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este tipo de cultivo como metodologa estndar en los laboratorios ha estado limitada por la
falta de instrumental especfico en este campo.
CULTIVOS TRIDIMENSIONALES PRIMARIOS
Cuando hablamos de cultivos tridimensionales primarios nos estamos refiriendo
principalmente al cultivo de rganos. Aunque no debemos pasar por alto, que existen
problemas de nomenclatura entre la literatura francesa y el mbito cientfico anglosajn estas
diferencias en la nomenclatura son aclaradas posteriormente en el presente artculo. En los
cultivos tridimensionales primarios se separa un fragmento tisular de un rgano vivo. Esta
accin supone la prdida de funcin del sistema vascular, ya que las clulas se encuentran
rodeadas por capilares sanguneos que garantizan la nutricin de cada una de ellas. El
espesor del fragmento orgnico est limitado por la difusin de nutrientes del medio a travs
de ese tejido. Evidentemente, el espesor depende de la densidad del rgano que queremos
estudiar, de su grado de compactacin, el hgado por ejemplo es muy compacto. Hay otros
rganos como el pulmn, que posee cavidades naturales, el espesor del fragmento orgnico
utilizado en un estudio podr ser mayor. Si la difusin de nutrientes no pasa a travs de todo
el tejido, este presentar degeneraciones necrticas en su centro. Normalmente no se
administra oxgeno adicional, porque no facilita el cultivo, por el contrario supone la aparicin
de diferentes alteraciones en el rgano que estamos cultivando. El cultivo de este tipo de
tejidos se realiza en la estufa con aire ambiente. El anclaje del tejido tambin es importante,
porque dependen directamente del anclaje para mantener su estructura tridimensional. Su
estudio se realiza mediante tcnicas histolgicas de tincin como Hematoxilina-eosina, PAS o
tricrmicos, tcnicas de hibridacin in situ, microscopa ptica o electrnica, etc.
CULTIVOS TRIDIMENSIONALES SECUNDARIOS
Dentro de los cultivos tridimensionales secundarios nos encontramos dos tipos de cultivos.
Por un lado tenemos los cultivos organotpicos22. Estos tipos de cultivo se caracterizan
porque constan de varios tipos celulares que interaccionan entre s de una forma que intenta
ser lo ms similar posible a la original. Este tipo de cultivos persigue la creacin in vitro de
tejidos u rganos completamente funciona- les que puedan ser utilizados en injertos o en
transplantes. Los cultivos organotpicos constituyen la base de una disciplina denominada
ingeniera de tejidos. El segundo tipo de cultivo tridimensional secundario son los cultivos
histotpicos. Estos cultivos estn formados por un solo tipo celular que consigue alcanzar una
elevada densidad celular. Las clulas son reagrupadas para recrear una estructura
tridimensional parecida al tejido original, este tipo de cultivo se asemeja mucho a lo que
realmente ocurre en los tejidos. Existe un problema de nomenclatura entre la literatura
francesa y el mbito cientfico anglosajn. Los cientficos franceses entienden por cultivo
organotpico al cultivo de rganos, sin embargo en el mbito cientfico anglosajn entienden
por cultivo organotpico a la reasociacin artificial de clulas, procedentes de distintas lneas
celulares, que se integran en una malla artificial, es decir, cultivo es un cultivo celular
tridimensional secundario. Mientras que el cultivo de rganos es un cultivo celular
tridimensional primario. Por otro lado, ambas tendencias coinciden en la definicin de cultivo
histotpico. La utilizacin de una amplia gama de matrices naturales o artificiales nos permite desarrollar tcnicas de cultivos tridimensionales secundarios. Dichas matrices nos
permiten reorganizar la estructura del tejido, o recrear otra de naturaleza artificial.
Normalmente se basan en una matriz de colgeno, en una esponja de celulosa o en una
gelatina a base de colgeno reabsorbible, denominada gelfoam en otras ocasiones se
utilizan andamios o matrices tridimensionales, formadas por polmeros artificiales, como son
las fibras sintticas, sobre las cuales son explantadas clulas.
CONCLUSIN
El cultivo de clulas en 3D se est convirtiendo en una tcnica esencial en mltiples reas de
investigacin como son la ingeniera tisular, medicina regenerativa o desarrollo de nuevos
frmacos. Este tipo de cultivo de clulas abre una nueva dimensin en los ensayos de
cultivos, ya que las clulas se comportan de manera ms parecida a como lo hacen en sus