El Agar nutritivo es un medio de cultivo usado normalmente como rutina para todo tipo de

bacteria. Es muy util porque permanece solido incluso a relativas altas temperaturas. Adems,
el crecimiento bacteriano en este agar lo hace en la superficie, por lo que se distinguen mejor
las colonias pequeas.
En un caldo de nutrientes, la bacteria crece en el lquido, y aparece como una sustancia
espesa, con colonias dificilmente observables. El agar nutritivo contiene normalmente (w/v):1

0.5 % Peptona

0.3 % extracto de carne/extracto de levadura

1.5 % agar

0.5% NaCl

Agua destilada

pH casi neutro (6.8) a 25 C.

Nutrient broth is made identically, except omitting the agar

http://es.wikipedia.org/wiki/Agar_nutritivo.

El agar Sabouraud es un tipo de agar que contiene peptonas.1 Se usa para

cultivar dermatofitos y otros tipos de hongos.2 3 4
Fue inventado por, Raymond Sabouraud en 1892. Ms tarde Emmons mejor el medio, el nivel
de pH se fue acercando al neutral para permitir el crecimiento de otros subcultivos de hongos. 5

OBJETIVOS DE LA ESTERILIZACIN: No se puede hablar de

esterilizacin sin considerar el concepto de microorganismo. Un
microorganismo es un agente microscpico vivo e imperceptible a los sentidos
que generalmente est agrupado en colonias, aunque bien puede estar como
una unidad formadora de colonias (U.F.C.), la que se desarrolla en un medio
apropiado para formar colonias perceptibles. Los microorganismos pueden ser
patgenos (productores de ciertas enfermedades) o banales (los habitualmente
hallados en los alimentos, el aire, el polvillo ambiental, que no perjudican al
hombre.

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El hecho de que existan distintos tipos de grmenes en el medio
ambiente, crea grandes dificultades en los estudios bacteriolgicos, cuando es
necesario obtener las especies microbianas en estado de pureza, ya que tanto

el instrumental como los medios de cultivo son invadidos con suma facilidad
por los microbios del medio ambiente.
Con el fin de subsanar stos inconvenientes se practica
la esterilizacin, procedimiento que consiste en destruir todos los grmenes
vivos que existan sobre los objetos o sustancias que se desean libre de ellos
(aspticos).
Los Microorganismos pueden clasificarse en criorresistentes, que son
los resistentes al fro y termo resistentes o resistentes a las altas temperaturas,
aunque la clasificacin ms comn es por la temperatura a la que se
reproducen. As se los puede clasificar en Crifilos (-5 a 14 C); Mesfilos (25 a
47 C) y Termfilos (50 hasta 113 C). Por ejemplo, muchos hongos se
destruyen con la temperatura, pero sus esporas an son viables y cuando
encuentran un medio apropiado, rico en nutrientes y humedad, se reproducen.
Por tal motivo la tecnologa para su destruccin debe considerar stas
variables.
LA ESTERILIZACIN
Esta operacin comprende todos los procedimientos fsicos, mecnicos
y qumicos, que se emplean para destruir, inactivar o retener grmenes en
general y patgenos en particular. A travs de esta, los materiales de
laboratorio para determinados diagnsticos y los elementos quirrgicos y la piel
del enfermo alcanzan un estado de desinfeccin que evita la contaminacin
operatoria.
Esterilizacin: eliminacin o muerte de todos los microorganismos que contiene un objeto o
sustancia, y que se encuentran acondicionados de tal forma que no pueden contaminarse
nuevamente.

La esterilizacin es un mtodo del control del crecimiento microbiano que involucra la

eliminacin de todas las formas de vida, incluidos virus y esporas. Es un trmino absoluto que
implica la prdida de la viabilidad mediante la destruccin de todos
los microorganismos contenidos en un objeto, rea especfica o sustancia, acondicionando de
tal modo la posterior propagacin o contaminacin a otros objetos o al medio ambiente.

http://es.wikipedia.org/wiki/Esterilizaci%C3%B3n_(microbiolog%C3%ADa)

