I.

INTRODUCCION

Desde hace muchos aos se ha usado el color como ayuda para reconocer las
sustancias qumicas; al reemplazar el ojo humano por otros detectores de
radiacin se puede estudiar la absorcin de sustancias, no solamente en la zona del
espectro visible, sino tambin en ultravioleta e infrarrojo. Se denomina
espectrofotometra a la medicin de la cantidad de energa radiante que absorbe
un sistema qumico en funcin de la longitud de onda de la radiacin, y a las
mediciones a una determinada longitud de onda. La teora ondulatoria de la luz
propone la idea de que un haz de luz es un flujo de cuantos de energa llamados
fotones; la luz de una cierta longitud de onda est asociada con los fotones, cada
uno de los cuales posee una cantidad definida de energa.
Los espectrofotmetros, estn a menudo, equipados con un dispositivo que tiene
una escala lineal que se extiende de 0 a 100%. De manera de hacer tal instrumento
de lectura directa en porcentaje de transmitancia, se efectan dos ajustes
preliminares, llamados 0%T y 100%T.
El ajuste del 0%T se lleva a cabo mediante un cierre mecnico del detector. El
ajuste de 100%T se hace con el cierre abierto y el solvente en el camino de la luz.
Normalmente el solvente est contenido en una celda que es casi idntica a las que
contienen las muestras. Cuando la celda del solvente es reemplazada por la celda
que contiene la muestra, la escala da la transmitancia porcentual. Los
instrumentos actuales poseen un sistema electrnico que realiza la operacin
matemtica y da la respuesta directamente absorbancia. Tambin hay que hacer
una calibracin previa con el solvente o blanco.
En esta prctica de laboratorio se determin el hierro III en una muestra
problema, se utiliza el principio de la formacin de complejos de tiocianato
fuertemente coloreados. La formacin del complejo permite la cuantificacin
gracias a la determinacin de la absorbancia de la muestra.

II.

OBJETIVOS

Aplicar los conocimientos tericos sobre la espectroscopia y el manejo del

espectrofotmetro.
Calcular la concentracin de Fe (+3) presente en la muestra a tratar
mediante el mtodo de adicin estndar.

III.

FUNDAMENTO TORICO

La Espectrofotometra es una de las tcnicas experimentales ms utilizadas para la

deteccin especfica de molculas. Se caracteriza por su precisin, sensibilidad y su
aplicabilidad a molculas de distinta naturaleza (contaminantes, biomolculas,
etc.) y estado de agregacin (slido, lquido, gas). Los fundamentos fsico-qumicos
de la espectrofotometra son relativamente sencillos.
Las molculas pueden absorber energa luminosa y almacenarla en forma de
energa interna. Esto permite que se inicien ciclos vitales de muchos organismos,
entre ellos el de la fotosntesis en plantas y bacterias. La Mecnica Cuntica nos
dice que la luz est compuesta de fotones cada uno de los cules tiene una energa.
Ecuacin de la energa

Estados excitados discretos (o bandas) de una molcula en estudio (especifica)

dependen de su estructura electrnica y la distinguen del resto de molculas.
Como consecuencia, se da el espectro de absorcin, es decir, la luz absorbida en
funcin de la longitud de onda, constituye una verdadera seal de identidad de
cada sustancia o molcula.
Lo mismo que ocurre con otros tipos de excitacin electrnica, el electrn que ha
experimentado la transferencia vuelve a su estado original, si bien, ocasionalmente
puede tener lugar la disociacin del estado excitado, teniendo lugar, en este caso,
una reaccin fotoqumica.

La absorcin molecular de
la radiacin en la regin
UV-VIS

a) ADICION ESTANDAR
Para el mtodo de adicin estndar tomamos un volumen fijo de muestra, al que
adicionamos un estndar (sustancia que queremos medir en estado puro) muy
concentrado (para aadir solo un volumen pequeo, del orden de micro litros y as
evitar el efecto dilucin).

De esta manera, no tenemos lo que se llama estndar 0, o muestra sin estndar. En

otros mtodos, sera el primer punto de la recta de calibrado, y nos dara
directamente el valor de la ordenada en el origen o "a" de la recta de regresin
(donde y= a + bx). La seal instrumental del estndar 0 estar prxima al origen de
coordenadas, aun siendo sustancialmente distinto. Es importante preparar bien
los estndares, porque el modelo matemtico asume que el error de preparacin
es despreciable (< 0,1%) frente al error de la seal instrumental (que estara en
torno al 1-2%).

Con el mtodo de adiciones estndar, obtendramos una recta tal que as:

Donde el punto de corte de abscisas en

vertiente
negativa,
nos
dara
la
concentracin de la muestra: es decir,
cuando y=o, la x representa la concentracin
del analito, ya que 0= a + bC (donde C es la
concentracin que queremos hallar), as que
C es simplemente: C= -a/-b.

Para
este
mtodo
dependemos tambin del
blanco analtico el cual se
entiende como toda contaminacin ajena a la muestra, prescindiendo del ruido
instrumental (tambin llamado blanco instrumental, que es propio del
instrumento que utilicemos de medida) y de todas las posibles prdidas por
procesos
fsicos
(que
se
conoce
como
blanco
negativo).
Se cuantifica el blanco analtico, y se sustrae a la concentracin de analito en la
muestra, y controlar el tamao del blanco analtico y su variabilidad es esencial.

IV.

