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Nutrientes universales
El agua
Las bacterias necesitan grandes cantidades de agua. De hecho, salvo excepciones, se pueden
considerar como organismos acuticos. Requieren cierto grado de humedad para crecer. Desde
el punto de vista de sus posibles papeles, el agua es:
Las auttrofas lo requieren como fuente de carbono, y lo reducen usando como fuente de
energa la luz (en el caso de las fotoauttrofas) u oxidaciones de determinadas sustancias
inorgnicas (los quimioautolitotrofos).
Las arqueobacterias metanognicas pueden usar el CO2 como aceptor de los electrones
procedentes de la oxidacin del H2, proceso por el que obtienen su energa:
Los hetertrofos, aunque no usan el CO2 como fuente de C ni como aceptor de electrones,
necesitan pequeas cantidades para las carboxilaciones en determinadas rutas anablicas
y catablicas.
Sales minerales
Las sales minerales son la fuente de aniones (p. ej. el Cl -) y de cationes para la clula. Los
siguientes cationes, concretamente, se necesitan en cantidades relativamente grandes: K +, Mg++,
Ca++, Fe++.
El in potasio (K+):
El in magnesio (Mg++):
Aparte de estos iones que se requieren en cantidades relativamente grandes, las bacterias
necesitan minsculas cantidades de otros elementos (oligoelementos), a los que tambin se
denomina como micronutrientes o elementos traza.
el radical -NH2 forma parte de los aminocidos (que a su vez son los sillares de las
protenas) y de las bases nitrogenadas (que participan en los cidos nucleicos y en
algunas coenzimas);
el radical -SH interviene en determinados aminocidos y en coenzimas como la CoA.
De
De
De
De
Muchas de las bacterias que pueden usar amonio como nica fuente de nitrgeno tambin
pueden usar nitratos.
Factores de Crecimiento Microbiano
Los requisitos para el crecimiento microbiano incluyen factores fsicos y qumicos. Entre los factores
fsicos tenemos la temperatura, el pH y la presin osmtica. Los factores qumicos necesarios para
el crecimiento bacterial son diversos elementos constitutivos de las clulas
Requisitos Fisicos
Temperatura
El patrn de crecimiento bacterial se ve profundamente influenciado por la temperatura. La
temperatura a crecimiento ptimo permite el crecimiento ms rpido de las bacterias durante un
perodo de tiempo, usualmente entre 12 y 14 horas. La temperatura mnima de crecimiento es
aquella temperatura menor a la cual la especie puede crecer. La Temperatura de crecimiento
Oxgeno No todos los microorganismos necesitan 02, sin embargo, muchas formas de vida
requieren oxgeno para llevar a cabo respiracin aerbica. Los microorganismos que utilizan oxgeno
molecular son llamados aerbicos. Estos se clasifican en aerbicos obligados que son los que
requieren oxgenos molecular para vivir, y los aerbicos facultativos los cuales utilizan el oxgeno
molecular cuando est presente, pero en su ausencia continan su crecimiento por la va de
fermentacin o respiracin anaerbica, un ejemplo es Escherichia coli. Por otro lado tenemos los
anaerbico obligados que necesitan ausencia de oxgeno molecular para crecer y donde este
generalmente es txico, un ejemplo es el gnero Clostridium. Estos microorganismos obtienen el
tomo de oxgeno molecular del agua. Tambin se observan microorganismos anaerbicos
aerotolerantes los cuales no utilizan el oxgenos molecular para su crecimiento, pero pueden
tolerarlo. Los microaeroflicos slo pueden crecer en concentraciones de oxgeno molecular menor a
las encontradas en el aire.
Factores orgnicos de crecimiento Estos son compuestos orgnicos esenciales que el organismo no
puede sintetizar, aqu se incluyen las vitaminas, los amino cidos, las purinas y las pirimidinas.
Medios de cultivo
Es un material nutriente preparado para el crecimiento de microorganismos en el laboratorio. Un
medio quimicamente definido es aquel donde su composicin qumica exacta es conocida. Un medio
compleio es aquel donde su composicin exacta vara de un lote a otro, ya que este medio esta
hecho de nutrientes como extractos de levaduras, carne, partes de plantas o protenas digeridas.