UNIVERSIDAD AUTNOMA DE BAJA CALIFORNIA

FACULTAD DE ODONTOLOGA
Laboratorio de Microbiologa
PRCTICA #4

Elaboracin de los Medios de Cultivo

ELABORACIN DE MEDIOS DE CULTIVO
OBJETIVO:
Uno de los principales objetivos de esta prctica es el de conocer la elaboracin de un medio de cultivo y
llevarla a cabo. As como tambin aplicar conocimientos anteriores
FUNDAMENTO:
DISEO DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
A la hora de disear un medio de cultivo no slo hay que tener en cuenta los nutrientes sino tambin las
condiciones fsicas que permitan el crecimiento de los microorganismos.
1.- Aporte de nutrientes
La cantidad y naturaleza de los nutrientes en un medio de cultivo viene determinada por el rendimiento de
un producto en especial adems de los requerimientos nutricionales del microorganismo.
2.- pH
Un microorganismo puede alterar el pH del medio de cultivo como resultado de las sustancias producidas
por el propio microorganismo; por ejemplo:
Utilizacin de carbohidratos ----> Produccin de cidos orgnicos ----> Acidificacin
Catabolismo de protenas ----> Produccin de materiales nitrogenados ----> Alcalinizacin
Estos cambios pueden llegar a ser tan grandes que inhiban el crecimiento del microorganismo. Estos
cambios se pueden prevenir controlando el pH mediante sistemas tampn. Uno de los ms utilizados en
microbiologa es la combinacin de KH2PO4 y K2HPO4 tamponando el medio a un pH de
aproximadamente 6,8.
3.- Necesidades de gases
Los gases principales que afectan al desarrollo microbiano son el oxgeno y el dixido de carbono. Las
bacterias presentan una respuesta amplia y variable al oxgeno libre clasificndose en cuatro grupos:
i.- Aerobias: bacterias que se desarrollan en presencia de oxgeno libre.
ii.- Anaerobias: bacterias que se desarrollan en ausencia de oxgeno libre.
iii.- Anaerobias facultativas: bacterias que se desarrollan tanto en presencia como en ausencia de
oxgeno libre.
iv.- Microaerfilas: bacterias que crecen en presencia de pequeas cantidades de oxgeno libre.

Para desarrollar bacterias aerobias se incuban los medios de cultivo en agitacin constante o
introduciendo aire estril en el medio.
Los anaerobios estrictos son muy sensibles al O2 por lo que se debe evitar la exposicin de estos
microorganismos al O2. Se puede obtener un ambiente de anaerobiosis por los siguientes mtodos:
A.- Agregando al medio de cultivo un compuesto reductor, como es el tioglicolato sdico, para disminuir el
contenido de O2.
B.- Quitando el O2 por procedimientos mecnicos y reemplazndolo por N2 o CO2.
C.- Mediante reacciones qumicas dentro del recipiente que contiene el medio de cultivo inoculado para
combinar el oxgeno libre con otro compuesto. Por ejemplo: al encender una vela se transforma el
oxgeno en dixido de carbono.
4.- Suministro de luz
Los organismos fotosintticos debern ser expuestos a una fuente de iluminacin ya que la luz es su
fuente de energa. Esta fuente de iluminacin no debe plantear problemas de variacin de temperatura,

por lo que suelen usarse lmparas fluorescentes con un desprendimiento mnimo de calor.
5.- Control de la temperatura
El desarrollo de las bacterias depende de reacciones qumicas, y la velocidad con que se efectan estas
reacciones est influda por la temperatura, por lo que la temperatura puede en parte determinar la
velocidad de crecimiento de los microorganismos. Cada especie microbiana posee una temperatura
ptima de crecimiento clasificndose segn esto en los siguientes grupos:
i.- Psicrfilas: capaces de desarrollarse a 0 C o menos. Su temperatura ptima es alrededor de los 15
C.
ii.- Mesfilas: crecen mejor entre 25 y 40 C.
iii.- Termfilas: crecen mejor entre 45 y 60 C.

6.- Otros requerimientos

Halfilas: bacterias que para su crecimiento requieren altas concentraciones de sal (10 - 15%). Son
aquellas bacterias aisladas del mar y ciertos alimentos.
Otras bacterias, como las aisladas en las fosas marinas, requieren presiones superiores a las normales.
TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO
1.- Estado:
A.- Medios lquidos
B.- Medios slidos: llevan un agente solidificante (Agar) que es un polisacrido acdico producido por
ciertas algas rojas que gelifica por debajo de 45 C. Se usa a una concentracin del 1,5%.
C.- Medios semislidos: agar a una concentracin del 0,7%.

