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Sistema nico de Sade

Estado de Santa Catarina Secretaria


de Estado da Sade Laboratrio
Central de Sade Pblica
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Cpia
Controlada N

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PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRO

CPIA NO
CONTROLADA

MANUAL DE ORIENTAO PARA COLETA, ACONDICIONAMENTO E


TRANSPORTE DE AMOSTRAS BIOLGICAS

Elaborado por
Marlei Pickler Debiasi dos Anjos
Rita de Cssia Campos Bertoncini

Rubrica

Data
29/10/2012
29/10/2012

Verificado por
Cristine Ferreira
Fabiana Girardi
Sandra Bianchini Fernandes

Rubrica

Data
30/10/2012
30/10/2012
30/10/2012
Data

Rubrica

Aprovado por
Cristine Ferreira
Eliane Bressa Dalcin
Referendado por
Gilberto Alves

30/10/2012
30/10/2012
Rubrica

Rua Felipe Schmidt, 788 - Centro - CEP 88010-002 - Florianpolis/SC


Tel: (0XX 48 3251 7800) - Fax: (0XX 48 3251 7900)
e-mail: lacen@saude.sc.gov.br

Data
30/10/2012

Laboratrio Central de Sade Pblica LACEN/SC


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Manual de orientao para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas

Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

SUMRIO
1
2
3
4
5
6
7
8
9

Objetivo
CPIA NO
Campo de aplicao
CONTROLADA
Definies
Siglas
Condies gerais
Condies especficas
Responsabilidades
Referncias
Anexos
A
DOC MCT 01 - 01 Procedimentos para coleta, acondicionamento e
transporte de amostras biolgicas

OBJETIVO

Padronizar e estabelecer regras e recomendaes quanto coleta, acondicionamento e


transporte de amostras biolgicas para o Lacen.
2

CAMPO DE APLICAO

Este manual aplica-se coleta, acondicionamento e transporte de amostra biolgica nas


unidades de sade do estado, encaminhadas para a gerncia de biologia mdica do Lacen.
3

DEFINIES

Para efeito deste POP aplicam-se as seguintes definies:


a) Amostra biolgica
Parte do material biolgico de origem humana utilizada para anlises laboratoriais.
b) Amostra rejeitada
Amostra biolgica fora das especificaes determinadas pelo Lacen.
c) Requisio de Exame
Formulrio que contm informao suficiente para identificar o paciente e o requisitante
autorizado e fornecer os dados clnicos pertinentes.
d) Unidade de Sade
Estabelecimento de sade destinada a realizar assistncia sade, a uma populao
determinada (hospitais, clnicas, postos de sade, vigilncia epidemiolgica, etc.).
e) Laboratrios de Referncia ou Apoio
Laboratrio de sade pblica e/ou clnico que executa exames em amostras enviadas por
outros laboratrios.
f) Caixa trmica
Caixa para transporte de amostra biolgica (tipo geladeira porttil) de polietileno ou similar,
lavvel, resistente desinfeco e portando a identificao de Infectante ou Risco
Biolgico.

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Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

g) Amostra sob refrigerao


Amostra biolgica conservada na temperatura de 2 a 8C.
h) Amostra congelada
Amostra biolgica conservada em temperatura abaixo de 20C negativos.

CPIA NO
CONTROLADA

i) Amostra em temperatura ambiente


Amostra biolgica conservada na temperatura de 17 a 27C.
4

SIGLAS

EPI
EPC
BPA-I
SINAN
VE
PCR
IFI
IFD
TSB
ACH
NA
5

Equipamento de Proteo Individual


Equipamento de Proteo Coletiva
Boletim de Produo Ambulatorial Individualizado
Sistema de Informao de Agravos de Notificao
Vigilncia Epidemiolgica
Reao em cadeia da Polimerase
Imunofluorescncia Indireta
Imunofluorescncia Direta
Trypticase Soy Broth
gar chocolate
No se aplica

CONDIES GERAIS

A qualidade dos resultados dos exames laboratoriais est intimamente relacionada fase
pr-analtica, que se inicia desde o preenchimento correto da requisio, preparao do
paciente, coleta e identificao da amostra, armazenamento temporrio da amostra no local
de coleta, transporte ao laboratrio, at o recebimento e cadastramento das amostras no
Lacen.
Esta fase deve ser criteriosamente definida e constantemente monitorada em razo do
impacto significativo das atividades realizadas durante este processo sobre a qualidade do
resultado liberado.
5.1

Requisies

Toda amostra biolgica deve ser encaminhada ao laboratrio acompanhada da requisio


para exames do LACEN devidamente preenchida, acompanhada da Ficha de notificao do
SINAN, quando se fizer necessrio.
Todas as requisies esto disponveis na home page do Lacen, no seguinte endereo
eletrnico: http://lacen.saude.sc.gov.br.
As requisies, solicitaes mdicas ou Laudo Mdico para emisso de BPA-I (quando
aplicvel) devem conter as seguintes informaes:
a) dados da Unidade requisitante ou de procedncia da amostra - instituio solicitante (VE
municipal, hospital, clnica, profissional solicitante) com n do CNES, nome do municpio,
telefone para contato;

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Seo: 03

Requisito: 7.5

b) dados do paciente - nome completo, n do Carto Nacional de Sade,


data de nascimento, sexo, raa, municpio de residncia, nome da me ou responsvel,
endereo e nmero da notificao, quando aplicvel;
c) dados da amostra biolgica coletada;
d) data e hora da coleta da amostra;

CPIA NO
CONTROLADA

e) exame(s) solicitado(s);
f) dados complementares condio clnica/epidemiolgica controle de tratamento, se
comunicante ou contato, manipulador de alimentos, sintomas clnicos e data inicial dos
sintomas, dados vacinais recentes, uso de antibiticos ou antivirais, histrico de viagem
recente, resultado de exames anteriores;
g) data da solicitao do exame;
h) identificao do profissional solicitante (assinatura e carimbo).
Nota: em caso de solicitao dos testes de quantificao da carga viral do HIV e contagem
de linfcitos T CD4+/CD8+, o mdico deve estar cadastrado no Sistema de Controle de
Exames Laboratoriais (SISCEL).
5.1.1 Exames que devem vir acompanhados das respectivas Fichas de Notificao de
Surto - SINAN:
a) Conjuntivite bacteriana;
b) Faringite estreptoccica / escarlatina;
c) Botulismo.
5.1.2 Exames que devem vir acompanhados do Boletim de Produo Ambulatorial
(Individualizado) BPA-I:
a) Contagem de Linfcitos T CD4+/CD8+;
b) Quantificao de cido Nuclico - Carga Viral do HIV;
c) Quantificao de RNA do vrus da Hepatite C;
d) Genotipagem do HCV;
e) Genotipagem do HIV;
f) Pesquisa de anticorpos contra o vrus da Hepatite C (Anti-HCV).
Nota: em todos os BPA I devem constar assinatura e carimbo do mdico solicitante.
5.2 Solicitao de kits para coleta e transporte de amostras
A solicitao dos kits para coleta e transporte das amostras biolgicas fornecidos pelo
Lacen dever ser feita mediante solicitao prvia Diviso de Controle da Rede por meio
do fax (48) 3251-7952.
A retirada do kit no Lacen de responsabilidade da Regional de Sade ou VE de cada
municpio.
Para a retirada do material de coleta no Lacen, o solicitante dever encaminhar caixa de
transporte contendo gelo reciclvel para o acondicionamento dos kits.

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Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

A caixa de transporte no deve ser a mesma onde tenham sido encaminhadas amostras
biolgicas de qualquer espcie.
5.3

Horrio de recebimento das amostras no Lacen

CPIA NO
CONTROLADA

O horrio de recebimento de amostras biolgicas no Lacen das 07h00 as 19h00 de


segunda sexta-feira.
Para anlises de urgncia (meningites bacterianas, malria, H1N1, e em caso de surtos,
dentre outros) o Lacen trabalha em regime de sobreaviso durante os dias da semana no
perodo das 19h00 as 07h00 e em regime de planto (07h00 as 19h00) nos finais de
semanas e feriados.
5.4

Informaes complementares

Informaes complementares sobre coleta, transporte e encaminhamento de amostras


podem ser obtidas por meio do telefone (48) 3251-7815 - Setor de Recepo, Avaliao e
Cadastro de Amostras - ou nos setores tcnicos pelos telefones:
Setor
Geral PABX
Gerncia Tcnica
Bacteriologia
Biologia Molecular
Doenas Tropicais
Virologia
5.5

Telefone
(48) 3251-7800
(48) 3251-7813
(48) 3251-7824
(48)3251-7847 /7846
(48) 3251-7834
(48) 3251-7829

Setor
SOBREAVISO
Controle da Rede
Imunologia
Micologia
Tuberculose

Telefone
(48) 9121-7495
(48) 3251-7833
(48) 3251-827/7828
(48) 3251-7839
(48) 3251-7841

Envio das amostras biolgicas ao Lacen

O envio da amostra ao laboratrio deve ser feito em tempo hbil e em condies


adequadas, para que no haja alterao da amostra durante o transporte. Ver anexo A
DOC MCT 01 - Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras
biolgicas.
5.5.1 Acondicionamento da amostra para transporte
No transporte de amostras biolgicas deve-se obedecer rigorosamente as normas de
biossegurana vigentes no pas. Para tanto, deve-se observar o que segue:
a) a temperatura adequada ao transportar cada tipo de amostra. Quando for necessria
refrigerao, as amostras devem ser acondicionadas juntamente com gelo reciclvel. Se
necessrias temperaturas inferiores, utilizar gelo seco;
b) as amostras devem ser encaminhadas dentro de sacos plsticos e acondicionadas em
caixas trmicas impermeveis e higienizveis que garantam a estabilidade das mesmas at
a chegada ao laboratrio (Fig.1);
c) a caixa trmica deve portar a identificao de Infectante ou Risco Biolgico;
d) no colocar as amostras soltas dentro da caixa trmica. Utilizar frasco com parede rgida
para acondicionamento (Fig.2);

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Seo: 03

Requisito: 7.5

e) acondicionar as amostras de forma a evitar vazamento e contaminao;


f) quando forem enviadas muitas amostras de sangue na mesma remessa, deve-se
acondicion-las em estantes (Fig 3) e envolv-las em papel amassado ou plstico bolha, de
maneira que as amostras no fiquem em contato direto com o gelo. As amostras devem ser
colocadas na estante na mesma ordem das requisies;
g) enviar as amostras de escarro, fezes in natura e urina no frasco original de coleta (Fig 4);
h) as lminas para anlise e/ou superviso devem vir acondicionadas em porta-lmina
plstico (Fig 5 e 6). No devem vir em caixas de madeira ou enroladas em papel;
i) documentos como: ofcios, solicitaes de exames, fichas epidemiolgicas encaminhados
junto com as amostras devem ser colocados em envelope com destinatrio e o remetente.
Estes envelopes devero ser acondicionados em saco plstico e colados na FACE
EXTERNA da tampa, ou na lateral da caixa trmica. Nunca coloc-los dentro da caixa;
j) caixa trmica deve ser hermeticamente fechada e deve conter a identificao do
destinatrio e remetente, como no exemplo:
Destinatrio: Laboratrio Central de Sade Publica LACEN SC
Rua: Felipe Schmidt, 788, Centro Florianpolis/SC
CEP: 88010-002
Remetente: Secretaria Municipal de Sade ou unidade hospitalar, seguida do endereo
completo do municpio, nome da pessoa responsvel pelo envio e telefone para contato.

Figura 1: Modelo de caixa para transporte de amostras


biolgicas (caixa trmica)

Figura 2: Modelo do frasco com parede rgida

CPIA NO
CONTROLADA

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Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

Figura 3: Modelo de estante para transporte de tubos

Figura 4: Modelo de frasco para coleta de amostras


biolgicas como escarro, fezes, urina

Figura 5: Modelo de caixa plstica para transporte de


lminas para superviso (tuberculose, hansenase,
malria)

Figura 6: Modelo de frasco para transporte de


lminas
CPIA NO
O
CONTROLADA
A

5.5.2 Condies de transporte


O transporte de amostras biolgicas em veculos com circulao de pessoas deve ser feito
em condies de segurana e em rea separada dos passageiros, sendo que deve ser
observado o que segue:
a) as caixas trmicas devem vir bem vedadas e fixadas para no virar durante o transporte
e protegidas do sol e de umidade;
b) o motorista deve ser orientado de como proceder em caso de acidente com as amostras.
Para isso, o veculo deve conter um kit com EPI: guarda-p, luvas de procedimento, uma p
com escova (caso tenha que recolher material derramado), pano de limpeza, um frasco com
lcool 70% para limpeza do local e das mos, saco para lixo infectante e fita adesiva;
c) em caso de acidente com as amostras, todos os materiais recolhidos e utilizados na
operao devem ser colocados no saco para lixo infectante bem fechado com a fita adesiva,
para que sejam esterilizados e descartados adequadamente. Neste caso, a pessoa
responsvel pela remessa das amostras, cuja identificao deve estar na caixa de
transporte (ver item 5.7.1), deve ser avisada do ocorrido.

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Seo: 03

Requisito: 7.5

CONDIES ESPECFICAS

A coleta de amostra biolgica bem feita uma etapa muito importante no processo de
realizao do exame pelo laboratrio. Tem como finalidade obter um resultado preciso e de
qualidade, fundamental para uma orientao epidemiolgica e/ou clnica correta.
6.1

Coleta, preparo e identificao da amostra biolgica

CPIA NO
CONTROLADA

A fase anterior coleta deve ser objeto de ateno por parte de todas as pessoas
envolvidas no atendimento com a finalidade de se prevenir a ocorrncia de enganos.
A coleta de amostras de material humano deve ser realizada rigorosamente dentro das
normas de biossegurana vigentes no pas, ocasio em que se deve observar o que segue:
a) ao iniciar o procedimento de coleta, o profissional de sade deve organizar todo o
material de acordo com as amostras a serem coletadas, conferir todos os dados da
requisio e solicitar ao paciente que diga seu nome completo para confirmao dos dados
da requisio;
b) na etiqueta de identificao da amostra deve constar o nome completo do paciente, tipo
de exame e data de coleta;
c) em tubos de sangue deve-se, preferencialmente, utilizar a etiqueta prpria do tubo com
caneta que no borre ou apague;
d) na requisio do exame deve constar o nome completo e telefone do profissional que
efetuou a coleta ou que recebeu a amostra de forma a garantir a rastreabilidade.
6.1.1 Coleta de sangue
No necessrio jejum prolongado para coleta dos exames enviados ao Lacen. Para evitar
lipemia das amostras deve-se obedecer a um jejum de pelo menos 3 a 4 horas antes da
coleta de sangue.
Para as tcnicas de coleta recomendamos seguir as orientaes dos Cursos Telelab:
Tcnicas para Coleta de Sangue e Coleta de Sangue - Diagnstico e monitoramento das
DST, Aids e Hepatites Virais.
a) Sangue total
Coletar o sangue com o anticoagulante recomendado para a realizao do exame, logo
aps a coleta homogeneizar suavemente e identificar corretamente o tubo.
o material de escolha para Contagem de Linfcitos T CD4+/CD8+ e Malria. Ver
orientaes especficas para cada tipo de exame neste manual e no DOC MCT 01 - 01
(anexo A).
b) Soro
Coletar o sangue em tubo sem anticoagulante. Recomendamos a utilizao de TUBO
COM GEL SEPARADOR e ativador de cogulo (tampa amarela) Este contm uma barreira
de gel que est presente no fundo do tubo.

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Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

Manual de orientao para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas

Aps a coleta, manter o tubo, verticalmente por 30 minutos a temperatura ambiente, no


refrigerar o sangue logo aps a coleta para evitar hemlise, esta etapa muito importante
para que ocorra a coagulao do sangue e retrao do cogulo, evitando a formao de
fibrina e hemlise da amostra.
Apos este perodo centrifugar o tubo com sangue entre 2.500 a 3.000 rpm por 10 minutos
para obteno do soro (sobrenadante).
O tempo entre a coleta e a centrifugao no deve exceder uma hora.

CPIA NO
CONTROLADA

Durante a centrifugao a barreira de gel move-se para cima at a interface entre o soro e o
cogulo, onde forma uma barreira estvel que separa o soro da fibrina e das clulas. Neste
caso, o soro pode ser utilizado pelo laboratrio diretamente no tubo de coleta, eliminando a
necessidade de transferncia de um tubo para outro.
Aps a centrifugao, os tubos com gel devem permanecer por uma hora na posio
vertical, para minimizar o risco de danificar a barreira formada pelo gel, atravs dos
movimentos de vibrao durante o transporte.
Manter as amostras centrifugadas no tubo original de coleta com gel separador sob
refrigerao (2 a 8C) at o acondicionamento correto (sob refrigerao) para envio ao
Lacen.
Este tubo pode permanecer por at cinco dias refrigerados. Excepcionalmente, se
necessrio manter armazenado no local de coleta por perodo maior que cinco dias, mas
nunca mais de 30 dias, recomendamos fracionar o soro para outro tubo de vidro ou
polietileno tamanho 12x75 mm, congelar o soro fracionado (- 20C) e enviar soro congelado.
c) Plasma
O sangue total deve ser coletado em tubo com anticoagulante. Seguir a tcnicas de coleta
e homogeneizao adequada do sangue, para evitar hemlise.
a amostra de escolha para a realizao de testes moleculares como Carga Viral do HBV e
HIV. Obedecer s orientaes de coleta, envio no tubo primrio ou se necessrio separao
de plasma para envio, nas informaes especficas para cada exame que seguem neste
manual e no DOC MCT 01 - 01 (anexo A).
Nota: No sero aceitas amostras com as seguintes caractersticas:
hemlise, lipemia e hiperbilirrubinemia;
mal conservadas (sem refrigerao), transportadas inadequadamente (tubos
quebrados, derramados), e
Tubos sem identificao.
6.1.2 Coleta das demais amostras biolgicas
As orientaes para a coleta das demais amostras biolgicas como escarro, fezes, lquor,
lquido pleural, lavado bronco-alveolar, sangue para hemocultura, secrees e outras
amostras esto descritos no DOC MCT 01 (anexo A) e mais detalhadamente no item 6.2, de
acordo com as orientaes dos setores tcnicos e peculiaridades de cada tipo de exame.

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Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

Para estas amostras, etiquetar o frasco com nome completo e legvel do paciente, data e
hora da coleta, tipo de exame e amostra biolgica;
A etiqueta deve ser colocada no corpo do frasco coletor, nunca na tampa.
Todas as amostras biolgicas devem ser armazenadas at o momento do envio de forma
adequada, obedecendo s orientaes do laboratrio, para que no haja interferncia em
seus constituintes.
6.2

Orientaes especficas para a coleta e transporte das amostras biolgicas

As orientaes para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas esto


descritas no DOC MCT 01 - 01 (anexo A). As informaes abaixo complementam o DOC
MCT 01.
O DOC MCT 01 01 est estruturada em ordem alfabtica por patologia, visando facilitar a
consulta. Para cada patologia est disponvel o nome dos exames realizados no Lacen ou
em Laboratrios de Referncia, a(s) amostra(s) biolgica(s) utilizadas na realizao de cada
exame, volume necessrio para realizao do exame, acondicionamento e temperatura de
transporte, o perodo ideal da coleta e o tempo crtico para a chegada da amostra no Lacen
e prazo mximo de liberao dos exames.
No item a seguir, as patologias com os respectivos exames esto agrupadas por Setor
Tcnico que realiza o exame e as informaes sobre coleta esto descritas
detalhadamente.
6.2.1 Setor de Bacteriologia UO BACTO

CPIA NO
CONTROLADA

Cancro mole
Material necessrio para coleta:
swab de algodo, haste plstica, estril (swab comum);
lmina de microscopia nova, limpa e desengordurada;
Coleta da leso genital
a amostra colhida com swab, do centro da leso, obtendo-se maior quantidade
possvel de secreo ou pus.
com o prprio swab da coleta, preparar dois esfregaos em 2 lminas e identific-las;
deixar secar em temperatura ambiente.
acondicionar as lminas em porta-lminas de plstico rgido para evitar quebra e
exposio poeira e insetos e a luz solar.
Coqueluche
Material necessrio para coleta
swab ultrafino com haste flexvel, estril e alginatado;
meio de transporte: Meio de Regan-Lowe com antibitico (gar carvo com antibitico).
no momento de uso o meio de transporte deve estar em temperatura ambiente, sendo
necessrio retir-lo do refrigerador pelo menos 30 minutos antes;

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Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

Coleta da secreo do nasofaringe


antes de iniciar a coleta, lavar as mos, colocar a mscara e calar as luvas;
retirar o excesso de muco nasal e iniciar a coleta;
introduzir o swab em uma narina do paciente, at encontrar resistncia na parede
posterior da nasofaringe (neste momento o paciente lacrimeja) girar o swab por alguns
segundos, ver Figura 7.
introduzir o swab no tubo com o Meio de transporte Regan-Lowe com antibitico,
deixando-o submerso totalmente no meio de cultura. Fechar firmemente o tubo.
identificar o tubo com os dados do paciente
Notas:

1) O swab deve ser armazenado, antes da sua utilizao, em temperatura ambiente e em local seco.
2) O meio de transporte deve ser armazenado, antes de sua utilizao, em refrigerador, observando sempre a
data de vencimento. O meio tem validade de 2 meses partir da data de fabricao (como o meio de cultura
contm sangue e antibitico, o prazo de validade dever ser seguido rigorosamente).
3) Na solicitao de exames dos contatos/comunicantes, acrescentar o nome do doente ao qual est
vinculado.
4) Por ser doena de transmisso respiratria, o uso de mscara e luvas de procedimento essencial para a
proteo do profissional que realiza a coleta e devem ser utilizadas tanto para caso suspeito como para os
comunicantes sadios.

Colonizao de Estreptococo do grupo B em gestante


Material necessrio para coleta
swab estril alginatado;
meio de transporte utilizado: Meio de Amies com carvo.

CPIA NO
CONTROLADA

Antes de iniciar a coleta, lavar as mos, calar as luvas e iniciar a coleta.


