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Centro universitrio Catlico Salesiano Auxilium de

Lins

QUMICA BACHAREL
Relatrio de Microbiologia
PRESENA DE MICROORGANISMOS NO
AMBIENTE
Csar Augusto Rocha

LINS, 17 DE ABRIL DE 2013

1 - SUMRIO

Introduo-----------------------------------------------------------------------pgina 03
Objetivos-------------------------------------------------------------------------pgina 04
Metodologia---------------------------------------------------------------------pgina 04

Esterilizao das placas de Petri------------------------------------pgina 04


Preparo do meio gar nutriente--------------------------------------pgina 04
Exposio das placas a diferentes ambientes-------------------pgina 05

Resultados-----------------------------------------------------------------------pgina 07
Concluso------------------------------------------------------------------------pgina 10
Referncias Bibliogrficas------------------------------------------------pgina 11

2 - INTRODUO

Microrganismo o nome dado a todos os organismos compostos por


uma nica clula e que no podem ser vistos a olho nu, sendo visveis apenas
com o auxlio de um microscpio. Podem estar reunidos organismos
pertencentes aos mais diversos grupos, como, por exemplo, vrus, bactrias,
fungos unicelulares e protistas. A rea que estuda esses pequenos organismos
chamada de microbiologia. Muitas vezes, o termo associado transmisso
de doenas. No entanto, nem todos os microrganismos so patognicos,
existindo at mesmo aqueles que so benficos sade humana, como o
caso das bactrias da flora intestinal.Os microrganismos, tal como outros
organismos vivos, necessitam de obter os nutrientes apropriados do seu meio
ambiente. Assim se quisermos cultivar e manter microrganismos vivos em
laboratrio, necessitamos coloca-los em meios de cultura contendo os
nutrientes apropriados para o seu crescimento. Alm dos nutrientes
necessrio tambm que as condies de oxignio, pH e presso osmtica
sejam adequadas ao crescimento desses microrganismos. Na preparao dos
meios e na manuteno das culturas de microrganismos importante observar
as condies necessrias de assepsia, de modo que se evitem contaminaes
com outros microrganismos. Os meios de cultura dividem-se primeiramente em
meios slidos, aqueles que contm gar, e meios lquidos, sem gar. Ambos os
meios so preparados com gua destilada, aquecidos at que se dissolvam
completamente e posteriormente esterilizados por autoclavagem a 121 C. Nos
meios slidos o crescimento para por exausto de nutrientes, devendo realizarse a transferncia de colnias para novo meio. No entanto estes meios
permitem a individualizao das colnias. Os meios lquidos permitem melhor
difuso de metablitos, mas no o isolamento de colnias. O crescimento de
bactrias, em um meio liquido, identifica-se por turvao do meio, formao de
uma pelcula na sua superfcie, ou aparecimento de sedimento, enquanto que
num meio slido por aparecimento de colnias, essa caracterstica
conveniente para isolamento de colnias de bactrias. As colnias de
diferentes espcies de bactrias diferem no tamanho, forma, textura e cor.
Aps a incubao e havendo crescimento devemos observar a forma da
colnia, os seus bordos e a cor.

3 - OBJETIVOS

O procedimento apresentado aqui busca mostrar a diversidade de


culturas microbianas existentes no ambiente e familiarizar-se com o preparo de
meios de cultura. A implementao de procedimentos particulares associados
s metodologias necessrias para manipular culturas microbianas mantem as
condies ideais para a segurana no laboratrio devido s reduzidas
dimenses das clulas, imperceptveis a olho nu e pela necessidade de
trabalhar com culturas celulares puras e/ou impuras, as quais podem conter um
nmero elevadssimo de clulas microbianas. Os procedimentos realizados
devem incluir o cumprimento de regras de funcionamento, de medidas de
segurana obrigatrias e o manuseamento correto e cuidadoso do material,
dos reagentes qumicos e do equipamento laboratorial.
O estudo mostra a importncia da assepsia e desinfeco apropriadas
para restringir os microrganismos presentes em recipientes, ambientes,
balces, nas mos, cabelos, roupas, superfcies e no ar.