2.- Composicin:
A.- Medios sintticos o qumicamente definidos. Llevan fuente de carbono, fuente de nitrgeno, sales
que suplan iones (P, K, Mg, Fe, Ca...), otros elementos como son estimuladores del crecimiento (eritritol
para Brucella abortus) pero siempre a concentraciones conocidas.
B.- Medios complejos o de composicin indefinida. Estos medios llevan ingredientes como extracto de
levadura, peptona, infusin de cerebro, extracto de carne, etc. que contienen nutrientes en abundancia
pero sin saber con exactitud la composicin cualitativa ni cuantitativa de estos nutrientes.
C.- Medios de enriquecimiento. Son medios complejos (normalmente) con aditivos adicionales para
favorecer el crecimiento de determinados microorganismos (particularmente hetertrofos exigentes).
Ejemplo: adiccin de sangre, suero o extractos de tejidos de animales y plantas.
D.- Medios selectivos. Son aquellos que favorecen por su diseo el crecimiento especfico de un
microorganismo particular (o grupo de microorganismos). Es de gran utilidad para el aislamiento de
microorganismos a partir de una poblacin microbiana mixta. Ejemplo: CO2 como fuente de carbono es
selectivo para autotrofos; adiccionando cristal violeta se inhibe el crecimiento de los Gram (+); utilizando
maltosa como nica fuente de carbono slo crecern los que usen maltosa.
E.- Medios diferenciales. Son aquellos destinados a facilitar la discriminacin de microorganismos de
una mezcla por sus propiedades diferenciales de crecimiento en dichos medios. Ejemplo: Agar sangre
diferencia hemolticos de no hemolticos; McConkey diferencia lactosa (+) de lactosa (-).
F.- Medios de mantenimiento. Suelen ser distintos a los de crecimiento ptimo ya que el crecimiento
rpido y prolfico suele ocasionar la muerte rpida de las clulas. Ejemplo: al aadir glucosa y utilizarla los
microorganismos producen cidos, acidificndose el medio por lo que es preferible no utilizar glucosa en
los medios de mantenimiento.
Agar sangre:

Apto para el crecimiento de la mayora de los microorganismos de importancia clnica y para estudiar su
propiedad hemoltica. Se usa una base nutriente y sangre ovina estril al 5%.
El AS al 5% con base de Tripticasa-Soja es un medio de uso general que permite el crecimiento tanto de
microorganismos exigentes como no exigentes, que incluyen bacterias aerobias y anaerobias, aunque no
es medio de eleccin para anaerobios. Permite visualizar reacciones hemolticas que producen muchas
especies bacterianas.
Tiene por base una fuente proteica (digeridos trpticos, digeridos proteicos de soja) con una pequea
cantidad de hidratos de carbono naturales, cloruro sdico y 5% de sangre.
La aportacin de caseina y peptonas de soja al agar de Tripticasa-soja hace el medio en muy nutritivo por
el suministro de nitrgeno orgnico, particularmente aminocidos y pptidos de cadena ms larga. La
presencia de estas peptonas en el medio permite el cultivo de una gran varedad de grmenes aerobios y
anaerobios que crecen rpidamente, as como los del gnero Candida. Tambn permite el crecimiento
de algunos grmenes exigentes como estreptococos, pneumococos, Brucella,
corinebacterias, Erysipelothrix y Pasteurella.
El cloruro sdico proporciona electrolitos esenciales. La adicin de sangre de carnero desfibrinada
enriquece la base y lo hace un medio adecuado para realizar la prueba del factor CAMP.
Permite as mismo determinar la capacidad de algunas bacterias de producir enzimas extracelulares que
actan sobre los glbulos rojos, ya sea por lisis completa (hemlisis beta, produce un halo
transparentealrededor de la colonia hemoltica), parcial (hemlisis alfa, coloracin verdosa alrededor de la
colonia) o por ausencia de alteracin (hemlisis gamma).
La produccin de hemolisinas por las bacterias depende de muchos factores ambientales como pH o
atmsfera de incubacin.
Las muestras que puedan contener Brucella o Neisseria deben incubarse en atmsfera enriquecida en
CO2.
Si se aade al medio el 0,5% de telurito potsico es muy til par el cultivo y aislamiento selectivo
de Corynebacterium diphteriae, Candida albicans, Listeria y estreptococos.
PROCEDIMIENTO:

pesar el medio segn las indicaciones del envase, (staphylococus 110 44.7gr y agar
sangre 12gr)
Calentar agua
Vaciar el medio a un matrz Erlem Meyer y disolverlo.
Calentarlo con agitacin hasta que se haga translucido, cuidando que no ebulla
demasiado y as evitar que se derrame.
Se prepara para esterilizar y se pone a esterilizar a 15 lbs / 15 min.
ya estril, esperar a que baje la temperatura hasta poderla soportar con las manos, ya
que si se enfra demasiado se gelatiniza.
Vaciar el medio a las cajas de petri, dejndola en la campana esteril, abiertas hasta
que se enfre.
se deja enfriar, despus se tapa y se almacena en un refrigerador previamente
envueltas en papel hasta su uso.

