UNIVERSIDADE ABERTA DO BRASIL/CAPES CENTRO DE EDUCAO ABERTA E A DISTNCIA COORDENAO DO CURSO DE LICENCIATURA EM QUMICA NA MODALIDADE A DISTNCIA DISCIPLINA: Qumica Orgnica - III COORDENADOR DA DISPLINA: Prof. Dra. Monica Regina Silva de Araujo TUTOR ( ) A DISTNCIA: Prof. Taciana Oliveira de Sousa ALUNO(A): Raniery Lopes Matos
Matrcula: 10L22295
1) Defina os seguintes termos em cromatografia:
a) suporte Papel sobre o qual fica retida a fase estacionria. b) fase estacionria Um material slido, que preenche as colunas, responsveis pela separao ou no de um componente, o qual depender do volume hidrodinmico da molcula analisada. c) fase mvel ou eluente o solvente que conduz a amostra para a coluna at o detector. d) revelador ou agente criognico o agente fsico ou qumico que torna visveis as substncias separadas pela cromatografia em papel. e) frente da fase mvel Linha de chegada da fase mvel, visvel ainda quando se retira o papel da cuba cromatogrfica.
f) cmara ou cuba cromatogrfica
Recipiente de vidro com tampa fechada hermeticamente, no deixando escapar vapores de fase mvel e onde se coloca o papel de cromatografia.. g) cromatograma Placa com substncias separadas. h) saturao da cuba Distribuio uniforme no interior da cuba da fase vapor da fase mvel aps alcanado o equilbrio. i) fase normal quando a fase estacionria mais polar do que a fase mvel. j) fase reversa quando a fase estacionria menos polar do que a fase mvel. l) eluio isocrtica Composio constante da fase mvel durante a eluio. m) gradiente de eluio Mistura de solventes da fase mvel durante a eluio. n) fator de reteno
o quociente entre as distncias percorridas simultaneamente
desde o ponto de partida, at o centro de maior concentrao da mancha do soluto e at frente da fase mvel. 2). Qual o tipo de mecanismo de separao envolvido na cromatografia em camada delgada e em coluna de gel de slica? Explique o mecanismo de separao da cromatografia por excluso, de troca inica e por bioafinidade. Cromatografia em camada delgada A cromatografia em camada delgada consiste na separao dos componentes de uma mistura slido lquido onde a fase mvel migra sobre uma camada delgada de ADOSRVENTE retido em uma superfcie plana, O processo de separao est fundamentado, principalmente no fenmeno de ADSORO. A cromatografia de gel de slica A cromatografia em coluna uma tcnica
de partio entre duas fases, slida e lquida, baseada na
capacidade de adsoro e solubilidade. O slido deve ser um material
insolvel na fase lquida associada, sendo que os mais utilizados so slica gel e alumina, geralmente na forma de p. A mistura a ser separada colocada na coluna com um eluente se consequentemente o seu poder de arraste de substncias mais polares. Uma sequencia de eluentes normalmente utilizada a seguinte: ter de petrleo, hexano, ter etlico, tetracloreto de carbono, acetato de etila, etanol, metanol, gua e cido actico. Cromatografia por excluso Conhecida tambm como filtrao em gel ou cromatografia em peneira molecular de difuso restrita. Efetua a separao de acordo com o tamanho efetivo das molculas. A velocidade das molculas grandes apresentam uma maior de velocidade de deslocamento dentro da coluna, emergindo mais rapidamente, promovendo separao dos componentes de acordo com o peso molecular. Cromatografia
de
troca
inica
Mtodo
de
separao
determinao de ons com base em resinas de troca inica. O princpio
envolve equilbrios de troca entre ons em soluo e ons de mesmo sinal
na superfcie de um slido. Cromatografia por bioafinidade Mtodo de isolamento seletivo de macromolculas biolgicas, atravs da utilizao das propriedades dessas substncias de unirem-se reversivelmente a ligante especfico. 3) Ordene as seguintes substncias conforme a atividade cromatogrfica em gel de slica: R-CH=CH-R; R-CO2H; R-NH2; R-OH; R-SH; R-COR, R-CO2R; R-CHO; ROCH3 Para se conhecer a natureza do processo de adsoro deve-se considerar a atividade do adsorvente (atividade cromatogrfica) que, de uma maneira geral traduz a fora de adsoro. Porm, s vezes, pode significar a rea de superfcie ativa do slido, onde ocorre a adsoro. As substncias eluiro da coluna segundo a sua polaridade. A atividade cromatogrfica do slido, tendo grupos polares, aumenta sobre substncias polares, observando a seguinte ordem: R-CO2H > R-OH > R-NH2 > R-SH . R-CHO > R-CO2R > R-OCH3 > RCH=CH-R.
