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UNIVERSIDADE DO EXTREMO SUL CATARINENSE

DISCIPLINA: BIOLOGIA
PROFESSOR: Tiago Moreti

TCNICAS DE MICROSCOPIA

MICROSCOPIA PTICA OU DE LUZ

OCULAR: a lente que fica prxima ao olho do observador e esta no pode ser retirada em
hiptese alguma. Na ocular existe um nmero seguido de um sinal de X, por exemplo, 10 X o
que indica a capacidade de aumento da ocular.
OBJETIVAS: So as lentes que se situam prximo ao objeto que est sendo examinado.
Geralmente em nmero de 4, sendo que cada uma delas representa um aumento diferente.
No REVLVER esto montadas as OBJETIVAS, este pode ser girado 360. Voc sentir um
click cada vez que a objetiva estiver posio correta.
A PLATINA ou MESA o local onde colocamos a lmina com o objeto a ser examinado. Possui
um orifcio central.
As PINAS sobre a MESA prendem a lmina para que esta possa ser deslocada pelo CARRO ou
CHARRIOT, que se localizam abaixo da mesa, representadas por dois parafusos que desloca a
mesa para direita e esquerda e para frente e para trs.
PARAFUSO MACROMTRICO: o primeiro a ser utilizado para uma focalizao mais grosseira.
Aps usamos o PARAFUSO MICROMTRICO, que dar um ajuste mais delicado imagem.

O CONDENSADOR que movimentado pelo macromtrico concentra os raios luminosos em


direo ao objeto focalizado. Quanto maior o aumento utilizado, mais prximo do objeto deve
estar o condensador.

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Abaixo do condensador fica o DIAFRAGMA que capaz de permitir a passagem de maior ou


menor quantidade de raios luminosos. Assim teremos um campo com maior ou menor brilho,
dando contraste ao objeto focalizado.
Abaixo do diafragma encontramos os FILTROS, cujo uso no obrigatrio, mas servem para
diminuir a fadiga do observador.
O INTERRUPTOR DE LUZ est localizado na base do aparelho e deve ser desligado sempre ao
trmino do trabalho.
ANEL DAS DIOPTRIAS: Localizado em uma das oculares ajusta o foco aps ser ajustado com
outra ocular.
Clculo do aumento: Multiplica-se o aumento dado pela ocular, pelo aumento da objetiva
utilizada. Ex: ocular = 10, objetiva utilizada = 40X, temos um aumento de 400X.
1) Numere as indicaes e identifique as partes do microscpio.

Numere as indicaes e identifique as partes do microscpio


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2) FOCALIZAO DE UM OBJETO
Colocar a objetiva de menor aumento em posio de uso (certifique-se que a mesma est
livre de poeiras e gorduras).
Utilizando o macromtrico, abaixar a mesa o suficiente para colocar a lmina, prendendo-a
com as pinas (verificar sempre se est bem limpa, livre de poeira sou gordura e se a
preparao for a fresco certifique-se que no haja excesso de gua).
Subir a platina ao mximo.
Verificar o condensador, quanto maior o aumento mais prximo este deve estar da lmina.
Centralizar o material com o charriot.
Acender a lmpada.
Olhando por fora, aproximar ao mximo a platina da objetiva usando o macromtrico.
Olhar pela ocular e fazer o movimento inverso, ainda com o macromtrico focalizando uma
imagem.
Com o micromtrico, fazer ajustes delicados at conseguir imagem ntida; talvez voc
precise ajustar a intensidade de luz e o contraste.
Com a mo direita no micromtrico e esquerda no charriot v procurando outros campos.
Utilizando o revlver girar para a objetiva de 10X e fazer novamente os ajustes
necessrios.

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3) USO DA OBJETIVA DE IMERSO

Esta objetiva s deve ser utilizada com um leo especial a finalidade deste de proteger a
objetiva de possveis arranhes e de concentrar a luminosidade.
Dar uma observada geral com a objetiva de menor aumento, fazer o mesmo com a
objetiva de 10X.
Com a objetiva de 40X focalizar o campo que deseja ampliar.
Afastar a objetiva da preparao e colocar uma pequena gota de leo especial.
Colocar a objetiva de imerso na posio de uso.
Olhando por fora aproximar ao mximo a objetiva da lmina.
Com os olhos na ocular fazer o movimento inverso at achar o foco.
Percorrer outros campos com o charriot.
PARA FINALIZAR: afastar a objetiva, retirar a preparao e recolocar o papel fino com o
algodo.
S retirar o leo da objetiva se voc tiver certeza de que sabe faz-lo.
4) FINALIZANDO O TRABALHO
Com o macromtrico afastar a platina da preparao.
Retirar a lmina pondo em seu lugar o papel absorvente com o algodo.
Girar o revlver e colocar a objetiva de maior aumento (100X) na posio de uso.
Diminuir ao mximo a intensidade de luz com o boto que controla a iluminao
(potencimetro), est prxima ao interruptor.
Desligar o interruptor.
Desligar da tomada.
MEDIDAS MAIS USADAS NA MICROCOPIA
mm = milmetro

