Arlindo Ugulino Netto MICROBIOLOGIA MEDICINA P3 2008.

FAMENE
NETTO, Arlindo Ugulino.

MICROBIOLOGIA
INTRODUO
(Professora Socorro Vieira)
A microbiologia (Mikros = pequeno + Bio = vida + logos = cincia) o ramo da biologia que estuda os
microrganismos, incluindo eucariontes unicelulares e procariontes, como as bactrias, fungos e vrus. Atualmente, a
maioria dos trabalhos em microbiologia feita com mtodos de bioqumica e gentica. Tambm relacionada com a
patologia, j que muitos organismos so patogenicos.
Microbiologistas tm feito muitas contribuies biologia, especialmente nos campos da bioqumica, gentica, e
biologia celular. Micrbios possuem caractersticas que os tornam os modelos de organismos ideais. Foi descoberta a
origem das bactrias, tendo sido anterior a origem de outros corpos, tais como protozorios, eucariotes e vrus. Dentre
os citados, o ltimo a se desenvolver foram os protozorios, por tratar-se de seres com uma complexidade maior.
So muito pequenos, ento eles no consomem muitos recursos
Alguns possuem ciclos de vida bastante curtos (aprox. 30 minutos para E. coli, desde que esteja na presena
das condies timas de crescimento)
Clulas podem sobreviver facilmente em isolamento das outras clulas
Eles podem-se reproduzir por diviso mittica, permitindo a propagao de clones idnticos em populaes
Eles podem ser congelados por longos perodos de tempo. Mesmo se 90% das clulas so mortas pelo
processo de congelamento, h milhes de clulas em um mililitro da cultura lquida.
Estes traos permitiram que Joshua e Esther Lederberg pudessem dirigir um elegante experimento em 1951
demonstrando que adaptaes evolutivas surgem melhor da preadaptao do que da mutao dirigida. Para isto, eles
inventaram a replicao em placa, que permitiu que eles transferissem numerosas colnias de bactrias para locais
especficos de uma placa de petri preenchida com gar-gar para regies anlogas em diversas outras placas de petri.
Aps a replicao de uma placa com E. coli, eles expuseram cada uma das placas a fagos. Eles observaram que
colnias resistentes aos fagos estavam presentes em partes anlogas de cada placa, possibilitando-os concluir que os
traos de resistncia aos fagos existiam na colonia original, que nunca havia sido exposta aos fagos, ao invs de
surgirem aps as bactrias terem sido expostas aos vrus.
A extensiva caracterizao dos micrbios tem nos permitido o uso deles como ferramentas em outras linhas da biologia:
Bactrias (especialmente Escherichia coli) podem ser usadas para reduplicar DNA na forma de um (plasmdeo).
Este DNA frequentemente modificado quimicamente in vitro e ento inserido em bactrias para selecionar
traos desejados e isolar o produto desejado de derivados da reao. Aps o crescimento da bactria e deste
modo a replicao do DNA, o DNA pode ser adicionalmente modificado e inserido em outros organismos.
Bactrias podem tambm ser usadas para a produo de grandes quantidades de protenas usando genes
codificados em um plasmdeo.
Genes bacteriais tem sido inseridos em outros organismos como genes reprteres.
O sistema de hibridao em levedura combina genes de bactrias com genes de outros organismos j
estudados e os insere em uma clula de levedura para estudar interaes proticas em um ambiente celular.

HISTRICO
Esta rea do conhecimento teve seu incio com os relatos de
Robert Hooke e Antony van Leeuwenhoek, no sculo XVII, que
desenvolveram microscpios que possibilitaram as primeiras
observaes de bactrias e outros microrganismos, alm de diversos
espcimes biolgicos. Leeuwenhoek descobriu por acidente uma
maneira de observar seres microscpicos no leite: lustrando lentes no
local onde trabalhava, observou que, associando algumas delas, era
possvel observar elementos minsculos, como os microorganismos.
Nesse momento, acontecia a descoberta do mundo microbiano, ou
seja, o mundo de pequeninos animlculos (bactrias, fungos,
protozorios), chamados assim por ele.
Embora van Leeuwenhoek seja considerado o "pai" da microbiologia, os relatos de Hooke, descrevendo a
estrutura de um bolor, foram publicados anteriormente aos de Leeuwenhoek. Assim, embora Leeuwnhoek tenha
fornecido importantes informaes sobre a morfologia bacteriana, estes dois pesquisadores devem ser considerados
como pioneiros nesta cincia. Recentemente foi publicado um artigo discutindo a importncia de Robert Hooke para o
desenvolvimento da Microbiologia.

