REPBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA

UNIVERSIDAD DEL ZULIA

FACULTAD EXPERIMENTAL DE CIENCIAS
DIVISIN DE ESTUDIOS BSICOS SECTORIALES
DEPARTAMENTO DE QUMICA
QUMICA ANALTICA II

ESPECTROMETRIA DE MASAS Y RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR

Br. Crisbeth Paola Molina.

C.I. v-22.658.745.

Maracaibo, julio 2014.

INDICE

Espectrometra Resonancia Magntica Nuclear.

o
o
o
o
o
o
o

Fundamentos: diferencias con el resto de la espectrometra.

Instrumentacin.
Parmetros espectrales.
Tipos de RMN Protones 1H y Carbonos 13C.
Anlisis cuantitativo y anlisis cualitativo
Aplicaciones y avances tecnolgicos.
Introduccin a los sistemas RMN bidimensionales.

Espectrometra de masas.
o
o
o
o
o
o

Fundamentos: diferencias con el resto de la espectrometra.

Instrumentacin.
Parmetros espectrales.
Anlisis cuantitativo y anlisis cualitativo.
Introduccin a los sistemas hbridos con EM
Aplicaciones y avances tecnolgicos.

INTRODUCCION
En espectroscopia molecular, lo que interesa es la transferencia de energa de un fotn a una
molcula, pero la idea es la misma. Considere, por ejemplo, dos estados de energa de una
molcula designados como E1 y E2. La diferencia de energa entre ellos es E2-E1, o E. En la
espectroscopia por resonancia magntica nuclear (RMN) stos son dos estados de espn
diferentes de un ncleo atmico; en la espectroscopia de infrarrojo (IR), son dos estados de
energa vibratoria diferentes; en la espectroscopia de ultravioleta-visible (UV-VIS), son dos
estados electrnicos diferentes. A diferencia de la energa cintica, la cual es continua, lo que
significa que todos los valores de la energa cintica estn disponibles para una molcula, slo
ciertas energas son posibles para los estados electrnicos, vibratorios y de espn nuclear. Se
dice que estos estados de energa estn cuantizados. Las molculas se encuentran ms en el
estado de energa menor E1 que en el estado de energa mayor E2. La excitacin de una
molcula de un estado menor a uno mayor requiere la adicin de un incremento de energa
igual a E. Por tanto, cuando la radiacin electromagntica incide sobre una molcula, slo la
frecuencia cuya energa correspondiente es igual a E es absorbida. Todas las otras
frecuencias se transmiten.
Los espectrmetros estn diseados para medir la absorcin de radiacin electromagntica por
una muestra. Con esto como antecedente, ahora se expondrn las tcnicas espectroscpicas
de manera individual. Las espectroscopias de RMN, IR y UV-VIS proporcionan informacin
complementaria, y todas son tiles. Entre ellas, la de RMN proporciona la informacin que se
relaciona en forma ms directa con la estructura molecular, y es la que se examinar primero.

ESPECTROMETRA RESONANCIA MAGNTICA NUCLEAR.

Fundamentos: diferencias con el resto de la espectrometra.

La espectroscopia de resonancia magntica nuclear (RMN) se basa en la medida de la
absorcin de la radiacin electromagntica en la regin de las radiofrecuencias
aproximadamente de 4 a 900MHz. En contraste con la absorcin ultravioleta, visible e
infrarroja, en el proceso de absorcin estn implicados los ncleos de los tomos en vez
de los electrones exteriores. Adems, es necesario colocar el analito en un intenso
campo magntico, con el fin de que aparezcan los estados de energa de los ncleos que
hagan posible la absorcin.
Instrumentacin.
Los espectrmetros de RMN que se comercializan son de dos tipos: espectrmetro de
lneas anchas y espectrmetro de alta resolucin. Los instrumentos de lneas anchas
tienen imanes con intensidades de unas pocas decimas de tesla y son considerablemente
mas simples y mas baratos que los instrumentos de alta resolucin. Los instrumento de
alta resolucin emplean imanes con insensidades que ocilan entre 1,4 y 14 T, que
corresponden a frecuencias de protn de 60 a 1.000MHz. En la figura siguiente se
muestra un diagrama de bloques simplificado que muestra los componentes de un
espectromtro caracterstico de RMN con transformada de Fourier. El componente
central del instrumento es un iman de gran estabilidad en el que se coloca la muestra
que se rodea por una bobina transmisora/receptora.
La radiacin de radio frecuencia se produce mediante un cristal sintetizador de
frecuencias controladas con una frecuencia de salida Vc. Esta seal pasa por un
interruptor pulsador y un amplificador de potencia, lo que origina un impulso de
radiacin de radiofrecuencia intensa y reproducible en la bobina transmisora. La
radiacin de RF resultante incide en la muestra que est contenida en el interior de la
bobina. La duracin, amplitud, forma y fase del impulso, son seleccionados por el
operador, se introducen en la consola y se controlan mediante un ordenador. En la figura
mostrada se muestra un impulso de 5 s de duracin.
La seal de FID que resulta es recogida por la misma bobina que ahora sirve como
receptor. La seal es amplificada y se transmite a un detector sensible a la fase. Los
circuitos del detector determinan la diferencia entre las seales nucleares Vn y la seal
de salida del cristal oscilador Vc, lo que origina la seal de dominio del tiempo de baja
frecuencia que se muestra en la parte derecha de la figura. Esta seal se digitaliza y se
almacena en un ordenador para realizar su anlisis mediante el programa de
transformada de Fourier y otros software de anlisis de datos. La seal de salida tras
este tratamiento se representa, obtenindose un espectro de dominio de la frecuencia.

Imanes

El componente principal de los instrumentos de RMN tanto de onda continua como de

transformada de Fourier es el imn. La sensibilidad y la resolucin de ambos tipos de
espectrmetro dependen crticamente de la intensidad y calidad de sus imanes (vase
ejemplo 19-2 y fig. 19-13). Puesto que tanto la sensibilidad como la resolucin
aumentan con el aumento de la intensidad del campo, resulta ventajoso operar a la
mayor intensidad de campo posible. Adems, el campo debe ser muy homogneo y
reproducible. En los espectrmetros de RMN se han utilizado tres tipos de imanes:
imanes permanentes, electroimanes convencionales y solenoides superconductores.
Actualmente, los electroimanes convencionales rara vez se incorporan a los
instrumentos de RMN. Los imanes permanentes son muy sensibles a la temperatura, y
como consecuencia requieren un buen aislamiento y una eficaz termostatizacin.
Debido a los problemas de deriva del campo, los imanes permanentes no son lo ms
adecuados para usarse con perodos prolongados recogida de datos, como los que a
menudo se emplean en los experimentos con transformada de Fourier. En los
instrumentos de alta resolucin ms modernos se utilizan los imanes superconductores.
Estos imanes alcanzan campos de hasta 21 T, que corresponden a una frecuencia de
resonancia protnica de 900 MHz. Para que el solenoide que es un arrollamiento de
alambre de niobio/estao o niobio/titanio se mantenga superconductor, est sumergido
en helio lquido a la temperatura de 4K. El vaso dewar de helio lquido se mantiene
dentro de un vaso dewar externo de nitrgeno lquido. La mayora de los sistemas de
iman superconductor se han de rellenar con nitrgeno lquido cada 10 das y con helio
lquido cada 80 a 130 das. En comparacin con un electroimn, las ventajas de los
solenoides superconductores, adems de sus elevadas intensidades de campo, son su
gran estabilidad, su bajo coste de funcionamiento, su sencillez y su pequeo tamao.
Las especificaciones de funcionamiento del imn de un espectrmetro son muy
rigurosas. El campo generado dentro de la zona de la muestra ha de ser homogneo y no
debe variar ms de unas pocas partes por milln (x 109) y ha de ser estable en un grado
similar durante el tiempo necesario para recoger los datos de la muestra. Por desgracia,
la estabilidad inherente a la mayora de los imanes, es considerablemente menor que la
que se precisa, y se observan con frecuencia variaciones que pueden llegar a ser una
parte de 107 en una hora. Para compensar tanto la deriva como la falta de homogeneidad
del campo, en los modernos instrumentos de RMN se utilizan distintos recursos.
Sonda de la muestra
Un componente clave de los espectrmetros de RMN es la sonda de la muestra, la cual
tiene mltiples funciones. Mantiene la muestra en una posicin fija dentro del campo
magntico contiene una turbina da aire para rotar la muestra, y aloja la bobina o bobinas
que permiten la excitacin y la deteccin de la seal de RMN. Adems, la sonda por lo
comn contiene otras de control y la otra para los experimentos de desacoplamiento de
banda ancha, desacoplamiento sin resonancia y desacoplamiento de impulsos. Por
ltimo, la mayora de las sondas pueden trabajar a temperatura variable. Las cubetas de
muestras usuales para RMN consisten en un tubo de vidrio de 5mm de dimetro externo