MATERIAL:

agua

staphylococus 110

agar sangre

sangre

autoclave

cajas de petri

vaso de precipitado

matraz

parrilla

balanza

esptula

agitador

algodn

gasa

tape indicador

OPERACIONES Y RESULTADOS:
Se prepar el medio en un matraz de acuerdo a las instrucciones del envase y se dejo enfriar hasta que el
alumno lo pudo soportar con las manos y de vaci en las cajas de petri; despus se dej hasta que enfre
y gelifque. Se tapan las cajas de petri y se envuelven en papel almacenadas hasta que se vayan a utilizar
en un refrigerador.
En la presente prctica se prepararon exitosamente los medios de cultivo tanto de agar sangre como de
staphylococus para poderse utilizar en la siguiente practica.
CONCLUSIN:
En esta prctica se puede concluir que el alumno elaboro de manera correcta los medios entes
mancionados y podran ser utilizados en la proxima clase.

http://html.rincondelvago.com/medios-de-cultivo.html

Trabajo prctico n 1
Preparacin de medios de cultivo
2009
Jefe de Ctedra: Ing. Eduardo Santambrosio
Jefe de Trabajos Prcticos: Ing. Marta Ortega
Auxiliar de 1: Ing. Pablo A. Garibaldi1. OBJETIVOS
Que el alumno se familiarice con los diferentes constituyentes de los
nutrientes que los
microorganismos necesitan para su desarrollo, las formas de preparacin de
los diferentes
medios de cultivo y su aplicacin.
2. FUNDAMENTOS
2.1. Nutricin Definicin
La nutricin es el proceso por el que los seres vivos toman las sustancias
qumicas que
necesitan para crecer, del medio donde habitan. Dichas sustancias se
denominan
nutrientes, y se requieren para dos objetivos:
Energticos: Los microorganismos requieren energa del exterior.
Biosintticos: formar sustancias que constituyen la clula (Ej.: protenas)
Los nutrientes pueden clasificarse en:
Universales: Son aquellos nutrientes que todos, o bien la mayora de los
microorganismos, requieren para su crecimiento. Los ms importantes son:
agua, dixido de carbono (CO2), fosfatos, sales minerales.
Particulares: Se trata de elementos que pueden ser cubiertos de modo
muy
distinto, dependiendo de las capacidades biosintticas del microorganismo
que
se considere. Concretamente consideraremos los elementos N y S (que
requieren todos los seres vivos).

 Factores de crecimiento: Son molculas orgnicas especficas que algunas

bacterias necesitan, en muy pequea cantidad, para crecer. Salvo
excepciones no
tienen funcin plstica, ni sirven como fuente de energa. Suelen ser
coenzimas
o sus precursores, vitaminas, que determinadas bacterias no pueden
fabricar por
s mismas, al carecer de parte (o toda) de una ruta biosinttica.
Consideraremos
como ejemplos, oligoelementos, vitaminas y minerales.
2.2. Medios de cultivo
Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de
microorganismos es
observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas
en el
laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es
el Medio
de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo.
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo
artificial, ste
debe reunir una serie de condiciones tales como: temperatura, grado de
humedad y
presin de oxgeno adecuadas, as como un grado correcto de acidez o
alcalinidad. Un
medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento
necesarios y
debe estar exento de todo microorganismo contaminante. Clasificacin de
medios de cultivo:
Segn su estado fsico:
Lquidos
Usualmente se denominan caldos ya que
contienen los nutrientes disueltos en agua.
Permiten obtener suspensiones con un elevado

nmero de microorganismos. Ej. Caldo nutritivo.

