Trabajo Prctico N4

CLULA
La clula es la unidad estructural y funcional de todo ser vivo y su conocimiento es fundamental
para el estudio de la biologa, como lo son los tomos para la qumica. Todos los organismos estn
constituidos por clulas, tanto los organismos unicelulares como los complejos multicelulares, como
ciertos hongos, las plantas y los animales. Los pluricelulares estn formados por conjuntos de varios
tipos de clulas especializadas que no podran sobrevivir aisladas. Sin embargo, aunque estn
ordenadas en niveles ms elevados de organizacin, como tejidos y rganos, las clulas pueden
definirse como las unidades bsicas de la estructura y funcin del organismo.
Las clulas pueden ser estudiadas bajo distintos aspectos, tales como el morfolgico, bioqumico
o fisiolgico, lo que en cada caso requiere de mtodos de estudio propios. Frecuentemente, la
observacin de clulas requieren de la aplicacin de microscopa y donde, a modo de ejemplo, las
tinciones que aumentan el contraste y ponen en evidencia estructuras especficas.
Aunque las clulas pueden ser muy diferentes unas de otras comparten ciertas caractersticas
comunes. En este trabajo prctico conoceremos en primer lugar las herramientas experimentales que
han permitido comprender los detalles subcelulares, y luego- analizaremos las modelos celulares, sus
estructuras y relacionarlas con sus funciones.

OBJETIVOS
Diferenciar los modelos celulares procariota y eucariota.
Identificar estructuras celulares y relacionarlas con sus funciones.
Reconocer la diversidad morfolgica, de tamao celular y las consecuencias funcionales de
esta diversidad.
Confeccionar preparados temporarios de distintos materiales biolgicos.
Aplicar tcnicas de tincin en organismos y estructuras subcelulares.

CONOCIMIENTOS TERICOS NECESARIOS

Estructura general de las clulas. Componentes subcelulares: forma, localizacin y funcin.
Postulados de la teora celular. Clulas procariotas y eucariotas: diversidad. Lmites de los tamaos
celulares. Compartimentalizacin celular y sus consecuencias funcionales.

CONCEPTOS CLAVE
Existen dos modelos estructurales de clulas: procariota y eucariota.
Las clulas eucariotas tienen membranas internas que compartimentan sus funciones.
Las estructuras subcelulares estn presentes en todo tipo de clula y realizan funciones
especficas.
Las clula s en organismos pluricelulares pueden diferenciarse para realizar distintas funciones

BIBLIOGRAFIA
Alberts B, Bray, D.; Hopkin, K.; Johnson A. D.; Lewis, J., Raff,M. Roberts, K. & P. Walter. 2006.
Introduccin a la Biologa Celular.2 Edicin. Editorial Mdico Panamericana, 740 pp.
Campbell NA & JB Reece. 2007. Biologa. 7ma edicin en espaol
Curtis H, NS Barnes, A Schnek y A Massarini, 2008. Biologa. 7ma edicin en espaol. De Robertis,
E.D.P. & E.M.F. De Robertis. 1994. Biologa celular y molecular. Ed. El Ateneo, Buenos Aires, 628 pp.
Capozzo, A. & Fernndez, A. 1997. Membrana celular y transporte. Cuadernillo N 3. Eudeba, Bs.
As. 33pp.

PRIMERA PARTE

ACTIVIDADES DE SNTESIS:
1. Conocimientos previos
1.1. En base a los conocimientos que tienen hasta el momento definan que es una clula, que tipos
existen y cules son las caractersticas esenciales que comparten las clulas.
Existen dos modelos estructurales de clulas: procariota y eucariota
2. Completen el siguiente cuadro sealando las diferencias entre organismos procariotas y eucariotas.
Procariota
Tamao celular
Relacin
superficie/volu
men
ADN
ARN

Eucariota

Procariota

Eucariota

Citoplasma
Organizacin
subcelular
Ejemplos

de

organismo

2.1. Qu diferencias funcionales podran deducirse para cada modelo celular?

3. La Teora Endosimbitica, propuesta por la investigadora Lynn Margulis, explica el origen de los
primeros organismos eucariotas. Explique cmo pudo haberse dado este proceso y cules son los
criterios en los que se basa esta teora. Cules son las ventajas de esta adquisicin evolutiva?
Las clulas eucariotas tienen membranas internas que compartimentan sus funciones

4. Completen el siguiente cuadro.

Biomolculas
presentes
Membrana celular

Pared celular
(presencia/ausencia
y composicin)
Ncleo

Cromosomas

Citoplasma

Retculo
endoplasmtico
Rugoso
Retculo
Endoplasmtico
Liso

Caractersticas

Funciones

Modelo celular
(Procariota/Eucariota)

Biomolculas

Caractersticas

Funciones

presentes

Modelo celular
(Procariota/Eucariota)