y con capacidad de aproximadamente 0,4ml de lquido. Tambin existen microtubos

para volmenes de muestra pequeos y tubos mayores para aplicaciones especiales.
El detector y el sistema de procesamiento de los datos
En el detector mostrado en la figura 19-21, la seal de radio de alta frecuencia se
convierte primero en una seal de audiofrecuencia que es mucho ms fcil de
digitalizar. La seal del amplificador de radiofrecuencia se puede imaginar como si
estuviera constituida por dos componentes: una seal portadora, que tiene la frecuencia
del oscilador utilizado para producirla, y una seal superpuesta de RMN. La seal del
analito difiere en frecuencia de la portadora en unas pocas partes por milln. Por
ejemplo, los desplazamientos qumicos en un espectro de protn abarcan normalmente
unas 10ppm. As, los datos de RMN de protn generados por un espectrmetro de
200MHz estaran en el intervalo de frecuencias de 200.000.000 a 200.002.000Hz. No
resulta prctico digitalizar seales de frecuencia tan elevadas ni extraer de las seales
digitalizadas las pequeas diferencias atribuible a la muestra; por ello, la frecuencia
portadora de Vc se resta electrnicamente de la seal de frecuencia del analito Vn en el
dominio analgico. En el ejemplo, este proceso conducira a una seal (Vn Vc) que se
encuentra dentro del intervalo de audiofrecuencias de 0 a 2.000 Hz.
Parmetros espectrales.
1- intensidad (area bajo la curva)
La intensidad relativa de una seal en la espectroscopia de RMN protn es proporcional
al nmero de protones que contribuyen a la seal. La curva superpuesta a las seales del
espectro, que se puede observar en la figura anterior, es la llamada curva de integracin.
La altura del escaln permite calcular el nmero de tomos de hidrgeno que dan origen
a cada seal. As, en la figura del espectro anterior se mide una altura para cada escaln
7.0 cm y 1.6 cm. Para calcular el nmero de tomos de hidrgeno que originan cada
seal se procede del siguiente modo
1. Se suman las dos integraciones y se divide por el nmero total de hidrgenos de la
estructura:
7.0 cm + 1.6 cm = 8.6 cm
n de hidrgenos del 1-bromo-2,2-dimetilpropano = 11 H
Por tanto: 11 H = 1.28 H /cm
8.6 cm
2. Para saber el nmero de hidrgenos de cada seal se multiplica su integracin por el
valor anterior
7.0 cm x 1.28 H/cm = 9 H
1.6 cm x 1.28 H/cm = 2 H

As pues, la seal ms intensa se debe a 9 protones (tres metilos de la estructura)

mientras que la menos intensa se debe a tan slo dos protones (metileno).

2- desplazamiento qumico, grupos funcionales en 1H RMN

La variacin de la posicin de la lnea de resonancia con la estructura qumica recibe el
nombre de desplazamiento o corrimiento qumico. En RMN no es practico expresar
estos desplazamientos en frecuencias absolutas o en campos absolutos y se miden sus
valores relativos respecto a un patrn. Patrones utilizados para los espectros de
resonancia magnetica protnica (RMP) son el agua, el benceno o el ciclohexano, todos
los cuales no presentan ms que una sola lnea de resonancia definida.
El patrn mas favorecido actualmente es el tetrametilsilanoSi(CH3 ). Todos los
protones de esta molecula estn en un entorno electrnico idntico, que proporciona un
efecto de pantalla muy intenso. En consecuencia, el tetrametilsilano (TMS) presenta una
sola lnea de resonancia, muy definida, para un campo aplicado muy intenso, mucho
ms que el necesario para los protones de la mayora de los compuestos orgnicos.
Solo en el caso de expresar los corrimientos quimcos en unidades adimensionales,
independientes de los valores del campo y de la frecuencia, pueden obtener respuestas
idnticas los cientficos que trabajan con instrumentos diferentes. Por esta razn, el
desplazamiento qumico se expresa en partes por milln desde un punto de referencia
dado.
3- desdoblamiento de seales
Adems de los desplazamientos qumicos, los espectros de RMN de alta resolucin
presentan otros caracteres que se originan en las interacciones transmitidas por los
electrones presentes entre ncleos adyacentes no equivalentes. Cada protn se puede
considerar como un iman en rotacin, el cual, en un campo aplicado se orienta en el
mismo sentido del campo, o en sentido contrario. El spin nuclear orientado da al
electron adyacente una orientacin opuesta.
Este efecto orientador se transmite a lo largo de la cadena y alcanza en ultimo termino a
un segundo nucleo. Las orientaciones de los spines estn caracterizadas por energias
diferentes y as, aquellas provocan el desdoblamiento en multipletes de los picos
creados por desplazamiento qumico. Este efecto recibe el nombre de desdoblamiento
spin-spin o de acoplamiento spin-spin. El acoplamiento ocurre a lo largo de los enlaces
gracias a un ligero desapareamiento transitorio de los electrones enlazantes.
La propagacin a lo largo de los enlaces multiples es mas intensa que a lo largo de los
simples, y el efecto de acoplamiento decrece rpidamente al aumentar el numero de
enlaces que intervienen. Los componentes de un multiplete estn separados entre si por
una constante de acoplamiento J. este efecto goza de la propiedad reciproca y si el
nucleo X desdobla el pico debido al ncleo Y, tambin Y desdobla el de X, siendo
idntico el valor J para ambos desdoblamientos.
4- tiempos de relajacin
El conjunto de procesos por los que la magnetizacin nuclear recupera el equilibrio tras
un pulso de un campo magntico externo. La aplicacin de un campo magntico fijo a
lo largo de un eje para dar una direccin estable a la magnetizacin, y de una serie de

pulsos de campo perpendiculares para rotar la magnetizacin y a continuacin dejar que

vuelva a relajarse son la base de estas tcnicas. Por tanto, estos procesos de relajacin
son de enorme importancia prctica para el diseo y comprensin de experimentos en
RMN e IRM; por otro lado tambin tienen implicaciones en estudios fundamentales
sobre coherencia cuntica, computacin cuntica e imanes moleculares.
Fundamentalmente, se considera la evolucin de las magnetizaciones en dos sentidos
independientes, ambos aproximados por un decremento exponencial y caracterizados
por tiempos caractersticos, anlogos a los tiempos de vida medios:

Relajacin longitudinal: la componente del vector de magnetizacin M que es

paralela al campo magntico principal B0 es llamada magnetizacin longitudinal (Mz).
El conjunto de procesos mediante los que se recupera a la magnetizacin en equilibrio
trmico M0, por ejemplo tras un giro de 180 en el que cambia de signo, es llamado
relajacin longitudinal o relajacin espn-red, y se caracteriza por una constante de
tiempo T1.

En un medio ideal donde la conservacin del momento angular se satisface en forma

estricta para los ncleos observados, T1 no existira. Cuando se altera la magnetizacin
de un ncleo por efecto de un pulso experimental, el mismo debe mantener su
precesin, de manera que la mayor parte de la magnetizacin en desequilibrio no puede
equilibrarse. Sin embargo, en un sistema real, se produce una transferencia de spin entre
los ncleos observados y el medio. Esto permite que se produzcan transiciones
"prohibidas", y "relajacin" desde un estado "excitado" a uno de equilibrio.
T1 es por definicin, la componente de la relajacin que ocurre en la direccin del
campo magntico ambiente. Esto por lo general sucede por interacciones entre los
ncleos de inters y los ncleos no excitados en el medio, como tambin con campos
elctricos en el medio (denominado en forma genrica como la 'red'). Por lo tanto, T1 es
llamado la relajacin de la "red de spin".
T1 se mide como el tiempo requerido para que el vector de magnetizacin M recupere
un valor igual al 63% de su magnitud inicial. Su valor vara segn la densidad de campo
magntico B.
Relajacin transversal: la componente del vector de magnetizacin M que es
perpendicular al campo magntico principal B0 es llamada magnetizacin transversal
(Mxy, MT, o ). El conjunto de procesos mediante los que decae hasta prcticamente
cero, por ejemplo tras un giro de 90 en el que su valor se hace mximo, es llamado
relajacin transversal o relajacin espn-espn, y se caracteriza por una constante de
tiempo T2.

En un sistema ideal, T2 tampoco existira. Sin embargo, en sistemas reales, existe una
transferencia de spin entre los ncleos excitados que dispersa la magnetizacin que no
se encuentra en equilibrio.