4 - METODOLOGIA
4.1 Esterilizaes das placas de Petri
As placas devem ser esterilizadas, secas e limpas, embrulhadas em
papel manilha ou semelhante, esterilizadas em autoclave, a 1 atmosfera
de presso por 20 minutos.

4.2 Preparo do meio gar nutriente


Pesar a quantidade adequada de gar nutriente em Erlenmeyer de 250
ml, adicionar a quantidade de gua destilada necessria. Levar o
conjunto ao banho-maria at dissoluo do gel. A seguir o gar
colocado em recipiente prprio (Schott) para esterilizao e tampado a
seguir, autoclavar o meio nutriente a 121C com presso de 1 atmosfera
por 15 min. Aps a esterilizao deixar o gar esfriar, em temperatura
ambiente, at que se consiga segurar o frasco com as mos, sem
queim-las (50-55C ). Verter aproximadamente 15 ml do meio nas
placas assepticamente, prximo chama. Deixar o gar solidificar em
temperatura ambiente e depois estocar adequadamente as placas, para
posterior utilizao. As placas devem ser estocadas e/ou incubadas
sempre invertidas, para que qualquer condensado, por ventura formado,
no se misture ao meio de cultura, a uma temperatura de 4C.

4.3 Exposio das placas a diferente ambientes


4.3.1 Uma das placas contendo gar nutriente foi levada at o interior
do banheiro masculino prximo a entrada principal do Centro
Universitrio Catlico Salesiano Auxilium de Lins e mantida aberta
durante 15 minutos, nas proximidades dos vasos sanitrios. Com
uma caneta de retroprojetor a mesma foi identificada, anotando
na sua tampa o nome do grupo responsvel e o local onde a
placa foi exposta.
4.3.2 Outra placa com gar foi levada at o interior do banheiro
feminino no ultimo andar do prdio A do Centro Universitrio
Catlico Salesiano Auxilium de Lins ficando aberta por 15
minutos. Com uma caneta de retroprojetor a placa foi identificada
com o nome do grupo responsvel e o local.
4.3.3 Em outra placa contendo gar, utilizando a caneta na parte de
baixo da placa foi feita uma diviso em quatro partes iguais
formando quatro quadrantes distintos. Cada quadrante foi
semeado da seguinte forma:

1 Quadrante Encostou-se o dedo indicador da mo direita suavemente no


gar sem utilizar nenhum tipo de antissepsia. Identificou-se o quadrante como
C (Controle).

2 Quadrante O mesmo dedo foi lavado com gua e sabo por 1 minuto,
secado com gaze estril e pressionado suavemente no gar. Identificou-se o
quadrante como MS (Mo Suja).

3 Quadrante No mesmo dedo foi feito antissepsia com gaze embebida em


lcool etlico a 70% por 1 minuto e tocado o gar da mesma forma. Identificouse o quadrante como DET (Detergente).

4 Quadrante - No mesmo dedo foi feito antissepsia com gaze embebida em


lcool iodado por um minuto e tocado o gar. Identificou-se o quadrante como
AI (lcool).

Figura 1 Esquema das marcaes dos quadrantes

5 RESULTADOS

As placas de Petri que foram expostas no banheiro feminino


apresentaram crescimento de vrias colnias bem definidas evidenciando trs
tipos distintos de bactrias e um tipo de fungo. Em uma comparao com
imagens de referncia de sites especializados em microbiologia tem-se a
concluso de que trata-se das seguintes bactrias:

Escherichia coli (Colnia em forma circular e esbranquiada)


Staphylococcus aureus (Colnia de cor amarelo escuro)
Enterococcus (A nica colnia alaranjada da placa)
Aspegillus (Colnia em forma de nvoa de cor branca