Coleta da secreo vaginal
no deve ser utilizado espculo
a amostra colhida introduzindo o swab no tero distal da vagina, fazendo movimentos
giratrios por toda a circunferncia da parede vaginal
introduzir o swab com a amostra no Meio de transporte Amies com carvo
identificar o tubo com os dados do paciente.
Coleta de raspado anorretal
introduzir o swab no orifcio anal e fazer movimentos giratrios por toda a parede distal
do reto
caso o swab toque as fezes, repetir o procedimento com novo swab
introduzir o swab com a amostra no Meio de transporte Amies com carvo
identificar o tubo com os dados do paciente.
Notas:

1) O swab deve ser armazenado, antes da sua utilizao, em temperatura ambiente e em local seco.
2) O meio de transporte deve ser armazenado, antes de sua utilizao, em refrigerador, observando sempre a
data de vencimento.

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Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

Conjuntivite bacteriana
* exame realizado somente em situaes de surto de conjuntivite bacteriana, quando
solicitado pela VE.
CPIA NO

Material necessrio para coleta


CONTROLADA
swab estril
meio de transporte utilizado: tubo com meio de cultura agar chocolate
no momento de uso o meio de cultura agar chocolate deve estar em temperatura
ambiente, sendo necessrio retir-lo do refrigerador pelo menos 30 minutos antes.
Coleta da secreo da conjuntiva
antes de iniciar a coleta, lavar as mos, colocar a mscara, calar as luvas e iniciar a
coleta
com um swab estril, colher a amostra da regio prxima ao saco conjuntival, no canto
interno do olho, evitando movimentos circulares. conveniente manter, por alguns
segundos, o swab no saco conjuntival, o que ir promover o lacrimejamento e absoro
da secreo pelo algodo
com o swab que foi coletada a amostra, inocular imediatamente no tubo de agar
chocolate, nas condies mais asspticas possveis (abrindo o tubo de agar chocolate
prximo chama do bico de Bunsen) e semear rolando o swab na superfcie inclinada
do meio. Desprezar o swab como resduo infectante. Fechar imediatamente o tubo com
a tampa de borracha e a tampa metlica
identificar o tubo com os dados do paciente e enviar a Ficha de Investigao de Surto
com as informaes clnicas e epidemiolgicas correspondentes ao caso.
Notas:
1) O swab deve ser armazenado, antes da sua utilizao, em temperatura ambiente e em local seco.
2) O meio de transporte deve ser armazenado, antes de sua utilizao, em refrigerador, observando sempre a
data de vencimento.

Difteria
Material necessrio para coleta
2 swab um para coleta do nasofaringe (swab ultrafino com haste flexvel, estril) e
outro para coleta do orofaringe (swab com haste plstica, estril)
1 abaixador de lngua
2 tubos com Meio de Transporte Amies com carvo
no momento de uso os meios de transporte devem estar em temperatura ambiente,
sendo necessrio retir-los do refrigerador pelo menos 30 minutos antes.
Coleta de secreo de nasofaringe e orofaringe
identificar os tubos com meio de transporte, com N (nariz) e G (garganta) para facilitar o
manuseio e evitar trocas
antes de iniciar a coleta, lavar as mos, colocar a mscara, calar as luvas e iniciar a
coleta;
Para o nariz (N) - introduzir o swab ultrafino flexvel e estril na narina do paciente at
encontrar resistncia na parede posterior da nasofaringe (Figura 7). Realizar
movimentos rotatrios. Utilizar o mesmo swab para ambas as narinas
imediatamente aps a coleta, introduzir o swab no meio de transporte Amies com
carvo. Ateno para que o swab fique submerso no meio de cultura. Fechar
firmemente o tubo;

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Manual de orientao para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas

Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

Para a garganta (G) com auxlio de um abaixador de lngua, pressionar a lngua para
baixo e com swab estril, fazer a coleta no redor da superfcie da garganta, passando o
swab pelas amgdalas, vula e toda a parede da garganta (Figura 8). Na coleta em
doentes, o swab deve ser passado cuidadosamente apenas ao redor das leses, para
que no haja descolamento da placa (pseudomembrana) imediatamente aps a coleta,
introduzir o swab no meio de transporte Amies com carvo. Ateno para que o swab
fique submerso no meio de cultura. Fechar firmemente o tubo.

Notas:
1) Os swab devem ser armazenados, antes da sua utilizao, em temperatura ambiente e em local seco.
2) O meio de transporte deve ser armazenado, antes de sua utilizao, em refrigerador, observando sempre a
data de vencimento.
3) Na solicitao de exames dos contatos/comunicantes, acrescentar o nome do doente ao qual est
vinculado.
4) Por ser doena de transmisso respiratria, o uso de mscara e luvas de procedimento essencial para a
proteo do profissional que realiza a coleta e devem ser utilizadas tanto para caso suspeito como para os
comunicantes sadios.

Figura 7: coleta de secreo de nasofaringe

Figura 8: coleta de secreo de orofaringe

Doena bacteriana invasiva

amostra biolgica: lquidos orgnicos estreis (lquido pleural, peritoneal, asctico)


procedimento mdico.
Doena diarrica bacteriana (Doena Transmitida por Alimento ou gua, clera)

Material necessrio para coleta


swab estril
frasco coletor, rgido, boca larga e tampa rosquevel
meio de transporte: Meio de Transporte Cary-Blair.

CPIA NO
CONTROLADA

Coleta das Fezes in natura


coletar de 2 a 4 g de fezes (equivalente a 1 colher de sobremesa) em frasco limpo,
seco, de boca larga e com tampa de rosca, dar preferncia s partes mucopurulentas e
com sangue.
Coleta com swab fecal em Meio de Transporte Cary-Blair
coletar de 2 a 4 g de fezes em frasco limpo, seco, de boca larga
mergulhar o swab no frasco contendo as fezes, dando preferncia s partes
mucopurulentas e com sangue e a seguir introduzir no meio de transporte Cary-Blair.
Fechar firmemente o frasco.

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Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

Coleta com swab retal em meio de transporte Cary-Blair


introduzir o swab no esfncter anal ( 2 cm), fazendo movimentos rotatrios suaves por
alguns segundos para que haja absoro do material. Retirar o swab e introduzir no
Meio de Transporte Cary-Blair. Fechar firmemente o frasco.
Notas:
1) A coprocultura de rotina realizada no LACEN inclui a pesquisa de Salmonella spp, Shigella spp,
Escherichia coli enteropatognicas.
2) A pesquisa de Vibrio cholerae e outros vbrios, E. coli enterohemorrgica O157, Aeromonas spp e
Plesiomonas shigeloides, deve ser solicitada separadamente, pois esses agentes necessitam de mtodos
especiais para seu isolamento e identificao.
3) Quando a coprocultura for realizada no laboratrio local e houver isolamento de Salmonella spp, Shigella
spp, Escherichia coli patognicas e Vibrio cholerae, o microrganismo isolado deve ser encaminhado ao Lacen
para confirmao e encaminhamento da cepa para o Laboratrio de Referncia Nacional.

Faringite estreptoccica / Escarlatina


* exame realizado somente em situaes de surto, quando solicitado pela Vigilncia
Epidemiolgica.
Material necessrio para coleta
swab de dracon ou rayon, flexvel, estril, com haste de plstico. No usar swab de
algodo comum ou alginatado
CPIA NO
meio de transporte: Meio de Transporte Amies com carvo.
CONTROLADA
Coleta de secreo de orofaringe
antes de iniciar a coleta, lavar as mos, colocar a mscara, calar as luvas e iniciar a
coleta;
introduzir na orofaringe do paciente, um swab de dracon ou rayon, evitar tocar outras
reas da cavidade oral com swab, para prevenir contaminao com a flora da orofaringe
coletar a secreo orofarngea, realizando na rea posterior da faringe e na superfcie
das tonsilas, movimentos rotatrios com o swab
introduzir o swab coletado em meio de transporte Amies com carvo
identificar o tubo com os dados do paciente e enviar a Ficha de Investigao de Surto
com as informaes clnicas e epidemiolgicas correspondentes ao caso.
Notas:

1) O swab deve ser armazenado, antes da sua utilizao, em temperatura ambiente e em local seco.
2) O meio de transporte deve ser armazenado, antes de sua utilizao, em refrigerador, observando sempre a
data de vencimento.

Febre tifide
a) Exames: Hemocultura e Coprocultura
b) Volume ideal
sangue: adultos: 5 mL de sangue em cada puno (para frasco com 45 mL de meio de
cultura frasco adulto); criana: 1 mL de sangue em cada puno (para frasco com 9
mL de meio de cultura frasco peditrico). Deve ser respeitada a quantidade de sangue
de 1:10 em relao ao meio de cultura.
fezes: coletar 2 a 4 g de fezes in natura, swab fecal ou swab retal .
c) Perodo ideal de coleta
sangue: coletar nas 2 semanas iniciais da doena. Fazer a coleta antes da ascenso

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Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

da temperatura (evitar o pico febril). Paciente com febre constante, fazer a coleta em
qualquer horrio. Paciente em uso de terapia antimicrobiana, colher antes da prxima
dose do antibitico;
fezes: coletar a partir da 2 semana at a 5 semana do incio dos sintomas, no estgio
de convalescena e na pesquisa de portador.
CPIA NO

CONTROLADA
d) Nmero de amostras de sangue e intervalo da coleta
recomenda-se a coleta de 2 a 3 amostras de sangue;
deve existir um intervalo de 15 a 20 minutos entre as coletas, intercalando os stios da
puno (ex.: brao direito, brao esquerdo).

e) Nmero de amostras de fezes e intervalo da coleta


recomenda-se a coleta de 3 amostras com intervalo de 3 dias cada uma;
no caso de portadores assintomticos, particularmente aqueles envolvidos na
manipulao de alimentos: 7 amostras em dias seqenciais.
sete dias aps o trmino do tratamento com antimicrobiano, realizar 3 (trs)
coproculturas com intervalos de 30 dias. Caso uma delas seja positiva, essa srie pode
ser suspensa e o indivduo deve ser novamente tratado.
f) Procedimento para a coleta de sangue:
identificar os frascos de meio de cultura lquido (TSB ou BHI) com o nome do paciente,
data e hora da coleta e nmero da amostra (se 1, 2 ou 3 amostra);
retirar a parte superior (circular) do lacre metlico dos frascos;
realizar a desinfeco da tampa de borracha com lcool 70%, e deixar sobre a rolha
uma gaze ou algodo embebido com lcool a 70%. Manter o algodo sobre o frasco at
o momento da puno;
realizar a anti-sepsia rigorosa do local da puno, deixar agir por 1 minuto. Evitar tocar
no local da puno;
colher a amostra, com seringa e agulha descartveis e transferir para o frasco, sem
trocar a agulha. Coletar um volume de sangue correspondente a aproximadamente 5
10% do volume do meio de cultura;
homogeneizar delicadamente o frasco por inverso.
g) Procedimento para coleta de fezes:
ver orientaes sobre coleta de fezes no item DOENAS DIARRICAS
Gonorria
a) Amostras biolgicas
paciente do sexo masculino: secreo uretral ou 1 jato urinrio.
paciente do sexo feminino: secreo endocervical, secreo uretral ou, no caso de
crianas e mulheres histerectomizadas, secreo do fundo do saco vaginal.
outras amostras: secreo anal e secreo de orofaringe.
b) Tipo de swab utilizado para coleta
secreo uretral: swab de algodo alginatado ultrafino.
secreo endocervical, orofaringe, anal e vaginal: swab de algodo alginatado.
c) Meio de transporte
meio de Transporte Amies com carvo.

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Seo: 03

Requisito: 7.5

d) Orientaes para a coleta das amostras


Preparo do paciente do sexo feminino: a coleta da secreo feminina deve ser feita
aps 3 horas da ltima mico. A paciente deve estar em abstinncia sexual de 2 dias
pelo menos. No estar fazendo uso de antisspticos locais ou cremes vaginais,
antibiticos ou quimioterpicos e no estar menstruada. No ter realizado exames
ginecolgicos com toque ou ultrasom transvaginal nas 48 horas que antecedem o
exame.

Preparo do paciente do sexo masculino: estar h pelo menos 3 horas sem urinar.
Evitar relaes sexuais e medicamentos tpicos nas 24 horas que antecedem o exame.
Preferencialmente no usar antibitico nos 3 dias que antecedem o exame.

Coleta da secreo uretral masculina


solicitar ao paciente para retrair o prepcio;
limpar a secreo emergente com gaze estril (no coletar a secreo emergente);
introduzir o swab alginatado ultrafino, cerca de 2 cm, no canal uretral, atravessando a
fossa navicular;
girar o swab, delicadamente, de 8 a 10 vezes para absorver a secreo;
retirar o swab; fazer um esfregao fino e homogneo em uma lmina identificada com o
nome do paciente;
proceder a nova coleta para cultura e inocular a amostra em meio de transporte Amies
com carvo.
Coleta da amostra de 1 jato urinrio
caso o paciente no esteja com secreo aparente colher a primeira urina da manh ou
reter a urina por pelo menos 3 horas antes de realizar o exame;
realizar higiene prvia da regio genital;
coletar os primeiros 10 mL de urina (1 jato urinrio) em frasco estril de boca larga com
tampa de rosca.
CPIA NO

CONTROLADA
Coleta da secreo endocervical
introduzir o espculo (no utilizar espculo lubrificado);
limpar, com gaze estril, a secreo do fundo do saco vaginal e a que recobre o colo do
tero;
introduzir o swab alginatado cerca de 1cm no canal endocervical, girando-o
delicadamente de 8 a 10 vezes, para absorver a secreo. Cuidado para no tocar a
parede vaginal;
retirar o swab; fazer um esfregao fino e homogneo em uma lmina identificada com o
nome do paciente;
proceder a nova coleta para cultura e inocular a amostra em meio de transporte Amies
com carvo.

Coleta da secreo uretral feminina


fazer a expresso da secreo das glndulas parauretrais pressionando a parede
vaginal com o dedo mdio;
introduzir o swab alginatado cerca de 2 cm na uretra;
coletar a secreo girando delicadamente o swab de 8 a 10 vezes para absorver a
secreo.

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Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

retirar o swab; fazer um esfregao fino e homogneo em uma lmina identificada com o
nome do paciente;
proceder a nova coleta para cultura e inocular a amostra em meio de transporte Amies
com carvo.
CPIA NO

Coleta da secreo de fundo de saco vaginal


CONTROLADA
introduzir o espculo;
coletar a amostra do saco vaginal com auxlio de um swab alginatado;
retirar o swab alginatado; fazer um esfregao fino e homogneo em uma lmina
identificada com o nome do paciente;
proceder a nova coleta para cultura e inocular a amostra em meio de transporte Amies
com carvo.
Coleta de secreo anal
introduzir o swab alginatado no reto, cerca de 2 cm;
fazer movimentos circulares junto parede retal raspando o material das criptas por 30
segundos, para absorver a secreo. Repetir o procedimento com novo swab, caso o
swab toque as fezes;
retirar o swab alginatado e inocular a amostra em meio de transporte Amies com
carvo.
Coleta de secreo de orofaringe
com auxlio de um abaixador de lngua, pressionar a lngua para baixo e com swab
estril alginatado, fazer a coleta passando o swab pelas amgdalas e faringe posterior;
imediatamente aps a coleta, introduzir o swab no meio de transporte Amies com
carvo. Ateno para que o swab fique submerso no meio de cultura. Fechar
firmemente o tubo.
Hansenase
a) Materiais necessrios para a coleta
lmina para microscopia, nova, limpa e desengordurada, com ponta fosca 26 x 76 mm;
lamparina a lcool 90 GL ou bico de Bunsen, fsforo;
lcool etlico 70GL ou 70%;
gaze no estril e algodo hidrfilo;
lpis ponta vdea;
cabo de bisturi n. 3 e lmina de bisturi n. 15 ou bisturi descartvel;
porta-lminas de plstico para o transporte da amostra;
esparadrapo ou bandagem antissptica;
EPI: luvas de procedimento, mscara, avental;
pina de Kelly curva ou reta para fazer isquemia no local da inciso;
recipiente para descarte do material utilizado.
b) Stios de coleta do raspado intradrmico
Em pacientes com leses cutneas visveis ou reas com alterao de sensibilidade, a
coleta dever ser feita em lbulo auricular direito (LD), lbulo auricular esquerdo (LE),
cotovelo direito (CD) e leso (L). Nas leses planas coletar no centro ou borda interna e
nos ndulos, tubrculos e placas eritematosas marginadas por microtubrculos, coletar
no centro.

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Seo: 03

Requisito: 7.5

c) Tcnica de Coleta
Para realizar a coleta necessrio que o procedimento ocorra em sala especfica.
importante que ela seja arejada, limpa e com boa iluminao.
Para realizao da coleta, seguir os passos descritos abaixo:
acomodar o paciente confortavelmente;
explicar o procedimento que ser realizado. No caso de criana explicar tambm para a
pessoa responsvel;
observar indicaes dos stios de coleta na solicitao mdica;
manusear a lmina pelas bordas evitando colocar os dedos no local onde a amostra
ser distribuda;
identificar a lmina com as iniciais do nome do paciente, o nmero de registro da
unidade e data da coleta;
no momento de cada coleta fazer antissepsia com lcool a 70 GL ou 70%, dos stios
indicados na solicitao mdica;
com o auxlio da pina Kelly, fazer uma prega no stio de coleta, pressionando a pele o
suficiente para obter a isquemia, evitando o sangramento. Manter a presso at o final
da coleta tomando o cuidado de no travar a pina (Figura 9);

CPIA NO
CONTROLADA

Figura 9: Pregueamento do stio de coleta (isquemia) e inciso para coleta do material

fazer um corte na pele de aproximadamente 5 mm de extenso por 3 mm de


profundidade. Colocar o lado no cortante da lmina do bisturi em ngulo reto em
relao ao corte e realizar o raspado intradrmico das bordas e do fundo da inciso,
retirando uma quantidade suficiente e visvel do material. Se fluir sangue no momento
do procedimento (o que no dever acontecer se a compresso da pele estiver
adequada) enxugar com algodo;
desfazer a presso e distribuir o material coletado na lmina, fazendo movimentos
circulares do centro para a borda numa rea aproximadamente de 5 - 7 mm de
dimetro, mantendo uma camada fina e uniforme;
o primeiro esfregao dever ser colocado na extremidade mais prxima da identificao
do paciente (parte fosca), e o segundo prximo ao primeiro observando uma distncia,
de pelo menos 0,5 cm entre cada amostra e assim sucessivamente. Os esfregaos
devem estar no mesmo lado da parte fosca da lmina (Fig 10);
entre um stio e outro de coleta, limpar a lmina de bisturi e a pina utilizada com
algodo ou gaze embebido em lcool 70 GL ou 70%, para que no ocorra a
contaminao entre eles;

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Seo: 03

Requisito: 7.5

fazer curativo compressivo e nunca liberar o paciente se estiver sangrando


I
D
E
N
T
I
F
I
C
A

LO

CE

Figura 10: Distribuio padro dos esfregaos na lmina

d) Fixao do esfregao
a lminas, contendo os raspados intradrmicos, deve permanecer em superfcie plana e
temperatura ambiente, durante 5 a 10 minutos at estarem completamente secos.
aps esta etapa os esfregaos devem ser fixados passando-se as lminas 2 a 3 vezes,
rapidamente, na chama de uma lamparina ou bico de Bunsen, com os esfregaos
voltados para cima. Evitar o aquecimento da lmina durante a fixao, para que no
haja alterao das caractersticas morfo-tintoriais do bacilo; em locais ou dias em que o
ar esteja mais mido, o tempo de secagem do esfregao poder ser maior.
Infeco de pele/ouvido/bipsia
* quando solicitado pela Vigilncia Epidemiolgica p/ esclarecimento de surto.
a) Bipsias
procedimento mdico.
CPIA NO
b) Leso aberta
CONTROLADA
no recomendada cultura de leses secas ou crostas;
descontaminar as margens e a superfcie da leso;
proceder nova limpeza com soluo fisiolgica estril;
coletar o material purulento na parte mais profunda da leso utilizando seringa e agulha.
Transferir a amostra para um frasco estril. Se no for possvel a coleta por puno,
utilizar swab com meio de transporte Amies com carvo.

c) Abscesso fechado
fazer anti-sepsia com produto adequado;
aspirar o exsudato com agulha e seringa. Transferir a amostra para um frasco estril.
No usar swab.
d) Pstula e vescula
selecionar uma pstula intacta. Fazer anti-sepsia com produto adequado e puncionar.
Se a leso for seca, com crosta, sem vescula ou pstula evidente, remover o material
superficial aps anti-sepsia e passar firmemente o swab estril sobre a leso.
e) Secreo de ouvido externo
usando um swab limpar o canal do ouvido com anti-sptico seguido de lavagem com
soluo fisiolgica estril;
com outro swab obter material fazendo rotao no canal do ouvido;
introduzir o swab no meio de transporte de Amies.

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Seo: 03

Requisito: 7.5

Infeco do Trato Urinrio (ITU)


a) Coleta em pacientes do sexo feminino:
paciente deve estar sem urinar, por pelo menos duas horas antes da coleta
a paciente deve lavar bem as mos com gua e sabo neutro e sec-las com toalha de
papel limpa e descartvel;
deve despir-se, afastar os lbios vaginais e lavar bem a vulva e os lbios vaginais
usando gua morna com sabo, sempre no sentido de frente para trs;
deve enxaguar bem com gua morna, no secar com toalha;
durante todo este processo a paciente deve manter os lbios vaginais separados, e no
tocar a rea limpa com os dedos;
urinar, desprezando a primeira parte do jato urinrio no vaso sanitrio;
colher cerca de 30mL (aproximadamente a metade do frasco) de urina em um frasco
estril, fechando assim que a urina for colhida;
em seguida, a amostra colhida contida no frasco fechado, deve ser entregue a pessoa
responsvel na recepo do Lacen.
b ) Coleta em pacientes do sexo masculino:
paciente deve estar sem urinar, por pelo menos duas horas antes da coleta
o paciente deve lavar bem as mos;
afastar o prepcio e desprezar no vaso sanitrio, uma pequena quantidade de urina;
sempre segurando para trs o prepcio, colher cerca de 30mL de urina no frasco estril,
fechando assim que a urina for colhida;
em seguida, a amostra colhida contida no frasco fechado, deve ser entregue a pessoa
responsvel na recepo do Lacen.
Meningite bacteriana
* Nos casos de suspeita de meningites bacterianas e/ou doena meningoccica SEMPRE
deve ser coletado: LQUOR, SANGUE E SORO, mesmo que no haja sintomas de sepse.
CPIA NO

a) Coleta de lquor
CONTROLADA
procedimento mdico
volume ideal: 3 a 5 mL ou coletar o maior volume que as condies clnicas permitirem;
b) Coleta de sangue para hemocultura
Tcnica de coleta:
lavar as mos com gua e sabo, enxaguar bem, enxugar com papel toalha e calar as
luvas;
realizar a anti-sepsia rigorosa do local da puno, deixar agir por 1 minuto. Evitar tocar
no local da puno;
coletar assepticamente no mnimo 5mL de sangue de adulto e 1mL de criana, cuidar
para que no haja bolhas de ar na seringa. Coletar um volume de sangue
correspondente a aproximadamente 5 10% do volume do meio de cultura;
no trocar de agulha antes de injetar o sangue no frasco.

