anastomoses vasculares durante a
vida in tero)
Duas populaes de clulas reconhecidas como
prprias
No h formao de Anti-A nem de anti-B
Nenhuma isoaglutinina da prova reversa

Prova direta

Prova reversa

Anti-A

Anti-B

Anti-AB

A1

Pt 1

2+ cm

2+ cm

4+

Pt 2

+ Fraco

+ Fraco

4+

Pacientes 1 e 2 so exemplos de gmeos com quimerismo.

Gmeo 1 70% B
30% O
Gmeo 2 30% B
70% O

Se o indivduo no tem irmo gmeo???

Quimeria por dispermia

Quimerias artificiais:

Dois espermas fer.lizando o


mesmo vulo

Transfuses
Transplante de medula ssea
Sangramento feto-materno

Entre classificao direta e reversa por antgenos de


reao fraca ou ausente
menos frequente
Subgrupos de A e/ou de B
Leucemias
Doena de Hodgking
Fenmeno de B adquirido
Anticorpos para antgeno de baixa incidncia no
reagente anti-A ou anti-B
Quantidades excessivas de substncias solveis do
grupo sanguneo

O FENMENO "B" ADQUIRIDO


Modificao do antgeno A pela ao de enzimas bacterianas.
N-ace.l-D-galactosamina
(grupo A)

D-galactosamina

Semelhante D-galactose
(grupo B)

Alguns reagentes monoclonais preparados a partir do clone ES4 so


conhecidos por detectar o antgeno "B" adquirido. A atividade deste
antgeno diminuda em meio de baixo pH.

Classificao direta
Paciente

Classificao reversa

Anti-A

Anti-B

Anti-A,B

Clulas
A1

Clulas B

++++

++

++++

Negativo

++++

Grupo provvel do paciente: A

ANTICORPOS PARA ANTGENO DE BAIXA INCIDNCIA


NO SORO REAGENTE ANTI-A OU ANTI-B
O soro reagente capaz de identificar antgenos de baixa
incidncia, reagindo na prova direta.
As clulas do reagente da prova reversa no apresentam estes
antgenos, a prova reversa negativa.
Classificao direta
Paciente

Classificao reversa

Anti-A

Anti-B

Anti-A,B

Clulas
A1

Clulas B

++++

++++

Negativo

++++

Grupo provvel do paciente: A

Reaes fracas podem ser amplificadas atravs de


incubao da mistura testes temperatura ambiente por
at 30 minutos.
Caso negativo, reduzir a temperatura para 4C.
As hemcias podem ser pr-tratadas com enzimas e
retestadas.
Excesso de antgenos solveis:
Os anticorpos do reagente se ligam aos antgenos solveis
e no sobra anticorpo para reagir com as hemcias,
resultando em prova direta negativa e reversa positiva.
Lavar as hemcias para retirada dos antgenos solveis.

B ADQUIRIDO
Teste do soro do paciente com hemcias autlogas gera reao
negativa.
Anti-B do soro no aglutina hemcias autlogas B adquiridas
O antgeno B adquirido tambm no aglutinado em pH superior a
8,5 ou inferior a 6,0.
O tratamento das hemcias com anidrito actico diminui a
reatividade das molcula B adquiridas, enquanto as B normais no so
afetadas.
Estudo secretor para identificao do fenmeno B adquirido:
Apenas substncia A secretada no fenmeno B adquirido.

Entre classificao direta e reversa por anormalidades das


protenas ou do plasma
Rouleaux (pseudo-aglutinao)

Nveis elevados de globulinas


Nveis elevados de fibrinognio
Expansores plasmticos (dextrana e polivinilpirrolidone, PVP)
Gelia de Wharton
Classificao direta

Paciente

Classificao reversa

Anti-A

Anti-B

Anti-A,B

Clulas
A1

Clulas B

++++

++

++++

++

++++

Grupo provvel do paciente: A

ROULEAUX

Empilhamento das hemcias


aparentando aglutinao.

que

aderem

Lavagem das hemcias, 6 a 8 vezes;


Diluio com salina;
Adio de salina (remove apenas o rouleaux).

como

moedas,

Entre classificao direta e reversa por problemas


variados:
Poliaglutinao (aglutinao com todos os soros);
Auto anticorpos reativos frios (alo e auto;
Auto-anticorpos quentes;
Isoaglutininas ABO irregulares;
Anticorpos diferentes de anti-A e anti-B (autoanticorpos);
Hemcias com Fentipo AB cis (raro), expressam A
raro e B fraco. Anti B fraco leva a discrepncia ABO
na reversa.

Poliaglutinao
Herana gentica ou infeco bacteriana
Antgeno T crptico
Todo soro humano tem anti-T
No problemas com reagentes monoclonais.
Realizar estudos de lectina
Classificao direta
Paciente

Classificao reversa

Anti-A

Anti-B

Anti-A,B

Clulas
A1

Clulas B

++

++++

++++

++++

Grupo provvel: O

Auto-anticorpos frios
Incubar a 37C
Lavar com salina a 37, 3 vezes
Tratar com ditiotreitol (DTT) para disperso da aglutinao
relacionada IgM
Classificao direta
Paciente

Classificao reversa

Anti-A

Anti-B

Anti-A,B

Clulas
A1

Clulas B

++

++++

++++

++++

+++

Grupo provvel: B

Auto-anticorpos quentes
Anemia hemoltica auto-imune quente; uso de drogas (alfametildopa); reaes transfusionais.
Hemcias revestidas por anticorpos suficientes para aglutinao
espontnea
Geram reaes fracas a temperatura ambiente.
Deve-se remover as imunoglobulinas ligadas.

Exposio das hemcias a 45C

Classificao direta
Paciente

Classificao reversa

Anti-A

Anti-B

Anti-A,B

Clulas
A1

Clulas B

++++

+++

Grupo provvel: O

Isoaglutininas ABO irregulares


Reagem com antgenos correspondentes nas clulas do reagente
utilizado.
A2 e A2B:produzem anti-A1
A1B: produzem anti-H
Repetir o testes com trs amostras de clulas A1, A2, B e O e
um controle autlogo;
Podem existir anticorpos contra grupos de antgenos
eritrocitrios raros:
identificao dos anticorpos irregulares
e nova tipagem
Classificao direta
Paciente

Classificao reversa

Anti-A

Anti-B

Anti-A,B

Clulas
A1

Clulas B

++++

++++

++++

Grupo provvel: AB

Anticorpos contra acriflavina


Se combinam com o corante e se ligam s hemcias

Aglutinao na prova direta

A lavagem com soluo salina resolve

Cis-AB
Herana de ambos os genes AB de um dos pais, e de
um gene O do outro genitor
Descendente com trs genes ABO herdados

O antgeno B gera reao fraca (em campo misto),


parecida com o B3;
O soro contm anti-B fraco.