S. aureus

E. coli

Aspergillus

A placa de Petri que foi exposta no banheiro masculino apresentou uma


variao menor em relao do banheiro masculino. Nota-se que, apesar de
apresentar as mesmas qualidades de bactrias, a quantidade de colnias foi
bem menor. Em uma comparao com imagens de referncia de sites
especializados em microbiologia tem-se a concluso de que tratam-se das
mesmas bactrias do exemplo anterior:

Escherichia coli (Colnia em forma circular e esbranquiada)


Staphylococcus aureus (Colnia de cor amarelo escuro)
Enterococcus (A nica colnia alaranjada da placa)
Aspegillus (Colnia em forma de nvoa de cor branca

CRESCIMENTO MICROBIANO NAS PLACAS


1 quadrante:
2 quadrante:
3 quadrante:
4 quadrante:

Apesar de no ter sido tocado durante a inoculao dos quadrante


vizinhos houve crescimento de 1 colnia de fungos e duas colnias S
aureus.
Grande quantidade de colnias, aproximadamente 20 colnias de S
aureus, 2 colnias de E. coli e 1 colnia de Enterococcus.
Houve um crescimento mais reduzido de ambas as bactrias, o que
interessante pois o dedo sofreu antiassepsia somente com detergente
Em relao aos outros quadrantes foi o que apresentou o maio
crescimento de E. coli, mesmo sendoo nico campo que foi inoculad
aps a antiassepsia com lcool 70%.

6 - CONCLUSO

Fica claro que em todos os lugares onde exercemos nossas atividades


dirias, so encontrados microrganismos das mais variadas formas. Os microorganismos so vitais para o meio ambiente e consequentemente para a vida
humana, participam do ciclo do carbono e do ciclo do nitrognio cumprindo
papis importantes em praticamente todos os ecossistemas, como por
exemplo a reciclagem de restos mortais de outros organismos atravs
de decomposio, so usados no preparo de alimentos, no tratamento de
gua, na produo de energia, e at mesmo na guerra. No passado as
bactrias liberaram oxignio para nossa atmosfera atravs de fotossntese e
com o aumento da concentrao desse gs foi possvel a diversificao dos
seres vivos .
Frequentemente somos atacados por esses seres que nos causam
doenas, muitas delas graves. Existem centenas de doenas causadas por
bactrias, fungos, protozorios, apesar disso a vasta maioria dos microorganismos nos ajudam e protegem. Sem eles, nosso planeta no teria o
oxignio de que precisamos. No procedimento apresentado ficou mais claro
ainda que o mtodo de inoculao, a forma como expomos o gar
atmosfera influenciam diretamente os resultados de contagem, diversidade e
quantidade de colnias que so formadas. A utilizao de um bico de Bunsen
primordial para proceder na inoculao das placas a partir dos dedos da
mo, o que ficou evidente em uma das amostras onde o quadrante de
controle apresentou crescimento de bactrias.
Mais evidente ainda a necessidade que todos ns devemos ter em
relao a higienizao das mos, e de todos os utenslios que entram em
contato com o nosso corpo, afinal, entre todos os lugares o corpo humano
ainda o melhor lar para as bactrias.

7 Referencias Bibliogrficas

http://pathmicro.med.sc.edu/Portuguese/chapter_2_bp.htm
http://www.pnas.org/content/early/2010/03/01/1000162107.abstract?sid=c2180f30-9fb4-4394-b97830bdf4867303
http://www.pnas.org/content/early/2010/03/01/1000162107.abstract?sid=c2180f30-9fb4-4394-b97830bdf4867303
http://portaldoprofessor.mec.gov.br/fichaTecnicaAula.html?aula=20015
http://www.popa.com.br/diversos/coliformes.htm
http://microbitos.wordpress.com/2010/06/14/morfologia-colonial-bacteriana/
http://www.scielo.br/img/revistas/dpjo/v16n3/a13fig1.jpg
http://microdidatica.wordpress.com/microbiologia-geral/aspectos-culturais/
http://pontociencia.org.br/experimentos-interna.php?experimento=348
http://www.flickr.com/photos/juanexpert/4944553340/