CRECIMIENTO POBLACIONAL DE BACTERIAS

Crecimiento poblacional: es el incremento en el nmero de clulas como una consecuencia del

crecimiento y divisin celular
a) Fase Lag o de Rezago.
Este periodo consiste en la adaptacin de las clulas microbianas a su nuevo ambiente.
b) Fase Exponencial.
En esta fase las clulas se encuentran en un estado de crecimiento sostenido. Se sintetiza nuevo
material celular a una tasa constante, pero ste material es en s cataltico y la masa aumenta
de manera exponencial, es decir crece muy rpidamente en el tiempo.
El crecimiento continuar hasta que uno o ms nutrimentos se agoten, o hasta que se acumule
tal cantidad de metabolitos txicos que se inhiba el crecimiento.
c) Fase Estacionaria.
Ante el agotamiento de nutrimentos en el medio o la acumulacin de metabolitos txicos el
crecimiento cesa por completo despus de un periodo de decrecimiento en la tasa de
crecimiento
d) Fase de Declinacin y/o Muerte.
Esta fase representa el decremento de clulas debido al aumento progresivo de la tasa de
mortalidad, misma que tarde o temprano alcanza un valor sostenido.
Factores que influyen en el crecimiento
a. Factores externos
Condiciones ambientales o culturales: pH, T (en escala centgrada = grados centgrados C),
disponibilidad de H2O, O2, CO2 y tiempo.
Condiciones nutricionales: Tasa C/N 10:1, 12:1, azufre y otros microelementos.
b. Factores internos
Capacidad metablica
Durante el crecimiento exponencial, la tasa de crecimiento de las clulas (medida en gramos de
biomasa producida por hora), se puede obtener multiplicando la constante de la tasa de
crecimiento por la concentracin de biomasa.
La constante de la tasa de crecimiento es la tasa a la cul las clulas producen ms clulas, y el
valor que esta toma se interpreta como los gramos de biomasa producidos por cada gramo de
biomasa preexistente creados en una hora.
Crecimiento sincrnico: todas las clulas se encuentran simultneamente en la misma fase del
crecimiento celular.
Los cultivos sincrnicos son muy difciles de mantener por lo que su importancia est
principalmente ligada a los estudios bsicos de biologa microbiana.
El crecimiento se denomina exponencial porque la biomasa se incrementa exponencialmente con
respecto al tiempo.
De lo anterior se deriva que, si graficamos el logaritmo de la concentracin de la biomasa (o
celular) en funcin del tiempo, como ocurre en la curva del crecimiento, obtendremos una lnea
recta como representacin de esta fase (Trtora, 2008).
Determinacin del crecimiento
En Documento leer pgina 14 de Unidad 1. Taxonoma Microbiana.
Tipos de Cultivo
Los medios de cultivo deben estar enriquecidos con distintos nutrientes: Carbohidratos simples
(azcares), protenas, lpidos (grasas) hasta sustancias complejas como la sangre o el extracto
de caldo de carne, as como los requerimientos que nosotros necesitamos para crecer
Se pueden clasificar segn sus caractersticas fsicas en: slidos, semislidos y lquidos. La
diferencia es slo la cantidad de una sustancia que llevan para solidificar (agar):
Lquidos: se preparan todos los constituyentes en una disolucin acuosa (agua destilada).
Slidos: Se procede del mismo modo que con los medios lquidos, pero, al disolver en agua
destilada, aadimos de 15 a 20 g/l de agar.
Semislidos: su apariencia es de gel. Slo llevan 5 g/l de agar, se utilizan poco, por ejemplo para
determinar la movilidad bacteriana.
El agar es un polisacrido obtenido de la pared celular de varias especies de algas rojas de los
gneros Gelidium, Euchema y Gracilaria

