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FUNDAMENTOS DE ESPECTROSCOPIA
MOLECULAR UV-VISVEL
Profa. Dra. Luciana Maria Saran
1. Introduo
Espectroscopia qualquer processo que utiliza a luz
para medir as concentraes qumicas. Baseia-se na
anlise da radiao eletromagntica emitida ou absorvida
pelas substncias.
Espectroscopia UV-Visvel: baseia-se em medidas de
absoro da radiao eletromagntica, nas regies visvel
e ultravioleta do espectro.
Mede-se a quantidade de luz absorvida pela amostra e
relaciona-se a mesma com a concentrao do analito.
2. Radiao Eletromagntica
Consiste em campos eltrico e magntico oscilando, que
atravessam o espao vazio a 3,00x108 m/s.
2. Radiao Eletromagntica
composta por: raios X e , radiao ultravioleta (UV),
radiao visvel, infravermelho, microondas e ondas de
rdio.
- Freqncia, ;
- Comprimento de onda, ;
- Amplitude, A.
(velocidade da luz no
vcuo)
E = h.c/
Destas equaes conclui-se que:
- Energia Alta
- Energia Baixa
freqncia, , alta e
freqncia baixa e
pequeno;
grande.
Segmento ampliado
do Espectro Visvel
4. Colorimetria
A percepo visual da cor depende da absoro seletiva
de certos comprimentos de onda da luz incidente pelo
objeto colorido.
Os demais comprimentos de onda so refletidos ou
transmitidos de acordo com a natureza do objeto e so
percebidos pelo olho como a cor do objeto.
Objeto branco: reflete igualmente todos os comprimentos
de onda.
Objeto preto: reflete pouca luz de qualquer comprimento
de onda.
4. Colorimetria
Se a luz vermelha for absorvida da luz branca, ento a luz
transmitida ou refletida ser verde.
Neste crculo de
cores, as cores
complementares
entre si esto
localizadas em
posies opostas.
Cor
Absorvida
Cor Observada
380 420
Violeta
Verde-amarelo
420 440
Violeta-azul
Amarelo
440 470
Azul
Laranja
470 500
Azul-verde
Vermelho
500 520
Verde
Roxo
520 550
Amareloverde
Violeta
550 580
Amarelo
Violeta-azul
580 620
Laranja
Azul
620 680
Vermelho
Azul-verde
680 780
Roxo
Verde
4. Colorimetria
A base de uma anlise colorimtrica a variao de
cor da soluo em funo da concentrao do analito.
A cor da soluo , usualmente devida, formao de
de um composto colorido pela adio de um reagente
apropriado ou inerente ao constituinte que se deseja
analisar.
A intensidade da cor comparada com a intensidade
da cor que se obtm com o mesmo procedimento pelo
tratamento de uma amostra cuja quantidade e concentrao so conhecidas.
4. Colorimetria
5. Absoro de Luz
A absoro de radiao UV-Visvel se deve ao fato das
molculas apresentarem eltrons que podem ser
promovidos a nveis de energia mais elevados mediante
a absoro de energia.
7. Espectros de Absoro
Um espectro de absoro
um grfico mostrando
como A (ou ) varia com o
comprimento de onda, .
7. Espectros de Absoro
7. Espectros de Absoro
Possibilitam:
Identificar substncias: as curvas de absoro so uma
espcie de impresso digital das substncias e caracterizam a presena desses compostos.
Absorvncia
0,7
0,6
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0,0
400
420
440
460
480
500
520
540
560
580
600
620
8. Lei de Beer-Lambert
Fonte de Luz
Seletor de
(Monocromador)
P0
P
Amostra
Detector
de Luz
No diagrama acima:
- P0: radiao incidente;
- P: radiao transmitida;
- b ou l: passo ptico ou caminho ptico.
8. Lei de Beer-Lambert
Transmitncia, T: frao da radiao incidente que
transmitida pela amostra.
T = P/P0
EQ. 1
A = - log T
EQ. 2
A = a.l.c
EQ. 3
8. Lei de Beer-Lambert
Exerccio 3: Qual o valor da absorbncia correspondente
T = 45%? Se uma soluo 0,01 mol/L exibe T = 45%,
qual ser a porcentagem de transmitncia para uma
soluo, do mesmo composto, de concentrao igual a
0,02 mol/L.
Resp.: A = 0,346; %T = 20%
8. Lei de Beer-Lambert
A Eq. 3, conhecida como Lei de Beer-Lambert, a
equao fundamental da espectrofotometria e mostra
que a absorvncia diretamente proporcional a
concentrao da espcie que absorve radiao de um
dado .
A = a.l.c
EQ. 3
Na EQ. 3:
A: absorbncia ou absorvncia;
a: absortividade;
l: caminho ptico ou passo ptico;
c: concentrao da espcie absorvente ou
analito.