Arlindo Ugulino Netto MICROBIOLOGIA MEDICINA P3 2008.2

TEORIA DA ABIOGNESE
Cerca de 2 mil anos atrs, surgiu a idia de que a vida poderia se originar espontaneamente da matria
inanimada. Aristteles e outros sbios da poca acreditavam que larvas poderiam surgir "espontaneamente" do lixo,
assim como outros seres poderiam aparecer na terra, da lama e de outros materiais. Aristteles admitia que, para um ser
vivo se originar da matria bruta bastava apresentar o que ele chamou de "princpio ativo", que faria uma pedra se
transformar num peixe, desde que as condies fossem favorveis. Entretanto, nunca ocorreu aos pesquisadores isolar
sua experincia para que os microorganismos no pudessem "entrar" no recipiente que continha os ingredientes. Assim,
tal experimento sofria abertamente a interferncia externa. A teoria da abiognese comeou a desmoronar quando essa
possibilidade foi testada.
TEORIA DA BIOGNESE
A vida s se origina de outra forma pr-existente e no de um "Principio ativo" que
segundo Aristteles, poderia ser um objeto inanimado. As experincias do mdico e
bilogo italiano Francesco Redi e Louis Pasteur sepultaram definitivamente a teoria da
abiognese.
Francesco Redi (1668), cientista italiano, foi um dos primeiros biogenistas a
questionar a teoria da gerao espontnea. Em seu experimento, Redi colocou pedaos
de carne em dois frascos abertos, cobrindo um deles com uma fina camada de gaze. Aps
instantes da preparao, analisou que os dois frascos ficaram rodeados por moscas, mas
elas s podiam pousar no pedao de carne contida no frasco descoberto. Transcorridos
alguns dias, com a matria orgnica decomposta, notou o surgimento de larvas apenas no
frasco aberto, concluindo ento que as larvas surgiram do desenvolvimento de ovos
colocados pelas moscas, e no da carne em putrefao, dotada de fonte de vida. Mas que
a carne somente contribua com um meio propcio para atrao de moscas, deposio de
ovos e ecloso de larvas. Com este teste provou que a vida no surge espontaneamente
em qualquer circunstncia, mas atestando que a vida somente se origina de outro ser
vivente.
Em meados do sculo XVII, o holands Antonie van Leeuwenhoek com um microscpio descobriu o mundo dos
microorganismos, os micrbios. Os abiogenitas acreditaram ainda mais na sua tese, afirmando que seres to pequenos
no se reproduzia e sim surgiam espontaneamente.
O cientista ingls John Needham (1713-1481) realizou seus
experimentos para provar que os micrbios surgiam de gerao
espontnea. Diversos frascos contendo um caldo nutritivo foram
submetidos fervura por 30 minutos. Depois Needham lacrava os
frascos com rolhas e os deixava por repouso por alguns dias. Depois
desse repouso ele examinou o caldo com a ajuda de um microscpio
e notou a presena de microorganismos. A explicao dada foi que a
fervura tinha matado todos os seres eventualmente presentes no
caldo e nenhum microorganismo poderia entrar no frasco aps de ter
sido lacrado com rolhas. Portanto, s havia uma explicao: os
microorganismos surgiram por gerao espontnea ou abiognese.
Aps alguns anos o padre e pesquisador italiano Lazzaro Spallanzani (1729-1799) repetiu os experimentos de
Needham com algumas modificaes. Spallanzani colocou caldo nutritivo em bales de vidro e fechou-os
hermeticamente esses bales eram ento colocados em caldeires e fervidos por cerca de uma hora. Dias depois ele
examinou os caldos e obteve resultados completamente diferentes aos de Needham: o caldo estava livre de
microorganismos.
Spallanzani explicou que Needham submeteu a soluo fervura por um tempo curto de mais para esterilizar o
caldo. Needham respondeu s crticas afirmando que o tempo longo usado pelo cientista destrua a fora vital ou
princpio ativo que dava vida matria, e ainda tornava o ar desfavorvel ao aparecimento da vida. Em fins do sculo
XVII pde-se entender porque o ar se tornava desfavorvel ao aparecimento da vida. Descobriu-se que o oxignio
essencial vida. Segundo abiogenistas o aquecimento prolongado e a vedao hermtica excluam o oxignio tornando
impossvel a sobrevivncia de qualquer forma de vida.
Foi por volta de 1860 que um grande cientista francs conseguiu provar definitivamente que seres vivos s
podem se originar de outros seres vivos. Louis Pasteur (1822-1895) preparou um caldo de carne excelente meio de
cultura para micrbios colocou ento, esse caldo em um frasco com pescoo de cisne e submeteu o lquido contido
dentro desse frasco fervura para a esterilizao. Aps a fervura a medida que o lquido resfriava, gotculas de gua se
acumulavam no pescoo do frasco agindo como uma espcie de filtro retendo os micrbios contidos no ar que penetrava
no balo, impedindo a contaminao do caldo. Esse experimento mostrou que no era a falta de ar fresco que impedia a
formao de microorganismos no caldo. Pateur provou tambm que no havia nenhuma fora vital que era destruda
aps a fervura, pois se aquele mesmo caldo esterilizado fosse submetido ao ar sem a filtragem que o balo pescoo de
cisne proporcionava, surgiriam sim microorganismos que advinham de contaminao. Com esse espetacular

