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Microscopio electrnico

Un microscopio electrnico es aqul que utiliza electrones en lugar de fotones o luz


visible para formar imgenes de objetos diminutos. Los microscopios electrnicos
permiten alcanzar ampliaciones hasta 5100 veces ms potentes que los mejores
microscopios opticos, debido a que la longitud de ondas de los electrones es mucho
menor que la de los fotones "visibles".
El primer microscopio electrnico fue diseado por Ernst Ruska y Max Knoll entre
1925 y 1930, quienes se basaron en los estudios de Louis-Victor de Broglie acerca de las
propiedades ondulatorias de los electrones.
Un microscopio electrnico, como el de la imagen, funciona con un haz de electrones
generados por un can electrnico, acelerados por un alto voltaje y focalizados por
medio de lentes magnticas (todo ello al alto vaco ya que los electrones son absorbidos
por el aire). Un rayo de electrones atraviesa la muestra (debidamente deshidratada y en
algunos casos recubierta de una fina capa metlica para resaltar su textura) y la
amplificacin se produce por un conjunto de lentes magnticas que forman una imagen
sobre una placa fotogrfica o sobre una pantalla sensible al impacto de los electrones
que transfiere la imagen formada a la pantalla de un ordenador. Los microscopios
electrnicos producen imgenes sin ninguna clase de informacin de color, puesto que
este es una propiedad de la luz y no hay una forma posible de reproducir este fenmeno
mediante los electrones; sin embargo, es posible colorear las imgenes posteriormente,
aplicando tcnicas de retoque digital a travs del ordenador.
Limitaciones del microscopio electrnico
El limitado dimetro de la apertura no permite que la informacin detallada
alcance la imagen, limitando de este modo la resolucin.
El contraste de amplitud (que radica en la naturaleza corpuscular de los
electrones) se debe al contraste de difraccin, provocado por la prdida de
electrones del rayo. Es un contraste dominante en espcimenes gruesos.
El contraste de fase (que radica en la naturaleza ondulatoria de los electrones) se
debe al contraste de interferencia provocado por los desplazamientos en las fases
relativas de las porciones del rayo. Es un contraste dominante en espcimenes
finos.
Existen tambin distintas aberraciones producidas por las lentes: astigmtica,
esfrica y cromtica
El problema de la funcin de transferencia de contraste (CTF): la CTF describe
la respuesta de un sistema ptico a una imagen descompuesta en ondas
cuadrticas.
El material biolgico presenta dos problemas fundamentales: el entorno de vaco y la
transferencia de energa. Para resolverlos, se utilizan distintas tcnicas dependiendo del
tamao de la muestra:
para muestras grandes como rganos, tejidos o clulas, se utilizan tres tcnicas:
1. la fijacin qumica o la criofijacin;
2. la inclusin en resinas (criosustitucin);

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la rplica metlica;
para muestras pequeas como complejos macromoleculares se utilizan las
siguientes tcnicas:
la tincin negativa: los agentes de tincin ms usados son el molibdato amnico,
el fosfotungstato sdico y sales de uranio como acetato y formiato. Todos ellos
presentan las siguientes propiedades: interactan mnimamente con la muestra y
son estables en la interaccin con los electrones, son altamente solubles en agua,
presentan una alta densidad que favorece el contraste, tienen un punto alto de
fusin, tienen un tamao de grano pequeo;
la rplica metlica: para construir la rplica metlica se evapora el metal
(estao), que se deposita sobre la muestra a la vez que esta, por el vaco, se
disuelve;
la criomicroscopa.

Tipos de microscopios electrnicos


Existen dos tipos principales de microscopios electrnicos: el microscopio electrnico de
transmisin y el microscopio electrnico de barrido.
Microscopio electrnico de transmisin
El microscopio electrnico de transmisin emite un haz de electrones dirigido hacia el
objeto cuya imagen se desea aumentar. Una parte de los electrones rebotan o son
absorbidos por el objeto y otros lo atraviesan formando una imagen aumentada de la
muestra. Para utilizar un microscopio electrnico de transmisin debe cortarse la
muestra en capas finas, no mayores de un par de miles de ngstroms. Los microscopios
electrnicos de transmisin pueden aumentar la imagen de un objeto hasta un milln
de veces.
Microscopio electrnico de barrido (MEB)
Imagen de una hormiga tomada con un MEB (microscopio electrnico de barrido).
Artculo principal: Microscopio electrnico de barrido
En el microscopio electrnico de barrido (MEB) la muestra es recubierta con una capa
de metal delgado, y es barrida con electrones enviados desde un can. Un detector
mide la cantidad de electrones enviados que arroja la intensidad de la zona de muestra,
siendo capaz de mostrar figuras en tres dimensiones, proyectados en una imagen de TV.
Su resolucin est entre 3 y 20 nm, dependiendo del microscopio. Permite obtener
imgenes de gran resolucin en materiales ptreos, metlicos y orgnicos. La luz se
sustituye por un haz de electrones, las lentes por electroimanes y las muestras se hacen
conductoras metalizando su superficie.
Aplicaciones en distintas reas
En el estudio de los circuitos integrados se suele utilizar el microscopio electrnico
debido a una curiosa propiedad: Como el campo elctrico modifica la trayectoria de los

electrones, en un circuito integrado en funcionamiento, visto bajo el microscopio


electrnico, se puede apreciar el potencial al que est cada elemento del circuito.
El microscopio electrnico es un dispositivo que utiliza un haz de electrones dirigidos
hacia una muestra a analizar y produciendo una imagen en una pantalla sensible a los
electrones. ste tipo de microscopio permite realizar aumentos de hasta 2.000.000x,
frente a los microscopios pticos que producen aumentos de 2.000x, gracias a que la
longitud de onda de los electrones (0,5 Angstroms) es mucho menor que la de la luz
visible (4.000 Angstroms).

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