Ribosomas

Mitocondrias

Plstidos

Complejo de Golgi

Lisosomas

Peroxisomas
Vacuolas
Citoesqueleto

5. Existen un conjunto de estructuras mnimas que debe poseer la clula para ser considerada como
tal. Enumere estas caractersticas, justificando su importancia en trminos de su funcin.
6. En los prximos trabajos prcticos veremos que cuanto ms activo es el metabolismo celular una
clula debe intercambiar materia y energa con su ambiente ms rpidamente para seguir
funcionando. En clulas grandes, la relacin superficie/volumen es menor que en clulas ms chicas,
es decir, las clulas de mayor tamao disponen de una superficie de intercambio con el medio ambiente
proporcionalmente menor. Por qu piensan que las clulas procariotas no alcanzan (en trminos
generales) el tamao de las clulas eucariotas? Expliquen a qu se denomina compartimentalizacin
celular y cmo se relaciona con el sistema de endomembranas.
Las estructuras subcelulares estn presentes en todo tipo de clula y realizan funciones
especficas.
7. Si bien todas las clulas utilizan mecanismos similares y las mismas molculas para sintetizar
protenas, transformar energa e incorporar sustancias, algunas desarrollan una o ms de stas

funciones hasta un grado tal de especializacin que se identifican con la funcin y con las estructuras
celulares asociadas. Relacionen la morfologa de los siguientes tipos celulares con la funcin que
desempean (recuerden que la especializacin de una clula se refleja no slo por la presencia de
mayor cantidad del componente estructural especfico que desarrolla la actividad, sino tambin por la
forma de la clula, su organizacin respecto de otras similitudes y sus productos).

1. Clulas nerviosas:

2. Clulas sanguneas

3. Clulas adiposas:

4. Epidermis vegetal:

5. Espermatozoide:

8. La clula es la unidad bsica de estructura y funcin, sin embargo los organismos pluricelulares
estn formados por conjuntos de varios tipos de clulas especializadas que no podran sobrevivir
aisladas. De acuerdo a los conceptos adquiridos en el TP N1: Vida y Biodiversidad (Actividad 3)
indica que otros niveles de organizacin estn presentes en los organismos pluricelulares. Cul es
la importancia biolgica de dicha organizacin? Qu tipos de comunicaciones intercelulares se
establecen entre las clulas que conforman los tejidos y los rganos para que puedan funcionar como
una entidad?
9. Teniendo en cuenta las estructuras mnimas que debe poseer una clula y las biomolculas que las
componen, discutan

en

grupo cmo podran haberse originado las primeras clulas y qu

caractersticas tendran. Compare sus conclusiones con las explicaciones brindadas por los libros de
texto.

SEGUNDA PARTE

ACTIVIDADES EXPERIMENTALES
MATERIALES
BIOLGICO

LABORATORIO

REACTIVOS Y SOLUCIONES

Catfila de bulbo (tallo subterrneo) de cebolla (Allium

cepa,).*
Baya (fruto) de tomate (Lycopersicum esculentum) .*

Cpsulas de Petri

Azul metileno

Tubrculo

(tallo
tuberosum),*
Levadura fresca*

subterrneo)

de

papa

(Solanum

Microscopios

Lugol

Lupas

Agua destilada

Portaobjetos y cubreobjetos

Agua de charco*

Tijeras

Azcar*

Pinzas y agujas de diseccin

Rollo cocina*

Bistur

Elodea*

Mechero

Grasa bovina

Papel filtro

Preparacin de materiales
Existen diversas tcnicas de preparacin del material para su observacin bajo el instrumental ptico.
Fundamentalmente, se requiere que los portas y cubreobjetos se encuentren perfectamente limpios,
preferentemente enjuagados con alcohol fino y secos. La preparacin del material se debe realizar
sobre una superficie limpia y plana. En caso de realizar cortes, stos deben ser sumamente delgados
como para permitir el paso de la luz a travs del material. Existen tres tcnicas para realizar el
montaje del material: MONTAJE HMEDO, SQUASH o aplastado y FROTIS o extendido.
MONTAJE HMEDO: consiste en colocar una muestra seca o semiseca sobre una gota de lquido
(agua) y luego el cubreobjetos. Se procede del siguiente modo:
1) Se coloca una gota de agua en el centro del portaobjetos limpio y seco por sus bordes.
2) Se coloca el material con la ayuda de pinzas y alfileres o agujas sobre un la gota de agua
3) Se cubre el preparado con un cubreobjetos y coloquen el portaobjetos sobre la platina del
microscopio del que disponen.
4) Observen a menor aumento, cuidando que el objetivo no toque el preparado.
SQUASH: consiste en la disgregacin de la muestra mediante el aplastamiento del material entre el
porta y el cubreobjetos. Para realizarlo se siguen los siguientes pasos: 1) Se disgrega el material con la
ayuda de pinzas y alfileres o agujas. Si se requiere, se lo somete a coloracin durante el tiempo
necesario.
2) Se cubre el material con un cubreobjetos.
3) Se apoya el portaobjetos sobre una superficie dura y completamente plana.
4) Se coloca sobre el cubreobjetos un papel secante o un papel de filtro doblado y se aplasta con el
dedo pulgar sin deslizar ni rotar el cubreobjetos.