Volume de sangue para cada amostra


adulto: 5 mL de sangue (p/ frasco com 45 mL de caldo TSB)
criana (at 6 anos de idade): 1 mL (p/ frasco com 9 mL de TSB frasco peditrico).

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Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

Inoculao e incubao
identificar os frascos de meio de cultura lquido (TSB ou BHI) com o nome do paciente,
data e hora da coleta e nmero da amostra (se 1, 2 ou 3 amostra);
retirar a parte superior (circular) do lacre metlico dos frascos;
realizar a desinfeco da tampa de borracha com lcool etlico 70%, e deixar sobre a
rolha uma gaze ou algodo embebido com lcool etlico a 70%. Manter o algodo sobre
o frasco at o momento da puno;
transferir o sangue coletado para o frasco, sem trocar a agulha;
homogeneizar delicadamente o frasco por inverso.
CPIA NO

c) Soro p/ pesquisa de antgenos bacterianos e PCR


CONTROLADA
volume ideal: 3 a 5 mL ou no mnimo 1.0 mL;
coletar o sangue sem o uso de anticoagulante e separar o soro.
Para a realizao dos exames, o Lacen fornece um kit de meningite (Figura 11), onde se
encontram as instrues de uso.

Figura 11: Kit de coleta de amostras para meningite

o kit deve ser conservado no refrigerador temperatura de 2 a 8C, antes do uso.


observar a validade dos frascos e o aspecto do meio de cultura agar chocolate (aspecto
mido, superfcie ntegra e sem contaminantes) e do TSB (sem precipitao, turvao
ou contaminao). Caso o kit apresente alguma irregularidade separ-lo para ser
devolvido ao Lacen, com justificativa e solicitao de novo kit.
os kit no utilizados que estiverem vencidos ou prximos do prazo de vencimento devero ser devolvidos ao Lacen.
encaminhar ao Lacen todos os meios semeados (com ou sem crescimento).
d) Orientao para o uso de kit de meningite
no momento da semeadura, os meios de cultura devem estar a temperatura ambiente
(se necessrio manter os frascos de gar chocolate e caldo TSB na mo fechada por
alguns minutos);
romper o lacre central dos frascos e fazer desinfeco das tampas de borracha com
lcool etlico 70%;
agar chocolate: com auxlio de seringa e agulha estreis, introduzir 5 a 10 gotas do
lquor no frasco com meio de agar chocolate (frasco com tarja verde);

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Seo: 03

Requisito: 7.5

lquor (LCR): colocar o restante do volume de LCR no frasco estril para o lquor
(frasco com tarja azul);
lmina: depositar sobre a lmina 1 gota de lquor centrifugado e deixar secar em
temperatura ambiente. No usar chama do bico de Bunsen para a fixao do esfregao;
frasco com meio de TSB (hemocultura): com auxlio de seringa e agulha estreis,
introduzir 1 mL de sangue direto no frasco para coleta peditrica (frasco com tarja
vermelha). No caso de frasco para coleta de adulto, com 45 mL de meio de cultura,
introduzir 5 mL de sangue. Respeitar sempre a proporo da quantidade de sangue de
1:10 em relao ao meio de cultura.
Soro: colocar 3 a 5 mL de soro no frasco estril para soro (frasco com tarja laranja).

Nota: Se o volume do lquor for muito pequeno, deve-se priorizar o inculo em gar chocolate para
a preservao do microrganismo e colocar a gota do LCR sem centrifugar em lmina de vidro para
a realizao da bacterioscopia pelo mtodo de Gram.
CPIA NO

e) Orientao para o caso de envio de lquor in natura (sem kit do Lacen) CONTROLADA
realizar puno lombar (procedimento mdico);
identificar um frasco estril e uma lmina com o nome do paciente e tipo de amostra;
acondicionar a amostra no frasco estril;
conservar em temperatura ambiente;
em uma lmina de microscopia nova, depositar 1 gota de lquor, de preferncia
centrifugado e deixar secar a temperatura ambiente. No fazer esfregao.
f) Orientao para encaminhamento de cepas bacterianas
quando a cultura do LCR ou hemocultura for realizada no laboratrio local e houver
crescimento de Neisseria meningitidis, Haemophilus spp e Streptococcus pneumoniae
enviar o microrganismo isolado para confirmao no Lacen.
realizar o repique do microrganismo isolado (cepa pura) no frasco de agar chocolate
(frasco com tarja verde); na falta deste, usar um tubo ou placa de meio de cultura
adequada (gar sangue ou gar chocolate, dependendo do microrganismo isolado).
Incubar em estufa bacteriolgica a 34C - 36 C por 18-24 horas;
identificar o tubo/placa com o nome do paciente e data do repique;
fechar com fita crepe ou film plstico;
encaminhar o tubo/placa em temperatura ambiente, imediatamente aps o perodo de
incubao.
Notas:
1) As cepas enviadas devero ser provenientes de repiques recentes (24 horas de incubao) para evitar que
haja perda da mesma por ressecamento.
2) Ao enviar cepas bacterianas para identificao, o laboratrio local dever especificar qual a amostra
biolgica de origem (sangue ou lquor).

g) Conservao das amostras at o envio


incubar os 02 frascos (agar chocolate e frasco da hemocultura) em estufa bacteriolgica
a 34C - 36 C por 18-24 horas, aps esse perodo, enviar imediatamente ao Lacen, em
temperatura ambiente;
lquor in natura e soro devero ser mantidos no freezer ou congelador (temperatura em
torno de 20 C at a hora de serem enviados ao Lacen. O transporte dever ser feito
com gelo reciclvel;
cepas bacterianas: fechar o tubo/placa com fita crepe e manter a temperatura ambiente.

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Seo: 03

Requisito: 7.5

h) Forma de acondicionamento para transporte


amostra semeada em frasco de gar chocolate e frasco de hemocultura que j foram
incubadas por 24 horas: acondicionar os frascos na caixa de transporte de amostras,
em temperatura ambiente (informar esse dado na requisio encaminhada ao Lacen).
Tempo crtico para a chegada destas amostras no Lacen at 48 horas aps a coleta;
amostra semeada em frasco de gar chocolate e frasco de hemocultura que no foram
incubadas por 24 horas: o transporte destas amostras dever ser realizado
imediatamente aps a coleta ou no mximo at 2 horas aps a coleta, em temperatura
ambiente;
amostras de lquor in natura e soro devero ser encaminhadas em caixa trmica com
gelo reciclvel;
a lmina deve ser acondicionada em porta-lminas de plstico rgido para evitar quebra;
cepas bacterianas: fechar o tubo/placa com fita crepe.
Nota: Os frascos que contm as amostras devem ser colocados dentro de um recipiente de paredes rgidas,
a prova de vazamentos e inquebrvel contendo etiqueta com as caractersticas da amostra. Este recipiente
deve ser colocado dentro de outra embalagem, como a caixa de trmica para transporte de amostras, que
deve conter o rtulo de material infectante ou de risco biolgico.

Oftalmia gonoccica
a) Material utilizado na coleta:
swab de algodo alginatado;
meio de transporte Amies com carvo.
b) Orientaes para a coleta das amostras:
afastar a plpebra e limpar a secreo acumulada nos cantos do olho;
coletar material dentro da conjuntiva, com auxlio do swab;
inocular o material, imediatamente, em meio de transporte Amies com carvo;
encaminhar ao Lacen at 8 horas aps a coleta, em temperatura ambiente.
Pneumonia bacteriana
Amostra biolgica
sangue (preferencialmente)
escarro, lavado brnquico, lavado broncoalveolar

CPIA NO
CONTROLADA

Nota: o escarro no considerado ideal para avaliao microbiolgica do trato respiratrio por ser uma
mostra muito contaminada, portanto sangue, lavado brnquico ou lavado brocoalveolar pode fornecer
resultado mais confivel.

a) Sangue
ver procedimento em meningites bacterianas.
b) Escarro
colher, de preferncia, a primeira amostra da manh;
orientar o paciente para enxaguar previamente vrias vezes a boca com gua para
remover a flora bacteriana superficial dessa regio;
respirar fundo vrias vezes e tossir profundamente, recolher a amostra diretamente em
um frasco de boca larga (explicar ao paciente a diferena entre uma amostra obtida
aps tosse profunda e a saliva, a fim de se obter um material de melhor qualidade).

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Seo: 03

Requisito: 7.5

c) Lavado brnquico/ lavado broncoalveolar (LBA)


procedimento mdico.
Sfilis
a) Coleta para exame microscpico aps colorao de Fontana Tribondeau
limpar a rea em volta da leso com gaze estril embebida em soluo salina estril;
friccionar a borda da leso com uma lmina de bisturi suavemente at obter uma linfa;
colocar a linfa em 2 lminas previamente identificadas e confeccionar o esfregao.
Deixar secar a temperatura ambiente;
encaminhar ao setor de bacteriologia imediatamente ou at 2 horas aps a coleta.
b) Coleta para exame microscpico em campo escuro
limpar a rea em volta da leso com gaze estril embebida em soluo salina estril;
fricionar a borda da leso com uma lmina de bisturi suavemente at obter uma linfa;
colocar a linfa sobre uma lmina com uma gota de salina, colocar a lamnula;
encaminhar ao setor de bacteriologia imediatamente aps a coleta.
Nota: no usar medicamento tpico na leso nas 12 horas que antecedem ao exame.

Tracoma
* coleta somente em situaes de surto quando solicitado pela Vigilncia Epidemiolgica.
a) Orientaes para a coleta e transporta da amostra:
utilizar lmina prpria para imunofluorescncia direta (IFD): lmina com crculo central.
limpar a secreo externa do olho com gaze estril. Descer a plpebra inferior de
maneira a expor a conjuntiva. Com um swab umedecido, limpar a secreo acumulada
nos cantos do olho. Descartar este swab.
com outro swab estril, coletar a amostra girando o swab vrias vezes para obter
clulas epiteliais em quantidade suficiente para o diagnstico.
transferir a amostra coletada no swab para o crculo central da lmina para
imunofluorescncia, rolando firmemente o swab, tendo o cuidado para no ultrapassar o
crculo.
deixar a lmina secar a temperatura ambiente por 5 a 10 minutos. Embalar a lmina em
papel alumnio e acondicion-la em porta-lmina;
transportar em caixa trmica com gelo;
a lmina, com esfregao fixado, embalada em papel alumnio, pode ser conservada em
geladeira (53C) por at 72 horas antes do envio ao Lacen.
b) Quantidade de amostras a serem coletadas:
Surtos at 30 doentes = 05 amostras
Surtos acima de 30 doentes = 10% do total de doentes

CPIA NO
CONTROLADA

Notas:
1) A lmina deve estar devidamente identificada com as seguintes informaes: nome completo do paciente,
tipo de material coletado, data e hora da coleta.
2) A amostra deve vir acompanhada do formulrio de notificao de surto (SINAN/Net).

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Seo: 03

Requisito: 7.5

Uretrite e cervicite no gonoccica


Orientaes para a coleta (coleta realizada somente no Lacen).
Preparo do paciente do sexo feminino: a coleta da secreo feminina deve ser feita
aps 3 horas da ltima mico. A paciente deve estar em abstinncia sexual de 2 dias
pelo menos. No estar fazer uso de antisspticos locais ou cremes vaginais, antibiticos
ou quimioterpicos, no estar menstruada. No ter realizado exames ginecolgicos com
toque ou ultrasom transvaginal nas 48 horas que antecedem o exame.
Preparo do paciente do sexo masculino: estar h pelo menos 3 horas sem urinar.
Evitar relaes sexuais e medicamentos tpicos nas 24 horas que antecedem o exame.
Preferencialmente no usar antibitico nos 3 dias que antecedem o exame.
a) Pesquisa de Ureaplasma e Micoplasma genitais
Amostras biolgicas
paciente do sexo masculino: raspado uretral.
paciente do sexo feminino: raspado endocervical e uretral.
Swab
raspado uretral: algodo alginatado, rayon ou dracon, ultrafino estril.
raspado endocervical: algodo alginatado, rayon ou dracon estril.
Meio de transporte
caldo nutritivo (fornecido pelo Lacen).

CPIA NO
CONTROLADA

Procedimento para a coleta do raspado uretral masculino


solicitar ao paciente para retrair o prepcio;
limpar a secreo emergente com gaze estril;
introduzir o swab alginatado, de rayon ou dracon, cerca de 4 centmetros no canal
uretral;
girar o swab delicadamente de 8 a 10 vezes para obter o maior nmero de clulas
epiteliais possveis;
retirar o swab; lavar bem o swab no frasco com caldo nutritivo e comprimir contra a
parede do tubo;
desprezar o swab e encaminhar o frasco com caldo nutritivo imediatamente ao setor de
bacteriologia, em temperatura ambiente.
Procedimento para a coleta do raspado uretral feminino
fazer a expresso da secreo das glndulas parauretrais pressionando a parede
vaginal com o dedo mdio;
introduzir o swab alginatado, de dracon ou rayon cerca de 2 cm na uretra;
coletar a secreo girando delicadamente o swab de 8 a 10 vezes para obter o maior
nmero de clulas epiteliais possveis;
retirar o swab; lavar bem o swab no frasco com caldo nutritivo e comprimir contra a
parede do tubo;
desprezar o swab e encaminhar o frasco com caldo nutritivo imediatamente ao setor de
bacteriologia, em temperatura ambiente.

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Seo: 03

Requisito: 7.5

Procedimento para a coleta do raspado endocervical


introduzir o espculo;
limpar com gaze a secreo do fundo do saco vaginal e a que recobre o colo do tero;
introduzir o swab alginatado, de rayon ou dracon cerca de 1cm no canal endocervical,
girando-o delicadamente de 8 a 10 vezes, para obter o maior nmero de clulas
epiteliais possveis. Retirar o swab sem tocar as paredes vaginais;
inocular o swab imediatamente no frasco com caldo nutritivo e comprimir contra a
parede do tubo;
desprezar o swab e encaminhar o frasco com caldo nutritivo imediatamente ao setor de
bacteriologia, em temperatura ambiente.
CPIA NO

CONTROLADA
b) Pesquisa de Chlamydia trachomatis por IFD
Amostras biolgicas
paciente do sexo masculino: raspado uretral.
paciente do sexo feminino: raspado endocervical e/ou raspado uretral

Swab
swab de dracon ou rayon.

Procedimento para a coleta do raspado uretral masculino e feminino e raspado


endocervical
Ver procedimento de coleta para pesquisa de Ureaplasma e Micoplasma genitais.
Vaginite e vaginose bacteriana

Orientaes para a coleta (coleta realizada somente no Lacen).


a) Exame a fresco:
introduzir o espculo;
coletar a amostra do fundo do saco vaginal com auxlio de um swab de algodo haste
plstica (swab comum);
retirar o swab, introduzir em tubo com 1,0 mL de salina estril, previamente identificado.
b) Cultura:
a) introduzir o espculo;
b) coletar a amostra do fundo do saco vaginal com auxlio de um swab de algodo haste
plstica (swab comum);
c) retirar o swab e inocular a amostra imediatamente no meio de transporte Amies com
carvo, identificando o mesmo.

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Seo: 03

Requisito: 7.5

6.2.2 Setor de Biologia Molecular UO BIMOL


Deteco do vrus INFLUENZA A
(engloba tambm H1N1pandmico 2009)
A sensibilidade e especificidade do mtodo dependem da quantidade e qualidade de
material enviado para a anlise. Por isso, sua coleta e transporte so essenciais para o
diagnstico adequado.
Perodo ideal de coleta: at o 3 dia do incio dos sintomas e eventualmente at o 7 dia.
a) Swab combinado (nasofaringe e orofaringe):
Na tcnica de swab combinado de nasofaringe e orofaringe, deve ser utilizado
exclusivamente swab de rayon (fornecido no kit de coleta).
No deve ser utilizado swab de algodo, pois o mesmo interfere nas metodologias
moleculares utilizadas.
Proceder a coleta utilizando trs swab que sero inseridos um na orofaringe e os dois
outros, um em cada narina.
CPIA NO
CONTROLADA

Tcnica de coleta:
inserir 1 swab na poro superior da faringe (aps a vula) e realizar movimentos
circulares para obter clulas da mucosa, evitando tocar em qualquer parte da boca
(Fig 13).
proceder da mesma forma com os outros dois swab nasais que sero inseridos em
cada narina at atingir o fundo da coana nasal (Fig 12).
inserir os trs swab em um mesmo frasco contendo meio de transporte viral ou
soluo estril de PBS 7,2 suplementado.
quebrar ou cortar as hastes dos swab, fechar e identificar com nome completo do
paciente de forma legvel e com caneta resistente a gua.
manter refrigerado a 2 a 8C (no congelar) at o acondicionamento para transporte.

Figura 12: coleta de secreo de nasofaringe

Figura 13: coleta de secreo de orofaringe

b) Aspirado de Nasofaringe
utilizar a tcnica de aspirado de nasofaringe quando a unidade de sade dispuser de
frasco coletor de secreo, pois a amostra obtida por essa tcnica pode
concentrar maior nmero de clulas.
Nota: frasco coletor de plstico descartvel acoplado com sonda n 6 e com controle de vcuo (tipo
bronquinho).

A coleta de ANF um processo indolor podendo apenas provocar lacrimejamento reflexo.


Coletores de muco plsticos descartveis ou equipo de soro acoplado a uma sonda so

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Seo: 03

Requisito: 7.5

preferencialmente recomendados para a obteno do espcime. A sonda preconizada a


uretral n 6 com apenas um orifcio na ponta. O calibre da sonda varivel segundo o
fabricante, devendo ser dada preferncia de maior flexibilidade.
A aspirao pode ser realizada com bomba aspiradora porttil, ou vcuo de parede do
hospital; no utilizar uma presso de vcuo muito forte.
Tcnica de coleta:
inserir atravs da narina at atingir a regio da nasofaringe quando ento o vcuo
aplicado aspirando secreo para o interior do frasco coletor ou equipo. O vcuo
deve ser colocado aps a sonda localizar-se na nasofaringe, uma vez que se no
momento da introduo da sonda houver o vcuo, poder ocorrer leso da mucosa.
Este procedimento deve ser realizado em ambas as narinas, mantendo
movimentao da sonda para evitar que haja presso diretamente sobre a mucosa
provocando sangramento (Fig 14).
alternar a coleta nas duas fossas nasais at obter um volume suficiente,
aproximadamente 1 mL, de ANF.
aps nebulizao com soro fisiolgico a secreo mais fluida e abundante,
facilitando a obteno. No insistir se a coleta no alcanar o volume desejado (mais
ou menos 1 mL), pois poder ocasionar leso de mucosa.
aps aspirar a secreo nasofarngea com o coletor prprio, inserir a sonda de
aspirao no frasco contendo 3 mL de meio de transporte viral ou em PBS pH 7,2
(fornecido pelo Lacen) e aspirar todo o meio para dentro do frasco coletor.
manter refrigerado entre 2 a 8C (no congelar) at o acondicionamento para o
transporte.

CPIA NO
CONTROLADA

Figura 14: coleta de aspirado de nasofaringe

VIROSES RESPIRATRIAS
Programa sentinela de Influenza
As orientaes das tcnicas de coleta devem seguir as mesmas orientaes descritas
acima para deteco do vrus Influenza A.

a coleta deve ser realizada na fase aguda, at cinco dias do incio dos sintomas clnicos.
Quanto mais cedo, maior a chance de detectar o vrus;
o material coletado tem que ser processado at 24 horas aps a coleta por isso deve-se
enviar a amostra para o Lacen logo aps a coleta, manter e transportar em temperatura
de 2 a 8 C (refrigerao);
atualmente esta coleta realizada somente nas Unidades Sentinelas:
Em Florianpolis: UPA Sul, UPA Norte;
Em So Jos: Unidade Sanitria Forquilhinhas

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Seo: 03

Requisito: 7.5

Teste de Quantificao de Carga Viral do HIV


a) Coleta da amostra
no necessrio jejum ou qualquer preparo especial do paciente. Entretanto, deve-se
evitar a coleta aps ingesto de alimentos gordurosos nas ltimas 3 horas;
coletar 2 tubos de 5 mL contendo EDTA (K2 ou K3 tampa lils);
em recm-nascidos, caso haja necessidade, dever ser utilizado tubos peditricos;
Identificar os tubos com nome, data e hora da coleta;
CPIA NO
no utilizar tubos de EDTA COM GEL SEPARADOR;
CONTROLADA
nunca utilizar tubos de coleta reciclados;
caso seja enviado sangue total, este deve ser conservado em seu tubo original e enviar:
b) Preparo da amostra (plasma), conservao e transporte
adotar precaues para evitar respingos nas luvas, bancadas ou qualquer outro material
utilizado, evitando assim a contaminao pessoal e da amostra;
todo material utilizado deve ser novo e estril (livre de RNAse ou DNAse) , uma vez que
a menor contaminao por outra amostra pode ser amplificada e gerar falso resultado;
para a obteno do plasma, centrifugar o sangue total a 2500 rpm durante 15 minutos.
O plasma no pode ser separado aps repouso espontneo, obrigatria a
centrifugao;
o plasma no pode estar hemolisado e no pode haver vestgios de hemcias;
no submeter o plasma a processos de filtrao ou centrifugao adicionais com o
intuito de diminuir a turbidez;
em seguida a centrifugao, transfira o plasma para tubos estreis (tampas rosqueveis
ou em microtubo de polipropileno tipo eppendorf livres de enzimas (RNAse ou DNAse)
em alquotas de no mnimo 1100 a 1200 ul com auxlio de ponteiras com barreiras e
livre de enzimas, sem ressuspender as clulas;
evitar mltiplos congelamentos-descongelamentos;
para envio tem que ser observado o tempo de coleta de cada amostra. Portanto,
quando houver vrias coletas, o tempo para o transporte deve ser calculado a partir da
primeira amostra coletada;
Nota: Recomendamos nunca enviar amostras s sextas-feiras, sbados e domingos ou vsperas de feriado
sem autorizao do Lacen.