Slidos
Se pueden preparar a partir de medios lquidos a los cuales se les aaden
agentes
solidificantes como agar, gelatina o slica gel. Se utilizan con frecuencia en
el
aislamiento y mantenimiento de los microorganismos en el laboratorio. Ej.
Agar
nutritivo.
El gelificante ms usado es el agar-agar,
extrado de las algas rojas (ej.: Gelidium),
del cual existen versiones ms o menos
purificadas. Las ms puras que se
enriquecen con el polisacrido agarosa
para evitar la introduccin de sustancias
contaminantes inadvertidas que falseen
las interpretaciones sobre el
comportamiento nutricional del
microorganismo; son las que se emplean
para los medios definidos (Ver ms abajo).
El agar presenta la gran ventaja de que una
vez gelificado, no funde hasta cerca de los
100 C, lo que permite su uso para la inmensa mayor a de los
microorganismos, que
son mesfilos. Segn la naturaleza de sus constituyentes:
Medios naturales, complejos o indefinidos
Estn constituidos por sustancias complejas de origen animal o vegetal y
usualmente
se complementan con el aadido de minerales y otras sustancias. No se
conocen

todos los componentes del medio de cultivo, ni las cantidades exactas en

que estn
presentes. Este tipo de medio es el ideal para cuando simplemente se
pretende
obtener un buen crecimiento microbiolgico, ya que su confeccin es fcil y
rpida
(Basta pesar una cierta cantidad del extracto desecado, suministrado por
casas
comerciales, disolverlo en agua y esterilizar en autoclave). Ej. Extracto de
carne,
extracto de levaduras.
Medios sintticos
Se preparan a partir de ingredientes qumicamente puros y por lo tanto se
puede
conocer exactamente su composicin cuali y cuantitativa. Por su costo slo
se
emplean en procedimientos especiales.
Medios mezcla de los anteriores
Denominado medio semisinttico, llevan algunas sustancias qumicas cuya
naturaleza
y cantidad se conoce, junto con sustancias de naturaleza y composicin
indefinida.
Segn sus propsitos de uso:
Medios de enriquecimiento
Se llama enriquecimiento a cualquier cultivo en medio lquido que resulte en
un
incremento en el nmero de un tipo dado de microorganismo en relacin
con el
nmero de otros tipos de microorganismos que puedan estar en el inculo.
Un medio de enriquecimiento puede contener sustancias que favorezcan el
crecimiento del microorganismo que nos interesa o que inhiban el
crecimiento de los
otros tipos de microorganismos presentes. La selectividad de un cultivo de

enriquecimiento no est determinada nicamente por la composicin

qumica del
medio usado, sino que en un medio dado puede ser variada
significativamente
modificando otros factores tales como: temperatura, pH, fuerza inica,
iluminacin,
aireacin, etc.
Ej. Caldo tetrationato utilizado para el enriquecimiento de las especies del
gnero
Salmonella provenientes de muestras de heces, orina, agua o alimentos.
Medios selectivos
Son bsicamente iguales a los de enriquecimiento, se diferencian por ser
medios
slidos y estn diseados para el aislamiento de microorganismos
especficos.
Ej. Agar desoxicolato citrato utilizado para el aislamiento de patgenos
entricos.
Medios diferenciales
No contienen sustancias inhibidoras, es decir, permiten el crecimiento de
muchos tipos
de microorganismos, pero s contienen indicadores de productos derivados
de la
actividad metablica de los microorganismos sobre algunos de los
componentes del
medio. Se utilizan para la identificacin de los microorganismos.
Ej.: Agar base rojo fenol utilizado para detectar fermentacin de
carbohidratos. Medios selectivos diferenciales
A veces se combinan en un mismo medio las caractersticas de ser selectivo
y
diferencial.
Por ejemplo, el agar Mac Conkey, este medio contiene sales biliares y cristal
violeta,
que inhiben el crecimiento de las bacterias gram positivas. Pero como
tambin