5) Se debe operar con precaucin pero con firmeza para evitar la rotura del material.

FROTIS: consiste en esparcir el material generalmente lquido o semilquido de modo que quede
distribuido uniformemente en una delgada capa. Para ello se utiliza otro portaobjetos de borde muy
parejo que se desliza sobre el primero desde un extremo al opuesto. Se procede del siguiente modo:
1) Se coloca una gota de material sobre un extremo del portaobjetos limpio y seco.
2) Se apoya sobre la gota un borde del otro portaobjetos formando un ngulo agudo.
3) Cuando la gota se extienda por capilaridad a todo el ancho del portaobjetos, se desliza hacia el otro
extremo con un movimiento suave, rpido y uniforme.

Observacin de Clulas: Observacin al microscopio ptico de clulas provenientes de material fresco

y preparados.
1. Clulas procariotas: Observacin de preparado definitivo de bacterias. Observen un preparado
definitivo de bacterias con el objetivo de inmersin (100X). Recuerden que se debe usar aceite de
inmersin. Qu pueden decir del tamao de las clulas con respecto a las clulas eucariotas?
2. Clulas eucariotas en organismos unicelulares:
2.1.Observacin de clulas de levadura (Saccharomyces sp.). Tomen una muestra de levaduras
incubadas en una solucin azucarada y colquenla sobre un portaobjetos. Fijen el preparado
suavemente a la llama. Tian con azul de metileno durante 15 minutos. Laven con agua corriente y
coloquen el cubreobjetos. Sequen cuidadosamente con papel de filtro. Observen al microscopio y
esquematicen.
2.2. Observacin de protistas Paramecium sp. y Euglena sp. Tomen una muestra de cultivo de
ciliados y flagelados o agua de charco y colquenla en un portaobjetos y cubran el preparado. Observen
las cilias, flagelos y forma de locomocin de los organismos. Esquematicen. Si no se dispone de materia
fresco, reconozcan las cilias en preparados definitivo de Paramecium sp. y Euglena sp.
3. Clulas eucariotas en organismos pluricelulares:
3.1. Epidermis de catfila de cebolla (Allium cepa). Tomen un portaobjetos y coloquen en el centro

una gota de agua. Con un bistur o una hoja de afeitar efecten un corte superficial en V sobre una
hoja de cebolla. A continuacin extraigan con una pinza histolgica una porcin de epidermis "tirando"
desde la punta del corte en forma de "V". Ubiquen el fragmento de tejido sobre el portaobjetos en la
gota de agua. Aadan luego una gota de colorante, azul de metileno, sobre el material para teirlo.
Cbranlo con un cubreobjetos, retiren el exceso de lquido con papel de filtro apoyndolo suavemente
al lado del cubreobjeto. Coloquen el preparado sobre la platina del microscopio y enfoquen la
preparacin.
3.2. Clulas de epidermis en hojas de Elodea sp. Tomen una hoja de Elodea sp. y efecten una
serie de cortes transversales lo ms delgados posibles. Colquenlos en un portaobjetos y agrguenles
una gota de agua. Observen al microscopio y esquematicen.
3.3. Observacin de clulas animales. Observen preparados definitivos de clulas epidrmicas,
sanguneas y nerviosas. Comparen las diferencias en la morfologa y esquematicen.
-Clulas adiposas: Corten un fina capa de grasa y colocar en un porta. Cbranlas con unas gotas de
Sudn III, dejen actuar 5 min. Laven con agua, cubran con un cubreobjetos y observen al microscopio.
4. Observacin de plstidos
4.1. Cromoplastos en clulas parenquimticas de tomate (Licopersicum esculentum). Valindose de
un bistur retiren la epidermis y extraigan una porcin del tejido interno del tomate (llamado
mesocarpo, porcin media del fruto) y colquenlo sobre un portaobjetos con una gotita de agua.
Utilizando una aguja histolgica dispersen el material. Cubran con un cubreobjetos. Enfoquen en el
microscopio y esquematicen.
4.2. Amiloplastos en tubrculo de papa (Solanum tuberosum). Con un bistur raspen el tejido interno
de la porcin de tubrculo de papa. De esta manera, rompern las clulas parenquimticas que
contienen los amiloplastos, dejndolos libres. Coloquen una pequea cantidad de este material sobre un
portaobjetos con una gota de agua. Luego aadan una gota de solucin de lugol y cubran con un
cubreobjetos. Si es necesario retiren el exceso de colorante con papel de filtro. Observen al
microscopio y esquematicen. Esquematicen.