Genotipagem do HIV
o manuseio correto das amostras imprescindvel para proteger o RNA viral do HIV-1
de degradao;
seguir as mesmas orientaes de coleta, preparao de amostra (plasma) da Carga
Viral do HIV. Porm deve ser observado:
Sempre transportar o plasma em gelo seco.
Nota: Recomendamos nunca enviar amostras s sextas-feiras, sbados e domingos ou vsperas de feriado
sem autorizao do LACEN.

As amostras devem estar acompanhadas dos Formulrios A e B (disponveis no site


www.aids.gov.br) devidamente preenchidos pelo mdico solicitante (formulrio A) e mdico
de referncia em genotipagem (formulrio B).

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Seo: 03

Requisito: 7.5

6.2.3 Setor de Doenas Tropicais UO DTROP


Doena de Chagas Aguda (DCA)
Exame microscpico (hemoparasitolgico) para pesquisa de Trypanosoma cruzi. (Ver
Anexo A - DOC MCT 01 - 01).
Este exame dever ser solicitado somente para suspeita de Doena de Chagas em casos
agudos. Devido o Trypanosoma cruzi estar presente no sangue somente nos primeiros 30
dias do incio dos sintomas, necessita-se que aps este perodo sejam solicitados exames
sorolgicos.
Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA)
Todas as coletas devero ser realizadas em ambulatrio mdico referenciado pela Diretoria
de Vigilncia Epidemiolgica.
necessria a realizao do Teste de Montenegro como forma de Triagem.
Leishmaniose Visceral Humana
Para realizao da sorologia dever ser encaminhado o nmero de notificao do SINAN.
Leishmaniose Visceral Canina
Este tipo de exame realizado em ces de circulao em reas endmicas ou para fins
epidemiolgicos. Em reas no endmicas necessrio consultar o Servio de Vigilncia
Epidemiolgica.
Leptospirose
Os exames de microaglutinao somente sero realizados em pacientes com ELISA IgM
leptospirose reagente ou inconclusivos.
Os exames de PCR somente sero realizados em pacientes com suspeita de leptospirose
que foram a bito at o 6 dia de incio dos sintomas.
Malria
Controle de Qualidade das lminas para pesquisa de Plasmodium sp:
Transporte de lminas para Superviso Indireta:

CPIA NO
CONTROLADA

todas as lminas positivas e todas as negativas devem ser encaminhadas ao Setor de


Doenas Tropicais do Lacen para superviso indireta;
devem ser transportadas em porta-lminas;
os formulrios que acompanham as lminas para a superviso indireta no devem ser
colocados junto com as lminas para evitar possveis contaminaes;
importante colocar no formulrio o nome do laboratrio e o municpio de
procedncia;
colocar o formulrio de superviso junto ao porta-lmina, embrulhar e enviar ao Lacen,
devidamente identificado com o endereo do remetente e destinatrio.

Nota: Os formulrios de superviso esto disponveis na home page do Lacen/SC no endereo eletrnico:
http://lacen.saude.sc.gov.br.

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Seo: 03

Requisito: 7.5

6.2.4 Setor de Imunologia UO IMUNO


No necessrio jejum prolongado para os exames imunolgicos, porm recomendamos
jejum de 3 a 4 horas para evitar lipemia. Amostras intensamente hemolisadas no sero
aceitas.
Para a realizao dos exames de sorologia que utilizam o mesmo material biolgico (soro)
pode ser enviado somente 1 ( um) tubo com no mnimo 2 mL de soro;
Brucelose

CPIA NO
CONTROLADA

Sorologia
Teste de aglutinao bacteriana para a deteco qualitativa e semi-quantitativa de
anticorpos do anti-Brucella no soro humano corado pelo Rosa Bengala.
Este exame detecta a presena de anticorpos anti-brucella no soro de indivduos que
apresentam sintomatologia atual ou pregressa.
Seguir orientaes do Protocolo Estadual de Vigilncia e Manejo Clnico de Brucelose
Humana, material elaborado pelo Grupo Tcnico da Diretoria de Vigilncia Epidemiolgica
de Santa Catarina (DIVE) e Lacen, disponveis nas home page do Lacen e DIVE.
Amostra: Soro lmpido, sem hemlise e/ou lipemia, sob refrigerao seguindo orientaes
de armazenamento e transporte deste manual, acompanhada da requisio prpria com
informao de diagnstico ou seguimento sorolgico.
Citomegalovirus, Infeco pelo
Sorologia
Deteco de anticorpos IgM e IgG na infeco pelo citomegalvrus.
destinado ao diagnstico de casos suspeitos, em doadores de rgos, receptores de
transplantes, pacientes imunocomprometidos e no acompanhamento pr-natal.
Informar esses dados na requisio.
Amostra: Soro lmpido, sem hemlise e/ou lipemia, sob refrigerao seguindo orientaes
de armazenamento e transporte deste manual e acompanhada da requisio especfica.
Contagem de linfcitos T CD4+/CD8+/CD45+
No necessrio jejum do paciente, porm sugerimos que seja orientado ao paciente no
ingerir alimentos gordurosos antes da coleta, para evitar lipemia da amostra.
Coleta de sangue em tubo com anticoagulante EDTA K2 ou K3. Homogeneizar
suavemente para evitar hemlise.
Manter e transportar a temperatura ambiente (20 a 25C). NO
REFRIGERAR.
O exame deve ser realizado no prazo mximo de 48 horas aps a coleta, portanto a
amostra deve chegar ao Lacen dentro do prazo vivel para processamento. Portanto, as
amostras devero chegar ao Lacen em no mximo 40 horas aps a coleta. Caso cheguem

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Manual de orientao para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas

Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

aps este prazo, sero descartadas.


Cada amostra deve estar acompanhada do Laudo Mdico para emisso de BPA-I com
todas as informaes requeridas de forma legvel. O mdico solicitante deve ser cadastrado
no Sistema de Controle de Exames Laboratoriais SISCEL - do Ministrio da Sade. Para
isto, necessrio nmero de CRM e CPF.
Dengue
Sorologia
Deteco do Antgeno NS1 dengue
Deteco do anticorpo IgM - dengue
Para as amostras de sangue (soro) coletadas com menos de cinco dias de incio de
sintomas sero realizadas a deteco do antgeno NS1 (detectvel at o 9 dia de incio
dos sintomas). As mesmas sero tambm armazenadas a 80C para realizao do
isolamento viral em Laboratrio de Referncia Nacional, caso seja necessrio.
Para deteco de anticorpos IgM, a coleta de sangue deve ser realizada a partir do 6 dia
do incio dos sintomas (febre).
Amostra: Soro lmpido, sem hemlise e/ ou lipemia, sob refrigerao seguindo orientaes
de armazenamento e transporte deste manual, acompanhada da requisio especfica.
Em caso de bito:
No mximo 12 horas aps o bito, coletar sangue por puno intracardaca e
amostras de fgado, rim, bao e linfonodo por necropsia. Acondicionar este
material isoladamente em frascos estreis, devidamente identificados.
Manter e transportar - 70 C.
Para exame histopatolgico e imunohistoqumica, podem-se coletar fragmentos de tecidos
e acondicion-los isoladamente em frascos com formalina ou em blocos de parafina.
Estes materiais devem permanecer em temperatura ambiente.
Doena de Chagas

CPIA NO
CONTROLADA

Exame complementar para diagnstico da Doena de Chagas ou acompanhamento de


infeco pregressa.
Sorologia
ELISA detecta anticorpos totais (IgM e IgG) anti- Tripanossoma cruzi e
Imunofluorescncia Indireta - Deteco de anticorpos IgG anti- Tripanossoma cruzi
Amostra: Soro lmpido, sem hemlise e/ou lipemia, sob refrigerao seguindo as
orientaes de armazenamento e transporte deste manual, acompanhada da requisio
especfica.
Doena Diarrica - Rotavrus
Deteco do antgeno de rotavrus em fezes lquidas in natura coletadas do 1 at o 4 dia
aps incio dos sintomas.
Amostras coletadas com 6 dias ou mais no contm quantidades de antgeno suficiente
para a realizao de um exame correto, podendo ocorrer exames falso-negativos.

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Manual de orientao para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas

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Seo: 03

Requisito: 7.5

No coletar amostras em meios que contenham conservantes ou swab retal.


Aps realizada a deteco de rotavrus no Lacen, as amostras so encaminhadas para
Laboratrio de Referncia para pesquisa de Norovrus e Astrovrus.
As amostras devem ser mantidas sob refrigerao e encaminhadas ao LACEN em at 48
horas aps a coleta.
Em caso de surtos, coletar trs amostras de cada local (creche, escola ou local trabalho).
Doenas Exantemticas Sarampo / Rubola / Sndrome da Rubola Congnita e
Eritema Infeccioso (Parvovrus B19)
Sorologia
Deteco de anticorpos IgM/IgG
As amostras de sangue de caso suspeito, contato com caso suspeito, gestante sintomtica,
gestante assintomtica (contato com caso suspeito), gestante vacinada inadvertidamente e
recm-nascido com suspeita de sndrome da rubola congnita devem ser coletadas
sempre que possvel no primeiro atendimento do paciente. Informar esta condio
epidemiolgica na requisio.
Em pacientes sintomticos, so consideradas amostras oportunas aquelas coletadas entre
o 1 ao 28 dia do aparecimento do exantema. Amostras coletadas aps este perodo so
consideradas tardias. Mesmo assim devem ser enviadas ao laboratrio.
A coleta de segunda amostra ser solicitada pelo LACEN ou DIVE. Esta dever ser
coletada entre duas a 3 semanas aps a primeira ( nas amostras oportunas).
Enviar requisio prpria do laboratrio, sempre informando a data de incio do exantema,
dados vacinais recentes e histrico de viagem.
CPIA NO
CONTROLADA

Amostra:
Soro lmpido, sem hemlise intensa e/ou lipemia, sob refrigerao, seguindo as
orientaes de armazenamento e transporte deste manual.
Isolamento viral (enviada ao Laboratrio de Referncia Nacional)
Amostras de urina, sangue total e secreo de nasofaringe devem ser coletadas at
o 5 dia a partir do aparecimento do exantema;
Urina Coletar aps higiene ntima, 15 a 10 mL de urina (de preferncia a 1
urina da manh), desprezando o 1 jato. Coletar o jato mdio em frasco estril
e enviar em at 24 a 48 horas sob refrigerao;
Sangue Total coletar 4 a 10 mL de sangue em tubo com anticoagulante. Enviar a
amostra sob refrigerao em at 24 horas;
Secreo de nasofaringe coletar 3 swabs: 2 swabs de secreo com clulas da
parede posterior nasal das duas narinas e 1 swab de orofaringe. Os 3 swabs sero
colocados em meio de transporte viral fornecido pelo LACEN/SC. Enviar em at 24
horas aps a coleta, mantendo sob refrigerao.
Nota: Devem ser priorizadas as seguintes situaes:

Casos importados, ocorrncia de surtos, casos com IgM reagente ou indeterminado.

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Manual de orientao para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas

Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

Sfilis
Triagem com teste no treponmico: VDRL ou RPR realizado para o ambulatrio do
Hospital Nereu Ramos de Florianpolis em atendimento ao protocolo para acidentes com
material biolgico/violncia sexual.
Testes Confirmatrios repetio do teste no treponmico e realizao da etapa II e
III (testes treponmicos) de acordo com Portaria MS/ n 3.242, de 30 de dezembro de
2011, que dispe sobre o Fluxograma Laboratorial da Sfilis.
Amostra: Soro lmpido, sem hemlise e/ou lipemia, sob refrigerao, seguindo as
orientaes de armazenamento e transporte deste manual, acompanhada da requisio
especfica.
Toxoplasmose
Sorologia
Deteco de anticorpos IgM/IgG
Teste de Avidez dos anticorpos da classe IgG

CPIA NO
CONTROLADA

Coleta de sangue (soro) para deteco de anticorpos IgM e IgG recomendada em 8 a 10


dias aps incio dos sintomas. Em alguns casos, ttulos altos de IgM podem permanecer
por meses ou anos.
Alm da sorologia pelo mtodo ELISA/ELFA, o Lacen realiza o Teste de Avidez os
anticorpos da classe IgG para elucidao destes casos.
O teste de Avidez de anticorpos da classe IgG um procedimento laboratorial que permite
estimar o perodo aproximado em que ocorreu a infeco toxoplsmica.
Em gestantes, a avaliao deve levar em conta o tempo gestacional e deve-se
correlacionar com os valores obtidos para anticorpos anti-toxoplasma IgM ou IgG em
amostras pareadas. O seguimento sorolgico ficar a critrio clnico.
Amostra: Soro lmpido, sem hemlise e/ou lipemia, sob refrigerao, seguindo as
orientaes de armazenamento e transporte deste manual, acompanhada da requisio
especfica.
6.2.5 Setor de Micologia UO MICOL
Em Micologia, fica difcil separar as orientaes de coleta por etiologia, uma vez que
normalmente, para uma nica suspeita clnica solicitado anlises de diferentes amostras
biolgicas. Por isso, optou-se por separar apenas por Micoses superficiais e Micoses
Sistmicas, no sentido de orientar o tcnico quanto procedncia da amostra.
Micoses Superficiais
a) Pele
descontaminar a pele com lcool etlico 70% e esperar total evaporao, antes da
coleta;
as amostras de leses de pele como escamas, crostas ou cascas devem ser

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Seo: 03

Requisito: 7.5

colhidas em placa, preferencialmente com uma lmina de bisturi descartvel ou com


a borda da lmina de vidro de microscopia, muito limpa;
deve-se colher, raspando em vrios pontos da leso, procurando as bordas das
leses mais recentes;
nos casos em que no h escamas aparentes, procura-se raspar bem o local e
retirar o material que for possvel;
a amostra biolgica coletada deve ser acondicionada em placas de Petri estreis
(Figura 15) ou em pedao de papel escuro esterilizado.
CPIA NO
CONTROLADA

Figura 15 Coleta de amostra para exame micolgico

b) Couro Cabeludo
descontaminar o local da leso com lcool etlico 70% e esperar total evaporao,
antes da coleta;
a amostra de leses no couro cabeludo deve ser obtida atravs da raspagem do
local;
a amostra deve conter tocos de cabelo, o contedo dos folculos tapados e as
escamas de pele;
os cabelos da rea tambm podem ser puxados com pina (os cabelos infectados
so facilmente removveis);
a amostra biolgica coletada deve ser acondicionada em placas de Petri estreis
(Figura 15) ou em pedao de papel escuro esterilizado.
c) Cabelos e Plos
descontaminar a pele ou o couro cabeludo com lcool 70% e esperar total
evaporao, antes da coleta;
se a leso for ao longo do cabelo ou plo, como ndulos, por exemplo, esses devem
ser cortados com tesoura;
a amostra biolgica coletada deve ser acondicionada em placas de Petri estreis
(Figura 15) ou em pedao de papel escuro esterilizado.
d) Unha
os fragmentos de unhas alteradas podem ser colhidos, raspando-os com o bisturi ou
com o auxlio de uma tesoura limpa;
material que se deposita embaixo da unha pode ser retirado cuidadosamente com o
bisturi, com um palito (tipo de manicure), previamente esterilizado ou outro objeto
pontiagudo estril;
em casos de paronquia (leses na regio da cutcula), colhem-se as escamas e, se
possvel, o pus, com um swab em salina estril;

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Seo: 03

Requisito: 7.5

se a leso uma mancha esbranquiada em baixo da unha, raspar por cima da


unha com o bisturi at chegar na parte com a leso; desprezar este material e raspar
todo o contedo da mancha;
a amostra biolgica coletada deve ser acondicionada em placas de Petri estreis
(Figura 15) ou em pedao de papel escuro esterilizado.
Nota: quando o material da leso seco, reduz a contaminao bacteriana e as amostras descritas acima
podem ser estocadas, em placas de petri estreis ou em saquinhos plsticos, por meses, sem perder a
viabilidade do fungo dermatfito.

e) Mucosa oral e orofaringe


para as infeces de boca, o raspado com lmina de bisturi ou esptula, nas partes
afetadas (reas com eritema e/ou placas brancas), melhor do que o swab, se o
material for processado imediatamente;
para o material de leso de mucosa jugal, papilas linguais ou regio tonsilar,
mergulhar o swab estril umedecido em salina estril e enviar o tubo ao laboratrio.
f) Leso de nariz e seios paranasais
CPIA NO
CONTROLADA
as leses podem ser raspadas e colocadas em recipiente estril;
material necrtico e tecidos so obtidos por bipsia;
para as secrees, utilizar swab umedecido em salina estril, fazendo rotao no
local.
g) Ouvido
as infeces fngicas de ouvido so geralmente secas, exceto quanto associadas a
infeces bacterianas;
a raspagem do material sempre melhor para o diagnstico laboratorial, embora o
swab em salina estril tambm possa ser usado.
h) Pus e material de abscesso
se houver escamas ou crostas na parte superficial da leso, estas podem ser
raspadas e colocadas em placas de Petri ou frascos estreis;
aspirado do pus e/ou biopsia so mais apropriados para o exame;
o pus coletado assepticamente de abscessos no drenados com uma agulha
estril em seringa. Aps a coleta, retirar a agulha com uma pina e passar o material
para um frasco estril;
nas leses ulceradas, caso o material tenha que ser colhido com swab (o que no
recomendado), o local deve ser limpo com gaze embebida em salina estril para
eliminar os exsudatos superficiais que so altamente contaminados com bactrias
para ento inserir o swab at a parte mais profunda da leso, evitando encosta-lo na
periferia e na pele adjacente;
se algum gro for visvel no pus, este deve ser includo na amostra.
i) Olho
deve ser solicitado meio de cultura ao laboratrio e o material retirado das reas de
ulceraes e supuraes, coletado pelo oftalmologista deve ser inoculado
imediatamente no meio de cultura;
lgrima e fludos podem ser coletados com pipeta plstica estril (pipeta Pasteur
descartvel Figura 16). O swab no adequado para este tipo de material.

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Seo: 03

Requisito: 7.5

CPIA NO
CONTROLADA

Figura 16: Modelos de pipeta Pasteur plstica

j) Secreo Vaginal
com auxlio de espculo, coletar o material da leso ou do fundo do saco vaginal
com swab estril;
enviar o swab umedecido em salina estril ao Lacen.
Notas:
1) para todas as coletas descritas acima, colher todo o material disponvel na leso. Quanto mais material
mais viabilidade na visualizao e no crescimento em cultura.
2) todas as vezes que a coleta for com swab, este deve ser umedecido em salina ou gua estril antes da
coleta. Aps a coleta, deve permanecer em um frasco estril com salina suficiente para mant-lo mido at
o procedimento do exame.

Micoses Sistmicas
a) Escarro
preferencialmente deve ser colhido por broncoscopia: lavado ou aspirado brnquico;
quando no for possvel, o escarro deve ser colhido da mesma maneira como
colhido para o exame de tuberculose, no esquecendo da higiene da boca antes da
coleta, para diminuir a contaminao pelos saprfitas da cavidade bucal e da faringe.
Nota: o exame de escarro, (direto e cultura), nem sempre satisfatrio e confivel, por ser uma amostra
muito contaminada. Quando houver a possibilidade do exame sorolgico, deve-se optar pelo ltimo.

b) Aspirado traqueal e secreo obtida por broncoscopia


procedimento realizado por mdico treinado. O material colhido colocado em
recipiente estril.
c) Aspirado gstrico
obtido atravs de sonda nasogstrica pela manh, em jejum;
aspirar cerca de 5 a 10 mL de suco gstrico.
d) Fluidos
pleural, abdominal e sinovial: aspirados ou drenados, so coletados assepticamente
em frasco estril contendo heparina estril 1:1000;
a quantidade de heparina usada varia de acordo com o volume da amostra
(aproximadamente 1 mL por 10 mL de fludo);
em casos de lquido abdominal de pacientes de dilise peritoneal, colher sem
heparina ou em frasco de hemocultura;
e) Urina
A amostra biolgica mais apropriada para o diagnstico de micose do trato urinrio obtida
por sondagem ou citoscopia. Quando no for possvel, e para evitar contaminao com
microrganismos presentes nas reas vizinhas, proceder da seguinte maneira:

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Seo: 03

Requisito: 7.5

realizar limpeza prvia da regio perineal com gua e sabo;


desprezar o primeiro jato de urina da manh e colher 3 a 5 mL de urina em frasco
estril.
f) Fezes
fazer lavagem prvia da regio anal com gua e sabo;
coletar pores de fezes em recipiente estril com tampa de rosca ou
swab anal umedecido em salina estril e transportado tambm em salina suficiente
para manter o material mido.
CPIA NO
CONTROLADA

g) Lquor (LCR Lquido Cfalorraquidiano)


procedimento mdico;
para exame direto, cultura e prova do ltex so necessrios de 2 a 3mL de lquor.
Nota: no recomendvel que a mesma amostra seja utilizada para os exames bacteriolgicos, micolgicos
ou de tuberculose porque pode haver contaminao. O ideal uma alquota da amostra para cada setor.

h) Sangue (Hemocultura)
Tcnica de coleta:
lavar as mos com gua e sabo, enxaguar bem, enxugar com papel toalha e calar
as luvas;
fazer a anti-sepsia rigorosa do local da puno, deixar agir por 1 minuto. Evitar tocar
no local da puno;
coletar assepticamente no mnimo 5mL de sangue de adulto e 1mL de criana,
cuidar para que no haja bolhas de ar na seringa. Coletar um volume de sangue
correspondente a aproximadamente 5-10% do volume do meio de cultura;
no trocar de agulha antes de injetar o sangue no frasco.
Volume de sangue para cada amostra
recomendado no mnimo duas amostras de cada paciente, sendo uma do brao
direito e outra do esquerdo, ou a critrio mdico.
deve ser respeitada a quantidade de sangue de 1:10 em relao ao meio de cultura,
isto : 5 mL de sangue para 45 mL de meio de TSB -Trypticase Soy Broth e 1 mL de
sangue para 9 mL de TSB (frasco peditrico).
Inoculao
romper o lacre central dos frascos e fazer a desinfeco na tampa de borracha dos
frascos de meio com TSB (frasco de hemocultura) com lcool etlico 70%;
inocular o sangue direto da seringa de coleta no frasco de hemocultura. Misturar
bem (sem agitar) para evitar coagulao.
i) Aspirado de Medula ssea
procedimento mdico;
aspirado de medula ssea coletado assepticamente em frasco estril contendo
heparina estril 1:1000 (0,5 mL de heparina diluda 1:1000);
aceita-se com restrio quando coletado em frasco para hemocultura.
j) Tecido obtido por bipsia, necropsia e peas operatrias
colher assepticamente, utilizando instrumentos estreis;
colocar em recipiente estril com salina;

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Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

no colocar nenhum lquido fixador (por exemplo, formalina);


encaminhar ao Lacen em temperatura ambiente.

k) Sorologias
para as sorologias, as amostras de sangue so coletadas em tubo seco, 5 a 10 mL
so suficientes;
o soro deve ser separado, congelado e encaminhado sob refrigerao.
Nota: para todos os exames de micologia, necessrio constar na requisio a suspeita clnica para que o
laboratrio possa fazer uso dos meios e condies de cultivos mais adequados.

