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FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGA- MICROBIOLOGA
PRACTICA 9
AISLAMIENTO DE RHIZOBIUM SPP.
CURSO
ECOLOGA MICROBIANA
PROFESOR
PRESENTADO POR :
TACNA - PER
2014
1
PRCTICA 9
AISLAMIENTO DE Rhizobium spp.
INTRODUCCIN
Bijerinck en 1988 obtuvo el primer cultivo bacteriano puro de un ndulo de raz
de leguminosa y lo llamo Bacillus radiccola. Posteriormente, Frank propuso el
nombre Rhizobium para estos aislados. Basada en la especificidad de los
huspedes para 1929 ya se haban reconocido seis especies: Rhizobium
leguminosarum, Rhizobium trifolii, Rhizobium phaseoli, Rhizobium meliloti,
Rhizobium japonicum, Rhizobium lupini. En esta clasificacin, cada especie se
compona de cepas que compartan un grupo de leguminosas husped.
Trabajos posteriores desafiaron esta designacin de especies basada en la
especificidad del husped.
El gnero Rhizobium son bacilos que miden 0,5 1,0 por 1,2 3,0 um. Se
mueven por medio de 1-6 flagelos que pueden ser peritricales. Las colonias
generalmente son blancas o de colores beige, circulares, convexos,
semitranslcidos u opacos y mucilaginosos; generalmente miden 2 4 mm de
dimetro a los 3-5 das de incubacin en agar BYMA. El crecimiento en medio
de carbohidratos generalmente est acompaado de reaccin cida y
abundante
cantidad
de
gelatina
polisacrido
extracelular.
Son
quimioorganotrficas, utilizando una gran variedad de carbohidratos y cidos
orgnicos. Algunas cepas requieren biotina, cido nicotnico o tiamina como
factores de crecimiento.
I.
OBJETIVOS
II.
MATERIAL Y MTODOS
Material Biolgico
Material de Laboratorio
Tubos de ensayo
Placas Petri
Pinzas
Asa de kolle
Lminas portaobjeto estriles
2
Viales
Microscopio ptico
Matraz de 250 ml
Medios de Cultivo:
Soluciones:
III.
Etanol al 95%
Solucin de HgCl2 o Hipoclorito de Sodio
Kit de coloracin Gram
Agua destilada estril
Rojo de Congo
PROCEDIMIENTO
IV.
RESULTADOS
Observar microscpicamente formas X, Y, V (de gran tamao
llamados bacteroides) y formas bacilares tanto en los ndulos como
en las colonias previa coloracin.
Observar microscpicamente despus de la incubacin colonias
incoloras, mucosas, irregulares y brillantes.
Luego de haber incubado, proceder a realizar la tincin Gram para
las colonias que hayan crecido, confirmar si son bacilos Gram
negativos.
V.
BIBLIOGRAFA
PROCESOS MICROBIANOS: Gua de Prctica
FRIONI, L.
Editorial de la Fundacin Universidad Nacional de Ro Cuarto
Argentina.
Villanueva E, Quintana A. Aislamiento y seleccin de bacterias
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Per
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