LABORATORIO DE FISIOLOGA

PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANAS CELULARES

INTRODUCCIN
La permeabilidad de las membranas celulares es selectiva, es decir, existen sustancias
que pueden atravesar la membrana y otras que no. Lo cual origina una diferencia de
solutos, que se debe en gran medida a la estructura y funcin de los fosfolpidos de la
bicapa lipdica, debido a que cuentan con una parte hidrofbica (no es miscible con el
agua) que es apolar y una hidroflica (afinidad al agua) que es polar.
La membrana plasmatica por lo general no es permeable a protenas, acidos nucleicos y
otras moleculas necesarias para la estructura y funcion de las celulas; sin embargo es
permeable a muchas otras moleculas como a moleculas no polares sin carga (el
oxigebo, el dioxido de carbono, alcoholes.), (Fox, 2011).

Existen varios mecanismos por los cuales se lleva a cabo el transpoerte de las
sustancias a travs de la membrana plasmatica.
una manera es agrupar los diferentes procesos de transporte en aquellos que requieren
transportadores de proteinas de membrana,(Fox, 2011) los cuales se describen a
continuacin:
1.Transporte mediado por transportador

Difusin facilitada

Es un transporte pasivo para solutos muy polares, cargados y grandes, se realiza

cuando un soluto se une a un transportador especfico de la membrana y lo traslada al
otro lado, despus de que el transportador sufre cambios morfolgicos.

Transporte activo

Se efecta con solutos polares y cargados que van en contra del gradiente de
concentracin, por lo cual requiere de energa para que las protenas transportadoras
muevan a los solutos. Las dos fuentes de energa celular son la hidrlisis de ATP y el
almacenamiento en los gradientes de concentracin inicos.
2. Transporte No mediado por transportador.
Todos los mecanismos de transporte que se describirn a continuacin son procesos
pasivos los cuales se caracteriza por el movimiento neto de molculas y iones a travs
de la membrana desde una concentracin ms alta haba una ms baja; es decir, a
favor del gradiente de concentracin.(Fox,2011)

Difusin pasiva

Es el paso de un soluto que se encuentra en altas concentraciones a una solucin con

bajas concentraciones para alcanzar el equilibrio. Es un proceso pasivo, admite el paso
de molculas no polares o hidrfobas.

smosis

Es un proceso pasivo, permite el paso de agua a travs de la membrana, pasando de

una concentracin mayor a una de menor concentracin, por medio de acuaporinas;
protenas integrales que funcionan como canales que acceden el movimiento rpido
del agua.
Transporte a travs de canales
Difusion simple de iones a traves de protenas de canales de membrana en la
membrana plasmatica

Es importante mencionar
principalmente de:

que

la

difusin

de

la

membrana

va

depender

Las interacciones de otras molculas

La diferencia de concentracin
El tamao de las molculas

Para realizar el estudio de la permeabilidad celular en relacin con los fenmenos de

difusin y smosis, se trabaj con clulas animales, especficamente con los glbulos
rojos de la sangre conocidos como eritrocitos, debido a que no poseen paredes rgidas
como las plantas o las bacterias, por lo que no soportan grandes cantidades de
volumen. Adems, cuentan con acuaporinas, que como ya se mencion, son poros que
permiten el flujo rpido de agua, pero poca permeabilidad en los solutos.
Como los glbulos rojos tienen una osmolaridad cercana a 300 mOsm que
corresponde a la osmolaridad de los lquidos corporales y es equivalente a la de una
solucin de NaCl al 0.9% (0.15M), la clula mantiene su forma y volumen constante,
porque se encuentran en una solucin salina con la misma osmolaridad, es decir, es
una solucin isoosmtica.
Por otro lado, cuando son colocados en soluciones diluidas, va a existir una menor
concentracin de solutos en el interior, pero una mayor cantidad de agua en el citosol,
debido a la mayor osmolaridad del citoplasma. Se lleva a cabo en soluciones
hipotnicas, en donde se produce un aumento en el volumen de la clula, generando la
rotura de la membrana de los eritrocitos, es decir, se libera su contenido en el medio y
este proceso se conoce como hemlisis.
El proceso contrario se lleva a cabo en soluciones hipertnicas, en donde la clula es
colocada en solucin ms concentrada que en su interior, provocando la salida de
agua, es decir, se produce una disminucin del volumen en la clula conocido como
crenacin.
Todos los conceptos mencionados anteriormente, son necesarios para el estudio de la
permeabilidad de la membrana, ya que para realizar dichas observaciones se necesita