4) O que CLAE? Esquematize um cromatgrafo para CLAE. Comente sobre
algumas aplicaes da CLAE. Cromatografia lquida de alta eficincia 5) Uma amostra de leo essencial foi analisada por CG/EM e o cromatograma de ons totais apresentou 10 picos referentes a 6 monoterpenos e 4 sesquitepenos. Os picos com maior tempo de reteno eram referentes aos sesquiterpenos, entre eles dois ficaram com tempo de reteno muito
prximos. A programao de temperatura usada foi a seguinte: Temp. da
coluna (DB-1): 750C (8 min); 60C min-1; 2000C (4 min). A temperatura do injetor foi de 1500C e a temperatura da interface: 2800C. a) O que significa a sigla CG/EM? Cromatografia gasosa acoplada espectrometria de massas. b) Por que os leos essenciais podem ser analisados por cromatografia gasosa? Porque os leos so volteis e a fase mvel na CG uma gs. c) Por que os monoterpenos eluram primeiro na coluna? Porque so mais volteis, pois tem apenas 10 tomos de carbono e os sesquitermonos possuem 15 tomos de carbono. d) Qual o tempo de durao da anlise? 12 minutos. 6) As seguintes substncias foram isoladas do extrato diclorometnico de uma alga denominada Lyngbya majuscula atravs de cromatografia em coluna de Sephadex LH- 20-(Cromatografia por excluso), usando como elunete CH2Cl2CH3COCH3 como eluente. Qual dever ser a ordem de eluio das substncias da coluna?
Cromatografia por excluso Conhecida tambm como filtrao
em gel, permeao em gel, ou cromatografia em peneira molecular de difuso restrita. Efetua a separao de acordo com o tamanho efetivo das molculas. A velocidade de deslocamento das molculas pequenas menor, pois estas precisam atravs do gel ou suporte. As molculas
grandes apresentam uma maior velocidade de deslocamento dentro da
coluna, emergindo mais rapidamente, promovendo a separao dos componentes de acordo com o peso molecular. Portanto, a ordem ser: I III II. 7) Considere as substncias relacionadas abaixo, as quais so usadas como solventes em separaes de compostos orgnicos e/ou realizaes de medidas: clorofrmio, diclorometano, tetracloreto de carbono, ter etlico, acetato de etila, hexano, butanol, acetona, metanol e etanol. a) Escreva a estrutura destas substncias
b) Coloque em ordem crescente de polaridade
hexano, tetracloreto de carbono, diclometano, clorofrmico, ter etlico, acetona, butano, etanol, metanol. c) Quais destes solventes formam duas fases quando misturados com gua? Hexano, tetracloreto de carbono, diclorometano, clorofrmico. 8) Calcule o Rf de uma mancha que se desloca 5,7 cm com uma frente de solvente igual a 13 cm. A relao entre as velocidades de movimento da substncia e da frente do solvente chamada Rf (Fator de reteno), e definido como a razo entre a distncia percorrida pela substncia, a partir do ponto de aplicao at o meio da mancha, e a distncia percorrida pelo solvente a partir do ponto de aplicao. Rf= dc/de; onde:
Dc: distncia percorrida pelo componente da mistura
De: distncia percorrida pelo componente do eluente Rf = 5,7/13 = 0,44 9) Como feita a revelao das placas em CCD? Quais os principais reveladores utilizados? Para a revelao de placas de CCD, existem processos destrutivos e no destrutivos. O s mtodos no destrutivos mais utilizados so a utilizao de 1) placas onde a fase estacionria fluorescente ou 2) iodo. O primeiro baseia-se na utilizao de substncias fluorescentes misturadas slica quando da preparao das placas, possibilitando a revelao em cmaras de luz ultravioleta. O segundo vale-se do fato de que o iodo complexa-se com compostos insaturados, de modo que placas que os contenham, ao serem colocadas em uma cmara contendo crestais de iodo, apresentaro pontos amarronzados. Os processos destrutivos consistem na oxidao dos compostos sobres a placa, pulverizando-os com soluo aquosa de um oxidante orgnico e/ou um cido mineral, submetendo-se a placa a altas temperaturas (~110C) por alguns minutos. Os compostos orgnicos oxidados sero revelados na forma de pontos. Reveladores atravs de mtodo fsico compostos UV-ativos, que aparecem como manchas escuras em fundo fluorescente, se a placa for iluminada de luz ultravioleta. Reveladores atravs de mtodo qumico: iodo, cido sulfrico/metanol, vanilina sulfrico, tricloreto de antimnio, permanganato de potssio.
10) Quais as vantagens e desvantagens da cromatografia gs-slido? E da
Cromatografia Lquida de Alta Eficincia? CROMATOGRAFIA GS-SLIDO
Vantagens Maior estabilidade dos adosorventes a maiores temperaturas
e ao ataque por oxignio. No existe problemas relacionados com a sangria da coluna. Desvantagens - No linearidade das isotermas de adsoro mesmo com pequenas quantidades de amostra, resultando em picos com caudas, tempos de reteno sujeitos a uma maior variao em funo do tamanho da amostra e adsoro irreversvel. CROMATOGRAFIA LQUIDA DE ALTA EFICINCIA Vantagens: - FE utilizada vrias vezes; - Versatilidade: nico requisito solubilidade da amostra na FM; - Tempo reduzido de anlise; - Alta resoluo; - Boa para anlise quantitativa: Parmetro para identificao: t R, espectro de adsoro no UV (dector de arranjo de diodos), espectro de massas; - Bons resultados quantitativos: Desvios inferiores a 5%; - Boa detectabilidade: - Automao.