Por definicin T2, es la componente 'verdadera' de relajacin (vase T2*) hacia las
condiciones de equilibrio, perpendicular al campo magntico ambiente. Por ello, la
relajacin est dominada por interacciones entre los ncleos spinning que ya se
encuentran excitados. Por dicha razn, la relajacin T2 es llamada relajacin
"transversal" o "spin-spin".
Dado que los procesos T2 siguen un decaimiento exponencial, la cantidad T2 se define
como el tiempo requerido para que la magnetizacin transversal del vector alcance el
37% de su magnitud original despus de su excitacin inicial. A diferencia de T1, T2 es
mucho menos susceptible a variaciones en la intensidad del campo B.

5- espectros bidimensionales
Un experimento multipulso contiene etapas de preparacin, evolucin y deteccin. Los
espectros que se obtiene en estos experimentos dependen de la naturaleza de la
preparacin y de la longitud del periodo de evolucin. Lo que ocurre durante el perodo
de evolucin no es detectado directamente, pero puede estimarse realizando mltiples
experimentos con periodos de evolucin de diferente duracin. De esta forma puede
obtenerse informacin sobre dos conjuntos separados de parmetros espectrales: Aquel
que influye sobre la magnetizacin durante el periodo de evolucin y el que acta
durante la adquisicin propiamente dicha. En RMN-2D se utiliza una segunda
transfomada de Fourier para convertir la dependencia temporal durante la evolucin en
una segunda frecuencia, lo que permite disear experimentos de diversa ndole, muy
ricos en informacin.
La idea original sobre RMN-Bidimensional (RMN-2D) se debe a Jeener (1971),
aunque fue llevada a la prctica por Ernst y colaboradores en 1976. La RMN-2D
corresponde a la generacin de espectros de RMN con dos frecuencias como variables
independientes. Estos espectros RMN-2D se generan registrando FID (t2) al final de
una secuencia de pulsos con variacin sistemtica de otro parmetro, ms comnmente
el tiempo de evolucin t1
Los experimentos de ms de dos dimensiones (RMN-3D y -4D) se generan
introduciendo tiempos de evolucin adicionales y se aplican principalmente en el campo
de las biomolculas, donde la complejidad estructural y la superposicin espectral las
hacen necesarias. Entre un par de pulsos. Los FIDs sucesivos se adquieren por
incremento de los tiempos de evolucin y se almacenan como filas en una matriz de
datos, tal como se muestra en la Figura 5.121, donde se comparan las tcnicas 1D y 2D.
El espectro 2D se obtiene por una doble transformacin de Fourier (2D-TF). Esta doble
transformacin consiste en TF unidimensionales a todas las filas y columnas de la
matriz de datos. Una 2D-TF conduce al espectro 2D que muestran picos mezclas de
componentes de absorcin y dispersin que pueden muchas veces corregirse por ciclado
de fases y manipulacin de los datos, resultando en espectros con fases absortivas puras.
Dependiendo de la secuencia de pulsos, se obtienen correlaciones muy tiles entre
diferentes picos de los espectros 1D o se simplifican espectros 1D muy superpuestos por
dispersin en las nuevas dimensiones.

Tipos de RMN Protones 1H y Carbonos 13C.

RMN Protones 1H: Apantallamiento o proteccin magntica por los electrones.
Hasta ahora se ha descrito el concepto de resonancia de un ncleo aislado dentro de un
campo magntico, pero en realidad los ncleos, como pueden ser los protones o los
carbonos que forman las molculas orgnicas, no se encuentran aislados sino que estn
rodeados de electrones que los protegen parcialmente del campo magntico externo al
que se ven sometidos. Los electrones se mueven generando un pequeo campo
magntico inducido que se opone al campo magntico externo.
En cualquier molcula la nube electrnica que existe alrededor de cada ncleo acta
como una corriente elctrica en movimiento que, como respuesta al campo magntico
externo, genera una pequea corriente inducida que se opone a dicho campo. El
resultado de este hecho es que el campo magntico que realmente llega al ncleo es ms
dbil que el campo externo, por tanto, se dice que el ncleo est protegido o
apantallado. Este apantallamiento es muy importante desde el punto de vista
experimental ya que el campo magntico efectivo (Hef) que siente un protn dentro de
una molcula es siempre menor que el campo externo, y por lo tanto, para que el ncleo
entre en resonancia dicho campo externo debe ser mayor.
Hef = H0 - Hloc
Si todos los protones (1H) de una molcula orgnica estuvieran apantallados de igual
forma, todos entraran en resonancia con la misma combinacin de frecuencia y campo
magntico. Sin embargo, los protones se hallan dentro de entornos electrnicos
diferentes y, por tanto, se encuentran diferentemente protegidos o apantallados.
Por ejemplo, en el metanol el tomo de oxgeno retira densidad electrnica del entorno
electrnico que rodea al protn del grupo hidroxilo, quedando este tomo de hidrgeno
menos protegido que los protones del grupo metilo. La consecuencia es que el protn
del grupo hidroxilo resuena a un campo magntico menor que los protones
Del grupo metilo.
Por lo general, los efectos de proteccin, o apantallamiento, de las nubes electrnicas
que rodean a cada protn son diferentes, lo que provoca diferentes frecuencias de
emisin. El resultado es un espectro de diversas frecuencias donde cada conjunto de
ncleos especficos da origen a una seal nica de RMN. As pues, un espectro de
RMN es una grfica de la intensidad de seal en funcin de la frecuencia de la
energa electromagntica que liberan los diversos ncleos de una muestra.
Las variaciones en las frecuencias de absorcin de resonancia magntica nuclear,
que tienen lugar debido al distinto apantallamiento de los ncleos, reciben el nombre de
desplazamientos qumicos (ppm).
En la prctica es difcil medir el campo magntico al que un protn absorbe con
suficiente exactitud para distinguir protones individuales ya que las absorciones slo
varan en unas pocas milsimas.

Un mtodo ms exacto para expresar desplazamientos qumicos es determinar el valor

respecto a un compuesto de referencia que se aade a la muestra. La diferencia en la
intensidad del campo magntico necesario para la resonancia de los protones de
la muestra y de los protones de referencia se puede medir, ahora s, con mucha
exactitud.

El compuesto de referencia ms comn en resonancia magntica nuclear es el

tetrametilsilano (TMS, (CH3)4Si). Como el silicio es menos electronegativo que el
carbono, los grupos metilo del TMS son relativamente ricos en electrones, es decir, sus
protones estn fuertemente apantallados. Como consecuencia de este apantallamiento,
estos protones absorben a una intensidad de campo mayor que el resto de protones
enlazados al carbono o a otros elementos, de manera que casi todas las seales de
resonancia magntica nuclear aparecen a campos ms bajos (hacia la izquierda de la
seal del TMS). Adems todos los protones del TMS absorben con el mismo
desplazamiento qumico dando una nica absorcin intensa.
Las escala ms comn de desplazamiento qumico es la escala
(delta) en la que la
absorcin del tetrametilsilano (TMS) se define como 0.00 . La mayor parte de los
protones absorben a campos menores que el TMS, de modo que la escala
aumenta
hacia los campos menores. La mayora de las seales de protones (1H) varan entre 0 y
12 , mientras que las seales del 13C varan del 0 a 250 .
Como el desplazamiento qumico de un protn est determinado por su entorno se han
construido tablas con valores representativos:

La tabla anterior muestra que los dobles enlaces y los anillos aromticos
producen grandes efectos desprotectores o desapantallantes en sus protones vinlicos y
aromticos respectivamente. En el caso de los derivados aromticos, el campo
magntico externo induce una corriente en el anillo aromtico que se opone a dicho
campo magntico.
Como resultado, los protones aromticos estn desapantallados y absorben a valores
bajos del campo magntico aplicado, de ah que la mayor parte de los protones
aromticos absorben en el rango de 7-8.
Por otro lado, los protones vinlicos de un alqueno estn desprotegidos o
desapantallados por los electrones del mismo modo que se desapantallan los protones
aromticos. Sin embargo, este efecto no es tan grande en el caso del alqueno, ya
que no existe el anillo tan efectivo de electrones que hay en los derivados del benceno.
Una vez ms, en los alquenos, el movimiento de los electrones genera un campo
magntico inducido que se opone al campo magntico externo en la parte media del
doble enlace. No obstante, los protones vinlicos estn en la periferia de este campo,
donde el campo inducido no se opone sino que refuerza el campo externo. Como

resultado de este efecto desapantallante, la mayor parte de los protones del vinilo
absorben entre 5-6 .
Por otra parte, los protones acetilnicos absorben entre 2.5-3 . Esto es debido a que la
densidad electrnica de un triple enlace forma un cilindro que rodea al enlace C-C, de
manera que el protn acetilnico queda situado a lo largo del eje de dicho campo
inducido quedando, pues, completamente apantallado, de ah que este protn se
encuentre a valores de desplazamiento qumico mucho menores que en el caso de un
protn vinlico.

