Clostridium Botulinum

Julin Snchez, Abraham Mondragn, Cristian Mndez

Introduccin

La palabra botulismo deriva del latn "botulus", salchicha, ya que los primeros casos estudiados por
Mller en 1870 fueron originados por la ingestin de embutidos en mal estado.
El primer aislamiento del Clostridium fue realizado en 1897 por van Ermengem en Holanda,
describindose en la actualidad 7 tipos toxignicos A, B, C, D, E, F, y G.
Su diferenciacin se basa en el tipo de toxina que producen, las que son inmunolgicamente
distintas. Los bovinos enferman ms comnmente con los tipos C, D y A. El ser humano es
afectado por el tipo A, enfermndose por el consumo de alimentos contaminados con la toxina. Esta
toxina es la ms potente que se conoce, se estima que 300 gramos seran suficientes para destruir la
humanidad
En condiciones favorables de temperatura y humedad, este germen se multiplica rpidamente y
elabora toxina altamente mortal y relativamente estable, qu al ser ingerida por los animales
produce la enfermedad. La toxina puede sobrevivir durante largos perodos (meses) en animales en
descomposicin y sobre todo en huesos; adems al ser ingerido por los animales resiste el pH y el
ataque de las enzimas gstricas.
Las enfermedades causadas por la bacteria Clostridium Botulinum son la causa de grandes prdidas
econmicas para los ganaderos que cran bovinos en muchas partes del mundo. Adems afecta con
mayor frecuencia en los animales que crecen con rapidez por estar sometidos a un plan intensivo de
nutricin.
Un miligramo de esta bacteria mata a un milln de cobayos, teniendo as un ndice de mortalidad
del 100%.
El botulismo es una de las enfermedades que se incluyen dentro de las causas de muerte repentina
de bovinos sin dar lugar a la observacin de sntomas clnicos. Debido a esto los pequeos detalles
acerca del comportamiento de los animales o signos clnicos previos a la muerte, son de gran apoyo
en la clarificacin diagnostica.

Objetivos
Se crearan kits de diagnostico de bajo costo y accesibles para la deteccin de
Clostridium Botulinum en bovinos.
Prevenir enfermedades transmitidas del ganado hacia el humano para evitar una
epidemia.

de forma importante a la aparicin de la

Descripcin de la bacteria
Son bacterias Gram positivas, no
capsuladas, mviles, de 3-8 x 0,5 micras,
con esporas centrales o subterminales.
Son Anaerobias obligadas, adems tienen
la capacidad de esporular cuando las
condiciones del medio no les es favorable
para reproducirse. Suelen producir gas.
Las colonias son pequeas, planas y
transparentes, por lo que es comn que el
crecimiento slo pueda apreciarse por la
hemlisis que algunas especies producen.
Presentan pleomorfismo, sobre todo en
las bacterias que se encuentran en las
lesiones.
La mayora de las especies del gnero
Clostridium son habitantes normales del
suelo y del tracto digestivo de los
animales. Por esta razn, producen
enfermedades infecciosas,no contagiosas;
No todas las especies de clostridios
provocan enfermedades, pero las que son
patgenas suelen ser mortales
Las enfermedades que conforman el
Complejo
Clostridial
Bovino
se
caracterizan por producir muerte sbita,
los agentes de manera frecuente se
encuentran en asociacin en los diversos
cuadros y los factores que desencadenan
estas enfermedades son muy similares.
Los animales sanos sin signos aparentes
de la enfermedad estn a menudo
infectados. Los factores que contribuyen

enfermedad son:

Cualquier situacin que cree

las condiciones para que las
bacterias invadan el cuerpo
y segreguen toxinas, es
decir, una herida o un
tratamiento invasivo, como
una intervencin quirrgica,
un parto o una herida
punzante.

Cambios bruscos de dieta,

sobrealimentacin, acidosis
aguda.

Se reconoce que Clostridium puede

permanecer en estado de latencia en los
tejidos mencionados. Por esta razn, el
ltimo factor predisponente, ser aquel
que le de las condiciones micro
ambientales (Baja concentracin de
Oxgeno) que le permita al agente
proliferar en los tejidos para que sea
capaz de producir sus enzimas y toxinas
potentes, que sern las responsables de
producir las lesiones caractersticas de
estos procesos. Ejemplos de estos FP son:
Afecciones hepticas o Fasciola heptica
en casos de Hemoglobinuria Bacilar y
Hepatitis Necrtica, golpes y heridas
(incluidas inyecciones poco aspticas) en
casos de Pierna Negra y Edema Maligno.