6.2.6 Setor de Tuberculose UO TUBER


Escarro espontneo
a) Orientao
lavar a boca / bochechos;
a coleta deve ser realizada em local arejado, ar livre;
abrir o pote;
forar a tosse: inspirar profundamente;
prender a respirao, escarrar no pote.

CPIA NO
CONTROLADA

b) Comentrios
a 1 amostra coletada na Unidade de Sade no momento da consulta;
a 2 amostra coletada na manh seguinte ao despertar;
coletar em 2 dias consecutivos;
conservar em refrigerao (2a 8C);
transportar ao laboratrio ao abrigo da luz solar.
Escarro induzido
a) Orientao
a sala equipada deve ser equipada com cuidados de biossegurana para evitar
contaminao do ambiente;
acompanhamento de tcnico treinado;
no dia anterior deve-se ingerir muito lquido;
a nebulizao deve ser feita com soluo salina hipertnica a 3%, durante 5 a 20
minutos;
seguir as mesmas instrues do escarro espontneo.
b) Comentrios
indicado quando o paciente tem pouca secreo ou no consegue expelir;
a nebulizao fluidifica a secreo do pulmo e provoca irritao que leva tosse e
expulso do escarro;
amostra menos viscosa e semelhante saliva;
escrever no pote escarro induzido.

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Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

Lavado brnquico, escovado brnquico, lavado bronco-alveolar (LBA), aspirado


transtraqueal
a) Orientao
sob orientao mdica;
uso de broncofibroscpio;
uso de substncia anestsica letal para micobactria;
a sala de coleta deve ter condies de biossegurana para evitar contaminao do
ambiente.
b) Comentrios
CPIA NO
procedimento invasivo;
CONTROLADA
processar imediatamente;
esterilizar o broncofibroscpio;
evitar a contaminao com o trato respiratrio superior;
a coleta da secreo aps o uso do aparelho pode ser recolhida at 2 dias depois.
Fragmentos de tecidos pulmonares
a) Orientao
sob orientao mdica;
usar soluo fisiolgica ou gua destilada;
no usar formol.
b) Comentrios
processar imediatamente;
evitar o ressecamento.
Lavado gstrico
a) Orientao
jejum de 8 a 10 horas;
a coleta deve ser feita logo ao acordar, antes de levantar;
em crianas, a coleta deve ser feita antes de ver a me para evitar deglutio pelo
estmulo visual;
deve ser realizada com sonda nasogstrica fina introduzida pela boca ou nariz;
injetar 10 a 15 mL de soluo fisiolgica;
aps 30 minutos, fazer lavagem gstrica.
b) Comentrios
requer hospitalizao;
crianas: 40% de positividade com evidncia da doena ao RX;
neutralizar o suco gstrico com carbonato de sdio 1mg/1mL de lavado gstrico;
a coleta deve ser feita em 2 dias consecutivos.
Urina
a) Orientao
a coleta deve ser feita aps higiene com gua e sabo neutro;
volume urinrio: toda urina da 1 mico da manh;
aps a coleta, levar imediatamente ao laboratrio.

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b) Comentrios
material rico em microbiota associada;
no aceitar pool de amostras colhidas em 24 horas;
no aceitar volumes inferiores a 40 mL;
coletar de 3 a 6 amostras em dias consecutivos.

Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

CPIA NO
CONTROLADA

Lquido cefalorraquidiano (LCR)

Procedimento mdico (coleta em hospitais).


Lquido pleural, Lquido sinovial, Lquido peritoneal

Procedimento mdico (coletado em hospitais ou clnicas especializadas)


Fragmentos cutneos, sseos e de rgos

Procedimento mdico
Sangue e aspirado de medula

Procedimento mdico
Pus e secrees

a) Orientao
de cavidade fechada: por puno;
de cavidade aberta: com swab;
de preferncia aspirar ou passar o swab na parte mais profunda da leso.
Envio de culturas do Mycobacterium tuberculosis para o LACEN
a) os tubos com a cultura do M. tuberculosis devem ser com tampa de rosca, a prova de
vazamento;
b) para o transporte, este tubo deve ser envolvido com papel absorvente, em quantidade
suficiente para absorver o material e proteg-lo em caso de acidente;
c) o tubo embalado deve ser colocado dentro de um recipiente de paredes rgidas,
inquebrvel a prova de vazamentos, contendo etiqueta com as caractersticas da amostra;
d) este recipiente deve ser colocado dentro de outra embalagem - como caixa de trmica
para transporte de amostras, que deve conter o rtulo de material infectante ou de risco
biolgico juntamente com o nome, telefone e endereo da pessoa que deve ser avisada em
caso de acidente com a(s) cultura(s);
e) completar o espao da caixa com papel amassado ou polibolha, para evitar o movimento
do recipiente contendo a cultura;
f) fechar e vedar bem a caixa;
g) colocar as requisies correspondentes, devidamente preenchidas, dentro de um saco
plstico;
h) vedar bem o saco e fix-lo na FACE EXTERNA da tampa ou na lateral da caixa
trmica. Nunca coloc-los dentro da caixa.
i) identificar com destinatrio e remetente;
j) enviar ao laboratrio.

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Seo: 03

Requisito: 7.5

6.2.7 Setor de Virologia UO VIROL


Exames realizados no setor:

CPIA NO
CONTROLADA

HBsAg
HBeAg
Anti-HBs
Anti-HBc Total
Anti-HBc IgM
Anti-HBe
Anti-HAV IgG
Anti-HAV IgM
Anti HCV

HBV DNA Quantitativo

HCV RNA Quantitativo


Genotipagem do HCV

Anti-HIV

Imunoblot rpido para o


HIV-1/2

Western blot para o HIV-1

Anti-HBs,
Anti-HBc IgM
HBeAg
HBsAg
Anti-HBe,
Anti HBc Total
Anti HAV total
Anti-HAV IgM
Anti-HCV

Marcadores para diagnstico sorolgico das


Hepatite A, B e C

Teste Molecular para indicao e monitoramento do


tratamento da Hepatite B
Testes moleculares para indicao e monitoramento do
tratamento da Hepatite C
Marcador para o diagnstico sorolgico da infeco pelo
HIV
Teste confirmatrio da Infeco pelo HIV-1/2
Teste confirmatrio da Infeco pelo HIV-1

HEPATITES VIRAIS SOROLOGIA

As seguintes situaes clnicas e epidemiolgicas devem ser consideradas para a


realizao do diagnstico sorolgico das hepatites virais:
Aminotransferases (transaminases) alteradas;
Ictercia aguda e colria;
Exposio percutnea ou de mucosa com sangue e/ou secrees de pessoas
portadoras ou com suspeita de infeco pelo HBV ou HCV;
Contato sexual ou domiciliar com indivduo sabidamente HBsAg reagente;
Contato sexual com indivduo sabidamente HCV reagente;
Contato com indivduo Anti-HAV IgM reagente;
Doadores de sangue e/ou rgos, usurio de hemodilise e ambulatrios de DST.

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Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

Para a realizao do diagnstico sorolgico das hepatites virais so necessrios:


a) Preenchimento da requisio de exame para Hepatites Virais ver tem 5.1 deste
manual.

Assinalar a condio epidemiolgica e/ou clnica do paciente;


Cada condio epidemiolgica ou clnica est relacionada com um perfil de
marcadores sorolgicos. Por isto, de extrema importncia assinalar apenas uma
condio - clnica ou epidemiolgica - para que no haja equvoco na avaliao das
fichas e cadastro dos marcadores que sero realizados pelo laboratrio.
Identificar o profissional solicitante (assinatura e carimbo).

Nota: As requisies incompletas ou com condies clnicas em desacordo com as preconizadas sero
devolvidas e o soro armazenado por 15 dias. Aps este perodo, sero desprezadas.

b) Coleta e preparo da amostra

necessrio jejum de 3 a 4 horas antes da coleta;


Aps a coleta, aguardar a retrao do cogulo por 30 minutos com o tubo na
posio vertical e em temperatura ambiente (20 a 25C) e centrifugar as amostras a
3.000 rpm por 10 minutos;
Aps a centrifugao, observar se h hemlise e/ou lipemia.
CPIA NO
Amostras com hemlise e/ou lipemia sero descartadas;
CONTROLADA
As amostras no devero ser fracionadas;
c) Armazenamento e transporte da amostra

Armazenar em geladeira (2 a 8 C) por no mximo 5 dias, ou -20C por no


mximo 30 dias;
Transportar as amostras em isopor com gelo reciclvel (gelox) juntamente com
requisio do exame devidamente preenchida. As amostras no devem ficar em
contato direto com o gelo para evitar hemlise.

d) Procedimentos laboratoriais para Hepatites Virais


CASO
Diagnstico
(Aminotransferases alteradas/ictercia/colria)

Monitoramento da Hepatite B aps 6 meses


Contato domiciliar e/ou sexual com portador de
hepatite B
Contato sexual com portador de hepatite C

MARCADORES
Anti HBc Total
HBsAg
Anti -HBc IgM,
Anti- HAV IgM
Anti -HCV (anexar BPA-I)
HBsAg
Anti - HBs
Anti Hbe
HBeAg
Anti- HBc Total
Obs.: Caso o Anti-HBc for reagente,
sero realizados outros marcadores.
Anti-HCV
(anexar BPA-I)

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Seo: 03

Requisito: 7.5

Anti- HBs
O teste para verificar eficcia da
vacina (Anti-HBs) no realizado,
Paciente Anti-Hbc Reagente
exceto nos casos de pacientes com
(Exame Realizado Em Banco De Sangue)
Anti-HBc reagente e Anti-HBs negativo
que necessitarem do exame para
verificar imunidade;
HBsAg
Recm nascido (RN) de me portadora de
Anti-HBs aos 9 meses e 15
hepatite B
meses de idade
Acidente percutneo/biossegurana/ hemodilise/
doador e receptor de rgos e sangue/ usurios
de drogas injetveis/ transfuso sangunea

Susceptibilidade hepatite A

Ambulatrio DST/AIDS/HIV

Diagnstico, indicao
tratamento do HCV

monitoramento

Anti-HBc Total
HBs Ag
Anti-HBs
Anti-HCV (anexar BPA-I)
Anti-HAV IgG
Os contatos de Hepatite A devem
seguir os mesmos procedimentos para
o diagnstico, pois no existe forma
crnica na infeco pelo vrus A.
Anti-HBc Total
HBsAg
Anti-HBs
Anti-HCV (anexar BPA-I)

do

Indicao e monitoramento do tratamento do


HBV

HCV RNA QUANTITATIVO


(ver testes moleculares)
Genotipagem do HCV
(ver testes moleculares)

HBV DNA QUANTITATIVO


(ver testes moleculares)

HEPATITES VIRAIS - TESTES MOLECULARES


HCV RNA quantitativo
HBV DNA quantitativo
Genotipagem do HCV

CPIA NO
CONTROLADA

1 - HCV RNA quantitativo


Para a realizao da carga viral do HCV necessrio:
a) preenchimento do Laudo Mdico para emisso do BPA-I - Quantificao de RNA do
vrus da Hepatite C:
Preencher com letra legvel todos os dados referentes instituio e paciente;
Assinalar o motivo pelo qual o exame est sendo solicitado;
Preencher o nmero da Notificao;
Identificar o mdico solicitante (assinatura e carimbo).

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Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

b) Coleta e preparo da amostra


necessrio jejum de 3 a 4 horas antes da coleta;
Coletar a amostra em tubo seco (sem anticoagulante) com gel separador e volume
de 5mL;
No usar HEPARINA como anticoagulante;
Aps a coleta, aguardar a retrao do cogulo por 30 minutos com o tubo na posio
vertical e em temperatura ambiente (20 a 25C) e centrifugar as amostras a 3.000
rpm por 10 minutos;
Aps a centrifugao observar se h hemlise e/ou lipemia. Amostras com hemlise
e/ou lipemia sero descartadas;
As amostras no devero ser aliquotadas;
CPIA NO
Nunca congelar as amostras;
CONTROLADA
Identificar o tubo com nome, exame, origem e data da coleta.
Nota: Para evitar contaminaes, nunca abrir o tubo de coleta.
c) Armazenamento e transporte da amostra
Aps a centrifugao, as amostras devem ser encaminhadas ao Lacen no prazo
mximo de 72 horas. Conserv-las entre 2 e 8 C at o envio ao laboratrio;
O transporte das amostras dever ser realizado em caixas trmicas com gelo
reciclvel entre 2 e 8C at as 5 feiras de cada semana.
d) Procedimentos (Etapas) Laboratoriais para o Diagnstico e Monitoramento do
Tratamento da Infeco pelo Vrus da Hepatite C (Portaria n. 221 de 13 de julho de
2011)
CASO
Diagnstico

Indicao De Tratamento
Monitorar Tratamento (12, 24, 48, 72 e 6
meses aps o tratamento)

CONDIES
Sorologia Anti-HCV Reagente
Preencher o laudo para emisso do BPA-I
Resultado de Carga Viral detectado (prtratamento)
Preencher o laudo para emisso do BPA-I
Anexar o resultado da Carga Viral anterior
Preencher o laudo para emisso do BPA-I

Transmisso Vertical

Preencher o laudo para emisso do BPA-I

Acidente Percutneo

A coleta dever ser realizada 12 dias aps


o acidente percutneo.
Preencher o laudo para emisso do BPA-I

2 - HBV DNA quantitativo

Para a realizao do HBV DNA Quantitativo necessrio:


a) preenchimento da Ficha de Quantificao de cido Nuclico Carga Viral de HBV:
Preencher com letra legvel todos os dados referentes instituio e paciente;
Assinalar o motivo pelo qual o exame est sendo solicitado;

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Manual de orientao para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas

Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

Preencher a justificativa do procedimento;


Preencher o nmero da Notificao;
Preencher a data e hora da coleta;
Identificar o mdico solicitante (assinatura e carimbo).
CASO

Indicao de tratamento

CONDIES
Dois resultados de HBsAg reagentes com intervalo
mnimo de seis meses (para comprovao de
infeco crnica)
Preencher a Ficha de Quantificao de cido
Nuclico Carga viral do HBV
Anexar o resultado da carga viral anterior

Monitorar tratamento

Preencher a Ficha de Quantificao de cido


Nuclico - Carga viral do HBV

a) Coleta e preparo da amostra

Para cada paciente, coletar 2 tubos de 5 mL com anticoagulante EDTA (tampa


roxa). No utilizar Heparina;
O sangue total dever ser enviado ao Lacen em at 20 horas aps a coleta e at
as 5 feiras de cada semana;
Se as amostras de sangue total no puderem chegar ao Lacen em at 20 horas, as
mesmas devero ser centrifugadas a 3.000 rpm por 10 minutos para a obteno do
plasma;
Separar o plasma, utilizando ponteira com filtro estril e acondicionar em 2
criotubos com tampa de rosca estreis, adicionando 2,0 mL de plasma em cada
criotubo estril;

b) Armazenamento e transporte da amostra

CPIA NO
CONTROLADA

As amostras de sangue total devero ser transportadas em caixas trmicas com


gelo reciclvel entre 2 e 8C. As amostras no devem ficar em contato direto com o
gelo para evitar hemlise;
Para as amostras de plasma acondicionadas em criotubos, acondicion-los em
geladeira em temperatura de 2 a 8 C por no mximo 5 dias aps a coleta. Enviar
em caixas trmicas com gelo reciclvel entre 2 e 8C.
Enviar at as 5 feiras de cada semana.
No congelar as amostras.

3 Genotipagem do HCV
Para a realizao da Genotipagem do HCV necessrio:
a) Preenchimento do Laudo Mdico para Emisso do BPA-I Genotipagem do Vrus
da Hepatite C:
Preencher com letra legvel todos os dados referentes instituio e paciente;
Assinalar o motivo pelo qual o exame est sendo solicitado;
Preencher o nmero da Notificao;
Identificar o mdico solicitante (assinatura e carimbo).

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Manual de orientao para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas

Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

b) Coleta e preparo da amostra

necessrio jejum de 3 a 4 horas antes da coleta;


Coletar a amostra em tubo seco (sem anticoagulante) com gel separador e volume
de 5 mL;
No usar HEPARINA como anticoagulante;
Aps a coleta, aguardar a retrao do cogulo por 30 minutos com o tubo na
posio vertical e em temperatura ambiente (20 a 25C) e centrifugar as amostras a
3.000 rpm por 10 minutos;
HIV, Infeco pelo

Para a realizao do diagnstico sorolgico da infeco pelo HIV necessrio:


a) O preenchimento da requisio para exame HIV ver tem 5.1 deste manual
Nota: As requisies incompletas sero devolvidas e o soro armazenado por 15 dias.
Aps este perodo sero desprezadas.
b) Coleta e preparo da amostra
necessrio jejum de 3 a 4 horas antes da coleta;
Aps a coleta, aguardar a retrao do cogulo por 30 minutos com o tubo na posio
vertical e em temperatura ambiente (20 a 25C) e centrifugar as amostras a 3.000
rpm por 10 minutos;
Aps a centrifugao observar se h hemlise e/ou lipemia. Amostras com hemlise
e/ou lipemia sero descartadas;
CPIA NO
As amostras no devero ser aliquotadas;
CONTROLADA
c) Armazenamento e transporte da amostra
Armazenar em geladeira (2 a 8 C) por no mximo 5 dias, ou -20C por no mximo
30 dias;
Transportar as amostras em caixas trmicas com gelo reciclvel juntamente com a
requisio devidamente preenchida. As amostras no devem ficar em contato direto
com o gelo para evitar hemlise.
6.3
Orientaes especficas para a coleta e transporte das amostras para
laboratrios de Referncia
No item a seguir, esto listadas as patologias com as orientaes especficas e detalhadas
de coleta, armazenamento e envio de amostras biolgicas que so encaminhadas para
Laboratrios de Referncia ou Apoio, principalmente em casos de bitos. As orientaes
gerais de coleta e envio esto descritas no DOC MCT 01 - 01(anexo A).
A execuo dos exames encaminhados pelo Lacen de responsabilidade dos Laboratrios
de Referncia e Apoio, sendo que a relao de exames realizados por estes laboratrios
pode sofrer alterao.

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Manual de orientao para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas

Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

Diante disso, antes da coleta das amostras biolgicas dever ser feito contato prvio com o
Lacen para verificar a possibilidade da realizao do exame e a fim de se estabelecer o fluxo
de encaminhamento das amostras.
Algumas patologias possuem requisies prprias disponveis na home page do Lacen, no
seguinte endereo eletrnico: http://lacen.saude.sc.gov.br.
Patologia

Orientaes especficas para coleta


Exame deve ser solicitado por neurologistas/clnicos responsveis pelo
acompanhamento dos pacientes.
Enviar ficha de notificao.

DCJ
Doena de
CreutzfeldtJakob

Deve acompanhar a amostra, o Termo de Consentimento Esclarecido (TCE)


assinado pelo paciente ou responsvel legal (solicitar no Lacen ou DIVE).

Coleta:
Sangue: Coletar 5 mL de sangue com anticoagulante EDTA ( tampa
roxa).
Enviar sob refrigerao ao Lacen imediatamente aps a coleta.
No Lacen: manter amostra congelada e enviar ao laboratrio de
referncia em gelo seco (no utilizar gelo mido).
Lquor: Coletar 1 a 2 mL em tubo estril, acondicionar e enviar sob
refrigerao;
CPIA NO
Amostras Ps-bito:
CONTROLADA
Encfalo inteiro, fragmentos do crebro (vrias reas do crtex,
ncleos da base, tlamo) cerebelo, tronco cerebral, devem ser
fixados em formol;
Blocos de tecidos as mesmas reas descritas acima
includos em parafina;
Fragmentos biopsiados devem ser fixados em formol ou
includos em parafina.
Amostra biolgica: Soro, plasma, sangue total.
Coletar 5 mL de sangue total ou 3 mL de soro ou plasma.
Coleta: at o 5 dia do incio dos sintomas.
Transporte em nitrognio lquido, gelo seco ou gelo reciclvel
(dentro de 6 horas no mximo).
Dengue, Febre
Conservao em freezer 70C ou nitrognio lquido.
Amarela ou
outros
Amostra: Material de necrpsia: sangue do corao, rins,
arbovrus
fragmentos do corao, fgado, pulmo, bao, fragmentos de crebro
(lobo frontal, lobo temporal, ncleos de base, cerebelo), medula
Isolamento
ssea, medula espinhal.
viral em cultura
Coleta: coletar em no mximo 8 horas aps o bito;
celular
Colocar as amostras de cada rgo e fragmentos de cada
regio do crebro em tubos separados e devidamente
identificados;
Enviar e conservar em nitrognio lquido, gelo seco ou gelo
reciclvel (dentro de 6 horas no mximo);
Conservar em freezer 70C ou em nitrognio lquido.