conocer de las caractersticas y el efecto que sufren los eritrocitos en diferentes

soluciones.
HIPTESIS
1. Observacin de la hemlisis

Cuando los eritrocitos se encuentren en una solucin hipotonica, la cual se caracteriza

por ser una solucion que tiene menor osmolaridad que la del plasma la celula incorpora
agua y se pone turgente a tal grado que puede reventar la membrana celular del
eritrocito liberando la hemoglobina.

2. Actividad osmtica de sustancias no difusibles

Al conocer el numero de particulas osmoticamente activas se puede obtener la
osmolaridad de las diferentes soluci{ones, sabiendo que el plasma tiene una
osmalaridad 0.3 osmoles se puede predecir en que tubos se llevara la hemolisis.

3. Actividad osmtica de sustancias difusibles

Se tiene dos sustancias de diferente naturaleza, un alcohol y un carbohidrato
(disacarido). El alcohol es permeable a la membrana plasmatica, sin embargo, el
disacarido es una moleculas demasiado grande , por lo que es impermeable a la
membrana.

4. Velocidad de difusin
Como la difusin rpida de la membrana depende del coeficiente de particin, el
alcohol con el valor ms alto de coeficiente de particin, atravesar ms rpido la
membrana, debido a que es ms soluble en aceites que en agua.
OBJETIVOS
Observar el fenmeno de la hemlisis y explicarlo en funcin de las
diferencias de osmolaridad entre el interior y el exterior de la clula
Comprobar que la osmolaridad de una solucin depende del nmero de
partculas osmticamente activas y no de su concentracin
Determinar la relacin que existe entre el coeficiente de particin y la
permeabilidad de la membrana. Explicar el fenmeno en funcin de la
estructura qumica de la membrana.
RESULTADOS
1. Observacin de la hemlisis

*Solucin salina: No ocurre la hemlisis ya que tanto en la clula como en la solucin

salina las concentraciones de sal son similares y la clula no absorbe demasiada agua
como para provocar la hemlisis.
*Agua destilada: ocurre la hemlisis ya que la concentracin de sales en la clula es
mayor a la del exterior por lo que el agua se sentir atrada y pasarn del medio de
menor concentracin de solutos al de mayor. Debido a que en las clulas entra
demasiada agua estas revientan dando lugar a la hemlisis.

2. Actividad osmtica de sustancias no difusibles

Tabla 1.
En la siguiente tabla, se muestra el resultado del clculo de la osmolaridad de la
suspensin inicial de glbulos rojos, al ser diluida con agua destilada a partir de la
presin osmtica y de la conversin a osmolaridad, corrigiendo el resultado con el
nmero de partculas que se disocian para el NaCl.
Tubo

ml de NaCl
0.15 M

ml de agua
destilada

Concentracin
final (M)

Osmolaridad
(G=1.8)

0.15

0.2947

0.06

0.1179

1.5

3.5

0.045

0.0884

0.03

0.0589

0.5

4.5

0.015

0.0295

Tabla 2.
En la siguiente tabla, se muestra el resultado del clculo de la osmolaridad de la
suspensin inicial de glbulos rojos, al ser diluida con agua destilada a partir de la
presin osmtica y de la conversin a osmolaridad, corrigiendo el resultado con el
nmero de partculas que se disocian para el CaCl2.
Tubo

ml de CaCl2
0.15 M

ml de agua
destilada

Concentracin
final (M)

Osmolaridad
(G=2.6)

0.15

0.4257

0.06

0.1703

1.5

3.5

0.045

0.1277

0.03

0.0851

0.5

4.5

0.015

0.0426

Tabla 3.
En la siguiente tabla, se muestra el resultado del clculo de la osmolaridad de la
suspensin inicial de glbulos rojos, al ser diluida con agua destilada a partir de la
presin osmtica y de la conversin a osmolaridad, corrigiendo el resultado con el
nmero de partculas que se disocian para la sacarosa.
Tubo

ml de sacarosa
0.15 M

ml de agua
destilada

Concentracin
final (M)