Arlindo Ugulino Netto MICROBIOLOGIA MEDICINA P3 2008.2

experimento Pasteur recebeu um prmio compensador da Academia Francesa de Cincias e derrubou de uma vez por
todas a hiptese da gerao espontnea ou abiognese.
1

OBS : Spallanzani durante seus experimentos submeteu seus caldos vedao hermtica, isto , livre de gazes. Um
confeiteiro parisiense Franois Appert aproveitou as experincias de Spallanzani, notando que alimentos cozidos podiam
ser guardados sob vedao hermtica sem se estragar, inventou a indstria de enlatados.
OBS: Pasteur submeteu seus caldos a uma cuidadosa tcnica de esterilizao, com aquecimentos e resfriamentos
bruscos. Hoje, essa tcnica conhecida como pasteurizao.
A partir destas descobertas e experincias que o mundo se viu voltado para um novo ramo da cincia. Lister
(1867), por exemplo, viu-se preocupado em proteger as cirurgias desses seres microscpicos, desenvolvendo, assim, a
cirrgia antissptica. Robert Koch (1876) e Pasteur se interessaram em estudar as possveis relaes desses seres com
algumas doenas que acometiam populaes nesse tempo. Foi da que o primeiro observou bactrias no sangue de
carneiro: bactrias causadoras da clera e tuberculose. Louis Pasteur foi requisitado para investigar a doena do bichoda-seda e durante seis anos tentou provar que um protozorio causava a doena. Tambm estudou o papel dos
microrganismos nas doenas dos seres humanos e dos animais. Em 1880 ele descobriu o que bactrias atenuadas
conferiram proteo contra a clera aviria e em 1884, relatou que os vrus atenuados protegiam contra a raiva. Pasteur
com a finalidade de matar esporos, iniciou a prtica de esterilizar as infuses empregando o vapor sob presso (15 libras
a 121oC), enquanto que materiais estveis eram esterilizados em fornos com calor seco na temperatura de 160C.
Robert Koch provou que as bactrias eram responsveis pela doena
do carbnculo. Foi o primeiro a provar que um tipo especfico de micrbio
causa um tipo definido de doena. Em 1877 foi o primeiro a utilizar o cristal
violeta com sucesso para a colorao do antraz, Paul Ehrlich utilizou o azul de
metileno e F Ziehl e F. Neelsen desenvolveram a colorao pelo cido,
permitindo que Koch observasse mais tarde o bacilo da tuberculose. Introduziu
tambm o meio contendo gar, identificou o bacilo da tuberculose e foi o
primeiro a isolar as bactrias causadoras do antraz e da clera asitica. Koch,
por volta de 1880, organizou postulados baseado em quatro critrios
necessrios para provar que um micrbio especfico causa uma doena
particular.
OBS: Postulados de Koch:
Um microrganismo especfico deve sempre estar associado a uma
doena.
O microrganismo deve ser isolado e cultivado em cultura pura, em
condies laboratoriais.
A cultura pura do microrganismo produzir a doena quando inoculada
em animal susceptvel.
possvel recuperar o microrganismo inoculado do animal infectado
experimentalmente.
O ramo da imunologia desenvolveu-se dos estudos iniciais da bacteriologia. Porm os chineses, persas e
brahmins j praticavam a variolizao, tcnica que consistia na exposio de um indivduo so s crostas secas de um
indivduo que se recuperava da doena. Em 1776, Edward Jenner, introduziu a prtica de imunizao ativa, expondo
indivduos a antgenos da varola humana mais branda, protegendo-os da forma mais agressiva.
Pasteur, aps 100 anos, estendeu o conceito de imunizao ativa, quando observou que a clera aviria podia
ser evitada inoculando cultura velha de bacilos, com a sua virulncia reduzida. Em seguida ele aplicou este princpio de
imunizao na preveno do carbnculo, denominando as culturas avirulentas de vacinas (do latim vacca, vaca) e o
processo de imunizao, com tais culturas, de vacinao. Ele desenvolveu este mtodo atravs da utilizao de
organismos atenuados e preparou vacinas protetoras contra o antraz, a erisipela suna e contra a raiva.
Koch iniciou estudos sobre as relaes celulares do hospedeiro s infeces, o clssico de imunidade mediada
por clulas foi a observao, que o mesmo fez, quando injetou um antgeno derivado do organismo causador da
tuberculose, ocasionando reaes inflamatrias tardias em seres humanos e animais quando expostos.
Alexander Fleming (1881 1955) trabalhou como mdico microbiologista no Hospital St. Mary de Londres at o
comeo da Primeira Guerra Mundial. Durante a guerra foi mdico militar nas frentes de batalha da Frana e ficou
impressionado pela grande mortalidade nos hospitais de campanha causada pelas feridas de arma de fogo que
resultavam em gangrena gasosa. Finalizada a guerra, regressou ao Hospital St. Mary onde buscou intensamente um
novo anti-sptico que evitasse a dura agonia provocada pelas infeces durante a guerra. Os dois descobrimentos de
Fleming ocorreram nos anos 20 e ainda que tenham sido acidentais demonstram a grande capacidade de observao e
intuio deste mdico britnico. O descobrimento da lisozima ocorreu depois que o muco de seu nariz, procedente de
um espirro, casse sobre uma placa de cultura onde cresciam colnias bacterianas. Alguns dias mais tarde notou que as
bactrias haviam sido destrudas no local onde se havia depositado o fluido nasal. O laboratrio de Fleming estava

