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UNIVERSIDAD DEL VALLE DE MEXICO

Divisin Acadmica de Ciencias de la Salud

Tecnologia Enzimatica.

Practica 4
Catedrtico: Juan Manuel Urrieta

Separacion de la caseina

Carrera: Q.F.B.T
Nombre: Aida Josefina
Semestre: 6

Grupo: A

Objetivo..
El objetivo fundamental de esta practica es la determinacin del
punto de la casena una vez extrada esta mediante procedimiento
qumico de la leche entera liquida.

Introduccin.

La leche contiene vitaminas (principalmente tiamina, riboflavina,


cido pantotico y vitaminas A, D y K), minerales (calcio, potasio,
sodio, fsforo y metales en pequeas cantidades), protenas
(incluyendo todos los aminocidos esenciales), carbohidratos
(lactosa) y lpidos. Los nicos elementos importantes de los que
carece la leche son el hierro y la vitamina C.
Las protenas se pueden clasificar de manera general en protenas
globulares y fibrosas. Las protenas globulares son aquellas que
tienden a agregarse en formas esferoidales y no establecen
interacciones intermoleculares como son los puentes de hidrgeno
(caractersticos de las protenas fibrosas) siendo solubilizadas en
suspensiones coloidales.
En la leche hay tres clases de protenas: casena, lacto albminas y
lacto globulinas (todas globulares).
La casena es una protena conjugada de la leche del tipo
fosfoprotena que se separa de la leche por acidificacin y forma una
masa blanca. Las fosfoproteinas son un grupo de protenas que
estn qumicamente unidas a una sustancia que contiene cido
fosfrico. En la casena la mayora de los grupos fosfato estn unidos
por los grupos hidroxilo de los aminocidos serina y treonina. La
casena en la leche se encuentra en forma de sal clcica (caseinato

clcico). La casena representa cerca del 77% al 82% de las


protenas presentes en la leche y el 2,7% en composicin de la leche
lquida.
La casena est formada por alpha(s1), alpha(s2)-casena, casena, y kappa-casena formando una micela o unidad soluble. Ni
la alfa ni la beta casena son solubles en la leche, solas o
combinadas. Si se aade la kappa casena a las dos anteriores o a
cada una de ellas por separado se forma un complejo de casena
que es solubilizado en forma de micela. Esta micela est estabilizada
por la kappa casena mientras que las alfa y beta son fosfoprotenas
que precipitan en presencia de iones calcio.

Materiales.

- Diez vasos precipitado de 25 ml


Dos vasos de precipitados de 50ml
- Un vaso de precipitado de 250ml
- Probeta de 50ml
- Matraz aforado de 50 ml
- pipeta graduada de 5,0 ml
- pipeta graduada de 1,0 ml
- pipeta graduada de 10,0 ml
- Embudo de vidrio mediano
- Papel de filtro
- Termmetro

Reactivo.

Aguadestilada Acetato sdico 0,1 N o cido actico 0,01 N o


cido actico 0,1 N o cido actico 1,0 N o NaOH 1N o ter
etlico o Etanol al 70%

Procedimiento.
- Caliente en un vaso de precipitado 150ml de agua destilada
a 38oC, aada 50ml de leche y luego gota a gota y con
agitacin, adicione cido actico 1M hasta que observe
que se forma un precipitado (la leche se corta).

- Deje sedimentar y filtre sobre papel de filtro usando


un embudo de cristal.
- Lave el precipitado con 20ml de etanol en el mismo
filtro.
- Seque el precipitado colocando varios pliegues de
papel de filtro.

- Coloque el precipitado en un vaso de precipitado


pequeo previamente pesado, vuelva a pesar el vaso con
el precipitado y luego adicione 5ml/g de ter etlico.
- Filtre nuevamente.
- Deseche el lquido quedando un precipitado blanco
de fcil manipulacin que es la casena. B. Preparacin
de la solucin de casena:
- Coloque aproximadamente
casena en un vaso de 50ml.

250

mg

de

- Agregue 20ml de agua destilada y 5 ml de


NaOH 1N; agite hasta lograr una solucin total de la
casena.
- Una vez disuelta la casena, se vierte en un
matraz aforado de 50 ml, adicione 5 ml de cido
actico 1N y diluya con agua destilada hasta 50ml y
mezcle bien.
- La solucin debe ser clara y limpia y si no es as, debe
volver a filtrar.

Resultado.

Como resultado de nuestra practica lo tuvimos que filtrar mas de


dos veces para que se pudiera separar bien en si la casena de
la leche el rendimiento de casena obtenido en esta prctica es
muy bajo al rendimiento reportado en la literatura (30 g por litro,
3%), es probable que esto se deba a que no se dej que la
casena precipitara completamente o, a la eliminacin del
sobrenadante en cada una de las centrifugaciones, proceso en
el cual se pudieron arrastrar cantidades considerables de
protena junto el agua utilizada para eliminar el HCl.

Conclusion.

Es posible el aislamiento de la casena de la leche, utilizando la


poca solubilidad que esta protena tiene cuando se le lleva hasta
su punto isoelctrico y la rapidez de sedimentacin de la misma
al utilizar la centrifuga. No obstante, el rendimiento puede ser
variado si se considera que los mtodos de purificacin son
tambin variados.

Bibliografia

Alais C, Lacasa A. Cinecia de la Leche: Principios de


Tcnica Lechera, 4ta. Edicin Ilustrated. Reverte,
Barcelona, 1985.
Murray R., Mayes P., Granner D., Rodwell V. Bioqumica
de Harper. 14 Edicin. Editorial Manual Moderno. Mxico.
1997 pg. 177.
Mathews, C., Van Holde, K. y Ahern, K. Bioqumica. 3
Edicin. Pearson Education. Espaa 2002. pg. 353 354.
Lpidos y Grasas (http://www.todo-medicinas.com.mx)
Proceso
de
deslactosado
consultado
en;
(http://www.nutrar.com/detalle.asp?lD=6727), el 8 de mayo
de 2009.