TEMA 8- El Retculo Endoplsmico y la

Ruta Secretora
Principales compartimentos intracelulares de una
clula animal :

1. LAS PROTENAS INGRESAN EN LOS ORGNULOS POR

MEDIO DE TRES MECANISMOS :
- La sntesis de casi todas las protenas de la clula comienza en los
ribosomas del citosol. Las excepciones son las escasas protenas de
las mitocondrias y de los cloroplastos.
- El destino de cualquier protena sintetizada depende de su
secuencia de aminocidos, que puede contener una seal de distribucin que dirige a la
protena hacia el orgnulo en el que se la requiere. Las protenas que carecen de esa seal se
quedan en el citosol.
Mapa de carreteras del transporte de protenas en la clula:
1. Las protenas que se desplazan desde el citosol al ncleo; se transportan a
travs de los poros nucleares.
2. Las protenas que se desplazan desde el citosol hacia el RE, las
mitocondrias, los cloroplastos o los peroxisomas; atraviesan la
membrana del orgnulo mediante protenas translocadoras.
Se sintetizan en los ribosomas libres en el citosol.
3. Las protenas que se desplazan desde el RE (por lo tanto se sintetizan en los
ribosomas unidos al RER) hacia un compartimento del sistema de
endomembranas (RE, Golgi, lisosomas, m.plasmtica), se transportan
por vesculas de transporte.

La cara del lumen del Golgi o del Retculo es igual a la topologa de la cara
exterior de la clula; Y el citosol es igual en todo.

Dos rutas de distribucin de

protenas:
-Las protenas sintetizadas viajan por la clula hasta su destino. Este
destino se encuentra marcado por seales (algunas en las protenas y otras en los
orgnulos).
La secuencia seal (la +importante) determina si la protena entra en la ruta secretora o no.
Si hay secuencia seal slo va a la ruta secretora.

Si no hay secuencia seal la sntesis se

completar en los lisosomas libres e ir a
mitocondrias, cloroplastos, peroxisomas,
citosol y ncleo.

Tipos de seales de localizacin:

+Lineales: Corresponden a una sola porcin de la secuencia de a. En el extremo N-terminal.
Se leen con la protena desplegada
En la RUTA SECRETORA
+Zonales (o tridimensionales): Varias porciones/secuencias de a.
Se leen con la protena plegada
Al NCLEO

La ruta secretora se ha estudiado con mutantes deficientes en secrecin:

-En una clula normal: las protenas se sintetizan en el RE Golgi vesculas exterior
-En las clulas mutantes, dependiendo de la T, la ruta secretora funciona normal o se detiene en
algn orgnulo. En mutantes: se produce un atasco (en el Golgi o en las vesculas) NOBEL

Dnde se sintetizan las protenas?

Los ribosomas son los orgnulos encargados de la sntesis de protenas. Dichos
ribosomas se encuentran en 2sitios:
o Ribosomas libres en el citosol: las protenas sintetizadas en los ribosomas
libres permanecen en el citosol o son transportadas al ncleo, cloroplastos,
mitocondrias o peroxisomas. (no ruta secretora).
Se liberan al citosol una
vez traducidas.
o Ribosomas unidos a la membrana del RE: estas protenas se translocan
directamente al interior del RE mientras se estn traduciendo. Contina la
traduccin y

Plegamiento y procesamiento de las protenas por las

chaperonas
Formacin de puentes disulfuro por disulfuro isomerasas
Primera parte de la glicosilacin
Las que se
Despus de esto, pueden ser retenidas en el RE o
sintetizan en
transportadas al aparato de Golgi (nuevamente procesadas),
los ribosomas
y de ah a los lisosomas, a la membrana plasmtica, o al
del RER
exterior celular mediante vesculas de secrecin.
Traslocacin cotraduccional (mamferos y levaduras):
traslocadas al RE durante su sntesis en los ribosomas unidos
a la membrana.
Traslocacin postraduccional (levaduras): traslocadas al RE una vez se ha
completado la traduccin en los ribosomas del citosol.

2. EL RETCULO ENDOPLASMTICO LISO Y RUGOSO

- El retculo endoplasmtico (RE) es una red de tbulos y sacos (cisternas) rodeados de membrana que se
extienden desde la envoltura nuclear (en contacto) por todo el citoplasma.
- Su membrana es la mitad de todas las membranas de la clula juntas.
- Su espacio encerrado (luz o lumen) es un 10% de todo el volumen celular.
- Hay 2tipos de RE que realizan =/=funciones:

REL/ SEL: no est asociado con ribosomas, est implicado en el metabolismo de lpidos (en
vez de protenas).
Es muy extenso en clulas como hepatocitos, clulas renales y el msculo.
Funciones: --Reservorio de Ca2+. La clula esconde el calcio en el interior del retculo, por eso
el nivel de Ca2+ es tan bajo en el citosol. El calcio es un ion
sealizador que interviene en muchas respuestas celulares
como la contraccin muscular.
--Biosntesis de lpidos de membrana.
--Desintoxicacin de xenobiticos (frmacos, carcingenos)

RER: Tiene ribosomas asociados a su membrana, los cuales llevan a cabo la sntesis de
protenas.

