ANALISIS INSTRUMENTAL

363
13:20-14:50
Martes-Jueves
Saln 214
Licda. Ingrid Bentez

CROMATOGRAFIA DE GASES
La cromatografa de gases es una tcnica
cromatogrfica en la que la muestra se volatiliza y
se inyecta en la cabeza de una columna
cromatogrfica.
La elucin se produce por el flujo de una fase
mvil de gas inerte. A diferencia de los otros tipos
de cromatografa, la fase mvil no interacciona
con las molculas del analizo; su nica funcin es
la de transportar el analito a travs de la columna.


Existen dos tipos de cromatografa de gases

(GC): la cromatografa gas-slido (GSC) y la

cromatografa gas-lquido (GLC), siendo
esta ltima la que se utiliza ms
ampliamente, y que se puede llamar
simplemente cromatografa de gases (GC).

En la GSC la fase estacionaria es slida y la
retencin de los analitos en ella se produce
mediante el proceso de adsorcin.


La GC se lleva a cabo en un

cromatgrafo de gases. ste consta

de diversos componentes como el
gas portador, el sistema de
inyeccin de muestra, la columna
(generalmente dentro de un
horno), y el detector.

Gas portador

El gas portador cumple bsicamente dos
propsitos: Transportar los componentes de la
muestra, y crear una matriz adecuada para el
detector. Un gas portador debe reunir ciertas
condiciones:

-Debe ser inerte para evitar interacciones (tanto
con la muestra como con la fase estacionaria) Debe ser capaz de minimizar la difusin gaseosa Fcilmente disponible y puro -Econmico Adecuado al detector a utilizar


El gas portador debe ser un gas inerte, para

prevenir su reaccin con el analito o la columna.
Generalmente se emplean gases como el helio,
argn, nitrgeno, hidrgeno o dixido de carbono,
y la eleccin de este gas en ocasiones depende del
tipo de detector empleado. El almacenaje del gas
puede ser en balas normales o empleando un
generador, especialmente en el caso del nitrgeno
y del hidrgeno. Luego tenemos un sistema de
manmetros y reguladores de flujo para
garantizar un flujo estable y un sistema de
deshidratacin del gas, como puede ser un tamiz
molecular.


Generalmente la regulacin de la presin se hace

a dos niveles: un primer manmetro se sita a la
salida de la bala o generador del gas y el otro a la
entrada del cromatgrafo, donde se regula el flujo.
Las presiones de entrada varan entre 10 y 25 psi,
lo que da lugar a caudales de 25 a 150 mL/min en
columnas de relleno y de 1 a 25 mL/min en
columnas capilares. Para comprobar el caudal se
puede utilizar un rotmetro o un simple medidor
de pompas de jabn, el cual da una medida muy
exacta del caudal volumtrico que entra a la
columna.

Sistema de inyeccin de muestra

La inyeccin de muestra es un apartado crtico, ya que
se debe inyectar una cantidad adecuada, y debe
introducirse de tal forma (como un "tapn de vapor")
que sea rpida para evitar el ensanchamiento de las
bandas de salida; este efecto se da con cantidades
elevadas de analito. El mtodo ms utilizado emplea
una microjeringa (de capacidades de varios
microlitros) para introducir el analito en una cmara
de vaporizacin instantnea. Esta cmara est a 50C
por encima del punto de ebullicin del componente
menos voltil, y est sellada por una junta de goma de
silicona septa o septum.


Si es necesaria una reproducibilidad del tamao

de muestra inyectado se puede usar una vlvula
de seis vas o vlvula de inyeccin, donde la
cantidad a inyectar es constante y determinada
por el tamao del bucle de dicha vlvula.

Un muestreador automtico Head spacer para GC
(accesorio)

Si la columna empleada es ordinaria, el volumen a
inyectar ser de unos 20 L, y en el caso de las
columnas capilares dicha cantidad es menor, de
10-3 L. Para obtener estas cantidades, se utiliza
un divisor de flujo a la entrada de la columna que
desecha parte del analito introducido.