La Gelatina es otro agente solidificante pero se emplea mucho menos ya que bastantes bacterias
provocan su licuacin.
Los medios de cultivo deben contener agua (H2O), carbono (C), nitrgeno (N), azufre (S), fsforo
(P), calcio (Ca), sodio (Na), magnesio (Mg), molibdeno (Mo), cobre (Cu) y zinc (Zn);
Microorganismos aerobios: Requieren de manera obligada del oxgeno necesariamente para
llevar a cabo su metabolismo.
Existen dos grupos:
Organismos aerobios estrictos que requieren oxgeno en concentraciones similares a la
atmosfrica (20%)
Aerobios microaerfilos que requieren oxgeno en concentraciones inferiores a las de la
atmsfera (5-10%).
Microorganismos anaerobios: son aquellos que no requieren de oxgeno para llevar a cabo sus
funciones metablicas, pudiendo ser de tres tipos:
anaerobios facultativos aquellos que crecen en ausencia y en presencia de oxgeno pero crecen
mejor con oxgeno,
anaerobios estrictos aquellos que no solo no requieren oxgeno, sino que su presencia los
destruye
anaerobios aerotolerantes son aquellos que no requieren oxgeno pero lo toleran; no mueren en
su presencia
Medios de Cultivo: en funcin de su composicin, distinguimos dos grupos de medios de cultivo:
Medios sintticos o definidos: aquellos que contienen cantidades precisas de sustancias
orgnicas e inorgnicas puras disueltas en agua destilada.
Medios complejos o indefinidos: contienen sustancias altamente nutritivas, pero de composicin
indefinida.
Suelen llevar sustancias como extractos de carne, peptona, extractos de levadura; la ventaja de
este medio de cultivo es que contiene muchos factores de crecimiento, por lo que podemos
cultivar en l gran nmero de microorganismos.
El inconveniente es que no conocemos lo que el microorganismo est consumiendo, ejemplos:
Caldo nutritivo: extracto de carne + peptona + agua, Agar nutritivo: extracto de carne +
peptona + agua + agar.
Clasificacin de los medios de cultivo
Generales: son medios que requieren contenidos mnimos de C, N, S, P, energa,
oligoelementos, pH adecuado.
Enriquecidos: se le llama as porque algunos microorganismos no son capaces de desarrollarse
en medios de cultivo generales;
Es necesario enriquecerlo con sustancias nutritivas como la sangre, el suero, extractos de tejidos
animales, los microorganismos que crecen en ellos son microoorganismos exigentes o
fastidiosos.
Selectivos: aquellos que contienen uno o varios compuestos que inhiben el crecimiento de un
determinado tipo de microorganismos y no afectan a otros tipos; por ejemplo el cristal violeta
inhibe las Gram +.
Otra manera es modificar la fuente de carbono; si sustituimos la glucosa por maltosa,
seleccionamos aquellos microorganismos capaces de digerirla.
Diferenciales: son medios que contienen distintos compuestos qumicos o indicadores sobre los
que determinados microorganismos adquiere coloraciones especficas o reaccionan de una
manera determinada.
Ejemplo: Agar levine tiene colorantes especiales (eosina y azul de metileno Escherichia coli
forma colonias de color verde claro, mientras que E. enterobacter forma colonias de color rosa
salmn.
De transporte: su nica funcin es mantener vivas a las bacterias desde la toma de la muestra
hasta su llegada al laboratorio. Les proporciona humedad (agar) y elimina los productos txicos
(carbono activo).
Agar Eosina y Azul de Metileno (EMB)
Utilizado para el aislamiento y diferenciacin de bacilos entricos Gram negativos. Permite la
diferenciacin de las colonias fermentadoras de lactosa de las no fermentadoras.