Descripcin de la enfermedad

Los primeros signos suelen presentarse

entre 3 y 6 das despus de haber tomado
los animales contacto con material
toxinfeccioso, siendo menor el periodo de
incubacin cuanto mayor sea la cantidad
de toxina ingerida.
Si bien se observan algunas muertes
agudas en la mayora de los casos el curso
de la enfermedad es subagudo.
Los primeros sntomas son inquietud, los
animales se separan del rodeo, hay
incoordinacin,
marcha
insegura,
debilidad y ataxia. Posteriormente el
animal cae siendo incapaz de levantarse,
mantenindose en decbito esternal un
tiempo variable (de 2 a 6 das) con la
cabeza hacia uno de los flancos. Hay
parlisis muscular flccida en las
extremidades posteriores, progresando
hacia extremidades anteriores, cabeza y
cuello. En algunos casos protusin de la
lengua, prdida de saliva filante e
incapacidad deglutaria.
La enfermedad termina con el animal en
decbito lateral, con paresia muscular
generalizada, afectando todo el tracto
digestivo. La muerte es producida por
parlisis cardiorrespiratoria. La parlisis
muscular es producida por la accin
directa de la toxina, la cual se fija a las
terminaciones nerviosas, impidiendo la
transmisin neuromuscular.

Sntomas
Los signos clnicos pueden variar segn
el tipo de bacteria implicado:
Muerte sbita en
aparentemente sanos.

animales

Letargo o abatimiento, con muerte

a las 6, 24 48 horas.
Fiebre elevada.
Falta de apetito.
Hinchazn en la cadera o en el
hombro, con una sensacin de
crepitacin cuando se presiona la
piel (presencia de gas), olor a
rancio.
Cojera aguda.
Rigidez localizada.
Espasmos musculares.
Orina de color rojo oscuro.
Lesiones:
Como ya se mencion, una vez que el
ambiente es adecuado para el desarrollo
de la bacteria, se comienzan a producir las
toxinas y enzimas, cada una con un fin
especifico. Los cuadros suelen ser tpicos
para cada enfermedad, sin embargo, es
conveniente reiterar que en muchos casos
existe la asociacin o participacin de
varias especies de Clostridium.
Tcnicas de diagnostico
La toxina botulnica se detecta
tpicamente con un bioanlisis en ratones.
Tambin se puede usar ELISA, pero
como detecta toxinas tanto activas como
inactivas (por ej., tratadas con calor), es
posible obtener falsos positivos con esta
prueba. Se puede clasificar el tipo de
toxina botulnica mediante las pruebas de
neutralizacin en ratones.
Los organismos C. botulinum pueden
aislarse de los alimentos. En el botulismo
toxico-infeccioso, el organismo se puede
cultivar
de
los
contenidos
gastrointestinales, heces, heridas u otros
tejidos. Debido a que los animales sanos

pueden tener esporas de C. botulinum en

el tracto gastrointestinal, si se encuentran
en este lugar, se deben interpretar con
precaucin.
C. botulinum tambin se puede aislar en
un cultivo anaerobio. El tratamiento con
calor o etanol puede ayudar a la
recuperacin en muestras altamente
contaminadas tales como alimentos o
heces. Estos tratamientos destruyen los
microorganismos que compiten a la vez
que permiten la supervivencia de las
esporas clostridiales. Algunos medios
slidos que se pueden utilizar son el agar
sangre o yema de huevo, el agar Brucella
con 5% de sangre ovina y el agar alcohol
feniletlico con sangre. Los medios
lquidos adecuados incluyen un medio de
almidn, glucosa y carne picada, un
medio de carne cocida, un medio
clostridial reforzado, caldo anaerobio y
otros. En los medios slidos, las colonias
de C. botulinum a menudo son de un
color blanco grisceo con un borde
irregular. Las colonias son generalmente
betahemolticas en agar sangre, mientras
que en un medio de yema de huevo, con
frecuencia muestran iridiscencia en la
superficie, que se extiende ms all de la
colonia (lipasa positiva), y son variables
para la actividad de la lecitinasa. La zona
iridiscente que rodea la colonia tiende a
ser mayor para las toxinas C, D y E. (La
lipasa no es especfica para C. botulinum;
muchas otras especies Clostridium y otras
bacterias tambin producen esta enzima.)
El organismo teido es un bacilo
grampositivo que se desarrolla en esporas
ovales subterminales, en especial en
medios, tales como carne picada,
incubados de 5 a 7 das a 30 C. En la
identificacin, son de utilidad las pruebas
bioqumicas y la deteccin de productos
metablicos