En

caso de muestras slidas,

simplemente se introducen en
forma de disolucin, ya que en la
cmara
de
vaporizacin
instantnea el disolvente se pierde
en la corriente de purga y no
interfiere en la elucin.

Columnas y sistemas de control de

temperatura

En GC se emplean dos tipos de

columnas: las empaquetadas o de

relleno y las tubulares abiertas o
capilares. Estas ltimas son ms
comunes en la actualidad (2005)
debido a su mayor rapidez y eficiencia.


La longitud de estas columnas es

variable, de 2 a 50 metros, y estn

construidas en acero inoxidable,
vidrio, slice fundida o tefln. Debido a
su longitud y a la necesidad de ser
introducidas en un horno, las
columnas suelen enrollarse en una
forma helicolidal con dimetros de 10 a
30 cm, dependiendo del tamao del
horno.


La

temperatura es una variable

importante, ya que de ella va a
depender el grado de separacin de los
diferentes analitos. Para ello, debe
ajustarse con una precisin de dcimas
de grado. Dicha temperatura depende
del punto de ebullicin del analito o
analitos, y por lo general se ajusta a un
valor igual o ligeramente superior a l.


Para estos valores, el tiempo de elucin va a

oscilar entre 2 y 30-40 minutos. Si tenemos varios
componentes con diferentes puntos de ebullicin,
se ajusta la llamada rampa de temperatura con
lo cual sta va aumentando ya sea de forma
continua o por etapas. En muchas ocasiones, el
ajustar correctamente la rampa puede significar
separar bien o no los diferentes analitos. Es
recomendable utilizar temperaturas bajas para la
elucin ya que aunque a mayor temperatura la
elucin es ms rpida, se corre el riesgo de
descomponer el analito.

DETECTORES

El

detector es la parte del

cromatgrafo que se encarga de
determinar cundo ha salido el analito
por el final de la columna. Las
caractersticas de un detector ideal
son:

CARACTERISTICAS

Sensibilidad: Es necesario que pueda determinar con
precisin cundo sale analito y cuando sale slo el gas
portador. Tienen sensibilidades entre 10-8 y 10-15 g/s de
analito.

Respuesta lineal al analito con un rango de varios
rdenes de magnitud.

Tiempo de respuesta corto, independiente del
caudal de salida.

Intervalo de temperatura de trabajo amplio, por
ejemplo desde temperatura ambiente hasta unos 350400C, temperaturas tpicas trabajo.


No debe destruir la muestra.

Estabilidad y reproducibilidad, es decir, a
cantidades iguales de analito debe dar salidas de seal
iguales.

Alta fiabilidad y manejo sencillo, o a prueba de
operadores inexpertos.

Respuesta semejante para todos los analitos, o

Respuesta selectiva y altamente predecible para
un reducido nmero de analitos.

Algunos tipos de detectores:

Detector de ionizacin
Ionization Detector).

de llama (FID, Flame

Detector de conductividad trmica (TCD, Thermical

Conductivity Detector).

Detector termoinico (TID, ThermoIonic Detector).

Detector de captura de electrones (ECD, ElectronCapture Detector).

Detector de emisin atmica (AED, Atomic Emission
Detector).

Detector de ionizacin de LlamaFID

Es uno de los detectores ms usados y

verstiles. Bsicamente es un quemador de

hidrgeno/oxgeno, donde se mezcla el
efluente de la columna (gas portador y
analito) con hidrgeno. Inmediatamente,
este gas mezclado se enciende mediante
una chispa elctrica, producindose una
llama de alta temperatura.