m = micrmetro

nm = nanmetro

1 mm = 1000 m
1 m = 1000 nm

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5) LIMITE DE RESOLUO DE UM SISTEMA PTICO

O olho humano no consegue distinguir objetos menores que 0,1 mm. O microscpio de
luz age como um complemento do olho, permitindo observar objetos menores que 0,1 mm. Nas
objetivas encontramos nmeros gravados: o aumento da lente, sua abertura numrica (AN) e no
caso de lminas de grande aumento a espessura da lamnula a ser utilizada (0,17 mm). A AN
corresponde qualidade da lente e com este valor podemos calcular o limite de resoluo (LR) de
cada objetiva.
O LR de uma objetiva a sua capacidade de distinguir detalhes, ou a menor distncia entre dois
pontos, de tal forma que eles ainda possam ser individualizados.
Quanto menor o LR melhor ser o microscpio. O LR das melhores lentes objetivas no
microscpio de luz atinge 0,2 micrmetros (m).
O LR pode ser calculado a partir da seguinte frmula: LR = H _
AN
ONDE: K = constante = 0,61 m
= o comprimento de onda da luz branca = 0,55 m
AN = a abertura numrica da lente ou: n. sen
A imagem final do microscpio caracteriza-se por ser uma imagem virtual, invertida e
ampliada devido ao seu sistema composto de lentes.
Existem vrios tipos de microscpios de luz, alm do ptico, encontramos o de contraste de fase,
de interferncia de campo, de campo escuro, de polarizao e de fluorescncia.
1) LMINA DA LETRINHA a
Colocar a letrinha a na mesa do microscpio e observar: A posio da mesma e
represent-la com a objetiva de 5X no campo visual abaixo.

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2) OBSERVAO DE FIOS DE CABELO


Pingar uma gota dgua em lmina histolgica.
Retirar algumas fibras de algodo e colocar na gota de gua.
Cubrir com a lamnula, secando os excessos de lquido com papel fino.
Observar nos diversos aumentos e representar com as objetivas de 5X, 10X, e 40X.

Objetiva usada:

Objetiva usada:

Objetiva usada:

Aumento:

Aumento:

Aumento:

3 - OBSERVAO DE LMINAS PRONTAS

Objetiva usada:

Objetiva usada:

Objetiva usada:

Aumento:

Aumento:

Aumento:

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NORMAS PARA PERMANNCIA NO LABORATRIO, DESTINO ADEQUADO AOS


RESDUOS DE SADE
OBJETIVO

- Orientar os acadmicos cursando esta disciplina sobre as normas de permanncia nos


Laboratrios de Microscopia, os procedimentos adotados para a segurana, traje adequado,
material necessrio para as aulas prticas de histologia, entrega de representaes das estruturas
apresentadas e justificativa de ausncia as aulas e maneiras de recuperao das mesmas.
NORMAS DE BIOSSEGURANA
Lavar as mos ao entrar e sair dos laboratrios e aps manipular material infectante.
Usar luvas em todos os procedimentos com risco de exposio a material infectante, no
descartar as luvas em lixeiras das reas administrativas banheiros, etc. No atender ao
telefone com luvas. Desprezar as luvas em local adequado (lixo adequado) e lavar as
mos em seguida.
No fumar, beber, comer, mascar chicletes, guardar alimentos ou aplicar cosmticos
dentro do laboratrio.
Evitar passar as mos nos olhos, na boca ou nariz. No colocar quaisquer objetos na
boca, inclusive pipetas.
Jalecos devem ter uso restrito ao laboratrio, e estes devem ter mangas compridas.
O uso de calas compridas e calado fechado so mais adequados por conferirem maior
proteo.
Cabelos longos devem ser amarrados de forma a no interferirem com reagentes e
equipamento.
Usar culos de segurana, visores ou outros equipamentos de proteo, sempre que
houver risco de espirrar material infectante ou de contuso com algum objeto.
Nunca reencapar as agulhas utilizadas.
Em qualquer local onde tenha derramado acidentalmente sangue ou fluidos corporais,
cubrir, inicialmente com papel toalha para minimizar a possvel formao de aerossis e
absorver o excesso de lquido, embeba com anti-sptico, esperar alguns minutos, jogar o
papel toalha no lixo biolgico e limpar a superfcie atingida vigorosamente com gaze ou
outro material e anti-sptico.
Material contaminado e instrumentos perfuro cortantes devem ser descartados
separadamente nos locais sinalizados adequadamente.