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Manual de orientao para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas

Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

Amostra: Soro ou cogulo, sangue total.


Soro: 3mL. Sangue total: 5mL;
Coleta: at o 4 dia aps o incio dos sintomas;
Tubo criognico transportado em nitrognio lquido ou gelo
seco;
Conservar em freezer 70C ou em nitrognio lquido.
Febre Amarela
Amostra ps-bito: material de necropsia - fragmentos de tecido
fresco.
Coleta: colher amostras em no mximo 8 horas aps o bito.
Os fragmentos devem ter de 1-2 cm3 de cada rgo e devem
ser colocados em tubos criognicos estreis.
ELISA IgM - Soro, plasma ou sangue total
Soro ou plasma: 3mL
Sangue total: 6mL
Coleta:
1 amostra: admisso do paciente no hospital;
CPIA NO
2 amostra*: algumas horas aps internao;
3 amostra: duas a 3 semanas aps a 2 amostra. CONTROLADA
*Somente quando solicitado pelo laboratrio

ELISA IgG - Soro, plasma ou sangue total


Comunicantes: informar que se trata de comunicante e o nome do pacientecaso.
Amostra: Soro ou plasma: 3 mL Sangue total: 6 mL
Coleta: nos primeiros 7 dias a partir do incio dos sintomas.
Conservao: sob refrigerao por no mximo 24 horas ou congelar a 20C.
Transporte: refrigerado com gelo reciclvel.
Hantavirose

RT- PCR (exame complementar)


Amostra: soro, plasma ou cogulo (coletados em at 7 dias do incio dos
sintomas);
Em caso de bito (at 8 horas aps): fragmentos de pulmo, rim, bao e
fgado (1,5 cm3);
Conservao: a - 70C ou em nitrognio lquido;
Transporte em caixa adequada para materiais infectantes, contendo gelo
seco.
Em caso de bito Amostra: sangue intracardaco. Coleta: colher amostras em no mximo 8
horas aps o bito.
Fragmento de 1-2 cm de cada rgo em tubo criognico estril.
Material de necropsia: fragmentos de tecido fresco (pulmo ou bao),
Transportar em nitrognio lquido ou gelo seco.
Conservar em Freezer 70C ou nitrognio lquido.
IMUNOHISTOQUMICA
Amostra: fragmentos de rim, pulmo, bao, linfonodo, corao, pncreas,
glndula pituitria, crebro e fgado (1,5 a 2 cm3)
Conservao: soluo de formalina tamponada a 10% ou em blocos de
parafina. Transporte em temperatura ambiente (NO REFRIGERAR)

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Manual de orientao para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas

Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

O procedimento de coleta em raspado de mucosa lingual (swab), tecido


bulbar de folculos pilosos, obtidos por bipsia de pele da regio cervical
deve ser feito por profissional habilitado mediante o uso de EPI.
Nota: Solicita-se que seja feito raspado de mucosa lingual e coleta de folculo piloso
antemortem quando possvel ou posmortem, conforme protocolo abaixo:

a) Coleta de Material antemortem:


Coleta de Folculo Piloso:

CPIA NO
CONTROLADA

As amostras de bipsias de pele da regio da nuca (antemortem ou


postmortem) devem ser coletadas com bisturi descartvel. Os bisturis no
devem ser reutilizados nem mesmo para coletar diferentes amostras de um
mesmo paciente.
As bipsias de pele, da regio da nuca (folculo piloso), devem ser
acondicionadas isoladas, separadamente das amostras de Sistema Nervoso
Central, e enviadas congeladas.
Coleta de Saliva (Raspado de Mucosa Lingual):

A saliva deve ser coletada por meio de raspado de mucosa lingual com
utilizao de swab estril.
Acondicionar o swab em tubo hermeticamente fechado e em temperatura
ambiente.
Raiva Humana Acondicionar e encaminhar as amostras para laboratrio em caixas
isotrmicas distintas. Identificar todas as amostras adequadamente e enviar
a ficha de investigao do caso de raiva humana.
b) Coleta ps mortem
Coleta de Tecido Nervoso (Crebro, cerebelo e medula):

O rgos di Sistema Nervoso Central (crebro, cerebelo e medula) devero


ser coletados com bisturis descartveis,
no devendo estes serem
reutilizados nem mesmo para coletar diferentes amostras de um mesmo
paciente.
Manter e enviar as amostras conservadas sob refrigerao em at 24 horas
aps a coleta, e congeladas, aps este prazo.
Excepcionalmente, pode-se conservar as amostras em soluo salina com
glicerina a 50%, em recipientes de paredes rgidas, hermeticamente
fechados, com identificao de material de risco biolgico juntamente com
cpia da ficha de notificao ou de investigao. No usar formol. A
qualidade do resultado laboratorial depender do estado de conservao da
amostra. Materiais autolisados interferem nas tcnicas laboratoriais, muitas
vezes tornando impossvel a emisso do laudo.
Juntamente com as amostras, devem ser enviadas as fichas epidemiolgicas
completas, onde devem constar os dados do caso suspeito. Quando
enviados dois ou mais fragmentos de tecidos, especificar no pedido e
identificar os mesmos.

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Manual de orientao para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas

6.4

Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

Encaminhamento dos resultados dos exames

Todos os clientes cadastrados que enviam amostras biolgicas ao LACEN (vigilncias


municipais, ncleos de vigilncias hospitalares, etc) podero acessar o resultado dos
exames via on line no seguinte endereo eletrnico: http://lacen.saude.sc.gov.br/.
O LACEN estabelece prazos de liberao dos laudos de exames. Estes prazos esto
disponveis no DOC MCT 01- 01 (anexo A)
Os exames enviados para Laboratrios de Referncia ou Apoio no obedecem ao mesmo
prazo de liberao dos exames realizados no LACEN/SC. Estes prazos esto sujeitos ao
estabelecido pela unidade que realiza os exames.
7

REFERNCIAS

CPIA NO
CONTROLADA

BRASIL. Ministrio da Sade. Secretaria Nacional de Aes Bsicas de Sade. Diviso


Nacional de Laboratrios de Sade Pblica. Normas tcnicas para o diagnstico das
meningites bacterianas. Braslia, DF; Centro de Documentao do Ministrio da Sade,
1986.
. Ministrio da Sade. Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria. Manual de
microbiologia clnica para o controle de infeco em servios de sade. Braslia, 2004.
Mdulo VII, p. 01-24.
. Ministrio da Sade. Secretaria Nacional de Aes Bsicas de Sade. Diviso
Nacional de Laboratrios de Sade Pblica. Normas, mtodos e tcnicas para o
diagnstico laboratorial de febre tifide. Braslia, DF, 1986.
. Ministrio da Sade. Secretaria Nacional de Aes Bsicas de Sade. Diviso
Nacional de Laboratrios de Sade Pblica. Normas, mtodos e tcnicas para
isolamento e diagnstico das enterobactrias. Braslia, DF, 1985.
. Ministrio da Sade. Secretaria Nacional de Assistncia Sade. Programa
Nacional de Controle de Doenas Sexualmente Transmissveis/Aids. Manual para controle
das doenas sexualmente transmissveis. Braslia, DF, 1993.
. Ministrio da Sade. Secretaria Nacional de Assistncia Sade. Programa
Nacional de Controle de Doenas Sexualmente Transmissveis/Aids. Manual de
procedimentos bsicos em microbiologia clnica para o controle da infeco
hospitalar. Braslia, DF, 2001.
. Ministrio da Sade. Secretaria de Vigilncia em Sade Bsica. Departamento de
Vigilncia Epidemiolgica. Guia de procedimentos tcnicos: baciloscopia em
hansenase. Braslia: Editora do Ministrio da Sade, 2010.
. Ministrio da Sade. Programa Nacional de DST e Aids. Bayer. Roche. bioMeriux.
Manual de Carga Viral HIV-1. [S.l.: s.n.], [200-]

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Manual de orientao para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas

Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

. Ministrio da Sade. Secretaria de Polticas de Sade. Coordenao Nacional de


DST e Aids. Tcnica para coleta de secrees. 2. ed. Braslia, DF, 1997.
. Ministrio da Sade. Secretaria de Vigilncia em Sade. Coordenao Geral do
Programa Nacional de Controle da Malria. Manual de treinamento em diagnstico
laboratorial de malria. Braslia, DF, 2003.
. Ministrio da Sade. Fundao Nacional de Sade. Comisso Nacional de
Preveno do Clera. Manual integrado de preveno e controle da clera. Braslia, DF,
1984.
. Ministrio da Sade. Fundao Nacional de Sade. Centro de Referncia Professor
Hlio Fraga. Manual de baciloscopia da tuberculose. Rio de Janeiro, 1998, 42p, il.
. Ministrio da Sade. Fundao Nacional de Sade. Coordenao de Controle de
Zoonoses e Animais Peonhentos. Manual de Leptospirose. Braslia, DF, 1995.
. Ministrio da Sade. Fundao Nacional de Sade. Guia de Vigilncia
Epidemiolgica. 5. ed. Braslia, DF, 2002. vol I e II.
. Ministrio da Sade. Fundao Oswaldo Cruz. Instituto de Pesquisa Evandro
Chagas. Diagnstico parasitolgico da leishmaniose tegumentar americana. Guia
Prtico. 2005.
.Ministrio da Sade. Secretaria de Vigilncia em Sade. Departamento de
Vigilncia Epidemiolgica. Manual Nacional de Vigilncia Laboratorial da Tuberculose e
outras micobactrias/Ministrio da Sade, Secretaria de Vigilncia em Sade,
Departamento de Vigilncia Epidemiolgica Braslia: Ministrio da Sade, 2008.
. Ministrio da Sade. PORTARIA MS N 3.242, DE 30 DE DEZEMBRO DE 2011
Dispe sobre o Fluxograma Laboratorial da Sfilis. Braslia, DF, 2011.
. Ministrio da Sade. Portaria GM/MS n. 2.848 DE 06 de Novembro de 2007.
Publica a Tabela de Procedimentos, Medicamentos, rteses, Prteses e Materiais
Especiais - OPM do Sistema nico de Sade. Braslia, DF, 2007.
Ministrio da Sade. SVS/ DEVEP/CGDT/COVEV Coordenao Geral de
Laboratrios, Instituto Pasteur Protocolo de Diagnstico Laboratorial da Raiva Humana.
Braslia, DF; 2006.
. Ministrio da Sade. Secretaria de Ateno Sade. Portaria n 719, de 28 de
dezembro de 2007. Inclui o campo Raa/Cor, nos Sistemas de Informao Ambulatorial
e Hospitalar-(SIA/SIH/SUS). Braslia, DF, 2007.
Ministrio da Sade Protocolo Clnico e Diretrizes Teraputicas para Hepatite
Viral C e Coinfeces. Srie A Normas e Manuais Tcnicos, Braslia, DF, 2011.
EVANS, E.C.V.; RICHARDSON, M.D. Medical Mycology: A Practical Aproach. Oxford:
Press, 1989.

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Manual

Seo: 03

Requisito: 7.5

LACAZ, C. da Silva; PORTO, E. M; COSTA, J.E. Micologia Mdica. So Paulo: Sarvier,


1991.
OPLUSTIL, C. P. et al. Procedimentos Bsicos em Microbiologia Clnica. 3. ed. Ver. E
ampl. So Paulo: Sarvier, 2010.
SO PAULO (ESTADO). Secretaria de Estado da Sade. Coordenao dos Institutos de
Pesquisa. Instituto Adolfo Lutz. Centro de Vigilncia Epidemiolgica Prof. Alexandre
Vranjac. Treinamento para coleta de secreo nasofaringe para cultura no diagnstico
laboratorial da coqueluche. So Paulo, [2000].
. Secretaria de Estado da Sade. Coordenao dos Institutos de Pesquisa. Instituto
Adolfo Lutz. Centro de Vigilncia Epidemiolgica Prof. Alexandre Vranjac. Treinamento de
difteria. So Paulo, [2000].
. Secretaria de Estado da Sade. Coordenao dos Institutos de Pesquisa. Instituto
Adolfo Lutz. Descrio: Catlogo de Exames (Arquivo total) Atualizado em:
21 Sep 2007.

CPIA NO
CONTROLADA

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Requisito: 7.5

Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

Exame/
metodologia

Amostra biolgica

sangue ( soro)

BOTULISMO

Todo caso
suspeito deve ser
notificado e
enviado a
Ficha de
Investigao
Epidemiolgica
Sinan

Investigao da
Toxina
Botulnica por
Bioensaio em
Camundongos
inoculao
intraperitoneal

Exame realizado
em Laboratrio
de Referncia

para botulismo alimentar,


intestinal e por ferimento

fezes (contedo
intestinal)
para botulismo alimentar
e intestinal

para botulismo alimentar

Exame realizado
em Laboratrio
de Referncia

at 8 dias aps incio


dos sintomas

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte
volume: 10 ml de soro. Coletar
sangue em tubo sem anticoagulante,
deixar a temperatura ambiente para
retrao do cogulo, centrifugar e se
o tubo no tiver gel separador,
aliquotar o soro
manter e enviar sob refrigerao
(2 a 8C)

vmito (lavado gstrico)

Cultura

Perodo ideal
da coleta

fezes (contedo
intestinal)
para botulismo alimentar
e intestinal

material do ferimento
para botulismo por
ferimento

Manual

Seo: 03

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

Prazo
mximo de
liberao do
exame

enviar no prazo
mximo de 24 horas
CPIA NO
CONTROLADA

at 3 dias aps incio


dos sintomas
se houver
constipao
intestinal, as fezes
podem ser coletadas
em at 6 dias
at 3 dias aps incio
dos sintomas
at 3 dias aps incio
dos sintomas
se houver
constipao
intestinal, as fezes
podem ser coletadas
em at 6 dias
antes do uso de
antibiticos

15 g ou 15 ml da amostra em frasco
estril, com tampa rosquevel, sem
vazamento

Sem previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia

manter e enviar sob refrigerao


(2 a 8C)
enviar no prazo
mximo de 24 horas
15 g ou 15 ml da amostra em frasco
estril, com tampa rosquevel, sem
vazamento
manter e enviar sob refrigerao
(2 a 8C)
exsudato da parte mais profunda do
ferimento com swab em tubo de
ensaio vedado. Se possvel, enviar
swab em meio de tioglicolato

enviar no prazo
mximo de 30
minutos

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Requisito: 7.5

Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas

Patologia

BARTONELOSE

Exame/
metodologia
IFI - Imunofluorescncia
Indireta

Amostra biolgica

BRUCELOSE

CPIA NO
CONTROLADA

CANCRO MOLE

CAXUMBA
Somente em caso
de surtos

Microscopia
aps colorao
pelo mtodo de
Gram (para
pesquisa de
Haemophilus
ducreyi)
Inibio por
hemaglutinao
Exame realizado
em Laboratrio
de Referncia

sangue (soro)

leso genital

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte
2,0 ml de soro

sangue (soro)

Exame realizado
em Laboratrio
de Referncia

Reao de
soroaglutinao
com antgeno
bruclico

Perodo ideal
da coleta

manter e enviar sob refrigerao


(2 a 8C)

coletar sangue em tubo sem


a partir da 2 semana
anticoagulante com gel separador
de incio de sintomas,
(tampa amarela)
em caso de
aguardar 30 minutos a temperatura
exposio e
ambiente e aps centrifugar para
acompanhamento de
separao do soro: 3000 rpm 10
casos positivos aps
minutos
tratamento : 3 ms,
enviar no tubo original na posio
6 ms,12 ms, 18
vertical ou fracionar soro para outro
ms, 24 ms
tubo
transportar sob refrigerao (2 a 8C)

antes do uso de
antibitico

esfregao em lmina de microscopia


nova, limpa e desengordurada
acondicionar em porta-lmina

Manual

Seo: 03

Tempo crtico p/
chegada no Lacen
at 24 h aps a
coleta, se amostra
refrigerada
aps 24 horas da
coleta, a amostra
deve ser congelada
(-20C)
at 5 dias aps a
coleta, desde que a
amostra centrifugada
seja mantida sob
refrigerao ( 2 a
8C)

Prazo
mximo de
liberao do
exame
Sem previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia

07 dias

para perodos
maiores fracionar o
soro e congelar
(-20C)

imediatamente
(coleta no Lacen)

05 dias

manter e enviar temperatura


ambiente
sangue (soro)
1 amostra (fase aguda) IgM
2 amostras (1 na fase
aguda, 2 aps 15 dias) IgG

quando solicitado
pela Vigilncia
Epidemiolgica para
esclarecimento de
surto

Sem previso

2,0 ml de soro
manter e enviar sob refrigerao
(2 a 8C)

NA

Enviado para
Laboratrio
de
Referncia

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Requisito: 7.5

Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas

Patologia

Exame/
metodologia
Sorologia
ELISA

CISTICERCOSE

Exame realizado
em Laboratrio
de Referncia

Amostra biolgica

sangue (soro)

Perodo ideal
da coleta

na suspeita clnica

lquor

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte
2,0 ml de soro ou lquor
manter e enviar sob refrigerao
(2 a 8C)
coletar sangue em tubo sem
anticoagulante com gel separador
(tampa amarela)

CITOMEGALOVRUS, pesquisa
de

Sorologia
(ELISA)
anticorpos IgM
e IgG

sangue (soro)

a critrio clnico

CPIA NO
CONTROLADA

aguardar 30 minutos a temperatura


ambiente e aps centrifugar para
separao do soro: 3000 rpm 10
minutos
descartar as amostras com hemlise
ou lipemia excessivas
enviar no tubo original na posio
vertical ou fracionar soro para outro
tubo

Manual

Seo: 03

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

Prazo
mximo de
liberao do
exame
Sem previso

NA

at 5 dias aps a
coleta, desde que a
amostra centrifugada
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)

Enviado para
Laboratrio
de
Referncia

15 dias

para perodos
maiores fracionar
soro e congelar
(-20C)

transportar sob refrigerao (2 a 8C)

COQUELUCHE

COLONIZAO
ESTREPTOCOCO
DO GRUPO B em
gestante

Cultura
para pesquisa
de Bordetella
pertussis

Cultura
para pesquisa
de S. agalactiae

na fase aguda da
doena
secreo de nasofaringe

secreo vaginal e
raspado anorretal

antes do incio de
antibitico ou no
mximo at 3 dias
aps o incio do
tratamento

35-37 semanas de
gestao

swab alginatado, ultrafino com haste


flexvel em meio de transporte
Reagan Lowe (agar carvo com
antibitico)

at 24h aps a coleta

17 dias

coleta no Lacen

09 dias

manter e enviar temperatura


ambiente
swab em meio de transporte Amies
com carvo
manter e enviar temperatura
ambiente

ANEXO A
Laboratrio Central de Sade Pblica LACEN/SC
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Requisito: 7.5

Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas

Patologia

Exame/
metodologia

Amostra biolgica

Perodo ideal
da coleta

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte

Cultura
CONJUNTIVITE
BACTERIANA
Somente em caso
de surtos

DENGUE

Todo caso
suspeito deve ser
notificado atravs
da ficha de
notificao
(SINAN)

para pesquisa
de:
- H. influenzae
biogrupo
aegytius,
- S.pneumoniae
- S. aureus
- S pyogenes

Sorologia
(ELISA),
anticorpos IgM

para pesquisa de
Corynebacterium
diphtheriae

semear a amostra com swab estril


em meio de gar chocolate inclinado
(tubo)
enviar temperatura ambiente
CPIA NO
CONTROLADA

sorologia:
Amostra 1
6 ao 10 dias de
incio dos sintomas
sangue (soro)

Isolamento viral
Exame
realizado em
Laboratrio de
Referncia
Cultura

DIFTERIA

secreo de conjuntiva

quando solicitado
pela Vigilncia
Epidemiolgica para
esclarecimento de
surto

Amostra 2
11 ao 30 dia aps
incio dos sintomas
isolamento viral e
deteco do
Antgeno NS1: do 1
ao 5 dias do incio
dos sintomas (febre)

secreo de orofaringe e
nasofaringe

antes do uso de
antibitico

Tempo crtico p/
chegada no Lacen
at 30 minutos
ou
at 48 horas aps a
coleta, quando
incubada a 352C
por 24 h no local da
coleta. Encaminhar
imediatamente aps
esse perodo.
Informar esse dado
na requisio

coletar sangue em tubo sem


anticoagulante com gel separador
(tampa amarela)

at 48 horas aps a
coleta (se amostra
refrigerada)

aguardar 30 minutos a temperatura


ambiente e aps centrifugar para
separao do soro: 3000 rpm 10
minutos

para perodos
maiores, fracionar
soro e congelar
(-20C)

enviar no tubo original na posio


vertical ou fracionar soro para outro
tubo

amostra para
isolamento viral deve
ser enviada
imediatamente aps
a coleta

transportar sob refrigerao (2 a 8C)

swab ultrafino em meio de transporte


Amies com carvo para secreo de
nasofaringe
swab em meio de transporte Amies
com carvo para secreo de
orofaringe
manter e enviar temperatura
ambiente

Manual

Seo: 03

at 24 h aps a
coleta

Prazo
mximo de
liberao do
exame

10 dias

07 dias

Sem previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia

22 dias

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Requisito: 7.5

Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas

Patologia

DOENA
BACTERIANA
INVASIVA

Exame/
metodologia
Microscopia
aps colorao
pelo mtodo de
Gram
Cultura

Sorologia
(ELISA)

DOENA DE
CHAGAS

Doena
Transmitida por
Alimentos e gua,
clera

lquidos biolgicos
estreis (lquido pleural,
peritonial e sangue de
medula ssea)

sangue (soro)

Imunofluorescncia
indireta IgG
IFI

Microscopia
(hemoparasitolgico) para
pesquisa de
Trypanosoma
cruzi
DOENAS
DIARRICAS
BACTERIANAS

Amostra biolgica

Perodo ideal
da coleta

antes do uso de
antibitico

na suspeita clnica

CPIA NO
CONTROLADA

sangue total

fezes in natura
Coprocultura
swab fecal ou swab retal

casos agudos com


at 30 dias do incio
dos sintomas

no incio da diarria e
antes do uso de
antibitico

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte
frasco estril
manter e enviar a temperatura
ambiente

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

30 minutos,
sendo o mximo
aceitvel em at 2
horas aps a coleta

coletar sangue em tubo sem


anticoagulante com gel separador
(tampa amarela)
aguardar 30 minutos a temperatura
ambiente e aps centrifugar para
separao do soro: 3000 rpm 10
minutos
enviar no tubo original na posio
vertical ou fracionar soro para outro
tubo.
transportar sob refrigerao (2 a 8C)

at 5 dias aps a
coleta, desde que a
amostra centrifugada
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)

em tubo com anticoagulante EDTA 5 ml ( tampa roxa)

at 72 h aps a
coleta, se amostra
refrigerada

manter e enviar sob refrigerao


(2 a 8C)
2 a 4 g em frasco coletor rgido de
boca larga e tampa rosquevel.
manter e enviar temperatura
ambiente
swab em meio de transporte CaryBlair
manter e enviar temperatura
ambiente

Manual

Seo: 03

para perodos
maiores fracionar
soro e congelar
(-20C).

