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En general, una cmara de electroforesis vertical puede tener los siguientes componentes:
Dos placas de vidrio del mismo grosor y anchura, de acuerdo al fabricante. En algunos modelos, la
altitud de los vidrios es diferente (uno con mayor altitud que el otro). En general, el tamao de los
vidrios es variable, dependiendo de la dimensin de la cmara.
Un peine, cuyos dientes pueden variar en nmero, tamao y grosor. Tiene el mismo grosor de los
espaciadores y est confeccionado del mismo material. Sirve para moldear los pocillos donde se
colocarn las muestras
Un soporte o base: dispositivo que sirve para permitir el ensamblaje de los vidrios con los
espaciadores,a travs de unas serie de prensas que ejercen presin y mantiene fijo todo el sistema
El tanque de electroforesis: recipiente que contiene el buffer de corrida superior e inferior. En algunos
sistemas, este tanque contiene electrodos permanentes a lo largo de sus bases listos para ser
conectados. En otras cmaras existe una tapa que contiene los electrodos, de tal manera que el
investigador ya no tiene contacto directo con el buffer durante el proceso de electroforesis
Fuente de poder: aparato que tiene por funcin proveer de energa elctrica a la cmara de
electroforesis. El voltaje, el amperaje y el tiempo, pueden ser regulados de acuerdo a las
necesidades del investigador.
Es discontinuo porque est conformado por dos geles de poliacrilamida de resolucin y empacamiento que
presentan diferente concentracin, composicin y pH. Ambos geles se encuentran unidos pero limitados por
una fase de separacin visible al trasluz. Debido a que en estado lquido ambos geles pueden mezclarse
fcilmente, deben ser preparados por separado esperando la total polimeracin del primero para continuar
con la polimerizacin del otro.
PREPARACION DE GELES
A/D + tampn del gel separador Ph 8.8 + mezcla de acrilamida y bis acrilamida al 30% + SDS +
PERSULFATO AMONICO + REACTIVO DE TEMED
Este ultimo completa la polimerizacin
Homogenizar mezcla
Se aade al espacio entre los cristales para un siguiente llenado con el gel concentrador
COLOCAR PEINE
TINCION DE PROTEINAS
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IDENTIFICACION DE PROTEINAS
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