Hay medios especficos para crecer anaerbicos, es estos se utiliza un ingrdiente reductor como
tioglicolato de sodio, que se combina con el oxgeno molecular disuelto para eliminarlo del medio.
Tambin hay medios selectivos, stos medios en particular proveen nutrientes que ayudan al
crecimiento y predominancia de un tipo particular de bacterias, y a su vez inhibe que otros tipos de
microorganismos estn presentes, un ejemplo de estos es el medio para crecer la bacteria Neisseria
gonorrhoeae. El Medio diferencial nos permite diferenciar entre varios tipos de bacterias al incorporar
a ste ciertas substancias como sangre, sal, tintes y otros. Si inoculamos el medio con bacterias que
destruyen las clulas rojas mientras que otras bacterias no destruyen este tipo de clulas, podemos
diferenciar unas de otras en el mismo medio.
En la siguiente tabla se muestran algunas de las vitaminas y cofactores requeridos por algunas
bacterias:
Factor o vitamina
funciones principales
p-aminobenzoico (PABA)
Acido flico
Biotina
Riboflavina
cido pantotnico
precursor de la CoA
descarboxilaciones; transcetolasas.
Complejo
piridoxamina)
Difusin simple
Difusin facilitada
Transporte activo
Traslocacin de grupo.
Difucion simple
Depende de la diferencia de gradiente de concentracin entre el exterior y el interior de la clula, y
de la permeabilidad de la membrana. La concentracin externa del nutriente debe ser alta. Solo
molculas pequeas pueden atravesar la membrana: H2O, O2, CO2, glicerol.
Difucion facilitada
Permite el transporte de molculas en contra de un gradiente de concentracin, con gasto de
energa.
El complejo proteico de membrana tiene varias subunidades: poro
La fuente de energa puede ser: ATP, compuestos de fosfato de alta energa, fuerza protn motriz.
Transporte por gradiente
SIMPORTE: transporte combinado de dos sustancias en la misma direccin
+
Ej. Simporte de H : La energa almacenada en el protn facilita el transporte del soluto. Se utiliza
para captar aminocidos y cidos orgnicos
ANTIPORTE: Sistema combinado de transporte por el que las sustancias se desplazan en
direcciones opuestas.
+
+
Ej. Como respuesta al ingreso de H se bombean iones Na al exterior. El gradiente de sodio
generado dirige la captacin de azcares y aminocido
Traslocacion de grupo:
Una molcula es transportada al interior celular despus de alterarse qumicamente
Ej. Sistema Fosfoenolpiruvato-Fosfotransferasa de azcares
PEP + azcar (exterior) / piruvato + azcar-P (interior)
Captacin de Fe: La captacin de Fe es difcil debido a la insolubilidad del ion Fe 3+
Los siderforos son molculas de bajo PM capaces de formar complejos de Fe 3+ y aportarlos a la
clula
Los mo secretan siderforos cuando hay poco Fe disponible. E complejo Fe-siderof se une a la prot
receptora del siderforo. Dentro de la clula el Fe se reduce a Fe 2
Requerimientos nutricionales
Los requerimientos nutricionales estn determinados por el tipo de metabolismo celular, ya sea
autotrfico, que corresponde a los microorganismos que obtienen el carbono del CO 2 como las algas
y algunas bacterias, heterotrfico que lo poseen organismos que necesitan compuestos orgnicos
como fuente de carbono. Otro factor esencial esta determinado por las condiciones del cultivo, si es
aerobio o anaerobio. E1 O2 es el oxidante mas comn en el metabolismo energtico. En la ausencia
de ste, el NO3-- SO42- son utilizados como aceptores de electrones por algunas bacterias. Otras
protistas obtienen su energa, en condiciones anaerobias por reaccin de oxido-reduccin realizadas
sobre compuestos orgnicos. Las fuentes de carbono cumplen tambin el rol de ser fuente de
energa.