Prazo
mximo de
liberao do
exame

09 dias

15 dias

05 dias

at 2 hora aps a
coleta
15 dias
at 72 h aps a
coleta

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Exame/
metodologia

Patologia

DOENAS
DIARRICAS
VIRAIS
(Rotavrus,
Astrovrus,
Norovrus)

DOENA DE
LYME-SIMILE

ERITEMA
INFECCIOSO

Deteco de
Antgeno Rotavrus
(ELISA)
Astrovrus
Norovrus

ELISA
Western Blot

Amostra biolgica

Perodo ideal
da coleta

CPIA NO
CONTROLADA
fezes lquidas
excepcionalmente
podero ser envi adas
descartveis
fraldas descart

sangue (soro)

1 ao 4 dia do incio
dos sintomas

na suspeita clnica

Exame realizado
em Laboratrio
de Referncia

Deteco de
anticorpos IgM
e IgG
Anti
Parvovrus B19
(ELISA)

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

no mnimo 5,0 ml em frasco coletor


rgido de boca larga e tampa
rosquevel

em temperatura
ambiente: at 1 hora
aps a coleta

a fralda dever ser forrada com


compressas de gaze antes da
evacuao. Esta deve ser
acondicionada inteira (com as
compressas) dentro de saco plstico

refrigerado (2 a 8C):
at 48 h aps a
coleta

2,0 ml de soro
manter e enviar sob refrigerao
(2 a 8C)

at 5 dias aps a
coleta, desde que a
amostra centrifugada
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)
para perodos
maiores fracionar
soro e congelar
(-20C)

sangue (soro)

a partir do 5 dia do
exantema

coletar sangue em tubo sem


anticoagulante com gel separador
(tampa amarela)
aguardar 30 minutos a temperatura
ambiente e aps centrifugar para
separao do soro: 3000 rpm 10
minutos
enviar no tubo original na posio
vertical ou fracionar soro para outro
tubo
transportar sob refrigerao (2 a 8C)

Manual

Seo: 03

at 5 dias aps a
coleta, desde que a
amostra centrifugada
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)
para perodos
maiores, fracionar o
soro e congelar
(- 20C)

Prazo
mximo de
liberao do
exame
10 dias

Sem previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia

Sem previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia

15 dias

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Requisito: 7.5

Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

FARINGITE
ESTREPTOCCICA /
ESCARLATINA
Somente em caso
de surtos
FEBRE
MACULOSA

Exame/
metodologia

Amostra biolgica

Cultura
para S pyogenes
(estreptococo
beta- -hemoltico
do grupo A)

secreo de orofaringe

Imunofluorescncia
indireta - IFI

sangue (soro)

Exame enviado
a Laboratrio de
referncia

02 amostras coletadas
com intervalo igual ou
maior que 15 dias

Perodo ideal
da coleta

quando solicitado
pela VE para
esclarecimento de
surto

a partir do 7 dia de
incio dos sintomas.

Hemocultura
FEBRE TIFIDE

Swab em meio de transporte Amies


com carvo
manter e enviar temperatura
ambiente
2,0 ml de soro
manter e enviar sob refrigerao
(2 a 8C)

CPIA NO
CONTROLADA

sangue total
2 a 3 amostras com
intervalo de 15 a 20
minutos entre as coletas

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte

at a 2 semana da
doena

sangue em meio de cultura lquido


caldo TSB ou BHI
1 ml no frasco peditrico ou 5 ml no
frasco de adulto
transportar temperatura ambiente

pesquisa de
Salmonella Typhi
swab em meio de transporte CaryBlair

swab fecal ou swab retal


Coprocultura

3 amostras com intervalo


de 3 dias cada uma

fezes in natura

a partir da 2 at a 5
semana da doena

manter e enviar temperatura


ambiente
2 a 4 g em frasco coletor de boca
larga e tampa rosquevel
manter e enviar temperatura
ambiente

Manual

Seo: 03

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

at 48h aps a coleta

at 24 h aps a coleta
se amostra
refrigerada e aps 24
horas a amostra deve
ser congelada
at 6 horas OU
at 48 horas aps a
coleta, quando
incubada a 352C
por 24 h no local da
coleta. Encaminhar
imediatamente aps
esse perodo.
Informar esse dado
na requisio
at 72 horas aps a
coleta

at 2 horas aps a
coleta

Prazo
mximo de
liberao do
exame

10 dias

Sem previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia

12 dias

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

GRIPE Deteco do vrus


INFLUENZA A
(engloba tambm
H1N1pandmico
2009)

Exame/
metodologia

Reao em
cadeia da
polimerase
RT - PCR
em tempo real

Amostra biolgica

swab combinado:
2 swab de secreo com
clulas da parede
posterior nasal das 2
narinas e 1 de orofaringe
aspirado de secreo
de nasofaringe:
coletado com frasco
coletor acoplado a bomba
aspiradora

Perodo ideal
da coleta

at o 3 dia do incio
dos sintomas e
eventualmente at o
7 dia
preferencialmente
antes do uso de
antiviral

lavado bronco alveolar

GRIPE
VIROSES
RESPIRATRIAS
Programa
sentinela de
Influenza

S para regio da
grande
Florianpolis

Pesquisa do
antgeno por
IFI Indireta
Vrus Influenza
AeB
Virus
Parainfluenza
1, 2,3
Adenovrus
Vrus Sincicial
Respiratrio

swab combinado:
2 swab de secreo com
clulas da parede
posterior nasal das 2
narinas e 1 de orofaringe
aspirado de secreo
de nasofaringe: coletado
com frasco coletor
acoplado a bomba
aspiradora

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte

Manual

Seo: 03

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

Prazo
mximo de
liberao do
exame

os 3 swab so inseridos no mesmo


tubo contendo meio de transporte
viral (fornecido pelo Lacen)
em caso de aspirado SNF: o meio de
transporte aspirado para dentro do
frasco coletor e este encaminhado
ao Lacen
lavado bronco alveolar
coleta em hospital , no mnimo 2 ml
em meio de tranporte viral

at 24 horas aps a
coleta

05 dias

CPIA NO
CONTROLADA

transportar sob refrigerao (2 a 8C)


(NO CONGELAR)

os 3 swab so inseridos no mesmo


tubo contendo meio de transporte
viral (fornecido pelo Lacen)
na fase aguda, at o
5 dia do incio dos
sintomas clnicos

em caso de aspirado SNF: o meio de


transporte aspirado para dentro do
frasco coletor e este encaminhado
ao Lacen
transportar sob refrigerao (2 a 8C)
(NO CONGELAR)

at 24 horas aps a
coleta

07 dias

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

GONORRIA

Exame/
metodologia

Microscopia
aps colorao
pelo mtodo de
Gram

Amostra biolgica

secreo uretral,
endocervical, anal e
orofarngea
(excepcionalmente
vaginal)

Cultura
para pesquisa
de Neisseria
gonorrhoeae

HANSENASE

Microscopia
aps colorao
pelo mtodo de
Ziehl-Neelsen

Perodo ideal
da coleta

esfregao em lmina de microscopia


nova, limpa e desengordurada,
acondicionada em porta-lmina

antes do uso de
antibitico

para pesquisa
de BAAR

ELISA IgM e IgG

Exame enviado
a Laboratrio de
referncia

Prazo
mximo de
liberao do
exame

12 dias

esfregao padronizado em lmina


de microscopia nova, limpa e
desengordurada
acondicionada em porta-lmina

CPIA NO
CONTROLADA

at 24 horas aps a
coleta

07 dias

manter e enviar temperatura


ambiente

sangue total

na suspeita clnica

soro ou plasma

HANTAVIROSE

imediatamente
(coleta no Lacen)

manter e enviar temperatura


ambiente

manter e enviar temperatura


ambiente

na suspeita clnica

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

swab estril alginatado em meio de


transporte Amies com carvo

frasco coletor estril, de boca larga e


tampa rosquevel

1 jato urinrio

raspado intradrmico

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte

Manual

Seo: 03

* casos bitos ver


condies
especficas do
manual

sangue total 6 ml
soro ou plasma no mnimo 3 ml
manter e enviar sob refrigerao
(2 a 8C)
manter sob refrigerao (2 a 8C)
por, no mximo, 24horas, aps este
perodo congelar (-20 C)

imediatamente ou
at 24 horas aps a
coleta

Sem previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia

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Requisito: 7.5

Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

Exame/
metodologia

Amostra biolgica

Perodo ideal
da coleta

sangue (soro)

HEPATITE VIRAL
(tipo A - HAV)

Marcadores
sorolgicos
anti-HAV Total
anti-HAV IgM

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte
coletar sangue em tubo 5 ml sem
anticoagulante com gel separador
(tampa amarela)

na suspeita clnica

CPIA NO
CONTROLADA

aguardar 30 minutos a temperatura


ambiente para retrao do cogulo
centrifugar para separao do soro a
3000 rpm 10 minutos
descartar as amostras com hemlise
ou lipemia
enviar no tubo original na posio
vertical

Manual

Seo: 03

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

at 5 dias aps a
coleta, desde que a
amostra centrifugada
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)

Prazo
mximo de
liberao do
exame

10 dias

para perodos
maiores (mximo 30
dias) congelar
(-20C)

transportar sob refrigerao (2 a 8C)

Marcadores
sorolgicos
HEPATITE VIRAL
(tipo B - HBV)

Imunoensaio
HBsAg
HBeAg
Anti-HBs
Anti-HBc IgM
Anti-HBc Total
Anti - HBe

sangue (soro)

na suspeita clnica
e/ou monitoramento

coletar sangue em tubo 5 ml sem


anticoagulante com gel separador
(tampa amarela)
aguardar 30 minutos a temperatura
ambiente para retrao do cogulo
centrifugar para separao do soro a
3000 rpm 10 minutos
descartar as amostras com hemlise
ou lipemia
enviar no tubo original na posio
vertical
transportar sob refrigerao (2 a 8C)

at 5 dias aps a
coleta, desde que a
amostra centrifugada
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)
para perodos
maiores (mximo 30
dias) congelar
(-20C)

10 dias

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Requisito: 7.5

Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

Exame/
metodologia

Amostra biolgica

Perodo ideal
da coleta

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte
para cada paciente coletar 2 tubos
de 5 ml com EDTA (tampa roxa)

HEPATITE VIRAL
(tipo B - HBV)

HBV (DNA
Quantitativo)
PCR em Tempo
Real

transportar as amostra sem contato


direto com o gelo reciclvel (2 a 8C)
sangue total (plasma)

Enviar BPA- I
Quantificao de
cido Nuclico
Carga Viral HBV

na indicao ou
monitoramento do
tratamento

CPIA NO
CONTROLADA

na impossibilidade da amostra
chegar ao Lacen em at 20 horas, as
mesmas devero ser centrifugadas a
3.000 rpm - 10 minutos
separar o plasma em 2 criotubos
estreis e com tampa de rosca,
utilizando ponteira estril e com filtro,
acondicionar 2,0 ml de plasma para
cada criotubo
aps separao, os criotubos
devero ser refrigerados (2 a 8C)
at o envio

Manual

Seo: 03

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

Prazo
mximo de
liberao do
exame

sangue total:
dever ser enviado
ao Lacen at 20
horas aps a coleta
plasma:
dever ser enviado
no mximo 5 dias
aps a coleta

30 dias

at 5 feira de cada
semana.

enviar as amostras com gelo


reciclvel (2 a 8C)
nunca congelar a amostra
5 ml de sangue em tubo sem
anticoagulante com gel separador
(tampa amarela)
HEPATITE VIRAL
(tipo C- HCV)

Anti-HCV
Imunoensaio

sangue (soro)

na suspeita clnica
e/ou monitoramento

aguardar 30 minutos a temperatura


ambiente para retrao do cogulo
centrifugar para separao do soro a
3000 rpm 10 minutos
descartar as amostras com hemlise
ou lipemia
enviar no tubo original na posio
vertical
transportar sob refrigerao (2 a 8C)

at 5 dias aps a
coleta, desde que a
amostra centrifugada
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)
para perodos
maiores (mximo 30
dias) congelar
(-20C)

10 dias

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Requisito: 7.5

Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

Exame/
metodologia

Amostra biolgica

Perodo ideal
da coleta

5 ml sangue em tubo sem


anticoagulante com gel separador
No utilizar tubo com heparina

HCV (RNA
quantitativo)
HEPATITE VIRAL
(tipo C- HCV)

PCR em Tempo
Real

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte

sangue (soro )

na suspeita clnica
e/ou monitoramento

aps a coleta, aguardar a retrao


do cogulo por 3 minutos

Enviar BPA - I
Quantificao do
RNA do vrus da
Hepatite C

CPIA NO
CONTROLADA

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

as amostras no devero ser


manuseadas ou aliquotadas

Prazo
mximo de
liberao do
exame

encaminhar no prazo
mximo de 72 horas.
At o envio conservar
entre 2 a 8C

centrifugar para separao do soro a


3000 rpm 10 minutos
descartar as amostras com hemlise
ou lipemia

Manual

Seo: 03

at 5 feira de cada
semana.
.

30 dias

enviar as amostras com gelo


reciclvel (2 a 8C)
nunca congelar a amostra
5 ml sangue em tubo sem
anticoagulante com gel separador
No utilizar tubo com heparina

HEPATITE VIRAL
(tipo C- HCV)

Genotipagem
do HCV

sangue (soro )

indicao de
tratamento

aps a coleta, aguardar a retrao


do cogulo por 3 minutos

encaminhar no prazo
mximo de 72 horas.
At o envio conservar
entre 2 a 8C

centrifugar para separao do soro a


3000 rpm 10 minutos

Enviar BPA - I
Genotipagem do
Vrus da Hep. C

descartar as amostras com hemlise


ou lipemia
as amostras no devero ser
manuseadas ou aliquotadas
enviar as amostras com gelo
reciclvel (2 a 8C)
nunca congelar a amostra

at 5 feira de cada
semana.

30 dias
(exame
realizado em
laboratrio de
apoio)

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Requisito: 7.5

Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

Exame/
metodologia

Amostra biolgica

Sorologia
(Imunoensaio)
HIV 1 e 2
Diagnstico da
infeco por

Imunoblot
Rpido
Western blot
(deteco de
anticorpos)

sangue (soro)

a critrio clnico

CPIA NO
CONTROLADA

Teste de
Quantificao
de Carga Viral
do HIV -1
HIV - 1
Monitoramento da
infeco por

Genotipagem
do HIV -1

Enviar BPA- I
Quantificao de
cido Nuclico
Carga Viral do
HIV

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte

Perodo ideal
da coleta

coletar sangue em tubo 5 ml sem


anticoagulante com gel separador
(tampa amarela)

aguardar 30 minutos a temperatura


ambiente para retrao do cogulo

centrifugar para separao do soro


a 3000 rpm 10 minutos

descartar as amostras com


hemlise ou lipemia

enviar no tubo original na posio


vertical

transportar sob refrigerao


(2 a 8C)

sangue total: 2 tubos de 5 ml com


EDTA K2 ou K 3 - tampa roxa
SEM GEL SEPARADOR
sangue total ou plasma

na indicao ou
monitoramento de
tratamento

em crianas pode ser utilizado tubo


peditrico
plasma: obter o plasma por
centrifugao e acondicionar em 2
criotubos livre de RNAse e DNAse
(1000 a 1200 ul em cada criotubo)
manter amostras refrigeradas at o
momento do envio
*os criotubos e ponteiras com filtro so
fornecidos pelo Lacen

Manual

Seo: 03

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

Prazo
mximo de
liberao do
exame

at 5 dias aps a
coleta, desde que a
amostra centrifugada
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)
para perodos
maiores (mximo 30
dias) congelar
(-20C)

15 dias

sangue total:
em temperatura
ambiente (22 a 25C)
por no mximo 6 horas
sob refrigerao
(2 a 8C):
Mximo em 24 horas
ERRATA: 18 horas

aps a coleta

plasma:
em temperatura
ambiente (22 a 25C)
por no mximo 6 horas
sob refrigerao
(2 a 8C):
mximo em 5 dias
aps a coleta

20 dias

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Requisito: 7.5

Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

HIV
Monitoramento da
infeco por

Exame/
metodologia

Contagem de
Linfcitos T
CD4+/CD8+/
CD45+

Amostra biolgica

Perodo ideal
da coleta

coletar cada amostra em 1 tubo de


coleta de 5ml com anticoagulante
EDTA K2 ou K3 e identific-las com
nome completo
sangue total

a critrio clnico

Citometria de
fluxo
CPIA NO
CONTROLADA

INFECO
BACTERIANA DE
PELE / OUVIDO /
BIPSIA

Cultura
Somente em caso
de surtos

caso necessrio, pode ser coletado


em tubo peditrico (EDTA K2 ou K3)
a amostra deve permanecer no tubo
original de coleta, em temperatura
ambiente (20 a 25C) durante
armazenamento e transporte
no refrigerar

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

prazo mximo de
40 horas aps a
coleta

Prazo
mximo de
liberao do
exame

15 dias

as amostras sero
recebidas no Lacen
de 2 a 5 feira

viabilidade da amostra para incio do


exame: 48 horas aps coleta

Enviar BPA- I
especfico

Microscopia
aps colorao
pelo mtodo de
Gram

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte

Manual

Seo: 03

leso aberta / abcesso


fechado / secreo de
ouvido externo

bipsia

swab estril em meio de transporte


Amies com carvo
quando solicitado
pela Vigilncia
Epidemiolgica p/
esclarecimento de
surto

manter e enviar temperatura


ambiente
frasco estril com soluo fisiolgica
(sem formol)
temperatura ambiente

at 24 horas aps a
coleta
10 dias
at 2 horas aps a
coleta

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

INFECO DO
TRATO
URINRIO (ITU)

Exame/
metodologia

Cultura
quantitativa

Amostra biolgica

urina (jato mdio)

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte

Perodo ideal
da coleta

antes do uso de
antibitico

Manual

Seo: 03

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

Prazo
mximo de
liberao do
exame

cerca de 30 ml em frasco coletor


estril de boca larga, transparente,
tampa rosquevel
temperatura ambiente: at 30
minutos aps a coleta

coleta no Lacen

07 dias

conservar sob refrigerao (2 a 8C):


at 2 horas

KPC

Cultura

Pesquisa de
K. pneumoniae
carbapenemase

cepa bacteriana isolada


PCR

Somente cepas
hospitalares

Exame realizado
em laboratrio
de referencia

Microscopia
(parasitolgico
de leso)
LEISHMANIOSE
TEGUMENTAR
AMERICANA

NA

CPIA NO
CONTROLADA

raspado de leso in print

Histopatologia
e PCR

aspirado de leso
bipsia em lcool

Exames
realizados em
laboratrio de
referencia

bipsia em formol

na suspeita clnica
com exame de
Montenegro positivo

semeadura da cepa pura no meio de


agar nutriente inclinado, em tubo
com tampa rosquevel
cepa bacteriana incubada a 352C
por 24 h no local do isolamento

at 48 horas (24 h de
incubao + 24 h
para transportar)

aps incubao, manter e enviar


temperatura ambiente

em lmina de microscopia nova

acondicionada em porta-lmina

manter e enviar temperatura


ambiente

bipsia: enviar em frasco vedado, em


temperatura ambiente
aspirado de leso: manter e enviar
sob refrigerao.

