AISLAMEINTO DE BACTERIAS

Es la separacin de un determinado microorganismo del resto de microorganismos que le acompaan. El

mtodo ms usual es la siembra por estra sobre un medio de cultivo slido adecuado dispuesto en una placa de
petri.

Para ello se toma una pequea cantidad de muestra con un asa de platino y se reparte sobre la superficie del
medio de cultivo. Sobre el medio quedan separadas e inmovilizadas las clulas bacterianas. Tras la incubacin
en condiciones adecuadas, cada clula viable origina una colonia visible resultado de sucesivas divisiones
celulares. Cada colonia bacteriana tiene unas caractersticas determinadas en cuanto a su forma, borde,
elevacin, tamao , consistencia, etc.. Los tipos de bacterias presentes en la muestra original es visible como
tipos diferentes de colonias. A partir de colonias separadas suficientemente es posible obtener un cultivo puro
de cada uno de los tipos de bacterias presentes en la muestra original.

El xito del aislamiento, de la separacin sobre el medio de cultivo, depende de la superficie sobre la que se ha
distribuido la muestra. Es muy importante realizar el mayor nmero de estras posible. En las primeras estras
aparecern colonias confluentes o una masa continua de microorganismos. En las estras finales debern
aparecer colonias separadas unas de otras. El aislamiento requiere un reducido inculo de partida. La sucesiva
disminucin del tamao de la poblacin sobre el asa (por descarga sobre el medio de cultivo) al recorrer el
medio de cultivo, debe asegurar que finalmente algunas clulas queden suficientemente separadas (aisladas
unas de otras) sobre la superficie.

Criterios para la diferenciacin de colonias El aspecto de las colonias, su coloracin, tamao, etc. permiten
diferenciar diferentes bacterias, aunque son propiedades generales muy influenciadas por las condiciones de
cultivo, por lo que a continuacin se realiza una descripcin muy general. Las colonias pueden ser opacas,
translucidas o transparentes. Algunas producen pigmentos fluorescentes cuando se iluminan con luz
ultravioleta. Otras aparecen con superficie pulverulenta, otras son lisas, o rugosas, o poseen anillos
concntricos. En ocasiones el olor es tambin caracterstico.
TIPIFICACIN BACTERIANA
La tipificacin de las bacterias se basa en el estudio de sus caractersticas mediante tcnicas que
oscilan entre las ms sencillas tinciones y los ms complejos estudios moleculares. Una tcnica til
y de bajo costo consiste en la tincin de Gram y posterior observacin de la muestra mediante el
microscopio de luz para estudiar las bacterias, su forma, tipo de agrupacin y color: grampositivas
o gramnegativas. La mayor parte de las bacterias puede ser ubicada en uno de estos dos grupos o
en un tercero, de acuerdo a la cido-alcohol resistencia que presenten (Ziehl-Neelsen).
Algunas propiedades genticas y fisiolgicas constituyen herramientas utilizadas para definir
algunas caractersticas de las cepas, como los serotipos y biotipos, determinacin de especies en
algunos grupos de bacterias, produccin de toxinas. Los mtodos ms sensibles se basan en el
anlisis del material gentico. Cabe mencionar que stos han diversificado sus objetivos; se
emplean en la identificacin de subgrupos de genes esenciales para el crecimiento, colonizacin,
adhesin e invasin bacterianos (un ejemplo es el IVET - siglas de "in vivo expression technology"),
desarrollada para seleccionar los genes activos nicamente durante la infeccin).

http://www.pomif.com/pages/practicas/bacteriologia/aislamiento
http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/bacteriologia/generalidades.html