Fundamento de los kits de diagnostico

Dada la diversidad de toxinas botulnicas
existentes
en
la
naturaleza,
la
confirmacin diagnstica debe ir dirigida
a determinar el (los) tipo (s) de toxina
actuantes en el campo. El mtodo
aceptado por la comunidad cientfica es la
prueba de seroneutralizacin en ratn
utilizando anti-toxinas de referencia
(Hatheway, 1988); sin embargo se han
descrito mtodos alternos, tales como el
uso de pruebas inmuno- enzimticas
(ELISA) (Gregory et al., 1996) o una
prueba de fijacin de complemento
(Dutra et al., 1993).
Las muestras de eleccin para el
diagnstico son suero sanguneo,
contenido ruminal, contenido intestinal e
hgado de animales afectados, enviando
como mnimo 250 gr de muestra, la que
debe ser obtenida de animales
sacrificados o recientemente muertos, que
no presenten descomposicin (las
muestras deben enviarse refrigeradas, 5-8
c, empacadas en bolsas estriles y
debidamente rotuladas). La prueba se
realiza inoculando ratones de 25- 40 g por
va intraperitoneal, con extractos de la
muestra de campo y observando la
presentacin de sntomas hasta por 96
horas.
El diagnstico se confirma cuando la
toxicidad del extracto es inhibida por una
antitoxina especfica. La prueba es
bastante sensible, pero tiene varios
inconvenientes, entre ellos, el gran
nmero de animales de laboratorio
requeridos, la tardanza para obtener los

resultados y la probabilidad de muerte

inespecfica de los ratones, debida a
interferencia de otras sustancias que
pueden ser letales o influenciar la
neutralizacin de las toxinas; por lo
anterior, la interpretacin adecuada de
resultados requiere de gran experiencia.
Una prueba biolgica negativa no excluye
la presencia de botulismo, dado que se ha
demostrado que la toxina no es detectable
en los casos promedio de animales de
granja (Blood, Radostits & Henderson,
1986).
CONTROL DE BOTULISMO
El control y prevencin se deben tomar en
cuenta desde un enfoque integral, ya que
la presencia de la enfermedad est
asociada con deficiencias minerales;
adems se debe considerar, que dentro de
la inspeccin del rebao la presencia de
un brote de mortalidad es la evidencia de
algn tipo de desequilibrio ecolgico en
la finca o regin; por lo que una solucin
de largo plazo debe considerar aspectos
de manejo, nutricin, gentica y de
inmunidad de la poblacin.
Vacunas y vacunacin
La posibilidad de proteger al ganado
frente al botulismo utilizando filtrados de
toxina inactivada (toxoides) fue descrita a
inicios del siglo pasado para el caso del
ganado vacuno. Para su empleo en los
animales domsticos los toxoides se
preparan con toxinas de las cepas de los
tipos C y D, se inactivan con formalina y
se adsorben con hidrxido de aluminio
que acta como adyuvante.

En animales que reciben por primera vez

la vacuna debe aplicarse un refuerzo al
mes y despus realizar vacunaciones cada
ao.
Mejora nutricional
La alimentacin de los bovinos debe estar
basada en el suministro de sales
mineralizadas adecuadamente diseadas
para las condiciones de cada regin.
Una vaca de 300 kg de peso y una
produccin diaria de 5 litros de leche
debe Consumir cerca de 70 gr diarios de
sal mineralizada con 10% de fsforo y
18% de Calcio. El suministro de sales
mineralizadas formuladas especialmente
para la zona es una de las medidas que se
pueden tomar para prevenir la mortalidad.
Normas tcnicas para el control y
erradicacin de la enfermedad
NORMA Oficial Mexicana NOM-063ZOO-1999, Especificaciones que
deben cumplir los biolgicos
empleados en la prevencin y
control de enfermedades que
afectan a los animales domsticos.
NOM-003-ZOO-1994, Criterios para
la operacin de laboratorios de
pruebas aprobados en materia
zoosanitaria.
NOM-012-ZOO-1993,
Especificaciones para la regulacin
de
productos
qumicos,
farmacuticos,
biolgicos
y
alimenticios para uso en animales o
consumo por stos.

Conclusin

Obtuvimos que a batertia clostridium bovina

es una bacteria bacterias Gram positivas
Referencias

1.- D.C. Blood & Radostitis, O.M. Medicina

Veterinaria. Interamericana. Mc. Graw Hill. 7a.
Edicin. (1992), 643-666.

2.- Informacin Pfizer Salud Animal Espaa.

Clostridiosis. animalhealth.pfizer.com / sites / pahweb /
ES / ES / ... / metritis . aspx
3.- L.Garry Adams, DVM PhD. Animal Health Issues
in South Texas Cattle Department of Pathobiology .
College of Veterinary Medicine Texas A&M
University. Universidad Autnoma de Tamaulipas. Feb.
26-27, 1998.
4.- Morales Alvarez J. F. morales62@yahoo.com.
COMPLEJO
CLOSTRIDIAL
EN
BOVINOS
Dr. Laboratorio de Diagnstico. CENID-Microbiologa
Animal INIFAP Mxico, 1-8, 2008.