Espectroscopia de resonancia magntica nuclear de 13C.

La resonancia magntica nuclear de carbono-13 se estudio por primera vez en 1957,
pero no se utiliz ampliamente hasta principios de los aos setenta. La razn de este
retraso fue el tiempo que se necesit para desarrollar instrumentos suficientemente
sensibles que permitieran la detencin de las dbiles seales de RMN del nucleo del
13
C. La baja intensidad de seal se relaciona directamente con poca abundancia
isotpica natural del istopo (1,1%) y la pequea relacin giromagnetica, que es
aproximadamente la cuarta parte de la del protn. Estos factores se combinan para hacer
la RMN de 13C unas 6.000 veces menos sensible que la RMN de protn.
Los desarrollos mas importante en el aumento de la seal de RMN, que condujeron a un
enorme crecimiento de la espectroscopia de resonancia magntica 13C se restringira al
estudio de slidos muy solubles de baja masa molecular, lquidos puros y a compuestos
enriquecidos isotpicamente.
En relacin con la capacidad para dilucidar estructuras organicas y bioqumicas, la
RMN de 13C tienen algunas ventajas sobre la RMN de protn. En primer lugar, la RMN
de 13C proporciona informacin acerca del esqueleto de las molculas mas que de su
periferia. Adems, el intervalo de desplazamiento qumico
Anlisis cuantitativo: La determinacin cuantitativa de un compuesto especfico no
requiere muestras puras del compuesto para la calibracin. El uso de la RMN no se ha
generalizado por el coste de los instrumentos

Anlisis cualitativo: pocas veces basta por si mismo para la identificacin de

compuestos orgnicos. Se emplea junto a otros espectros de masa, infrarrojo y
ultravioleta.
Introduccin a los sistemas RMN bidimensionales.
A travs de sus mtodos multidimensionales la RMN se ha convertido en la tcnica ms
importante para resolucin de estructuras, estudios de dinmica y reacciones de los
biopolmeros en disolucin. Aunque los espectrmetros comerciales actualmente

disponibles incluyen automatizaciones avanzadas que facilitan el uso de un amplio

conjunto de diferentes experimentos y mejoran rpidamente, no es trivial seleccionar el
experimento ms adecuado al problema que queremos resolver y establecer los valores
ptimos de los numerosos parmetros experimentales y de procesamiento de datos. Por
otro lado tampoco es trivial la interpretacin rigurosa de los espectros. Por ello es
ineludible comprender en suficiente profundidad los fundamentos de la moderna RMN
para usarla con la necesaria fiabilidad.
La descripcin de los experimentos de RMN bidimensional mediante un modelo
vectorial es bastante engorrosa y limitada, no pudindose explicar todos los aspectos de
estos mtodos.
Afortunadamente el formalismo de los operadores producto con un diseo preciso de
las rutas de transferencia de coherencia, hoy plenamente desarrollado, proporciona un
marco terico de gran exactitud, simple y con la rigurosidad de la Mecnica Cuntica.
El concepto de espectroscopia de RMN bidimensional fue propuesto por primera vez
por Jean Jeener en una Ampere International SummerSchool que tuvo lugar en Basko
Polje (antigua Yugoslavia) en 1971. Curiosamente la comunicacin de Jeener nunca fue
publicada e incluso su propuesta no fue comprobada experimentalmente hasta 1975.
Los primeros experimentos fueron publicados por Aue, et al. (1976). Andrew E.
Derome
en
su
ampliamente
difundido
libro
Modern
NMR
TechniquesforChemistryResearch introduce la RMN bidimensional describiendo lo
que el autor califica como remarkablysillyexperiment pero idneo para ilustrar
cualitativamente los conceptos bsicos y facilitar la iniciacin a la RMN
multidimensional.
La representacin usualmente adoptada para el anlisis de los espectro bidimensionales
es la de un mapa de contornos en el que los picos estn representados por curvas de
nivel, y el significado de los eje ortogonales del plano dependen del tipo de espectro,
como se ver posteriormente en la figura 1.1 se muestran los elementos esenciales del
caso considerado; el eje horizontal representa la frecuencia F2 (la escala normalmente
va de derecha a izquierda), el eje vertical la frecuencia F1 (la escala normalmente va de
arriba a abajo), con lo cual existe una diagonal (valores de frecuencia idnticos de cada
eje) desde el vrtice superior derecho al inferior izquierdo sobre la que se proyecta el
espectro mono dimensional; en este caso las curvas de contorno del pico estn centradas
sobre la diagonal ( , ). El experimento que acabamos de describir no representa
ninguna aportacin relevante en relacin con un buen espectro mono dimensional; la
causa de su poca utilidad radica en que la frecuencia de precesin de la magnetizacin y
la frecuencia de modula de la FID es la misma; la utilidad de la RMN.2D se pone
claramente de manifiesto cuando los picos corresponden con diferentes frecuencias en
cada eje, se decir cuando aparecen fuera de la diagonal.
En resumen la RMN bidimensional o 2d RMN, comprende una serie relativamente
nueva de tcnicas de multi impulso que hacen posible la interpretacin de espectros
complejos . En los mtodos bidimensionales los datos se adquieren, como en la RMN
de transformada de Fourier ordinaria, como una funcin del tiempo t2. Sin embargo,

antes de obtener la seal de la FID, el sistema es perturbado con un impulso durante un

tiempot1. La transformacin de Fourier de la FID como una funcin de t2 para un t1
fijado, origina un espectro semejante al que se obtiene en un experimento ordinario de
impulso. Este proceso se repite entonces para varios valores de t1, dando as un espectro
bidimensional con respecto a dos variables de frecuencias v1, y v2, o a veces a dos
parmetros de desplazamiento qumico&1 y 62. La naturaleza y el tiempo de los
impulsos que se han empleado en al 2D RMN varan ampliamente, y en algunos casos
se han utilizado mas, para ilustrar las posibilidades del mtodo se describe uno de estos
experimentos.

Aplicaciones y avances tecnolgicos.

La aplicacin fundamental de la espectroscopia de RMN es la determinacin estructural,
ya sea de molculas orgnicas, organometlicas o biolgicas. Para ello es necesario la
realizacin de diferentes tipos de experimentos de los cuales se obtiene una determinada
informacin.
Para la elucidacin estructural de molculas orgnicas y organometlicas los
experimentos ms utilizados son los siguientes:
Espectro monodimensional de 1H: Da informacin del nmero y tipo de hidrgenos
diferentes que hay en la molcula. La posicin en el espectro (desplazamiento qumico)
determina el entorno qumico del ncleo, y por tanto da informacin de grupos
funcionales a los que pertenecen o que estn cerca. La forma de la seal da informacin
de los protones cercanos acoplados escalarmente.
Espectro monodimensional de 13C: Al igual que en 1H el desplazamiento qumico da
informacin de los grupos funcionales. Dependiendo del tipo de experimento realizado
se puede obtener informacin del nmero de hidrgenos unidos a cada carbono.
Espectros bidimensionales homonucleares: Los experimentos COSY y TOCSY dan
informacin de las relaciones entre los protones de la molcula, por acoplamiento
escalar o dipolar (NOESY).
Espectros bidimensionales heteronucleares: Los experimentos HMQC y HSQC
indican qu hidrgenos estn unidos a qu carbonos. El experimento HMBC permite
determinar relaciones entre protones y carbonos a mayor distancia (2 o 3 enlaces).
Experimentos con otros ncleos: Si la molcula posee otros ncleos activos en RMN
es posible su medida a travs de experimentos monodimensionales o bidimensionales
(por deteccin indirecta).
La enorme versatilidad de aproximacin de esta tcnica permite la investigacin de
aspectos tan diversos como la estructura tridimensional y dinmica de macromolculas
biolgicas, el estudio de la anatoma normal y patolgica en seres humanos y modelos
animales, o el seguimiento in vivo de rutas metablicas y su regulacin. No obstante, la