Osmolaridad

0.15

0.1600

0.06

0.1300

1.5

3.5

0.045

0.0985

0.03

0.0651

0.5

4.5

0.015

0.0374

A continuacin se presenta un ejemplo del clculo que se realiz en las tablas

anteriores, para encontrar la osmolaridad.
Para encontrar la osmolaridad, se debe de calcular primero la presin osmtica
utilizando la siguiente ecuacin.
= nRTC
En donde:
= presin osmtica
n= nmero de partculas formadas por la disociacin de una molcula de soluto
R= constante de los gases (0.082 L atm/K mol)
T= temperatura en kelvin
C= concentracin molar del soluto en mol/L
Aplicando la ecuacin con nuestros datos experimentales del NaCl tenemos que:

=1.8 ( 298.15)(0.15 mlo / L)

= 6.6010 atm
Como nuestro resultado est en atm y lo necesitamos en osmoles, hacemos uso de la
siguiente conversin, en donde 22.4 atm equivale a 1 osmol.

6.6010 atm x

1osmol
=0.2947 osmol de NaCl
22.4 atm

3. Actividad osmtica de sustancias difusibles

Aspecto de los tubos.

Glicerol: la hemlisis fue ms rpida con un tiempo de 7 minutos y 45 seg.

Sacarosa: la hemlisis tard mucho ms que en el tubo del glicerol con un

tiempo de 12 minutos.
A continuacin se muestran las imgenes de lo ocurrido experimentalmente.

4. Velocidad de difusin

Tabla 4.
En la siguiente tabla se muestran los datos registrados en el experimento para realizar
la grfica que se muestra a continuacin.
ALCOHOL

TIEMPO

COEFICIENTE DE
PARTICIN

Alcohol metlico (CH3OH)

8.5 s

0.0097

Alcohol etlico (CH3-CH2OH)

5s

0.0357

Alcohol proplico (CH3-CH2CH2-OH)

4s

0.156

Encontrando en el grfico, que la velocidad a la que atraviesa la membrana celular

aumenta mientras mayor sea el peso molecular y la longitud de la cadena de tomos
de carbono de la sustancia.
ANLISIS DE RESULTADOS
1.Observacin de la hemlisis
El fenmeno de hemlisis se observ en el tubo de agua destilada, debido a que esta
es en una solucin hipotnica, por lo que, haba mayor osmolaridad en el citoplasma

que en la solucion, lo cual produjo un aumento en el volumen celular hasta provocar la

ruptura de los glbulos rojos.
2.Actividad osmotica de sustancias no difusibles
Como se pudo comprobar las solucion que tiene mas particulas osmoticamente activa
tuvo una mayor osmolaridad( dependiendo de las concentraciones) respecto a las
demas soluciones.
3.Actividad osmotica de sustancias difusibles
Logramos observar que efectivamente
permeables a la membrana plasmatica.

los

alcoholes

(glicerol)

son

moleculas

4. Velocidad de difusi{on
Con ayuda del coerficiente de particion de cada sustancia utiizada em esta parte,
logramos identificar la relacin que existe entre este y la permeabilidad de la membrana. debido a

que miemtras mas grande sea la cadena de carbonos es m{as apolar siendo afin a la membrana
lipidica.

Discusin de resultados.
Como sabemos, las soluciones se pueden clasificar dependiendo del movimiento
osmotico del agua a traves de una membrana debido a la diferencia de
concentraciones o de osmolaridad.
En esta parte de la prctica se utilizaron dos soluciones, una hipotonica (agua
destilada) e isotonica ( solucion salina NaCl 0.15M) respecto al plasma del eritrocito.
Una solucin de cloruro de sodia 0.15M( solucion salina) tiene la misma osmolaliad y
presi{on osmotica que el plasma ,la cual se ioniza para producir una concentracion
total de 300mosm.(Fox,2011). Debido a esto la solucion salina es isoosmotica respecto
al plasma por lo que no se llevara el fenomeno de hemolisis simplemente, la
suspencion se diluye, por lo que el color de la solucion no varia mucho al de la
suspencion inicial.
El agua destilada al ser una solucion hipotonica produjo un fenomeno llamado
hemolisis, debido a que este tipo de solucion tiene una concentracion ms baja de
solutos que la del plasma, entrando por consiguiente mayor cantidad de agua a la
celula, hasta que esta se revienta. Esto se pudo verificar gracias al cambio de color
de la supension diluida en agua destilada.
En la segunda parte de la prctica, se utilizaron tres soluciones diferentes (NaCl, CaCl2
y sacarosa) las cuales se fueron diluyendo hasta obtener una concentracion de 0.015M,
obteniendo as{i la osmolaridad de las disoluciones.
Como ya mencionamos el plasma tiene una osmolaridad 300mosm o 0.3osm, por lo
que, en las soluciones que tengan una osmolaridad menor se observara el fenomeno

