Atualiza

Aline Santana Souza

A utilizao de tcnicas de biologia molecular na
gentica forense: uma reviso
Os avanos nas tecnologias de DNA surtiram um enorme impacto no campo da cincia forense. Com uma
incrvel sensibilidade e um alto poder de discriminao, a analise de DNA tem sido uma poderosa ferramenta para
a identificao humana e investigaes criminais. A determinao de identidade gentica pelo DNA pode ser
usada para demonstrar a culpabilidade dos criminosos, identificar corpos e restos humanos e determinar
paternidade.
A coleta e preservao de evidncias biolgicas dependeram do estado e condio da evidencia biolgica.
Em geral, uma quantidade significativa de material deve ser coletada para garantir a extrao de DNA suficiente
para os testes. No entanto, importante preservar a coleta de contaminaes que possam afetar o processo de
tipagem de DNA. Uma vez que as amostras foram coletadas, elas devem ser imediatamente entregues ao
laboratrio forense onde devem ser guardados em ambiente frio e seco para minimizar a deteriorao da amostra
at que sejam submetidos a testagem.
MARCADORES MOLECULARES PARA A IDENTIFICAO HUMANA
Nos testes de determinao de identidade gentica so estudadas regies genmicas essas regies so
chamadas de polimorfismos de DNA ou marcadores de DNA O mtodo mais usado hoje em dia e o estudo de
regies repetitivas de DNA, chamadas de minissatelites (VNTRs) e microssatelites (STRs). A chave da
diversidade nessas regies e que o numero de repeties varia entre indivduos e pode ser estudada com sondas
de DNA, ou atravs de PCR. Alm desses existem dois grandes grupos de polimorfismos no genoma humano os polimorfismos de substituio de nucleotdeos nicos (SNPs) e os polimorfismos de insero ou deleo de um
ou mais nucleotdeos (polimorfismos de insero - deleo; ins/del). descrita, tanto na deteco de SNPs como
de VNTRs ou STRs. Com o advento da reao em cadeia da polimerase (PCR), todos os tipos de marcadores
moleculares passaram a ser detectados a partir de quantidades menores de amostras, com um menor tempo.
TCNICAS UTILIZADAS PARA A GENOTIPAGEM DE MARCADORES GENTICOS
ELETROFORESE
Por meio dessa tcnica possvel separar molculas em funo da sua massa, forma e compactao.
Trata- se de uma tcnica rpida, sensvel e precisa. O DNA, migra em por ao de uma corrente eltrica, com
diferentes velocidades, dependendo do seu tamanho e forma. Quanto maior a molcula, maior o atrito e mais lenta
a migrao. Apesar de sua versatilidade e relativo baixo nvel de dificuldade de realizao, a eletroforese
convencional tem a desvantagem de identificar os fragmentos apenas quanto ao tamanho e no quanto a
sequncia.
SOUTHERN BLOTTING
Esse procedimento utiliza a capacidade de a nitrocelulose ligar-se fortemente ao DNA fita simples, mas
no a fita dupla. A tcnica de Southern Blotting pode ser utilizada na identificao de polimorfismos que
determinam a alterao do padro de clivagem obtido a partir de uma determinada regio do DNA (RFLP).
PCR
A reao em cadeia da DNA-polimerase revolucionou a gentica molecular por permitir a rpida clonagem
e a analise do DNA. um mtodo rpido e verstil para a amplificao de sequencia-alvo de DNA definidas,
presentes em uma preparao de DNA. Os resultados podem ser obtidos em um espao curto de tempo, ao
contrario do uma analise do genoma total com Southern, que exige at mesmo semanas alm de precisar de uma
quantidade menor de amostra e podendo utilizar amostras muito degradadas, tendo a certeza de resultados
satisfatrios. Principais vantagens da tcnica de PCR so: Velocidade e facilidade de utilizao, sensibilidade,
robustez e possibilidade de anlise de amostras degradadas j a limitao so as possveis contaminao
O DNA MITOCONDRIAL NA IDENTIFICAO HUMANA
Essa tcnica particularmente til em investigaes criminais, uma vez que esta abundancia oferece uma
maior chance de algumas copias suportarem a degradao das amostras obtidas para a analise forense. Apesar
de o DNA nuclear possuir um timo poder para as identificaes criminais, ele aparece com uma frequncia de
apenas duas copias por clula diploide Uma caracterstica importante do DNA mitocondrial e que ele e herdado
uniparentalmente, pois apenas as mitocndrias do gameta materno esto presentes no embrio e

consequentemente no individuo adulto. Sendo assim, as relaes familiares pela linhagem materna sao
reconhecidas facilmente.
O CROMOSSOMO Y NA IDENTIFICAO HUMANA
Assim como a analise do DNAmt e muito utilizada em questes relacionadas a linhagem materna, a
analise de STRs do cromossomo Y tem sido uma excelente tcnica usada em identificaes humanas para
solucionar disputas de paternidade de filhos do sexo masculino,
Investigaes de STRs do cromossomo Y tem sido uteis, por exemplo, em casos de estupro, onde so
encontradas misturas de secreo vaginal com smen.
As principais limitaes quanto ao uso do DNA so: crimes cometidos por gnios idnticos; as condies
de preservao do material biolgico de um cadver carbonizado ou que tenha ficado por muito tempo submerso
no mar e vestgio de roupas coloridas, porque inibem a reao de PCR.