PROCEDIMIENTO EXPERIEMNTAL

MATERIALES Y REACTIVOS:
Materiales:

Espectrofotmetro Spectronic 20D con celdas de absorcin

Balanza analtica
2 lunas de reloj
1 fiola de 250 ml
2 fiolas de 50 ml
6 fiolas de 25 ml
2 vasos precipitados de 150 y 250 ml
1 pipeta volumtrica de 1, 2, 3, 5 y 10 ml
2 pipetas graduadas de 10 ml

Reactivos:

Sulfato amnico frrico

cido sulfrico concentrado
Tiocianato de amonio
cido clorhdrico concentrado
Agua destilada

a) PROCEDIMIENTO
Preparacin de reactivos:

Solucin estndar de 100 ppm Fe (III):

Pesamos 0.216 g de sulfato amnico ferroso, lo disolvemos con un poco de
agua destilada y aadimos 15 gotas de H2SO4 cc. Diluir en una fiola de 250
ml hasta enrasar.

Solucin diluida de 20 ppm Fe (III):

Tomamos 10 ml de la solucin anterior y la colocamos en una fiola de 50
ml, enrasamos con agua destilada.

Solucin de tiocianato de amonio (2%):

Pesamos 1 g de tiocianato de amonio, lo disolvemos con un poco de agua y
aadimos 10 gotas de HCl concentrado. Enrasar en una fiola de 50 ml.
PREPARACIN DE LA MUESTRA PROBLEMA:

Pesamos 0.01 g de tiocianato de amonio, lo disolvimos con un poco de agua

y aadimos 10 gotas de H2SO4 cc. Enrasar con agua destilada a 250 ml.
(esta ser nuestra muestra X)

PROCEDIMIENTO PARA EL ANLISIS DE LAS MUESTRAS:

Alistamos 5 fiolas de 25 ml para preparar nuestras muestras. Tomamos con
una pipeta volumtrica 2 ml de la muestra X y lo adicionamos a cada fiola.

Tomamos con pipeta volumtrica los volmenes de 1, 2, 3 y 5 ml, de la

solucin diluida de hierro que ese encuentra a 20 ppm y lo colocamos en
fiolas de 25 ml.

Agregamos a cada una de las cinco fiolas 2 ml de la solucin de tiocianato

de amonio.

Preparamos un blanco de reactivos, para ello tomamos un fiola de 25 ml y

le agregamos 5 ml de la solucin de tiocianato de amonio (2%). Enrasamos
con agua destilada.

Como parte final medimos la absorbancia de las muestras a 472 nm.

V.

RESULTADOS-CALCULOS

VX

VS

Absorcin

0.324

0.468

0.581

0.7

0.9

Tabla N1: Datos experimentales para determinar la concentracin del Hierro

(III), por el mtodo de adicin estndar a partir de sus absorbancias, el volumen
constante de la muestra y los volmenes de la solucin estndar.

Usamos el mtodo de mnimos cuadrados para calcular, siendo el volumen de

la solucin (x) y absorcin (y):

x
0
1
2
3
5

y
0.324
0.468
0.581
0.7
0.9

xy
0
0.468
1.162
2.1
4.5

X2
0
1
4
9
25

x = 11

y = 2.973

xy = 8.23

x2 = 39

Los valores remplazados en:

Se obtiene:

a = 0.1141
b = 0.3435

Reemplazamos en la ecuacin:

Grfica del volumen de estndar vs. Absorbancias:

VSTD vs Absorbancia
1
0.9

0.9

y = 0.1141x + 0.3435
R = 0.995

0.8
0.7

0.7

0.6

0.581

0.5

Valores Y

0.468

Linear (Valores Y)

0.4
0.324

0.3
0.2
0.1
0
0

VI.

DISCUSIN:

En base a lo obtenido en los resultados, la concentracin de Fe3+ es de

30.10mg/L, tambin calculamos el peso (en mg) de hierro (III) presente en la
muestra X que fue de 94.06 mg de Fe+3. En base a estos resultados podemos
decir que el mtodo usado resulta muy eficaz para determinar la concentracin
de un analito en una muestra.
Conforme bamos preparando las muestras se observ la formacin de un color
rojo-naranja en las fiolas esto sucedi al aadirle la solucin de tiocianato de
amonio, se debe a que algunos metales como el Fe (III), Co, Ti (IV), etc, forman
complejos de tiocianato de gran medida coloreados y estables que nos resultan
muy tiles en la determinacin espectrofotomtrica.

VII. CONCLUSIONES :

La concentracin de Hierro (III) hallada en la muestra problema (muestra X) es

de 30.10 ppm.
Se obtuvo el peso de hierro presente en la muestra el cual fue de 94.06 mg de
Fe+3.
El mtodo de adicin estndar se utiliza siempre y cuando la muestra problema
sea igual a la solucin estndar.
La tcnica de anlisis por espectrofotometra UV-Visible es la ms adecuada
para determinar de analitos (Hierro) en una muestra problema.

VIII. BIBLIOGRAFIA
1. HARRIS, Daniel C. (1993), Anlisis Qumico Cuantitativo, Editorial:
Iberoamericana, pg.: 56.
2. http://www.merck-chemicals.com
3. PARRY, Robert W., QUMICA: Fundamentos experimentales, Cap. 12, pg. 160.
4. PA. SAFAVI, H. ABDOLLAHI (2001), Application of the H-point standard
addition method to the speciation of Fe (II) and Fe (III) with chromogenic mixed
reagents, Iran, Editorial: El SEVIER, pg.: 3