LA RUTA SECRETORA Y EL RER: -George Palade: realiz trabajos pioneros sobre la ruta secretora,
defini las etapas de la ruta secretora.
Tom clulas pancreticas, marc protenas con
radiactivos y pudo detectarlas usando una placa de Ag+.
As defini la ruta:
REGolgiVesculas de secrecinExterior

Esto llev a preguntarse qu diferencia haba entre los ribosomas libres y los adosados al RER?
Los cientficos no se explicaban por qu las protenas podan ser sintetizadas en el citosol o en la membrana
del RE.
- Mediante experimentos, se determin que los ribosomas libres y los unidos al RER son funcionalmente
indistinguibles, y toda la sntesis proteica se inicia en los ribosomas libres en el citosol.

*Si realizamos una centrifugacin en gradiente de

densidad, las clulas se rompen y el RE se fragmenta en
El
mismo
POOLdenominadas
de ribosomas
pequeas
vesculas
microsomas. Los
sintetiza
lastienen
protena
microsomastodas
del RER
mayorcelulares.
densidad debido a la
gran cantidad de ARN en los ribosomas.

- Se formul la hiptesis de la seal: propone que una

secuencia N-terminal marca y dirige la cadena polipeptdica a los microsomas*
-Las protenas pueden ser translocadas al RE durante su sntesis en los ribosomas unidos a la
membrana (translocacin cotraduccional)
una vez que la traduccin se ha completado en los ribosomas libres en el citosol (postraduccional).
VA COTRADUCCIONAL: - El mecanismo por el que las protenas secretadas son dirigidas al RE
durante su traduccin (va cotraduccional) se conoce bien actualmente. Todo el proceso est regulado
por la hidrlisis de GTP. Proceso:
1.
A medida emerge del ribosoma, la secuencia seal es reconocida y unida a una partcula de
reconocimiento de la seal SRP (Signal Reconigtion Particle). Y se detiene la elongacin de la
protena.
2.
La SRP acompaa al complejo hasta la membrana del RE, donde se une a su receptor de la SPR.
Esto facilita la colocacin del ribosoma en el traslocn.
3.
La SPR se libera.Y la secuencia seal se inserta en un canal de la membrana.
4.
La secuencia seal abre el traslocn. Se reanuda la traduccin, y la cadena polipeptdica en
crecimiento es translocada a travs de la membrana.
5.
La secuencia seal es cortada por la peptidasa e impide que la protena salga del retculo.
De esta manera la transferencia de la protena es unidireccional.
Una vez en el RE -> la protena se pliega: -formacin de puentes disulfuro (no suelen formarse en el citosol
pues hay un ambiente reductor que mantiene la cistena en su estado reducido), formacin favorecida por la
enzima disulfuro isomerasa.
-La chaperona molecular BiP se une a las cadenas polipeptdicas cuando atraviesan la membrana del RE y
favorece el plegamiento.
-Si la protena se ha plegado mal -> se degrada.

Caractersticas de
la
SECUENCIA
SEAL: Suele
tener
3 partes.
Las secuencias seal son pequeos segmentos que estn formados por unos 20 a, habitualmente en el
extremo N-terminal de la cadena polipeptdica.
N-terminal
H- es la regin central (hidrofbica)
C-terminal
La seal es reconocida por la Partcula de
Reconocimiento de la Seal SPR
-Cotraduccional la protena se lleva al retculo mientras se est sintetizando. Hay
ribosoma
- En el caso de la translocacin postraduccional Las protenas se
sintetizan completamente en los ribosomas libres del citosol y despus se translocan;
PERO la incorporacin de las protenas al RE no requiere PRS.
En su lugar, sus secuencias seal son reconocidas por protenas receptoras (el complejo Sec
62/63) asociadas al translocn.
Se requieren **chaperonas citoslicas (Hsp 70) para mantener la conformacin primaria de
las protenas y as podrn penetrar en el translocn. ** Y otra chaperona BIP que se une a la
protena, va tirando y metindola a travs del canal hasta el interior. No hay ribosoma

Sntesis de fosfolpidos, en la cara citoslica del RE

Enzimas que catalizan el plegamiento proteico

1. Protena disulfuro-isomerasa: cataliza la formacin de puentes disulfuro en
las protenas que tienen mltiples residuos de cistena.
Que se formen o no puentes disulfuro (enlace covalente) depende de la cantidad de GSH y GSSG de manera que si hay mucho GSH no se forman.
reducido

oxidado

GSH

GSSG

Esta
catlisis est mediada por un dador de e- que existe en su forma
reducida (GSH) y en su forma oxidada (GSSG): en el citosol
(ambiente reductor) predomina la forma reducida, y as no se
pueden formar los puentes disulfuro. En el interior del RE s se
forman los puentes disulfuro.
Esto explica porqu las protenas de la ruta secretora tienen
S-S y porqu dichos puentes slo estn en la cara externa.