de hemolisis. Como podemos observar en la tabla 1 (NaCl) en todas las

concentraciones excepto en la de 0.15M se llevo la hemolisis ya que tenian una
osmolaridad menor a la del plasma.
eN LA tabla 2(CaCl)EN TUBO 1 CON UNA concentracion 0.15M se llevo un fenomeno
llamado crenaci{on el cual se produce cuando la solucion tiene una osmaliridad mayor
a la del plasma (solucion hipertonica), PERO EN LAS 4 SIGUENTES SE PRODUJO LA
HEMLISLS
fINALMENTE en las soluciones de sacarosa todos los tubos presentaron hemolisis.
Si comparamos las columnas de Concentracion final y osmolaridad de las tres tablas
podemos darnos cuenta que la osmolaridad para cada tubo (1,2,3,4) que les
corresponde la misma concentracion respectivamente, es mayor en la tabla dos que
pertenece al cloruro de calcio esto se debe a que este compuesto tiene 3 particulas
osmoticamente activas comprobando que la osmaliridad depende del numero de
particulas osmoticamente activas y no de su concentracion.
En la tercera parte de la practica, se utilizaron dos soluciones isoosmoticas
respecto a los globulos rojos 0.3osm. el glicerol (difusible) y la sacarosa (no
difusible) para observar un gradiente osmotico que se produce en el interior
de la celula.El glicerol presenta mayor actividad osmtica en comparacin
con la sacarosa.
En las soluciones isotonicas no ocurre la hemolisis o ocurre de una manera
mucho mas lenta debido a que hay un equilibrio osmotico en las dos
soluciones en contacto. Mientras que en las solucones isoosmoticas existe la
misma cantidad de particulas tanto dentro como fuera de la celula.
esto no pasa en soluciones salinas ya que estas se disocian en iones los
cuales no pueden trasnpasar la membrana de forma pasiva.

Existen diferentes factores que alteran el grado de difusi{on de las sustancias a traves
de la membrana plasmatica, uno de esos, el cual fue el fundamento de la cuarta y
ltima parte de la prctica, es la facilidad de solubiladad de sustancias en la matriz
lipidica.
Se utilizaron tres alcohles diferentes : alcohol metilico, etilico y propilico, aumentando
su peso molecular y su cadena de carbonos respectivamente y por lo tanto su
coeficiente de particion( relacion que resulta de comparar la solubilidad de una
sustancia en aceite y su solubilidad en agua(. y COMO SABEMOS LOS ALCOLES SON
SUSTANCIAS QUE SON completamente permeables a la membrana. obtuvimos que el
alcohol quedifunde mas rapido es el propilico por todo lo mencionado anteriormente,.
CONCLUSIN

En cuentiones generales Observamos la diferencia entre las soluciones

hipotnicas, isotnicas e hipertnicas detectando los efectos que producen
en las clulas dichas soluciones. Tambin al hacer clculos sobre presin
osmtica pudimos diferenciar las soluciones que podran presentar hemlisis
de manera ms rpida que otras. y con el coeficiente de particion logramos
conocer que alcholes tiene una rapidez de difusion mayor debido a su peso
molecular, numero de carbonos.
BIBLIOGRAFA
Gerard J. Tortora y Bryan Derrickson, Principios de anatoma y
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Hershel Raff;Michael Levitzky. Fisiologia medica Un enfoque por aparatos
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Kim E. Barret et al. Fisiologia medica. p.p 10, 27, 29, 500, Mexico
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Conocer por medio de una serie de experimentos simples cmo

es que se produce la hemlisis.
Mediante sustancias diferentes observar como la hemlisiss es
afectada por la osmolaridad.