La sacarosa est incluida en el medio para detectar a los miembros del grupo coliforme que
fermentan ms rpidamente la sacarosa que la lactosa.
Enterobacteriaceae son bacilos gramnegativos, que habitan naturalmente el intestino de los
animales, algunos son patgenos (Salmonella y Shigella) y otros forman parte de la flora normal
(E. coli)
Caldo nutritivo:
Medio de cultivo utilizado para propsitos generales, para el desarrollo de microorganismos con
escasos requerimientos nutricionales
Caldo triptosa fosfatado:
Medio que sirve para propsitos generales, til para el cultivo de bacterias nutricionalmente
exigentes, especialmente Streptococcus spp., a partir de diversas muestras
Agar Salmonella-Shigella:
Tambin conocido como Agar SS, es utilizado para el aislamiento de especies de Salmonella y
Shigella a partir de muestras clnicas y de alimentos
Se necesita una caja o placa petri en la cual se coloca el medio de cultivo y se procede a
sembrar una muestra ya sea slida o lquida, se recomienda el uso de un asa de platino para
realizar la siembra.
(a) esterilizar un asa de siembra por flameado en la llama de un mechero hasta que tenga
tonalidad del rojo vivo
(b) introducirla en la suspensin bacteriana u objeto para recoger una muestra,
(c) sembrar haciendo estras sobre la superficie de un medio slido en una placa Petri.
(d) despus de la incubacin, se desarrollan colonias aisladas. Para estar seguro de que el cultivo
es puro, repetir el proceso entero; para ello tomar una colonia aislada y sembrar por estras una
segunda placa.
Existen dos formas ms importantes de conservacin:
I. Congelacin (a 70 C y 196 C) y liofilizacin como tcnicas que minimizan al mximo el
riesgo de cambio gentico en las clulas y las mantienen viables por 10 aos o ms, as se han
podido conservar materiales biolgicos como cultivos de hongos, bacterias y levaduras, algas,
suero, clulas sanguneas, entre otros
La liofilizacin es un proceso en el que se congela el producto y posteriormente se introduce en
una cmara de vaco para realizar la separacin del agua por sublimacin. De esta manera se
elimina el agua desde el estado slido al gaseoso del ambiente sin pasar por el estado lquido.
Para acelerar el proceso se utilizan ciclos de congelacin-sublimacin con los que se consigue
eliminar prcticamente la totalidad del agua libre contenida en el producto original, pero
preservando la estructura molecular de la sustancia liofilizada.
T= ((P1-P0)/P0) *100
T - tasa de crecimiento de poblacin
P1 - poblacin actual
P0 - poblacin inicial
T=(10-5)/5)*100= 100
Te resulta por ejemplo 100%
Ejemplo: Un matraz tiene una poblacin de 800.000 clulas bacterianas a la hora cero y una
poblacin de 1.500.000 a las 18 h. Para encontrar la tasa de crecimiento de la poblacin de este
matraz:
Tasa de crecimiento = [(1.500.000 - 800.000) / 800 000] * 100 Tasa de crecimiento = 87.5 por
ciento Tasa de Crecimiento Promedio Anual = 87,5 por ciento / 18 horas
Tasa de Crecimiento Promedio Anual = 4,86 por ciento
Hay varios tipos de microorganismos en funcin de sus temperaturas de crecimiento mnima,
mxima y ptima
CASO REAL:
Propagacin de clulas del Lactobacillus casei a escala de laboratorio para la elaboracin de una
bebida multifuncional probitica, con el fin de evaluarla en el tratamiento y prevencin de
enfermedades gastrointestinales.

Esto se logr hallando una concentracin celular mediante bioensayos de laboratorio, a

determinados periodos de tiempo y con caractersticas semejantes, por duplicado para optimizar
cada uno de los procesos.
Se realiz a nivel de laboratorio, mediante recuentos en cmara de Newbauer, realizando esto en
tratamiento por duplicado de lo cual se obtuvieron los resultados de fermentar la bebida por 4
horas a una temperatura de 40C y sin agitacin.
Inferencia.
La fase Lag o de adaptacin es relativamente larga (1 hora) si se compara con organismos que
se reproducen en slo 20 o 30 minutos.
La fase exponencial dura 2 horas por lo tanto cuando las bacterias tienen 2 horas de haber sido
cultivadas es cuando se da el mayor consumo de nutrientes que les permite incrementar su
velocidad de crecimiento para infectar al objetivo.
Pero si lo que se quisiera es erradicar o contrarrestar el crecimiento bacteriano, aplicar o bien un
antibitico o bien alterar las condiciones del medio de cultivo para dificultar la absorcin de
nutrientes y por ende perjudicar la reproduccin bacteriana y as proteger al organismo de la
infeccin bacteriana.
En la fase estacionaria ya no hay ni multiplicacin ni infeccin. En el caso de la bacteria de
yogurt es en esta fase en la que entran en accin ejerciendo su actividad gastrointestinal sobre
la flora intestinal y otros organismos patgenos.
Cepa y clon
Una cepa es un cultivo puro derivado de un solo aislamiento.
Clon es un cultivo puro formado por los descendientes de una sola bacteria.
El GNERO est formado por un grupo de especies relacionadas .
Un grupo de gneros estrechamente relacionados constituyen una FAMILIA.
Las categoras taxonmicas superiores se definen de igual manera y son las siguientes: ORDEN,
CLASE, DIVISIN Y REINO.
En ocasiones existen subclasificaciones de estas categoras taxonmicas bsicas como por ej
subfamilia suborden.
En taxonoma bacteriana, cuando se da nombre a una nueva especie, una cepa concreta se
designa como cepa tipo. Las cepas tipo se conservan en colecciones de cultivos y es importante
con fines de nomenclatura, ya que el nombre especfico va ligado a ella.
Las bacterias est situadas en el Manual Bergey en el reino Procaryotae, en el que se reconocen
cuatro divisiones:
Gracillicutes (procariotas con pared celular gramnegativa),
Firmicutes (procariotas con pared grampositiva)
Tenericutes (sin pared celular) y
Mendosicutes (procariotas filogenticamente anteriores a las divisiones anteriores, como las
Arquebacterias y otras)