Relacin molar
GSH / GSSG
Citosol
100:1
ER 2:1

-protena recin sintetizada.

-La PDI Protein Disulfuro
Isomerasa interacciona con la protena y un S de la PDI ataca al de la protena.
-La PDI se queda reducida y la protena con puentes disulfuro S-S
-Para que la PDI vuelva a estar reducida, la protena Ero1 (oxidada) lo permite.
2. Isomerizacion Cis-Trans de la prolina: cataliza la isomerizacin de las configuraciones cistrans de los enlaces peptdicos [en los que interviene la prolina], que podra representar un
paso limitante del plegamiento de protenas.
Esta reaccin es catalizada por la peptidil-prolil-isomerasa (facilita la rotacin).

CONTROL DE CALIDAD EN EL RE
implica
El control de calidad es el encargado de :
1) Roturas proteolticas especficas
2) Adicin y procesamiento de
oligosacridos.
3) Correcto plegamiento ("folding").
4) Formacin de puentes disulfuro (SS).
5) Ensamblado de protenas multimricas
Controla que todas las protenas se plieguen y as adquieran su
capacidad funcional

BiP
Otras chaperonas
Disulfuro isomerasa
Gran n de prot.
asociadas

Plegamiento de una protena tras su sntesis

Las protenas pueden seguir distintos caminos:
- Un tercio de las protenas pueden plegarse con poca o sin ayuda. Correctas
-Otro tercio slo se pliegan con ayudan de Chaperonas (protenas que facilitan el plegamiento de otras
protenas). Correctas
-Otro tercio de las protenas no pasan el control de calidad (se encuentran mal plegadas) y son llevadas a
una especie de trituradora llamada proteasoma.

- La chaperona +importante del RE es la chaperona BiP (Binding Protein)de la familia de las

chaperonas Hsp70. Actan hidrolizando ATP. Su principal funcin es mantener la protena
desplegada mientras est siendo sintetizada en el ribosoma.
La chaperona BiP se une a la cadena polipeptdica
sin plegar cuando cruza la membrana, y despus (en
el interior del RE) media el plegamiento y el
ensamblaje.

- Adems de actuar como chaperona, BiP juega un papel central como sensor del estado del
plegamiento proteico en el interior celular.
Si se acumula un exceso de protenas sin plegar, la sealizacin va BiP inicia un proceso conocido
como la respuesta a protenas no plegadas. (lo estudiamos luego)
-Tmbn lectinas: Protenas que se unen especficamente a azcares especficos calnexina y calreticulina.
- Otro ej.de plegamiento de protenas est representado por los anticuerpos (son inmunoglobulinas), la
protena BiP ensambla los anticuerpos hasta que contienen 2cadenas ligeras y 2pesadas de forma adecuada.
Y slo los tetrmeros bien constituidos pueden salir control de calidad completo

- Protenas: -Se pliegan GOLGI

-No se pliegan Proteasoma (trituradora de
protenas)

Qu pasa si una protena est mal plegada?

- La calreticulina reconoce las glicoprotenas mal
plegadas.
Conforme la protena se va plegando, se van
cortando glucosas: 1 se escinden glucosas de la
glicoprotena para facilitar su unin con la
calreticulina y su correcto plegamiento. Si se pierden
todas las glucosas se superan todos los controles de
plegamiento.
Si est mal plegada (pero tiene posible arreglo),
se aade un residuo de glucosa y la glicoprotena
regresa al ciclo.

Las protenas de plegamiento totalmente incorrecto (sin remedio) se le pone un sello, se le

aade Ubiquina Y las protenas son reconocidas por el Proteosoma:

-Mquina para degradas protenas,

-la subunidad central tiene accin cataltica,
-la S del extremo reconoce a las protenas con ubiquina y las introduce para ser degradadas.
La ubiquitina se libera de tal manera que
puede ser utilizada de nuevo. Todo este
proceso requiere energa en forma de ATP.

- Si se acumula un exceso de protenas desplegadas, compiten por el BiP disponible. Como

respuesta, la UPR: es un mecanismo general que se da en el RE cuando se acumula un exceso de
protenas desplegadas.
Unos sensores (en la membrana del retculo) detectan el nivel de protenas mal plegadas, y si este
nivel es elevado:
UP
-Los sensores activan a un factor de transcripcin de chaperonas.
- Este factor, activado, va al ncleo y all se une al DNA favoreciendo
la sntesis del gen de la chaperona BIP.
-Aumenta la chaperona BIP en el lumen, y si todo va bien las
protenas se plegarn adecuadamente.

Todo asegura que slo las protenas que estn bien plegadas lleguen a la
superficie. Pero a veces este control es excesivo, ej: Fibrosis qustica:
se produce una protena que permita el 60% de funcionamiento, pero
como est mal plegada es eliminada por el control de calidad del RE.

Resumen:
Si la protena es correctamente plegada con ayuda de las chaperonas vescula, Golgi
Si no logra plegarse Traslocn PROTEASOMA
Si se pliega mal UPR.
Si la UPR va mal: Apoptosis (muerte celular programada).