Imagen de Resonancia Magntica (IRM) es la vertiente ms conocida a nivel popular

dada su cada vez mayor implantacin en el diagnstico clnico. Es una tcnica que usa
una radiacin electromagntica no ionizante para obtener imgenes con un excelente
contraste entre tejidos blandos y una elevada resolucin espacial en cualquier direccin
del espacio. En este caso, de entre todos los posibles tomos a utilizar, el hidrgeno es
el de uso ms extendido por diferentes factores. Prcticamente la totalidad de las
imgenes obtenidas en diagnstico son imgenes de 1H, que por otro lado es el ncleo
ms abundante en el cuerpo humano. Dentro de las potenciales aplicaciones de la IRM,
merecen un notable inters todas las encaminadas al diagnstico, pronstico y estudio
de las diferentes neuropatologas, algunas de la cuales forman parte de las enfermedades
de mayor prevalencia y trascendencia en la sociedad actual, como son los tumores
intracraneales, neurodegeneraciones o encefalopatas. Adems, como resultado de los
avances tecnolgicos, las tcnicas de adquisicin rpida de imagen han permitido
abordar reas que tradicionalmente se crean incompatibles con la RM, como estudios
dinmicos, imagen cine, imagen 3D de alta resolucin, angiografa y estudio funcional
del cerebro.
Dentro del campo de la investigacin bsica, el desarrollo de la aproximacin
biomdica de la RMN se ha soportado en algunas ventajas de los mtodos empleados en
la misma comparados con las tcnicas ms clsicas. Las caractersticas inherentes de
esta tcnica, como tiempos de relajacin, valores de desplazamiento qumico y
constantes de acoplamiento, contienen una valiosa informacin del estado fisiolgico o
patolgico de los tejidos y de la operacin in situ de multitud de procesos biolgicos.
Por contrapartida, los mtodos de RMN son menos sensibles que los clsicos mtodos
pticos o radiactivos, con sensibilidades que oscilan entre 0,01 y 1 mM para estudios in
vitro e in vivo respectivamente.
Todas estas caractersticas abren un enorme campo de posibilidades que han conducido
a que tanto la imagen como la espectroscopa de RMN se apliquen cada vez ms en
multitud de reas y lneas de investigacin dentro de casi cualquier rea de la ciencia,
permitiendo el estudio de numerosos aspectos de una manera que no abordable por
ninguna otra tcnica.
ESPECTROMETRA DE MASAS.

Fundamentos: diferencias con la espectrometra molecular (haz de electrones).

La espectrometra de masas est basada en la obtencin de iones a partir de molculas
orgnicas en fase gaseosa; una vez obtenidos estos iones, se separan de acuerdo con su
masa y su carga, y finalmente se detectan por medio de un dispositivo adecuado. Un
espectro de masas ser, en consecuencia, una informacin bidimensional que representa
un parmetro relacionado con la abundancia de los diferentes tipos de iones en funcin
de la relacin masa/carga de cada uno de ellos.

Como ya se ha mencionado, los procesos que tienen lugar en un espectrmetro de

masas, son de naturaleza qumica; en consecuencia, la presencia y abundancia en el
espectro de determinados tipos de iones, identificables a partir de su masa, ser funcin
de la estructura qumica de cada compuesto; la informacin ofrecida por un espectro de
masas es, de alguna forma, comparable a la obtenida mediante una gran cantidad de
reacciones de las utilizadas para la determinacin de estructuras por va qumica, por lo
que la espectrometra de masas puede ofrecer una enorme cantidad de informacin
sobre un compuesto determinado. La espectrometra de masas es una tcnica
instrumental universal y especifica, altamente sensible y que permite la identificacin
inequvoca de una sustancia. El principio de la espectrometra de masas es la produccin
de iones a partir de compuestos neutros y la observacin de la subsiguiente
descomposicin de esos iones. Estos iones descompuestos (fragmentos que tambin
poseen carga) se mueven rpidamente y son clasificados de acuerdo a su relacin m/z
(masa/n de cargas del in).
El espectrmetro de masas no solo clasifica los fragmentos, sino que adems mide la
cantidad de ellos que se forman. Cuando a una molcula se le suministra una
determinada energa la molcula se descompone siguiendo un patrn concreto en el que
se obtienen siempre los mismos fragmentos y en la misma relacin de intensidad. Este
patrn concreto se representa grficamente en el espectro de masas, al que denomina
por esta razn huella digital de la sustancia. De esta forma, el espectro de masas
permite la identificacin inequvoca de las molculas.
Instrumentacin.
Esencialmente, el espectrmetro de masas debe ser capaz de desempear cuatro
funciones:
1) El espectrmetro de masas debe ser capaz de vaporizar substancias de volatilidades
muy diferentes.
2) Una vez volatilizada la muestra, el espectrmetro debe ser capaz de originar iones a
partir de las molculas neutras en fase gaseosa.
3) Una vez generados los iones, el espectrmetro debe ser capaz de separarlos en
funcin de su relacin masa/carga.
4) Una vez separados los iones, el espectrmetro debe ser capaz de detectar los iones
formados y registrar la informacin adecuadamente. Ya que el espectrmetro debe
cumplir estas cuatro funciones, deber constar de cuatro partes ms o menos
independientes:
1.- Fuente de iones.
2.- Analizadores de masas (detectores)
Fuente de iones:

Principalmente, existen dos mtodos para producir la ionizacin de la muestra en estado

gaseoso; la ionizacin por impacto o bombardeo electrnico, que es con mucho el ms
utilizado, y la ionizacin qumica.
1.- Ionizacin por impacto electrnico. En este mtodo, las molculas de muestra son
ionizadas por medio de un haz de electrones de elevada energa. El esquema de esta
fuente de iones se encuentra en la figura 3.

Los electrones utilizados para la ionizacin, proceden de un filamento incandescente

que emite por efecto termoelctrico y son acelerados por medio de una diferencia de
potencial variable.
Figura 3. Fuente de iones de impacto electrnico (entre 5 y 70 V) entre el filamento y la
fuente de iones, con lo que los electrones adquieren energas entre 5 y 70 eV.
Para enfocar los electrones dentro de una trayectoria determinada, se utiliza un campo
magntico dispuesto paralelamente a la direccin en
la que se mueven los electrones, de forma que estos describen una trayectoria helicoidal
hasta llegar a un nodo donde son recogidos.
El haz de molculas procedente del sistema de introduccin de muestras, atraviesa el
haz de electrones de alta energa, y al entrar en colisin con ellos, pueden darse varios
procesos primarios.
1.- Eliminacin de un electrn:
ABC + eABC++ 2 e2.- Eliminacin de dos electrones:
ABC + eABC2+ + 3 e3.- Captacin de un electrn:
ABC + eABC
4.- Disociacin de la molecula:
ABC + eAB++ C+ + eDe entre estos cuatro tipos de procesos primario iones, el ms probable es con mucho el
primero, siendo la posibilidad de que se de cualquiera de los otro tres, entre 1.000 y
10.000 veces menor, de Una vez ionizada, y en su caso fragmentada, la molcula, se
utiliza una placa con carga positiva para repeler los iones y expulsarlos fuera del haz de
electrones. Para sacar a las molculas ionizadas de la fuente de iones, se utiliza un
potencial elctrico muy elevado, entre 1 y 10 kV, que se establece entre el final de la
fuente de iones y una placa situada detrs de ella.El proceso primario de produccin de
iones, lgicamente depender de la energa de los electrones; la energa mnima que
deben llevar stos, se corresponder con el potencial de ionizacin de la molcula,
normalmente entre 7 y 10 eV. Si se representa grficamente la cantidad de iones
generados en funcin de la energa de los electrones (figura 4), se encuentra que la
abundancia inica alcanza un mximo, mantenindose despus prcticamente constante,

de forma que pequeas oscilaciones en la energa no afectan apreciablemente a la

produccin de iones:
La energa comunicada a los electrones, corresponde a la zona en que se encuentra una
mayor abundancia de ion molecular, normalmente de 70 eV (equivalente a 1.600 kcal).
Esta energa de los electrones, es muy superior al potencial de ionizacin de la
molcula, de forma que el ion molecular originado puede estar activado, con un
contenido de energa interna muy superior al que
le correspondera en su estado fundamental. Es de hacer notar que no todos los
impactos van a suministrar exactamente la misma energa a las molculas, de forma que
se obtendr una serie de molculas ionizadas con un amplio abanico de energas, y este
hecho presentar bastante importancia como se ver ms adelante.
Las molculas ionizadas procedentes del proceso primario que tengan un mayor
contenido de energa, se podrn descomponer originando diversos procesos
secundarios:
Incluso a partir de iones procedentes de los procesos secundarios que tengan un elevado
contenido de energa, se podrn originar procesos terciarios.
Es de hacer notar, que al trabajar a un vaco tan elevado, se evita la posibilidad de que
se originen reacciones biomoleculares, de forma que el ion de mayor masa posible, ser
el ion molecular, que al ser detectado, originar en el espectro el llamado "pico
molecular"; este pico molecular, suministrar informacin muy exacta sobre el peso
molecular de la muestra.
El sistema de ionizacin por impacto electrnico, presenta un problema, y es que
dependiendo de la naturaleza de la molcula a estudiar, algunos iones sern ms estables
que otros, existiendo algunos casos en los que el ion molecular no se descompone casi,
mientras que en otros la importancia de los procesos secundarios ser tan grande que
apenas quedar ion molecular. Dado
Que en algunos casos, el pico molecular presenta gran importancia, habr que buscar
mtodos alternativos que permitan obviar este inconveniente. El pico molecular
presenta especial importancia cuando se trabaja en combinacin con la cromatografa de
gases, ya que en este caso el picomolecular por si solo permite en muchas ocasiones
lograr la identificacin del compuesto sin necesidad de ms informacin.
2.- Mtodo de Ionizacin Qumica. En este mtodo, se utiliza como agente ionizante un
ion que va a transferir su carga a la molcula de muestra por medio de una reaccin
bimolecular. La fuente de iones es en esencia igual que la del caso anterior. Para
producir una ionizacin qumica, se introduce metano en la fuente de iones, a una
presin de 1 mm de Hg. En estas condiciones, los electrones ionizan fundamentalmente
a las molculas de metano originndose a continuacin la reaccin bimolecular:

La especie CH5+, ion metonio, ser la que reaccione ahora con las molculas de la
muestra, ionizndolas:
Al ion as originado, con una unidad de masa ms que el ion molecular, se le denomina
ion cuasimolecular. El ion cuasimolecular, se origina casi sin exceso de energa interna,
por lo que no presentar tendencia a descomponerse, y al obtener el espectro de masas,
la seal ms intensa corresponder al pico cuasimolecular.
Los dos mtodos de ionizacin que se han comentado, son con mucho los ms
utilizados; debe mencionarse, no obstante, la existencia de otros mtodos de ionizacin
que se utilizan en ocasiones especiales, tal como puede ser el de muestras de baja
volatilidad. As, pueden mencionarse mtodos como la ionizacin en superficie, en los
que la muestra se vaporiza e ioniza sobre una superficie a elevada temperatura, el
mtodo F.A.B. (FastAtomBombardment) en el que la muestra es ionizada por
bombardeo con iones de elementos ligeros y el mtodo L.A.M.M.A. en el que
vaporizacin e ionizacin se producen por medio de una fuente de radiacin laser, el
mtodo M.A.L.D.I., etc.
Analizadores de masas
A la salida de la fuente de iones, se tiene una mezcla de diversos iones que deben ser
separados para detectarlos de forma individual; para la separacin de estos iones,
existen tambin varios procedimientos posibles. Los analizadores ms utilizados, son el
de campo magntico, el analizador cuadripolar, muy utilizado en equipos combinados
con un cromatografo de gases, y el analizador de trampa de iones.
1.- Analizador Magntico. Una vez que los diversos iones abandonan la cmara de
deionizacin, llevan una cierta velocidad que les ha sido suministrada por el campo
elctrico al que han sido sometidos. La energa cintica de llevan los iones (Ec), sera:

Y en consecuencia su velocidad (v) ser:

Esta velocidad es bastante elevada, del orden de 105ms-1

. Una vez acelerados los iones, se dispone un campo magntico perpendicular al
movimiento de stos; al aplicar este campo magntico(B), se obligar a los iones a
describir una trayectoria circular de radio:

O bien, substituyendo la velocidad en la expresin anterior

Esta ecuacin muestra que cada especie inica caracterizada por una determinada
relacin masa/carga, seguir, para un valor dado del campo magntico, su propia
trayectoria de radio r.
El analizador de masas de sector magntico, cuyo esquema puede verse en la figura 5,
est provisto de una rendija de salida con el fin de aislar los iones cuyas trayectorias
tengan el radio de deflexin necesario que los dirigir hacia el detector.
Dado que para un potencial (V) y un campo magntico (B) fijados, slo una partcula
describir la curva adecuada para ser detectada, se deber variar bien el potencial, bien
la intensidad del campo magntico para poder detectar sucesivamente todas las masas.
Normalmente, en los aparatos comerciales, se efecta un barrido de campo magntico
para obtener de esta forma un barrido de masas. Las constantes de construccin de un
espectrmetro comercial tpico, suelen ser parecidas a las siguientes:
r = 20 cm
Potencial de aceleracin = 4.800 V
Valor de H = 0 - 15.500 Gauss

Siendo la mxima relacin carga/masa que podr medir un aparato con estas
caractersticas, calculada en base a la ecuacin de trayectoria, de 965.
Los espectrmetros de masas de sector magntico, se suelen hacer trabajar a su mximo
potencial de aceleracin para mejorar su sensibilidad y su poder de resolucin, pero si
se precisa medir relaciones masa/carga mayores de la que puede suministrar el aparato
en estas condiciones, se puede recurrir a disminuir el valor del potencial de aceleracin.
El poder de resolucin (R) de un espectrmetro,
esto es, su capacidad de separar partculas de relacin m/e muy prximas, se define
como:
R = m/m
Siendo m la mnima diferencia de masa que debe tener un ion para ser separado de
otro ion de masa m y ser detectados en el espectro de forma claramente diferenciada. Se
considera que los dos picos estarn suficientemente separados cuando el valle existente
entre ambos sea del l0% de la altura de los picos (figura 6). Los analizadores
magnticos comerciales, presentan poderes de resolucin de 1.000 a 2.000 y permiten
medir la masa nominal de un ion, es decir, su masa redondeada al nmero entero ms
prximo, lo que es suficiente para el trabajo de rutina. El analizador de sector
magntico, presenta un grave inconveniente, y es que cuando se precisa realizar barridos

muy rpidos o frecuentes, como es el caso cuando se combina el espectrmetro con un

cromatografo, la variacin del campo magntico no sigue exactamente a las variaciones
de corriente del electroimn, debido a la histresis magntica del ncleo de ste; por
este motivo, para los casos en que es preciso utilizar una gran velocidad de barrido,
muchos espectrmetros utilizan analizadores de masas que no estn basados en la
utilizacin de campos magnticos.
2.- Analizador cuadripolar.
Este tipo de analizador no utiliza campos magnticos para la dispersin, por lo que se
encuentra libre de los problemas derivados de la histresis magntica y, en
consecuencia, es perfectamente utilizable para realizar barridos con gran rapidez.
El analizador cuadripolar est formado por cuatro barras metlicas de secciones
circulares o hiperblicas, exactamente rectas y paralelas y dispuestas con gran precisin
sobre una circunferencia, de tal forma que el haz de iones procedente de la fuente
incida sobre el centro del dispositivo (figura7).
Sobre estas barras, por pares alternos, se aplica un potencial constante V, y un potencial
alterno de radiofrecuencia superpuesto. Ninguno de estos dos campos elctricos tienen
efecto sobre el movimiento longitudinal de los iones, pero la combinacin de los dos
campos origina un movimiento lateral complejo.
En el caso de que las varillas tengan una seccin transversal hiperblica, el potencial del
campo elctrico, () en cualquier punto, vendr definido como una funcin de tiempo
por la ecuacin:

Donde V es el potencial continuo aplicado, y V0 la amplitud del voltaje alterno de

frecuencia aplicado. Las fuerzas que actan lateralmente sobre un ion de carga e en
cada direccin, pueden obtenerse diferenciando con respecto a x e y:

Teniendo ahora en cuenta que la aceleracin en cada sentido est relacionada con la
relacin de fuerza a masa, las respectivas ecuaciones de movimiento, quedarn como:

Estas ecuaciones muestran que los movimientos de los iones dependen de la relacin
carga/masa, existiendo solamente un pequeo rango de frecuencia en el que la
trayectoria de un determinado ion es estable; fuera de ste, la trayectoria de los
restantes iones los lleva a chocar contra cualquier varilla, lo que origina que el
cuadrupolo se comporte como un autntico filtro de masas. El barrido de masas, se
realiza manteniendo fija la frecuencia del potencial alterno y variando simultneamente
los valores de los potenciales V y V0, manteniendo la relacin entre ellos constante.
Como los analizadores cuadrupolares trabajan slo con campos elctricos, los barridos
pueden ser extraordinariamente rpidos (0,01 s); por otra parte, el analizador
cuadrapolar no precisa rendijas para el enfoque del haz con lo que la sensibilidad del
equipo aumenta bastante. Otra de las ventajas que presenta el analizador cuadrupolar, es
que la escala de masas es lineal con respecto a los potenciales utilizados, de forma que
en los espectros obtenidos por este procedimiento pueden realizarse interpolaciones de
masa con facilidad.
La principal desventaja que presenta este tipo de analizador, consiste en su poder de
resolucin, relativamente pequeo, del orden de 500 a 1.000, y su limitado rango de
utilizacin, ya que slo permite la separacin de iones con relaciones m/e menores de
1.000.
3.- Analizador de trampa de iones.
El analizador de trampa de iones ha sido utilizado, hasta el momento, nicamente como
detector cromatogrfico ms que en sistemas reales de acoplamiento cromatografa de
gases/espectrometra de masas para anlisis estructural. Este tipo de analizador es una
modificacin del analizador cuadrupolar, y est basado en la utilizacin de una zona de
confinamiento electromagntica generada por medio de dos seales de radiofrecuencia.
El analizador de trampa de iones (figura 9) est formado por tres electrodos de
superficie hiperblica; de ellos, el electrodo central es anular, mientras que los
electrodos superior e inferior

Forman el cierre de los extremos del anillo. Los tres electrodos forman una cavidad en
la que se producen la ionizacin, la fragmentacin y el anlisis de masas.

