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UNIVERSIDADE ESTADUAL DA PARABA UEPB

CENTRO DE CIENCIAS E TECNOLOGIA CCT


CURSO DE ENGENHARIA SANITRIA E AMBIENTAL
COMPONENTE C.: MICROBIOLOGIA EXPERIMENTAL

ALUNO: KENNY ROGERS DA SILVA HENRIQUES


MAT.: 08101034-6

DETECO DE COLIFORMES TOTAIS E ESCHERICHIA


COLI EM GUA DE CONSUMO HUMANO PELO MTODO
COLILERT

Trabalho referente ao 1
experimento, da segunda
unidade
2010.2
do
componente
de
microbiologia experimental,
ministrado pela professora
Weruska Brasileiro Ferreira.

Campina Grande PB
Outubro de 2010
INTRODUO

Durante milnios as guas insalubres propagaram epidemias que dizimaram


populaes. A cada dia 6 mil pessoas morrem por doenas diarricas, a maioria sendo criana
de at cinco anos. As doenas de veiculao hdrica so causadas, principalmente, por
microrganismos patognicos de origem entrica, animal ou humana, transmitidos basicamente
pela rota fecal-oral, ou seja, so excretados nas fezes de indivduos infectados e ingeridos na
forma de gua ou alimento contaminado por gua poluda com fezes (Nikaido et al., 2004).
A deteco de agentes patognicos na gua extremamente difcil em razo de suas
baixas concentraes e para verificar essa possvel contaminao, considera-se a presena de
organismos indicadores como as bactrias do grupo coliformes.
A determinao de coliformes totais inclui as bactrias na forma de bastonetes Gram
negativos, no esporognicos anaerbios facultativos, capazes de fermentar a lactose com
produo de gs, em 24 48 horas a 35C. J a determinao de coliformes fecais a mesma
de coliformes totais, porm, restringindo-se aos membros capazes de fermentar a lactose com
produo de gs, em 24 horas 44,5 - 45,5C. Esta definio objetivou, em princpio,
selecionar apenas os coliformes originrios do trato gastrintestinal. Atualmente sabe-se,
entretanto, que o grupo dos coliformes fecais inclui pelo menos trs gneros, Escherichia,
Enterobacter e Klebsiela, dos quais dois incluem apenas de origem no fecal. Por esse
motivo, a presena de coliformes fecais em gua e alimentos menos representativa, como
indicao de contaminao fecal, do que a enumerao direta de E. coli, porm, muito mais
significativa do que a presena de coliformes totais, dada a alta incidncia de E. coli dentro do
grupo fecal.
Com a E. coli a determinao cerca de 95% dos coliformes existentes nas fezes
humanas e de outros animais, dentre as bactrias de habitat reconhecidamente fecal, dentro do
grupo os coliformes fecais, E. coli a mais conhecida e a mais facilmente diferenciada dos
membros no fecais. Todos os demais membros do grupo tm uma associao duvidosa com a
contaminao fecal e E. coli, embora tambm possa ser introduzida a partir de fontes no
fecais, o melhor indicador de contaminao fecal conhecido at o momento. Por esse
motivo, as tendncias atuais se direcionam no sentindo de deteco especfica de E. coli, com
o desenvolvimento de diversos mtodos que permitem a enumerao rpida dessa espcie
diretamente.

OBJETIVOS

O objetivo desse experimento foi analisar a presena de Coliformes totais e E. Coli,


na gua para consumo do Centro de Cincias e Tecnologia CCT UEPB, a partir de duas
amostras de fontes distintas.
MATERIAIS E MTODOS
Os alunos e funcionrios do CCT UEPB, desfrutam duas opes para
dessedentamento. Uma delas utilizar os vrios bebedouros distribudos pelos corredores do
prdio e outra comprar gua mineral vendida em copos descartveis na cantina do Centro.
Assim, foram analisadas duas amostras, uma de um bebedouro escolhido aleatoriamente, e
outra comprada na citada cantina.
Para a quantificao dos indicadores microbiolgicos foi utilizado o sistema Colilert
(sistema patenteado por IDEXX Laboratories) que utilizado para deteces simultneas,
identificaes especficas e confirmativas de coliformes totais e E. coli em gua continental
natural ou tratada. O Colilert utiliza nutrientes (acares ligados a radicais orgnicos
cromognicos) que fazem com que os microrganismos de interesse presentes na amostra
produzam uma mudana de cor (ou fluorescncia) no sistema inoculado.
O

meio

Colilert

contm

os

nutrientes

ONPG

(o-nitrofenil-

Beta

-D-

galactopiranosdeo) e MUG (4-metil-umbeliferil- Beta -D-glucorondeo). As enzimas


especficas e portanto caractersticas dos coliformes totais (Beta-Galactosidade) e da E. coli
(Beta-Glucoronidase) ao metabolizarem os nutrientes, causam a liberao do radical orgnico
cromognico, e como conseqncia, a amostra passa a apresentar uma colorao especfica
amarela para coliformes totais (ONPG) e fluorescncia (na presena de luz ultravioleta a 365
nm) para E. coli (MUG).
O critrio para que as bactrias sejam consideradas ideais indicadoras de poluio de
origem fecal, que estejam presentes em grande nmero nas fezes humanas e de animais, em
efluentes residuais e ausentes em guas limpas. A E. coli o nico bitipo da famlia
Enterobacteriaceae que pode ser considerado exclusivamente de origem fecal.
Cada amostra de gua com 100ml, recebeu o meio Colilert e foram posteriormente
seladas e incubadas a uma temperatura de 35C por 24 horas fornecendo desse modo os
resultados por colorao e fluorescncia.

RESULTADOS

Aps incubao por 24 horas a 35C, foi verificada a colorao das amostras. Uma
colorao amarela foi detectada, evidenciando coliformes totais em ambas as amostras.
Assim, devido este primeiro resultado, foi conveniente realizar o teste para a deteco de E.
coli, submetendo as amostras a presena de luz ultravioleta a 365nm. Aps o teste, as
amostras apresentaram caractersticas de fluorescncia, logo, o resultado foi positivo para
presena de E. coli.
CONCLUSO
Segundo a portaria 518 do Ministrio da Sade, a presena de coliformes na gua
indica contamio, com o risco potencial da presena de organismos patognicos, e uma vez
que so mais resistentes na gua do que as bactrias patognicas de origem intestinal. A
presena de coliformes totais em alimentos no indica, necessariamente, contaminao fecal
ou ocorrncia de enteropatgenos, j em gua para consumo humano tem que estar totalmente
ausente de qualquer tipo de coliforme, tanto os totais como os termotolerantes. Pode-se
constatar ento que a gua analisada est imprpria para consumo humano.
REFERNCIAS
Nikaido M, Oliveira AS, Trevilato TMB & Segura-Muoz SI. 2004. Anlise da qualidade da
gua do crrego Monte Alegre e afluentes, Ribeiro Preto, SP: enfoque para coliformes
fecais e metais pesados. O mundo da Sade, 28: 414-420

MORAIS, Eduardo Beraldo de. Qualidade microbiolgica das guas do rio Cabea
um afluente na bacia do rio Corumbata, SP. Arquivos da Universidade Estadual
Paulista, Av. 24-A, 1515, Rio Claro, Brasil.