Sem previso
Enviado para
Centro
Colaborador

at 72 horas aps a
coleta
12 dias

at 72 horas aps a
coleta

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

Exame/
metodologia

Amostra biolgica

Perodo ideal
da coleta

coletar sangue em tubo sem


anticoagulante com gel separador
(tampa amarela)

Imunocromatografia

LEISHMANIOSE
VISCERAL
HUMANA (LVH)

Imuno
fluorescncia
indireta

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte

sangue (soro)

na suspeita clnica

aguardar 30 minutos a temperatura


ambiente e aps centrifugar para
separao do soro: 3000 rpm 10
minutos
enviar no tubo original na posio
vertical ou fracionar soro para outro
tubo

Exame realizado
em laboratrio
de referencia

CPIA NO
CONTROLADA

armazenar e transportar sob


refrigerao (2 a 8C) ou congelar
para perodos maiores que 5 dias
coletar sangue em tubo sem
anticoagulante com gel separador
(tampa amarela)

Sorologia
(ELISA)
LEISHMANIOSE
VISCERAL
CANINA (LVC)

Imunocromatografia
de duplo
percurso

sangue (soro)

na suspeita clnica

aguardar 30 minutos a temperatura


ambiente e aps centrifugar para
separao do soro: 3000 rpm 10
minutos
enviar no tubo original na posio
vertical ou fracionar soro para outro
tubo
armazenar e transportar sob
refrigerao (2 a 8C) ou congelar
para perodos maiores que 5 dias

Manual

Seo: 03

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

at 5 dias aps a
coleta, desde que a
amostra centrifugada
seja mantida sob
refrigerao
(2 a 8C)

Prazo
mximo de
liberao do
exame

03 dias

para perodos
maiores fracionar
soro e congelar
(-20C)

at 5 dias aps a
coleta, desde que a
amostra centrifugada
seja mantida sob
refrigerao
(2 a 8C)
para perodos
maiores fracionar
soro e congelar
(-20C)

20 dias

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

Exame/
metodologia

Amostra biolgica

coletar sangue em tubo sem


anticoagulante com gel separador
(tampa amarela)

Sorologia
(ELISA) IgM
sangue (soro)

a partir do 7 dia
aps o incio dos
sintomas

Microaglutinao
LEPTOSPIROSE

Exame realizado
em laboratrio
de referencia

LEVEDUROSES
Infeco hospitalar
ou resistncia ao
tratamento

sangue total

manter e enviar sob refrigerao


(2 a 8C) ou congelar para perodos
maiores que 5 dias
at o 6 dia do incio
dos sintomas
para esclarecimento
de bito

Identificao de
leveduras
Teste de
Sensibilidade a
Antifngicos
(TSAF)

aguardar 30 minutos a temperatura


ambiente e aps centrifugar para
separao do soro: 3000 rpm 10
minutos
enviar no tubo original na posio
vertical ou fracionar soro para outro
tubo

CPIA NO
CONTROLADA

PCR

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte

Perodo ideal
da coleta

5 ml em tubo com EDTA

transportar sob refrigerao


(2 a 8C)

cepa semeada em meio de cultura


agar Sabouraud
cepa de levedura isolada

NA

incubar a cepa de levedura isolada


entre 25 a 30C por 48 horas
enviar temperatura ambiente

Manual

Seo: 03

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

at 5 dias aps a
coleta, desde que a
amostra centrifugada
seja mantida sob
refrigerao
(2 a 8C)

Prazo
mximo de
liberao do
exame

09 dias

para perodos
maiores fracionar
soro e congelar
(-20C)

at 72 horas aps a
coleta, sob
refrigerao (2 a 8C)

imediatamente aps
a incubao (repique
de 24 a 48h)

Sem previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia

22 dias

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

Exame/
metodologia

Amostra biolgica

Perodo ideal
da coleta

Microscopia
MALRIA

MANIPULADOR
DE ALIMENTOS,
pesquisa de
portador
Somente em caso
de surtos de
infeco alimentar

Hemoparasitolgico
para pesquisa
de Plasmodium
spp
Cultura
(p/ S. aureus)

sangue total

na fase aguda, a
partir do 1 dia do
incio dos sintomas

secreo de nasofaringe

quando solicitado
pela VE para
esclarecimento de
surto

swab fecal ou swab retal

antes do uso de
antibitico

CPIA NO
CONTROLADA

MONONUCLEOSE

Exame realizado
em laboratrio
de referencia

sangue (soro)

na suspeita clnica

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

Prazo
mximo de
liberao do
exame

5 ml em tubo com anticoagulante


EDTA
transportar sob refrigerao
(2 a 8C)

swab em meio de transporte Amies


com carvo
manter e enviar temperatura
ambiente
2 a 4 g em frasco coletor rgido de
boca larga e tampa rosquevel

fezes in natura
Cultura de
fezes
(coprocultura)

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte

Manual

Seo: 03

manter e enviar temperatura


ambiente
swab em meio de transporte CaryBlair
manter e enviar temperatura
ambiente
coletar sangue em tubo sem
anticoagulante com gel separador
(tampa amarela)
aguardar 30 minutos a temperatura
ambiente e aps centrifugar para
separao do soro: 3000 rpm 10
minutos
enviar no tubo original na posio
vertical ou fracionar soro para outro
tubo
transportar sob refrigerao (2 a 8C)

imediatamente

04 dias

at 48h aps a coleta

09 dias

at 2 hora aps a
coleta
12 dias
at 72 h aps a
coleta

at 5 dias aps a
coleta, desde que a
amostra centrifugada
seja mantida sob
refrigerao
( 2 a 8C)
para perodos
maiores fracionar
soro e congelar
(- 20C)

Sem previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

Exame/
metodologia

Microscopia
aps colorao
pelo mtodo de
Gram

Amostra biolgica

Perodo ideal
da coleta

lquor

esfregao em lmina, do lquor


centrifugado recm puncionado (at
2 horas da coleta)
acondicionar em porta-lmina

CPIA NO
CONTROLADA

lquor

MENINGITE
BACTERIANA

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte

antes do uso de
antibitico

sangue em meio de cultura lquido


caldo TSB ou BHI
1 ml no frasco peditrico ou 5 ml no
frasco de adulto
incubar o meio lquido a 352C por
18 a 24 horas logo aps a coleta
transportar temperatura ambiente
Pesquisa de
antgenos
bacterianos
PCR RT

lquor e sangue (soro)

NA

Prazo
mximo de
liberao do
exame

at 48 horas aps a
coleta (acompanha o
kit de meningite)

at 48 horas aps a
coleta, quando
incubarr o meio de agar chocolate
incubado a 352C
semeado a 352C por 18 a 24
por 24 h no local da
horas logo aps a coleta
coleta. Encaminhar
transportar o meio de agar chocolate imediatamente aps
temperatura ambiente
esse perodo
manter e enviar temperatura
ambiente

sangue

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

manter e transportar temperatura


ambiente
gotejar 5 a 10 gotas de lquor no
meio de agar chocolate inclinado

somente lquor in natura (3 a 5 ml)

Cultura

Manual

Seo: 03

3 a 5 ml de lquor e soro em frascos


estreis
manter congelado (-20C) e
transportar sob refrigerao
(2 a 8C)

at 2 horas aps a
coleta
at 30 minutos OU
at 48 horas aps a
coleta, quando
incubado a 352C
por 24 h no local da
coleta. Encaminhar
imediatamente aps
esse perodo.
Informar esse dado
na requisio
at 48 horas aps a
coleta (acompanha o
kit de meningite)

12 dias

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Requisito: 7.5

Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

Exame/
metodologia

Microscopia:
exame direto

MICOSES
SUPERFICIAIS

Amostra biolgica

Perodo ideal
da coleta

em placa de Petri estril, placas


descartveis de coleta ou em sacos
plsticos pequenos e nunca
utilizados

pele, couro cabeludo,


unha, cabelo, plo e,
mucosa oral

Microscopia
aps colorao
pelos mtodos
de Giemsa e/ou
Grocott

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte

manter e transportar temperatura


ambiente

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

30 dias
amostra em frasco estril ou swab
umedecido em salina estril
manter e transportar temperatura
ambiente

secreo de ouvido, olho,


pus, abscesso, leso de
nariz e seios paranasais
e mucosa de orofaringe

Prazo
mximo de
liberao do
exame

a amostra
permanece vivel por
muito tempo

antes do uso de
antifngicos

Cultura

Manual

Seo: 03

CPIA NO
CONTROLADA

at 24 horas aps a
coleta

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Requisito: 7.5

Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

Exame/
metodologia

Amostra biolgica

Perodo ideal
da coleta

escarro

Microscopia:
exame direto

MICOSES
SISTMICAS

Microscopia
aps colorao
pelos mtodos
de Giemsa e/ou
Grocott
Cultura
Imunodifuso
dupla (IDD)
Pesquisa de
antgenos
(prova de
aglutinao em
ltex)

em pote de boca larga, transparente,


estril, descartvel, com tampa
rosquevel
CPIA NO
CONTROLADA

tecido obtido por bipsia,


necropsia e pea
operatria
lquor, lavado ou aspirado
brnquico, lavado
gstrico, lquidos
corporais (pleural,
abdominal, sinovial)
aspirado de medula
ssea

sangue
(2 a 3 amostras com
intervalo de 15 a 20
minutos entre as coletas)

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte

manter e transportar sob refrigerao


(2 a 8C)
em frasco estril com salina
(no utilizar formol)
manter e transportar temperatura
ambiente

antes do uso de
antifngicos

em frasco estril contendo 0,5 ml de


heparina diluda 1:1000
manter e transportar temperatura
ambiente
sangue em meio de cultura lquido
caldo TSB ou BHI
1 ml no frasco peditrico ou 5 ml no
frasco de adulto
transportar temperatura ambiente

5 ml em tubo seco
sangue (soro)

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

manter e enviar sob refrigerao


(2 a 8C)

Prazo
mximo de
liberao do
exame

at 24 horas aps a
coleta

at 24 horas aps a
coleta

30 dias

em frasco estril
manter e transportar temperatura
ambiente

Manual

Seo: 03

at 24 horas aps a
coleta

at 24 horas aps a
coleta
at 30 minutos aps
a coleta
ou
48 horas aps a
coleta quando
incubado a 35C2C
por 24 h no local da
coleta
at 48 horas aps a
coleta

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

OFTALMIA
GONOCCICA

PARALISIA
FLCIDA AGUDA
PFA

Exame/
metodologia

Cultura
p/ pesquisa de
N.gonorrhoeae

Exame realizado
em laboratrio
de referencia

Amostra biolgica

secreo da conjuntiva

Perodo ideal
da coleta

na suspeita clnica,
antes do uso de
antibitico
at 14 dias aps
incio da deficincia
motora

fezes in natura

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte
swab alginatado em meio de
transporte Amies com carvo
manter e transportar temperatura
ambiente
4 a 8 g de fezes em frasco coletor
rgido de boca larga e tampa
rosquevel.
manter e enviar sob refrigerao
(2 a 8C)
frasco coletor estril rgido de boca
larga e tampa rosquevel

lavado brnquico, lavado


bronco-alveolar, escarro
PNEUMONIA
BACTERIANA

antes do uso de
antibitico

Cultura

sangue total

manter temperatura ambiente


(17 a 27C) ou sob refrigerao
(2 a 8C) conforme tempo de
armazenamento
sangue em meio de cultura lquido
caldo BHI ou TSB

CPIA NO
CONTROLADA

1 ml no frasco peditrico ou 5 ml no
frasco de adulto
enviar temperatura ambiente

RAIVA
Pesquisa de ttulos
protetores para
raiva

Titulao de
anticorpos
neutralizantes
Exame realizado
em laboratrio
de referencia

sangue (soro)

10 a 14 dias aps a
ltima dose da
vacinao ou aps a
administrao de
dose de reforo

2,0 ml de soro
manter e enviar sob refrigerao
(2 a 8C)..

Manual

Seo: 03

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

at 8 horas aps a
coleta

at 3 dias aps a
coleta

Prazo
mximo de
liberao do
exame
12 dias
Sem
Previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia

se temperatura
ambiente: at 2 horas
aps a coleta
se conservada sob
refrigerao
at 12 horas aps a
coleta

12 dias

at 30 minutos OU
48 horas aps a
coleta, quando
incubado a 351C
por 18-24h no local
da coleta
at 5 dias aps a
coleta, desde que a
amostra centrifugada
seja mantida sob
refrigerao
( 2 a 8C)

Sem
Previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia

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Requisito: 7.5

Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

Exame/
metodologia
IFD
PCR

RAIVA HUMANA

Exames
realizados em
laboratrio de
referencia

Amostra biolgica

raspado de mucosa
lingual, bipsia de pele
da regio cervical

Perodo ideal
da coleta

na suspeita clnica, o
mais precocemente
possvel

Para isolamento
viral, seguir
mesmas
orientaes do
sarampo

swab estril de raspado de mucosa


lingual acondicionado em tubo
fechado em temperatura ambiente
bipsia de pele da regio cervical
acondicionada em frasco estril,
manter e enviar congelada ( -20C)
coletar sangue em tubo sem
anticoagulante com gel separador
(tampa amarela)

Deteco de
anticorpos
IgM e IgG
RUBOLA

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte

sangue (soro)

na suspeita clnica

CPIA NO
CONTROLADA

aguardar 30 minutos a temperatura


ambiente e aps centrifugar para
separao do soro: 3000 rpm 10
minutos
enviar no tubo original na posio
vertical ou fracionar soro para outro
tubo

Manual

Seo: 03

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

imediatamente aps
a coleta

at 5 dias aps a
coleta, desde que a
amostra centrifugada
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)

Prazo
mximo de
liberao do
exame
Sem
Previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia

07 dias

para perodos
maiores fracionar
soro e congelar
(-20C).

transportar sob refrigerao (2 a 8C)


coletar sangue em tubo sem
anticoagulante com gel separador
(tampa amarela)

SARAMPO

Deteco de
anticorpos IgM e
IgG
ELISA

sangue (soro)

aconselhvel a
coleta no 1 at 28
dia do exantema

aguardar 30 minutos a temperatura


ambiente e aps centrifugar para
separao do soro a 3000 rpm 10
minutos
enviar no tubo original na posio
vertical ou fracionar soro para outro
tubo
transportar sob refrigerao (2 a 8C)

at 5 dias aps a
coleta, desde que a
amostra centrifugada
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)
para perodos
maiores fracionar
soro e congelar
(-20C)

07 dias

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Requisito: 7.5

Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

Exame/
metodologia

Amostra biolgica

Perodo ideal
da coleta

secreo de naso
faringe (SNF)
SARAMPO/
RUBOLA
Isolamento Viral

Exame
encaminhado
para laboratrio
de referncia

swab combinado:
com
2 swab de com
secreo
com clulas da parede
clulas
posterior nasal das 2
narinas e 1 de
orofaringe
urina

Microscopia em
campo escuro
Microscopia aps
colorao pelo
mtodo Fontana Tribondeau
SFILIS

leso genital

at o 5 dia do incio
do exantema.

Testes
Treponmicos
(confirmatrio)
ELISA
FTA Abs

coletar 3 amostras de SNF e colocar


em meio de transporte viral fornecido
pelo Lacen (as 3 amostras coletadas
so colocadas em um nico tubo)
urina preferencialmente a primeira
da manh

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

Prazo
mximo de
liberao do
exame
Sem
Previso

at 24 horas aps a
coleta

Enviado para
Laboratrio
de
Referncia

transportar sob refrigerao (2 a 8C)


NO CONGELAR

CPIA NO
CONTROLADA

na suspeita clnica

coletar da leso e depositar entre


lmina e lamnula
esfregao em lmina de microscopia
nova e desengordurada

imediatamente
(coleta no Lacen)

07 dias

manter e transportar temperatura


ambiente

Teste No
Treponmico
(triagem)
VDRL
RPR

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte

Manual

Seo: 03

coletar sangue em tubo sem


anticoagulante com gel separador
(tampa amarela)
sangue (soro)

na suspeita clnica

aguardar 30 minutos a temperatura


ambiente e aps centrifugar para
separao do soro a 3000 rpm 10
minutos
enviar no tubo original na posio
vertical ou fracionar soro para outro
tubo
transportar sob refrigerao (2 a 8C)

at 5 dias aps a
coleta, desde que a
amostra centrifugada
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)
para perodos
maiores fracionar
soro e congelar
(-20C).

10 dias

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Requisito: 7.5

Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

TRACOMA
Somente em caso
de surtos

Exame/
metodologia

Imuno
Fluorescncia
Direta IFD
para pesquisa
de Chlamydia
trachomatis

Amostra biolgica

raspado da conjuntiva

TOXOPLASMOSE

Teste de
Avidez

quando solicitado
pela Vigilncia
Epidemiolgica p/
esclarecimento de
surto

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte

esfregao em lmina padronizada p/


IFD, embalada em papel alumnio
acondicionada em porta-lmina

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

se conservada
temperatura
ambiente: at 8 horas
aps a coleta

Prazo
mximo de
liberao do
exame

15 dias

se conservada sob
refrigerao
(2 a 8C): at 72
horas aps a coleta

CPIA NO
CONTROLADA

Deteco de
anticorpos IgM e
IgG
- ELISA.
Deteco de
Anticorpos IgM
- ELFA.

Perodo ideal
da coleta

Manual

Seo: 03

coletar sangue em tubo sem


anticoagulante com gel separador
(tampa amarela)
sangue (soro

na suspeita clnica

a critrio clnico, em
caso de gestante
com sorologia IgM
reagente

aguardar 30 minutos a temperatura


ambiente e aps centrifugar para
separao do soro: 3000 rpm 10
minutos
enviar no tubo original na posio
vertical ou fracionar soro para outro
tubo
transportar sob refrigerao (2 a 8C)

at 5 dias aps a
coleta, desde que a
amostra centrifugada
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)

15 dias

para perodos
maiores fracionar
soro e congelar
(-20C)
15 dias

ANEXO A
Laboratrio Central de Sade Pblica LACEN/SC
Cdigo do Documento

Edio/Reviso
02/00

DOC MCT 01 - 01

Arquivo eletrnico
MCT 01.pdf

Pgina

26/28

Requisito: 7.5

Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

Exame/
metodologia

Amostra biolgica

escarro

CPIA NO
CONTROLADA

Pesquisa de
BAAR
(Baciloscopia)

TUBERCULOSE

5 a 10 ml em frasco rgido,
transparente, de boca larga, tampa
rosquevel, descartvel

manter e transportar sob


refrigerao (2 a 8C)

aspirado brnquico,
lavado brnquico,
escovado brnquico,
lavado bronco-alveolar

em frasco estril

manter e transportar sob


refrigerao (2 a 8C)

lquor,lquido pleural,
asctico, sinovial,
pericrdico, peritoneal

em frasco estril

manter e transportar temperatura


ambiente e ao abrigo da luz

40 ml em pote rgido, estril, de


boca larga, tampa rosquevel,
descartvel

transportar sob refrigerao


(2 a 8C)

Cultura
lavado gstrico
(paciente deve estar em
jejum de 8 a 10 horas)

Teste de
Sensibilidade

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte

Perodo ideal
da coleta

NA

40 ml em pote rgido, estril, de


boca larga, tampa rosquevel,
descartvel

transportar sob refrigerao


(2 a 8C)

urina

Manual

Seo: 03

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

at 7 dias aps a
coleta

at 24 horas aps a
coleta

Prazo
mximo de
liberao do
exame

Baciloscopia:
05 dias
Cultura
convencional:
at 65 dias
Cultura
automatizada
at 45 dias
Teste de
sensibilidade
Convencional:
at 50 dias
aps resultado
da cultura

at 4 horas aps a
coleta

Teste de
sensibilidade
automatizado:
at 20 dias
aps resultado
da cultura

ANEXO A
Laboratrio Central de Sade Pblica LACEN/SC
Cdigo do Documento

Edio/Reviso
02/00

DOC MCT 01 - 01

Pgina

Arquivo eletrnico
MCT 01.pdf

27/28

Requisito: 7.5

Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

Exame/
metodologia

Amostra biolgica

sangue, aspirado de
medula ssea

Pesquisa de
BAAR
Baciloscopia

pus ou secrees de
cavidades

CPIA NO
CONTROLADA

5 ml em tubo com anticoagulante


SPS ou heparina ou em frasco de
hemocultura

manter e transportar temperatura


ambiente

de cavidade fechada: por puno


frasco estril

de cavidade aberta: com swab


imerso em gua destilada ou
salina

manter e transportar temperatura


ambiente

de cavidade fechada: por puno


frasco estril

de cavidade aberta: com swab


imerso em gua destilada ou
salina

manter e transportar temperatura


ambiente

tubo com meio de cultura, vedado


com tampa rosquevel

manter e transportar temperatura


ambiente

Cultura

TUBERCULOSE

NA

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte

Perodo ideal
da coleta

Teste de
Sensibilidade
fragmentos cutneos,
sseos e rgos (bipsia)

cepa para identificao e


teste de sensibilidade

Manual

Seo: 03

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

Prazo
mximo de
liberao do
exame

at 24 horas aps a
coleta
os mesmos
prazos da
pgina
anterior

at 24 horas aps a
coleta

NA

Teste de
sensibilidade
automatizado:
at 20 dias

ANEXO A
Laboratrio Central de Sade Pblica LACEN/SC
Cdigo do Documento

Edio/Reviso
02/00

DOC MCT 01 - 01

Arquivo eletrnico
MCT 01.pdf

Pgina

28/28

Requisito: 7.5

Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Patologia

URETRITE E
CERVICITE NO
GONOCCICA

VAGINITE E
VAGINOSE
BACTERIANA

Exame/
metodologia

Cultura para
Ureaplasma e
Micoplasma
genitais

Microscopia
a fresco e aps
colorao pelo
mtodo de
Gram

Acondicionamento/ volume/
temperatura de
armazenamento e transporte

Perodo ideal
da coleta

raspado uretral e raspado


endocervical

Tempo crtico p/
chegada no Lacen

frasco c/ caldo nutritivo

antes do uso de
antibitico
CPIA NO
CONTROLADA

esfregao em lmina padronizada p/


IFD, embalada em papel alumnio

Prazo
mximo de
liberao do
exame
09 dias

manter e transportar temperatura


ambiente

Imunofluorescncia Direta
IFD para
pesquisa de
Chlamydia
trachomatis

Cultura

NA No se aplica

Amostra biolgica

Manual

Seo: 03

coleta no Lacen
12 dias

acondicionar em porta-lmina
manter e transportar temperatura
ambiente

secreo vaginal

antes do uso de
antibitico

swab estril, em tubo com 1,0 ml


de salina estril para exame
fresco

esfregao em lmina de
microscopia nova (confeccionar o
esfregao no momento da coleta)

swab em meio de transporte de


Amies com carvo

manter e transportar temperatura


ambiente

coleta no Lacen

09 dias

Laboratrio Central de Sade Pblica LACEN/SC


Cdigo do Documento

Edio/Reviso
01/04

FOR RD 4.3 - 03

Arquivo eletrnico
POP RD 4.3.pdf

Pgina

1/1

Controle de alterao de documentos


Codificao: MCT 01

Manual

Seo: 02
Requisito: 4.3

Edio/Reviso: 01/02

Documento: Manual de orientao para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas


Alterado por: Marlei Pickler Debiasi dos Anjos
Rita de Cssia Campos Bertoncini

Data: 15/10/2012

HISTRICO DE MUDANAS
N do Captulo

Todo o
documento

N da Pgina

todas

Sntese da Mudana
Nova edio.
Todo o procedimento foi alterado em funo de atualizaes referentes s
constantes mudanas de procedimentos de coleta, armazenamento e
transporte de amostras biolgicas.
Incluso das amostras enviadas para Laboratrios de Referncia e Apoio

Anexo A

01

Incluso de DOC MCT 01 - 01 onde so ordenadas alfabeticamente as


patologias com informaes de exame realizado, amostra biolgica, perodo
ideal de coleta, acondicionamento, volume, tempo de armazenamento e
transporte, tempo crtico para chegada ao Lacen e prazo mximo para
liberao de exames.

CPIA NO
CONTROLADA

Anlise crtica de documento no alterado


Este documento foi analisado criticamente e no houve necessidade de alteraes, ele
continua vigente.
NO SE APLICA
Data/Assinatura do revisor

O campo de identificao da edio/reviso refere-se ao documento que est sendo revisado.