contiene lactosa y un indicador de pH permite distinguir entre las bacterias

fermentadoras de lactosa y las que no lo son.
2.3. Ejemplos de medios de cultivo
Agua peptonada
Medio usado como diluyente y para enriquecimiento bacteriano a partir de
alimentos y otros materiales de inters sanitario.
APC Agar plate count
Medio de cultivo recomendado para el recuento de bacterias aerbicas en
aguas, aguas residuales, productos lcteos y otros alimentos. Tambin es
recomendado como medio general para determinar poblaciones
microbianas.
Baird Parker Medio Base
Medio de alta especificidad diagnstica, selectivo y diferencial para el
aislamiento y recuento de estafilococos coagulasa positiva en alimentos y
otros
materiales de importancia sanitaria.
VRBL Violeta Rojo Bilis Lactosa
Medio selectivo para la investigacin presuntiva y recuento de coliformes en
alimentos y productos lcteos. Es importante aclarar que este medio en
particular no debe esterilizarse en autoclave.
EMB (eosina-azul de metileno)
Este medio (tambin denominado E.A.M.) es utilizado para el aislamiento
selectivo de bacilos Gram negativos de rpido desarrollo y escasas
exigencias
nutricionales. Permite el desarrollo de todas las especies de la familia
Enterobacteriaceae.
YGC (extracto de levadura, glucosa, cloramfenicol)
Medio selectivo recomendado para el recuento genrico de mohos y
levaduras.
Caldo Mac Conkey

Medio de cultivo selectivo, utilizado para la investigacin presuntiva de

microorganismos coliformes en aguas, alimentos y otros materiales de
importancia sanitaria.
Caldo lactosado
Se recomienda como prueba presuntiva para investigar la presencia de
bacterias del grupo coliforme en agua, productos lcteos, etc.
Actualmente tambin est indicado para el preenriquecimiento no selectivo
en
la bsqueda de Salmonella spp. a partir de alimentos 2.4. Medios de cultivo
preparados listos para usar
En la actualidad los profesionales tienen la posibilidad de contar con medios
de
cultivos preparados en placas, tubos, frascos listos para usar. Al elegir esta
opcin, ahorran tiempo pudindolo emplear en tareas ms inherentes a su
rol en
el laboratorio.
Existen tambin las Placas Petrifilm de 3M, que son una herramienta segura
y
sencilla para todas aquellas personas que deban realizar anlisis
microbiolgicos
en alimentos en
particular.
Debido a su muy
ingeniosa
conformacin de
gran similitud al
mtodo
tradicional, del
que extrae sus
ventajas (medios
de cultivo ms

que probados) y
elimina el
inconveniente de
trabajar a
temperatura
(tornando no
viables bacterias injuriadas), es que poseen una enorme versatilidad para
realizar
ensayos en sitios aislados, en situaciones que requieran gran delicadeza en
el
tratamiento trmico de muestras con bacterias necesitadas de recuperacin
y
varias aplicaciones no habituales en las cuales han mostrado un excelente
desempeo.
Cuando se requiere la realizacin de mltiples lecturas o para evitar
posibles
variaciones entre distintos tcnicos del
laboratorio, 3M ofrece la posibilidad de
utilizar un lector de placas, que proporciona
una lectura y registro consistentes y
automatizados de los resultados de las
Placas 3M Petrifilm (Recuento de Aerobios,
Coliformes, E. coli/Coliformes y Selectivo E.
coli) en tan solo 4 segundos.3. DESARROLLO
El trabajo en laboratorio consiste en preparar diferentes tipos de medios de
cultivo
lquidos, slidos, genricos, selectivos y diferenciales.
3.1. Materiales
Erlenmeyer de 250 cm
3

(uno por cada medio a preparar)

Varilla de vidrio
Medios de cultivo
Agua destilada csp
Recipientes para bao Mara
Tubos de ensayo
Tapones para tubos esterilizables, o bien gasa y algodn csp
Mecheros
Balanza
3.2. Preparacin de medios de cultivo slidos
1. Pesar la cantidad necesaria para preparar 250 cm
3
de medio de cultivo
2. Agregar 250 cm
3
de agua destilada
3. Homogeneizar con varilla de vidrio
4. Sumergir el erlenmeyer en bao Mara, agitando suavemente hasta la
disolucin total del medio
5. Distribuir el medio en porciones de 10 a 12 ml en tubos de ensayo, o
bien
dejarlo en el erlenmeyer
6. Tapar con tapones de plstico esterilizables, o en su defecto con
torundas de
algodn
7. Esterilizar en autoclave o a vapor fluente segn corresponda. (TP N
2)3.3 Preparacin de medios de cultivo lquidos
1. Pesar la cantidad necesaria para preparar 250 cm
3
de medio de cultivo

2. Agregar 250 cm
3
de agua destilada
3. Homogeneizar y disolver con varilla de vidrio
4. Una vez disuelto el medio, distribuirlo en porciones de 10 a 12 ml en
tubos
de ensayo
5. Tapar con tapones de plstico esterilizables, o en su defecto con
torundas
de algodn
6. Esterilizar en autoclave o a vapor fluente segn corresponda. (TP N 2)