Comprobacin experimental de la primera

y la segunda ley de Mendel con mutantes de

Drosophila Melanogaster

Objetivo general:
Comprobar de forma experimental la dos primeras leyes de Mendel con ejemplares
salvajes y mutantes de cuerpo de Drosophila Melanogaster. Se trabajar sobre la ley
de la uniformidad de los hbridos de la primera generacin filial y sobre la ley de
segregacin de los caracteres en la segunda generacin filial. Tambin se llevar a
cabo un retrocruzamiento para comprobar el genotipo de los filiales obtenidos del
segundo cruzamiento.

Material:
Para llevar a cabo correctamente el experimento se necesitarn botes de vidrio con
preparado alimenticio para Drosophila Melanogaster, frascos ms pequeos para aislar
a los ejemplares a la hora de separar hembras vrgenes, pinceles para manipular pupas
o moscas adultas y tapones de espuma (o algodn hidrfilo en su defecto).

Metodologa:
Para permitir el correcto desarrollo de los ejemplares utilizados ser necesario cambiar
peridicamente el preparado alimenticio (cuya composicin desconocemos). Para ello
verteremos dos medidas de preparado en polvo en un vaso de cultivo limpio y
aadimos agua hasta lograr la consistencia deseada. Se dejar reposar la preparacin
hasta que solidifique (5 minutos aprox.)

Procedimiento:
Para llevar a cabo este experimento utilizaremos las cepa salvaje (+/+) y la cepa ebony
(e); as podremos contar con un gen dominante (+/+) y otro recesivo (e) que son
autosmicos, ya que se encuentran en el cromosoma III (y no en el cromosoma I, el
sexual).
A fin de evitar la extincin de los ejemplares cultivados en el laboratorios, ser
necesario separar cierto nmero de moscas de cada cepa e introducirlas en botes
independientes utilizados nicamente para este experimento.
A continuacin, iniciaremos el proceso de separacin de vrgenes, paso previo esencial
para cualquier cruzamiento, pues las hembras pueden almacenar y utilizar el esperma
de una sola inseminacin durante la mayor parte de su reproduccin, contaminando as
los resultados. Para ello, deberemos dejar que las moscas se reproduzcan hasta poder
observar las primeras larvas. Entonces, procederemos a retirar los individuos de la
generacin parental (P) para evitar que se produzcan cruzamientos entre P y F1. Las
larvas atravesarn un periodo de pupacin (de aproximadamente dos das); segn
vayan eclosionando, las iremos depositando en botes individuales sin papilla. Al cabo

de una hora, las cras comenzarn a pigmentar y as podremos diferenciar su sexo y

dividirlas en dos botes.
Una vez realizada esta segregacin por sexos, introduciremos en otro vaso de cultivo
cinco hembras vrgenes ebony (e) y cinco machos salvajes (+/+), o viceversa. Se
dejarn pasar unos das hasta que puedan diferenciarse las primeras larvas. Entonces,
se retirarn los individuos adultos y esperaremos hasta que se complete el ciclo
reproductivo (10 das aprox.). Una vez completado, es necesario repetir el proceso de
separacin de vrgenes (para poder comprobar ms tarde la segunda ley de Mendel) y
llevar a cabo un meticuloso recuento de los fenotipos de la F1. Los resultados
esperados, segn la primera ley de Mendel, se muestran a continuacin:

+/e

+/e

+/e

+/e

Del cruzamiento de dos moscas homocigticas (una dominante y la otra recesiva)

debera resultar una generacin filial compuesta ntegramente por hbridos. Estos
hbridos presentarn el fenotipo dominante (salvaje).
Con el cruzamiento anterior hemos obtenido los hbridos que necesitamos para
comprobar la segunda ley de Mendel. Deberemos introducir en un vaso de cultivo con
papilla cinco machos y cinco hembras (ambos hbridos +/e) y dejar que se reproduzcan.
Una vez aparezcan las larvas, la generacin F1 ser retirada y se repetir el
procedimiento del cruzamiento anterior (incluida la separacin de hembras vrgenes)
para obtener una generacin F2 segregada por sexos y, as, poder realizar ms tarde
un retrocruzamiento. Al realizar el recuento fenotpico deberemos observar los
siguientes resultados:

+/+

+/e

+/e

e/e

Al cruzar dos ejemplares hbridos, se formarn gametos (+) y (e), que darn a lugar a
individuos hbridos (50%), homocigticos dominantes (25%) y homocigticos recesivos
(25%).
Los homocigotos dominantes y los hbridos son fenotpicamente iguales y, por eso, es
necesario realizar lo que se conoce como retrocruzamiento para diferenciar sus
genotipos.
Para llevar a cabo el retrocruzamiento, necesitamos cruzar una mosca fenotpicamente
salvaje (cuyo genotipo desconocemos) con una ebony (que sabemos que slo puede
ser homocigtica pues el alelo e es recesivo). Analizando su descendencia, podremos
determinar si el individuo de fenotipo salvaje es heterocigtico u homocigtico. Cuando
se distingan las primeras larvas, retiramos a los parentales y esperamos a que
terminen de desarrollarse. En este caso no es necesario separar hembras vrgenes de
entre la generacin filial (F3).
Si toda la descendencia obtenida presenta un fenotipo salvaje, deducimos que el
genotipo incgnita del parental es +/+.
Si entre la descendencia encontramos algunos individuos con fenotipo ebony,
deducimos que el genotipo incgnita del parental es +/e.

Caso 1

Caso 2

+/e

+/e

+/e

e/e

+/e

+/e

+/e

e/e

-En el esquema adyacente se

muestra un rbol genealgico
con todas la generaciones
que debern manifestarse
durante el experimento.