Durante el proceso de anlisis de masas, se aplica entre los electrodos superior e inferior
un potencial de radiofrecuencia de 525 kHz (voltaje de modulacin axial); al mismo
tiempo, sobre el electrodo central se aplica otro voltaje de radiofrecuencia de 1,1 MHz y
de amplitud variable entre 0 y 7.500 V.
Estos dos voltajes de radiofrecuencia dan lugar a un campo electromagntico
cuadrupolar tridimensional en el que quedan confinados los iones con una trayectoria
oscilante estable (figura 10), dependiendo el movimiento exacto de cada ion de los
voltajes aplicados y de su relacin m/e. Para detectar los iones, se altera la seal de
radiofrecuencia del electrodo anular, lo que da lugar a la desestabilizacin de la
trayectoria de un ion de concreto que es eyectado de la trampa. Un cambio gradual en
la amplitud del campo de radiofrecuencia, dar lugar a que los iones sean eyectados de
la trampa en orden creciente de su relacin m/e, lo que dar lugar a un espectro de
masas.
El analizador de trampa de iones presenta la ventaja de ofrecer una sensibilidad bastante
ms elevada que las conseguidas utilizando otros analizadores; al mismo tiempo, su
velocidad de barrido es tambin muy alta, por lo que sus pretaciones como detector
cromatogrfico son francamente buenas. Por otro lado, debe tenerse en cuenta que al
existir una concentracin de iones bastante elevada en el interior de la "trampa", es
relativamente frecuente la existencia de reacciones bimoleculares entre los iones, lo que
puede dar lugar a espectros con esquemas de fragmentacin diferentes a los que se
obtienen por medio de los otros tipos de analizadores.
4.- Analizador de tiempo de vuelo.
El analizador de masas de tiempo de vuelo est basado en un concepto muy sencillo, por
lo que los primeros analizadores fueron desarrollados ya en 1948; no obstante, el escaso
conocimiento de todos los factores que influan en la resolucin junto con algunos
defectos en los diseos iniciales, hicieron que estos analizadores fuesen relegados por
los analizadores de tipo cuadrupolo. En un analizador de tiempo de vuelo, los iones
generados en la fuente son acelerados por medio de un pulso de potencial elctrico, lo
que proporciona a todos los iones del paquete una misma energa que corresponder a:

Que se traducir en una velocidad de los iones correspondiente a:

Es decir, la velocidad adquirida por cada ion ser inversamente proporcional a su

relacin m/e. Para una longitud dada de analizador, L, el tiempo que tardar un ion en
atravesarlo, vendr dado por la expresin:

O bien :

Donde k es una constante que recoge los parmetros de diseo del analizador.
El principal problema de los analizadores de tiempo de vuelo, es que el tiempo que
tardan los iones en alcanzar el detector en un analizador tpico, se encuentra en el
entorno de unos pocos microsegundos, lo que exige unos sistemas de deteccin
extremadamente rpidos. En un analizador de tiempo de vuelo tpico (figura 11) la
muestra es vaporizada y sometida durante un periodo de aproximadamente 1 s a un
pulso de electrones que dan lugar la ionizacin; seguidamente, se aplica un potencial de
aceleracin durante un tiempo menor (100 ns) que el utilizado para la generacin de
iones, de forma que todos los iones de la muestra son acelerados de forma casi
simultnea; acto seguido, los iones alcanzan una zona libre de campo, a lo largo de la
cual se mueven a velocidad constante hasta alcanzar el detector.
Por supuesto, los iones no son generados en la fuente en un punto geomtrico, sino en
un volumen de espacio, lo que da lugar a una cierta dispersin en las velocidades que
alcanzan tras la aceleracin que perjudica, consecuentemente, la resolucin del
analizador. El efecto de dispersin de velocidades tiende a compensarse en un punto, de
nominado punto focal primario, y si el detector se sita en este punto, la anchura del
paquete de iones ser la menor posible y el analizador alcanzar su mxima resolucin;
desafortunadamente, en la mayora de los equipos, la distancia a la que se encuentra el
punto focal primario es demasiado corta (del orden de 10 cm) para proporcionar un
tiempo de vuelo suficiente, siendo sta la principal limitacin de la capacidad de
resolucin de este tipo de analizadores. Si se desea aumentar la resolucin, es necesario
utilizar dispositivos de enfoque secundario tales como reflectrones, etc. Los
espectrmetros de tiempo de vuelo ofrecen dos importantes ventajas sobre los restantes
tipos de analizadores: en primer lugar, su tiempo de anlisis es extraordinariamente

corto y, por otra parte y de mayor importancia todava, no existen limitaciones en la

masa de los iones que pueden ser separados, por lo que los espectrometros de tiempo de
vuelo son de amplia utilizacin para el anlisis de substancias de muy elevado peso
molecular. No obstante, esta ltima caracterstica no da lugar a que sean utilizados en
combinacin con un cromatgrafo de gases, ya que las substancias de elevado peso
molecular no son lo suficientemente voltiles, sino fundamentalmente en combinacin
con cromatgrafos de lquidos.
Detectores
Las corrientes de iones que salen del analizador, son de una intensidad pequesima (108a10-14A); estas bajas intensidades de la corriente inica originan problemas a la hora
de realizar la deteccin, que debe ser muy rpida y muy precisa. Existen principalmente
tres tipos de detectores:
1.- Caja de Faraday.
2.- Multiplicador de electrones.
3.- Placa fotogrfica.
La caja o copa de Faraday, consiste en una caja dentro de la cual se tiene una placa,
ligeramente inclinada para evitar la reflexin de iones; al chocar con la placa, los iones
toman de sta electrones para neutralizar su carga, y midiendo la corriente electrnica
necesaria para neutralizar a todos los iones, se puede tener una idea bastante exacta del
nmero de iones que han alcanzado la placa. Este tipo de detector es muy utilizado para
determinaciones cuantitativas, en particular para determinaciones de abundancia
isotpica; presenta la dificultad de que como las corrientes originadas son muy dbiles,
son necesarios aparatos de medida muy sofisticados para poder determinarlas con
exactitud.
El multiplicador de electrones es esencial mente igual a los tubos fotomultiplicadores
utilizados para la deteccin de radiacin. Este tipo de detector, utiliza la energa cintica
de los iones que inciden sobre una placa que tiene su superficie recubierta por xidos
de tierras raras; al chocar los iones contra la placa, sta emite una corriente de electrones
que son acelerados hacia una segunda placa, de la que vuelven a arrancar electrones que
son acelerados hacia una tercera placa y as sucesivamente. En principio, pueden
utilizarse tantas placas como se quiera, aunque generalmente se utilizan entre 10 y 16.
Por medio de este detector, se consiguen amplificaciones de la corriente inica con
factores de multiplicacin de 10 6 o mayores. Este tipo de detector, presenta el
inconveniente de que las corrientes inicial y final no presentan una proporcionalidad
suficientemente buena como para poder ser utilizados en determinaciones cuantitativas
muy exactas. Una variante de este tipo de detectores es la placa de micro canales,
formada por un material emisor de electrones aplicado sobre las paredes de micro tubos
a lo largo de los cuales se establece una diferencia de potencial que acelera los
electrones.. La deteccin fotogrfica, se utiliza en muy pocos equipos y nicamente

cuando es necesaria una altsima sensibilidad o una extraordinaria resolucin; las placas
sobre las que ha incidido el haz de electrones, se procesan por medio de tcnicas
normales de fotografa y su lectura se realiza por medio de un densitmetro.
Parmetros espectrales.
Anlisis cuantitativo:
Las aplicaciones de la espectrometra de masas para el anlisis cuantitativo son de dos
tipos. El primero est relacionado con la determinacin cuantitativa de especies
moleculares o tipo de especies moleculares en muestras orgnicas, biolgicas y
ocasionalmente inorgnicas. El segundo est relacionado con la determinacin de la
concentracin de elementos en muestras inorgnicas y, en menor medida, de muestras
orgnicas y biolgicas.
-