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Manter o laboratrio limpo, organizado e livre de materiais no pertinentes ao trabalho ali


desempenhado.
No permitir a entrada de pessoas que desconheam riscos potenciais de exposio,
crianas ou animais. Manter as portas do laboratrio fechadas durante o trabalho.
Na ocorrncia de qualquer acidente o professor deve ser imediatamente comunicado.
Antes de utilizar um reagente, leia com ateno o rtulo do frasco. No utilizar reativos que
no estejam devidamente identificados.
Nunca cheirar diretamente uma substncia.
Produtos qumicos que exalam vapores, cheiros fortes, txicos e volteis devem ser
manipulados na Cabine de Segurana Qumica.
Ao trmino do trabalho deixar as mesas em ordem e as banquetas no local adequado.
Ao aquecer um tubo de ensaio no virar a boca do mesmo para si ou seus colegas.
Peas de vidro quente tem a mesma aparncia de vidro frio e estes devem ser aquecidos
com a pina de madeira.
No misturar substncias ao acaso.
Cada reagente deve ter uma pipeta ou conta gotas de uso exclusivo a fim de no ocorrer
contaminao dos mesmos.
Antes de iniciar uma atividade prtica ler com ateno os procedimentos no roteiro
fornecido.
Trabalhar com mtodo, ateno e calma.
GERENCIAMENTO DOS RESDUOS DE SADE
CONAMA - Resoluo Da Diretoria Colegiada
RDC N 358, de 29 de abril de 2005
Dispe sobre o tratamento e a disposio final dos resduos do os servios de sade e d outras
providncias:
Art. 1: Esta resoluo aplica-se a todos os servios relacionados com o atendimento sade
humana ou animal, inclusive os servios de assistncia domiciliar e de trabalhos de campo;
laboratrios analticos de produtos para a sade; necrotrios, funerrias e servios onde se
realizam atividades de embalsamamento (tanatopraxia e somatoconservao); servios de
medicina legal; drogarias e farmcias inclusive as de manipulao; estabelecimentos de ensino e
pesquisa na rea de sade; centros de controle de zoonoses; distribuidores de produtos
farmacuticos; importadores, distribuidores e produtores de materiais e controle para diagnstico
in vitro; unidades mveis de atendimento sade.

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Art. 3: Cabe aos geradores de servios de sade e ao responsvel legal, referidos no art. 1
desta Resoluo, o gerenciamento dos servios deste desde a gerao at a disposio final, de
forma a atender os requisitos ambientais e de sade pblica e sade ocupacional, sem prejuzo
de responsabilidade solidria a todos aqueles, pessoas fsicas e jurdicas que, direta ou
indiretamente, causem ou possam causar degradao ambiental, Em especial os transportadores
e operadores das instalaes de tratamento e disposio final, nos termos da Lei n 6.938, de 31
de agosto de 1981.
Art. 4: Os geradores de servio de sade constantes do art. 1 desta Resoluo, em operao ou
a serem implantados, devem elaborar ou implantar o Plano de Gerenciamento de Resduos de
Servio de Sade - PGRSS, de acordo com a legislao vigente, especialmente as normas de
vigilncia sanitria.
Art. 6: Os geradores de servio de sade devero apresentar aos rgos competentes, at o dia
31 de maro de cada ano, declarao, referente ao ano civil anterior, subscrita pelo administrador
principal da empresa e pelo responsvel tcnico devidamente habilitado, acompanhada da
respectiva ART, relatando o cumprimento das exigncias previstas nesta Resoluo.
ANVISA - Resoluo da Diretoria Colegiada RDC N 306, DE 7 de Dezembro de 2004
Dispe sobre o Regulamento Tcnico para gerenciamento de resduos de servios de sade.

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