La mayora de compuestos orgnicos al

someterse a altas temperaturas pirolizan y se
producen iones y electrones, que son
conductores elctricos. Este hecho se
aprovecha estableciendo una diferencia de
potencial de unos centenares de voltios entre
la parte inferior del quemador y un electrodo
colector situado por encima de la llama. La
corriente generada es baja (del orden de los 1012 A), por lo tanto debe ser amplificada
mediante un amplificador de alta impedancia


Existen algunos grupos funcionales que no

dan respuesta en este detector, como el

carbonilo, alcohol, halgeno o amina, y
tampoco responden gases no inflamables
como el CO2, SO2, agua y xidos de
nitrgeno. Este hecho, ms que limitar el
mbito de aplicacin de este detector,
permite
el
anlisis
de
muestras
contaminadas
con
alguno
de
los
compuestos mencionados.


Ventajas:

Alta sensibilidad, del orden de 10-13 g/s.

Amplio intervalo lineal de respuesta, 107

unidades.

Bajo ruido de fondo (elevada relacin
seal/ruido).

Bajo mantenimiento, fcil de fabricar.

Desventajas:

Destruye la muestra (la piroliza).

Detector de conductividad
trmica-TCD

Tiene una amplia aplicacin y su uso se basa en la
diferencia de conductividad trmica del gas
portador cuando circula tambin analito. Este tipo
de detector se denomina tambin catarmetro. El
sensor de un catarmetro consiste en un elemento
calentado elctricamente (resistencia). Esta
resistencia, para una potencia elctrica constante,
tiene una temperatura que depende del gas
circundante


Los gases empleados como portadores

permiten distinguir con facilidad cundo el

gas lleva analito, debido a que las
conductividades del hidrgeno y helio son
de 6 a 10 veces mayores que la mayora de
compuestos orgnicos. Este efecto no se da
en otros gases portadores como el
nitrgeno, por lo cual el uso de este
detector est limitado a la utilizacin de
hidrgeno o helio como gas portador.


Ventajas de este detector:

Simplicidad.

Amplio rango dinmico lineal, 105 unidades.

Respuesta universal a compuestos orgnicos e
inorgnicos.

Detector no destructivo.

Desventajas:

Sensibilidad relativamente baja, 10-8 g de
soluto/ml de gas portador.

Imposibilidad de utilizarlo en columnas capilares
(caudal de salida pequeo).

Detector termoinico-TID

Es selectivo para compuestos orgnicos fosforados y
nitrogenados, aunque su respuesta no es igual para
ambos elementos, siendo para el fsforo 10 veces
mayor que para el nitrgeno. Es unas 500 veces ms
sensible que el detector de ionizacin de llama para
compuestos fosforados y unas 50 veces ms sensible
para compuestos nitrogenados (tpicamente aminas,
nitratos y otras especies). Debido a esta sensibilidad
obtenida con compuestos fosforados, su uso es amplio
en la determinacin de pesticidas fosforados.

Detector de captura de electrones

Fue inventado por James
Lovelock.
Su
funcionamiento bsico
se basa en la emisin de
una
partcula

(electrn) por parte de

tomos como el 63Ni o
tritio adsorbido sobre
una placa de platino o
titanio.


Este detector es muy selectivo, y es sensible a la

presencia
de
molculas
con
grupos
electronegativos como halgenos, perxidos,
quinonas y grupos nitro, grupos que contienen
tomos de halgeno (cloro, bromo, yodo),
oxgeno y nitrgeno. Otros grupos como el
alcohol, amina e hidrocarburos no dan seal.

Se aplica en la deteccin de molculas que
contienen halgenos, principalmente cloro, como
algunos insecticidas o bifenilos policlorados


Ventajas:

Simple y robusto.

Bajo mantenimiento.

No destructivo.

Muy sensible, del orden de 10-12g/ml de gas
portador.

Desventajas:

Bajo rango dinmico lineal, 10 unidades.

Precauciones de uso debido a la presencia de
material radiactivo (63Ni o tritio). Dicho material
se encuentra en un cilindro sellado de acero y
debe ser revisado peridicamente.