Determinacin cuantitativa de especies moleculares

La espectrometra de masas es utilizada para la determinacin cuantitativa de uno o ms

componentes en sistemas complejos orgnicos (y a veces inorgnicos) tales como los
que existen en las industrias farmacuticas o del petrleo, as como en problemas
medioambientales. Normalmente tales anlisis se llevan a cabo haciendo pasar la
muestra a travs de una columna cromatografa o de electroforesis capilar y
posteriormente por el espectrmetro, con el espectrmetro a un valor adecuado de m/z,
se registra la corriente de iones en funcin del tiempo. Esta tcnica se denomina control
selectivo de iones, en algunos casos se controlan de forma cclica, corrientes de tres o
cuatro veces el valor m/z mediante un cambio rpido de un pico a otro. La
representacin grafica de los datos, llamada cromatograma de masas, consiste en una
serie de picos cromatograficos cada uno de los cuales aparece a un tiempo caracterstico
de uno de los diversos componentes de la muestra que da iones del valor o valores
elegidos de m/z .Generalmente, las reas de los picos son directamente proporcionales
a la concentraciones del componente y por tanto, sirven como parmetro analtico. En
este procedimiento, el espectrmetro de masas acta simplemente como un sofisticado
selector selectivo para un anlisis cromatografico o electrofortico cuantitativo.
-Determinacin de la concentracin de elementos en muestras inorgnicas
En este segundo tipo, las concentraciones del analito se obtienen directamente a partir
de las alturas de los picos de los espectros de masa. A veces, para mezclas sencillas, es
posible encontrar para cada componente, picos a un valor m/z nico. En estas
condiciones, se pueden preparar curvas de calibrado de las alturas de los picos frente a
la concentracin y utilizarlas para el anlisis cuantitativo. Sin embargo, se pueden
obtener resultados ms precisos aadiendo una cantidad fija de sustancia patrn interno
tanto a las muestras como a los patrones de calibracin. Seguidamente se representa la
relacin entre la intensidad de pico de las especies de analito y los patrones internos en

funcin de la concentracin de analito. El patrn interno tiende a reducir la

incertidumbre que surgen en la preparacin de la muestra y en su introduccin. Dadas
las pequeas cantidades de muestra que se requieren en espectrometra de masas, estas
incertidumbres son, a menudo, la mayor fuente de errores indeterminados.
Anlisis cualitativo
La espectrometra de masas, es una tcnica de anlisis cualitativo, de amplia utilizacin
para la determinacin de estructuras orgnicas, por si sola o en combinacin con otras
tcnicas de espectrometra. Cabe destacar que la espectrometra de masas tiene muy
poco en comn con las tcnicas clsicas de espectrofotometra , ya que, en sentido
estricto, no es propiamente en mtodo espectroscpico( desde el punto de vista clsico,
un espectro es una informacin bidimensional que representa un parmetro relacionado
con la emisin o absorcin de una radiacin con la energa de dicha radiacin); en la
espectrometra de masas, no se utiliza ningn tipo de radiacin, por lo que bsicamente,
no puede ser considerada como una tcnica espectroscpica. La espectrometra de
masas est basada en la obtencin de iones a partir de molculas orgnicas en fase
gaseosa; una vez obtenido esto iones, se separan de nuevo con su masa y su carga, y
finalmente se detectan por medio de un dispositivo adecuado.
Como ya se ha mencionado, los procesos que tienen lugar en un espectrmetro de
masas, son de naturaleza qumica, en consecuencia la presencia y abundancia en el
espectro de determinado tipos de iones, identificables a partir de su masa es, ser
funcin de la estructura qumica de cada compuesto; la informacin ofrecida por un
espectro de masas es, de alguna forma comparable a la obtenida mediante una gran
cantidad de reacciones de utilizadas para la determinacin de estructuras por va
qumica, por lo que la espectrometra de masas puede ofrecer una enorme cantidad de
informacin sobre un compuesto determinado.
Introduccin a los sistemas hbridos con EM.
La combinacin a travs de una interface de dos tcnicas analticas independientes, que
genera una informacin nica e integral de la composicin de la muestra y se caracteriza
por ser ms completa que la informacin alcanzada independientemente por cada
tcnica. Los requisitos que deben cumplir las tcnicas para acoplarse, son (8):
compatibilidad; independencia entre los mtodos; ortogonalidad, que en este caso
significa que los mtodos acoplados deben basar sus respectivas separaciones en
mecanismos de separacin tan distintos como sea posible; que sean complementarias,
para obtener una mejor informacin analtica y permitir una adquisicin de datos que
simplifique su interpretacin. En separaciones de mezclas complejas el papel de la
cromatografa de gases (GC), de lquidos en su modalidad HPLC y la electroforesis
capilar (CE) es innegable. Del mismo modo, es indiscutible la capacidad de la MS como
tcnica para proporcionar informacin que permite la identificacin de numerosos
compuestos. Ambas tcnicas presentan sus limitaciones como cualquier tcnica

utilizada, sin embargo, el acoplamiento en lnea de una tcnica de separacin con MS

resulta muy til al conseguir una metodologa analtica en dos dimensiones, en la que se
realiza simultneamente la separacin y la identificacin. El acoplamiento en lnea
requiere una interfaz que pueda introducir los componentes separados con la primera
tcnica, en el sistema de ionizacin del espectrmetro sin afectar a su resolucin ni
tampoco a su forma de operar. La cromatografa y la espectrometra de masas cumplen
los requisitos, pero el reto es mantener el vaco requerido en el espectrmetro al mismo
tiempo que se est introduciendo el lquido o gas, con los analitos procedente del
cromatgrafo.
Aplicaciones y avances tecnolgicos.
La bibliografa mas reciente relacionada con las aplicaciones directas de la
espectrometra de masas es tan extensa que es difcil resumirla. La relacin de las
aplicaciones ms caractersticas reunidas por Melporder y Brown demuestra claramente
la versatilidad del mtodo. Por ejemplo, algunas de las mezclas que pueden ser
analizadas sin calentar la muestra incluyen el gas natural; hidrocarburos C3-C5;
hidrocarburos saturados C6-C8; cloruros y ioduros C1-C4; fluorocarburos, tiofenos,
contaminantes atmosfricos, gases de escape y muchas otras. Utilizando temperaturas
elevadas, se han descrito mtodos muy tiles para alcoholes C16-C27, cidos
aromticos y esteres, esteroides, polifenilosfluorados, amidas alifticas, derivados
aromticos halogenados y nitrilos aromticos.
La espectrometra de masas ha sido tambin utilizada para la caracterizacin y anlisis
de materiales polimricos de elevado peso molecular. En este caso, la muestra se
piroliza primero; los productos voltiles son posteriormente introducidos en el
espectrmetro para su examen. Como alternativa, el calentamiento se puede llevar a
cabo en la sonda de un sistema de entrada directo. Algunos polmeros dan
esencialmente un fragmento nico; por ejemplo, el isopreno que viene del caucho
natural, el estireno del poliestireno, el etileno del polietileno. Otros polmeros dan dos o
ms productos, lo cual depende de la cantidad y de la temperatura de la pirolisis.
Estudios sobre los efectos de la temperatura pueden proporcionar informacin sobre la
estabilidad de los diversos enlaces, as como la distribucin de pesos moleculares
aproximada.

CONCLUSION.
Los protones en ambientes diferentes dentro de una molcula tienen desplazamientos
qumicos diferentes; es decir, experimentan diferentes grados de proteccin. Los
desplazamientos qumicos () se reportan en partes por milln (ppm) a partir del
tetrametilsilano (TMS). Adems del desplazamiento qumico, un espectro de RMN de
1H proporciona informacin estructural basada en: Nmero de seales, que indica
cuntas clases diferentes de protones hay. reas integradas, que indica las razones de
las varias clases de protones. Patrn de desdoblamiento, que da informacin acerca del
nmero de protones que estn a una distancia de dos o tres enlaces del que est dando la
seal. El desdoblamiento espn-espn de las seales de RMN resulta del acoplamiento
de los espines nucleares que estn separados por dos enlaces (acoplamiento geminal) o
tres enlaces (acoplamiento vecinal). En los casos ms simples, el nmero de picos en los
cuales se rompe una seal es igual a n + 1, donde n es el nmero de protones a los que
el protn en cuestin est acoplado. Los protones que tienen el mismo desplazamiento
qumico no desdoblan su seal entre s.
El 13C tiene un espn nuclear de pero slo alrededor de 1% de todos los carbonos en una
muestra son 13C. No obstante, pueden obtenerse espectros de RMN de 13C de alta
calidad por tcnicas de TF por pulsos y son un complemento til a los espectros de
RMN de 1H. Las seales de 13C estn ms separadas entre s que las seales de los
protones, y los espectros de RMN de 13C son relativamente fciles de interpretar. Los
espectros de RMN de 13C rara vez estn integrados debido a que la tcnica de TF por
pulsos distorsiona las intensidades de las seales.