8. Lei de Beer-Lambert
Na figura abaixo, a absorbncia, como evidenciado
pela cor, proporcional concentrao de ferro.
8. Lei de Beer-Lambert
A absortividade, a:
- Depende do comprimento de onda e da natureza do
material absorvente.
8. Lei de Beer-Lambert
Exerccio 4: 15 mg de um composto, que apresenta
massa molar = 384,63 g/mol, foram dissolvidas em gua
preparando-se 5,00 mL de soluo. 1,00 mL dessa
soluo foi diludo 10,0 mL.
a) Qual a concentrao da soluo preparada inicialmente?
b) Qual a concentrao da soluo diluda do composto?
c) Considerando que a soluo diluda foi transferida para
uma cubeta de 0,5 cm de caminho tico e que absorbncia desta soluo foi medida em = 495 nm, sendo
A = 0,634, calcule a absortividade molar, , do composto
no comprimento de onda em questo.
Resp.: 7,80x10-3 mol/L; 7,80x10-4 mol/L ;1626 cm-1 mol-1 L
)
Canalito (mol/L)
Exerccio 5:
Fe(III) pode ser determinado espectrofotometricamente por reao com SCN-, para produzir um
complexo vermelho, [Fe(SCN)6]3-, que absorve fortemente em 480 nm. Um litro de soluo padro
estoque de Fe(III) foi preparado a partir de 0,8640 g de sulfato frrico amoniacal, FeNH4(SO4)2.12H2O
(massa molar = 482,19 g mol-1). Trs solues padres foram preparadas por diluio da soluo
estoque de Fe(III), transferindo-se alquotas de 2,5, 3,5 e 4,5 mL de tal soluo para bales volumtricos
de 100 mL e completando-se o volume de cada um, com gua destilada. Uma amostra slida foi transferida
para um balo volumtrico de 100 mL e dissolvida com gua destilada, preparando-se 100 mL de uma
soluo da amostra. Considerando os valores de absorbncia (A) a seguir e l = 1 cm:
a) Construa a curva analtica ou curva de calibrao.
b) Calcule a absortividade molar () do composto, no comprimento de onda em questo;
c) Calcule quantos miligramas de Fe(III) esto presentes na amostra.
Soluo
CFe/ mol L1
Padro 1
0,342
4,480x10-5
Padro 2
0,479
6,272x10-5
Padro 3
0,616
8,064x10-5
Amostra
0,463
480 nm
0,65
0,60
Absorvncia
0,55
0,50
0,45
Y = a + b.X
Y = -0,0005 + 7645X
R=1
0,40
0,35
0,30
4,0x10
-5
4,5x10
-5
5,0x10
-5
5,5x10
-5
6,0x10
-5
6,5x10
-5
7,0x10
-5
7,5x10
-5
8,0x10
-5
8,5x10
-5
CFe (mol/L)
3+
Exerccio 5:
b) = 7645 cm-1 mol-1 L
c) Aamostra = 0,463
Eq. da reta: Y = - 0,0005 + 7645X
0,463 = - 0,0005 + 7645X
X = 6,05x10-5 mol L-1
Em 100 mL da soluo da amostra
Fe3+ = 0,339 mg
6,05x10-6 mol de
9. Instrumentao
O instrumento necessrio para uma anlise
espectrofomtrica o Espectrofotmetro.
9. Funcionamento do Espectrofotmetro
A luz proveniente de uma fonte contnua passa por um
monocromador, que seleciona uma estreita faixa de
comprimentos de onda do feixe incidente. Essa luz
monocromtica passa pela amostra de comprimento
b, e a energia radiante da luz emergente medida
(vide diagrama abaixo).
Fonte de Luz
Seletor de
(Monocromador)
P0
P
Amostra
Detector
de Luz
Fontes de Radiao
Lmpada de Deutrio
( : 160 380 nm)
Lmpada de Tungstnio
( : 350 2200 nm)
Clulas ou Cubetas
10. Precaues
Para uma anlise espectrofotomtrica, geralmente
escolhe-se o comprimento de mxima absorvncia (
Justificativa: a sensibilidade da anlise maior na
absorvncia mxima.
max).
10. Precaues
O manuseio das cubetas deve ser feito com um tecido,
para impedir que as pontas dos dedos entrem em contato
com as faces.
Mantenha os dedos longe das faces limpas da cubeta,
pois as impresses digitais dispersam e absorvem a luz.
Para leituras precisas, importante posicionar a cubeta
no espectrofotmetro da maneira mais reprodutvel
possvel. Justificativa: uma variao aleatria na
absorvncia surge de pequenas diferenas da posio
da cubeta no seu suporte.