Arlindo Ugulino Netto MICROBIOLOGIA MEDICINA P3 2008.2

habitualmente bagunado, o que resultou em uma grande vantagem para sua segunda importante descoberta. Em
Setembro de 1928, Fleming estava realizando vrios experimentos em seu laboratrio e ao inspecionar suas culturas
antigas antes de destru-las notou que a colnia de um fungo havia crescido espontaneamente, como um contaminante,
numa das placas de Petri semeadas com Staphylococcus aureus. Fleming observou outras placas e comprovou que as
colnias bacterianas que se encontravam ao redor do fungo (mais tarde identificado como Penicillium notatum) eram
transparentes devido a uma lise bacteriana. A lise significava a morte das bactrias, e no caso, das bactrias
patognicas (Staphylococcus aureus) crescidas na placa.

CLASSIFICAO GERAL DOS SERES VIVOS

At a metade do sculo XX, os seres vivos so classificados em apenas duas categorias: reino animal e reino
vegetal. Com o progresso da biologia, a classificao se amplia para incluir organismos primitivos que no tm
caractersticas especficas s de animais ou de vegetais.
A partir da dcada de 60, o critrio internacionalmente aceito divide os organismos em cinco reinos:
Moneras: seres unicelulares (formados por uma nica clula) procariontes (clulas sem ncleo organizado). O material
hereditrio constitudo por cido nuclico no
citoplasma. So as bactrias e as cianfitas
(algas azuis), antes consideradas vegetais
primitivos.
Protistas: seres unicelulares ou pluricelulares
eucariontes
(que
possuem
ncleo
individualizado). Seu material gentico est
organizado nos cromossomos, dentro do
ncleo. Representados por protozorios, como
a ameba, o tripanossomo (causador do mal de
Chagas) o plasmdio (agente da malria), que
at a metade do sculo XX eram considerados
animais primitivos e algas unicelulares e
pluricelulares.
Fungos: seres eucariontes uni e pluricelulares
como as leveduras, o mofo e os cogumelos. J
foram classificados como vegetais, mas sua
membrana possui quitina, molcula tpica dos
insetos e que no se encontra entre as plantas.
So hetertrofos (no produzem seu prprio
alimento), por no possurem clorofila.
Animais: so organismos multicelulares e
hetertrofos (no produzem seu prprio
alimento). Englobam desde as esponjas
marinhas at o homem, cujo nome cientfico
Homo sapiens.
Plantas: caracterizam-se por ter as clulas
revestidas por uma membrana de celulose e
por serem auttrofas (sintetizam seu prprio
alimento pela fotossntese). Existem cerca de
400 mil espcies de vegetais classificados.

PRINCIPAIS DOENAS CAUSADAS POR BACTRIAS

Tuberculose: causada pelo bacilo Mycobacterium tuberculosis.
Hansenase (lepra): transmitida pelo bacilo de Hansen (Mycobacterium leprae).
Difteria: provocada pelo bacilo diftrico.
Coqueluche: causada pela bactria Bordetella pertussis.
Pneumonia bacteriana: provocada, principalmente, pela bactria Streptococcus pneumoniae
(pneumococo).
Escarlatina: provocada pelo Streptococcus pyogenes.
Ttano: causado pela toxina produzida pelo bacilo do ttano (Clostridium tetani).
Leptospirose: causada pela Leptospira interrogans.
Tracoma: provocada pela Chlamydia trachomatis.
Gonorria ou blenorragia: causada por uma bactria, o gonococo (Neisseria gonorrhoeae).
Sfilis: provocada pela bactria Treponema pallidum.
Meningite meningoccica: causada por uma bactria chamada de meningococo.
Clera: doena causada pela bactria Vibrio cholerae, o vibrio colrico.
Febre tifide: causada pela Salmonella typhi.