Otro requerimiento nutricional esta constituido por las fuentes de nitrgeno que pueden ser de
naturaleza inorgnica u orgnica. E] nitrgeno es utilizado para la biosntesis de protenas, cidos
nucleicos y polmeros de la pared celular. Para la sntesis de protena se requieren en general Laminoacidos, aunque tambin son necesarios algunos aminocidos de la serie D como D-alanina y
D-asprtico para su incorporacin a la pared de la clulas. En algunos casos se requieren tambin
peptidos de histidina.
Los requerimientos de otros macronutrientes como el P y el S son suministrados en forma de
fosfatos y sulfatos ( aminocidos azufrados). E1 fsforo se incorpora en cidos nucleicos, y
polmeros celulares. El S es asimilado para la sntesis de aminocidos azufrados, y adems se
necesita para la biotina, coenzima A, tiamina y otros componentes.
Los requerimientos de K y Mg son tambin esenciales. Una parte importante del primero esta unida
al RNA de manera que los requerimientos de K aumentan con los factores que influyen en el
aumento del RNA de las clulas, como la velocidad de crecimiento. El ion K acta como coenzima y
probablemente acta como catin en la estructura aninica de varios componentes celulares. El ion
Mg es esencial para la estabilidad de los ribosomas y acta como cofactor en numerosas reacciones
del metabolismo. Tanto el K como el Mg se incorporan a los medios en forma de sales como fosfato
y sulfato.
Con respecto a los micronutrientes se distinguen 2 categoras: a) Los que son frecuentemente
esenciales para el crecimiento como Ca, Mn, Fe, Co, Cu y Zn y b) los que son raramente esenciales
como B, Na, Al, Si, Cl, V, Cr, Ni, As, Se, Mo, etc.. En general los requerimientos de trazas de
elementos son conocidas cualitativamente. A veces es difcil demostrar un requerimiento de un
micronutriente porque generalmente est presente en suficiente cantidad como impureza de los
componentes principales. Los requerimientos de estos compuestos pueden aumentar varias veces
cuando el cultivo ha estado sujeto a "strees", como por ejemplo por aumento de temperatura por
encima de un valor ptimo.
Los requerimientos de factores de crecimiento comprenden ciertos aminocidos y vitaminas del
grupo B como tiamina, riboflavina, cido pantotetico, niacina, etc., que representan para muchas
bacterias y levaduras factores esenciales en los medios sin los cuales no se produce crecimiento
celular. La mayor parte de las vitaminas son constituyentes de co-enzimas. Otros factores de
crecimiento son las purinas, poliaminas, putrescinas, etc..
En algunos procesos existe la necesidad de efectuar otros agregados, aparte de los nutrientes
requeridos por los microorganismos y que representan los requerimientos especficos del proceso
considerado.
Un ejemplo es el caso de los precursores que constituye la base de una molcula que debe ser
sintetizada por el microorganismo, como el cido fenil actico para la produccin de penicilina. Otro
ejemplo es el agregado de cloruros o bromuros en el caso de algunos antibiticos como cloro y
bromotetraciclinas producidas por el Streptomyces aureofaciens. El agregado de sulfito, en el
proceso de fermentacin alcohlica, que favorece la formacin de glicerol, es otro ejemplo de un
requerimiento especifico.
El diseo correcto tiene que ver con las caractersticas bioqumicas propias y evolucin de los
parmetros de cada proceso. Por ejemplo, un proceso caracterizado por un descenso continuo de
pH, debido al uso de una sal de amonio como fuente de nitrgeno, obliga a considerar en su diseo
algn agregado que no corresponda a una exigencia nutricional, como es el caso del control de pH
del mismo. Este puede efectuarse por agregados al medio de agentes "buffer" como mezclas de
fosfatos o de carbonato de calcio o como mas generalmente se hace, con agregados peridicos de
soluciones alcalinas que pueden efectuarse en forma mas conveniente mediante un control
automtico de pH. El diseo de un medio especifico para la produccin de cido ctrico debe
considerar la influencia negativa que para el proceso tiene un exceso de hierro en su composicin;
por lo tanto dicho medio debe disearse de manera tal que su preparacin (a partir de diversas
materias primas) considere una eliminacin total del hierro y posterior agregado del mismo en
cantidades controladas.
Bibliografia: