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OBJETIVOS
- Observar la distribucin de microorganismos en una columna de agua-sedimento.
- Relacionar su presencia con las caractersticas del micro hbitat.
RESULTADOS
A continuacin se muestran las observaciones obtenidas en las columnas de Winogradsky en un
periodo de 5 semanas a partir del da 18 de febrero hasta el 1 de abril (da donde se inici la
observacin de preparaciones en fresco de dichas columnas al microscopio)
Tabla 1. Observaciones para la columna N 1 Iluminacin
Fecha
18. Feb.
14
19. Feb.
14
Equip
o
Indicador rdox
Papel filtro
Columna de
agua
Columna de sedimento
Morado
Intacto
Turbia
Negro-caf arenoso
Morado
Intacto
Traslucida de
color turbio
Negro de olor
desagradable
Rosa en la superficie
y ligeramente claro
en el fondo
Sin cambio
Transparente
Intacto
Traslucida
Negro
Pequea
adherencia
s de color
negra.
Turbia
En la parte superior e
inferior color rosaanaranjado y en el
medio violeta ms
claro
Traslucida
Formacin de capas
delgadas inferior de
color negro y superior
blanquecina
Negro y
rosa hasta
Violeta en el medio y
arriba, con
morado arriba.
adhesiones
.
Traslcida
Intacto
Traslucida
Sin cambios
Partculas
adheridas
ligerament
e.
Turbia
Arenoso
20. Feb.
14
21. Feb.
14
5
25. Feb.
14
Intacto
Intacto
Tiene
partculas
adheridas
04.Marz.1
4
5
3
06.Marz.1
4
En tonalidades rojo y
violeta en el medio y
los extremos rojos
Presenta en la parte
superior un anillo
rosa y
posteriormente es
incoloro.
Traslucida
Sedimento ms oscuro
y la capa negra ms
delgada
Traslucida
Partculas
adheridas,
papel sin
degradar.
Turbia
Pigmentos negros en
medio del sedimento
Intacto
Formacin de
un anillo
superior color
amarillo
10.Marz.1
4
Incoloro en la mayor
parte de la columna
excepto la superficie
Sin cambio
Turbia
Cambio
de fecha
es el 11
de
Marzo
Con
muchas
partculas
adheridas
Traslcida
Anaranjado parte
superior y rosa en el
fondo
Partculas
adheridas
Sin cambio
Traslucida
Sin cambio
Sin cambio
13.Marz.1
4
18.Marz.1
4
3
En la parte superior
es color rosa y
posteriormente no
presenta color.
Partculas
adheridas
y en la
parte de
hasta
arriba
estn
presentes
algas.
Partculas
adheridas
color
20.Marz.1
4
25.Marz.1
4
Totalmente incoloro
(Reducido)
Con
partculas
adheridas
Turbia
Rosa
Sin
cambios
Sin cambio
Con ligera
Muchas
capa rosa
partculas
hasta arriba y
adheridas
turbia hacia
y cado en
debajo de
sedimento
color caf.
Negro y arenoso.
5
3
Sin
cambios.
Sin cambios
Sin cambios.
Rosa claro
Por fuera
del agua
partculas
amarillas
Sin cambio
27.Marz.1
4
5
01.Abr.14
3
5
Sin cambios
Sin cambios
Equip
o
Indicador Rdox
Papel
filtro
Columna de
agua
Morado
Intacto
Turbia
Morado
Intacto
Traslucida de
color turbio
Sin
cambio
Transparente
Intacto
Menos
traslucida
que la 1
Negro
3
19. Feb.
14
5
20. Feb.
14
3
Rosa en la superficie
y ligeramente claro
en el fondo
Rosa fuerte hasta la
parte media el resto
violeta
Columna de sedimento
Arenoso, color negrocaf.
Negro de olor
desagradable
Presenta
En la parte superior
pequeas
color rosa, en medio
Fino, color gris, con una
adherenci
color guinda y la
Turbia
posterior fase color
as de
parte baja color
negra.
color
negro.
negro.
Incoloro
Intacto Produccin de Pigmentacin color negro
gas y
en la parte superior y
presento
paredes de la columna
Incoloro
Sin
cambios
Turbia
Negro, arcillosos y
grueso, con manchas
lechosas en la superficie.
Sin cambios
Sin
cambios
Burbujas y
menos turbia
Sin cambio
Transparente
Ligerame
nte
partculas
adheridas
.
Turbia
Arenoso.
Sin cambios
Sin
cambios
Burbujas y
menos turbia
ms
trasparente
Negro
Blanco
Desgasta
do con
partculas
adheridas
.
Turbia.
Arenosos. Presenta en la
parte superior una franja
color blanca.
Sin
cambios
Capa superior
blanca y el
resto menos
turbia
traslucida
Sin cambios
Turbia.
Anillo
superior
amarillo
turbia y
opaca
Turbia
21. Feb.
14
24. Feb.
14
3
04.Marz.
14
5
3
06.Marz.
14
10.Marz.
14
3
5
Sin cambios
En la parte superior
tiene una capa
negra con hongos y
posteriormente
presenta un color
blanco.
Sin cambios
Presenta
muchas
partculas
adheridas
, sin
degradar
y
presenta
un color
caf.
Pigmento
s en la
parte
superior
color
negro
Incoloro en la mayor
Con
parte de la columna partculas
excepto la superficie adheridas
13.Marz.
14
18.Marz.
14
Sin cambios
Partculas
adheridas
Parte superior
Los
pigmentacin
pigmento verde, sigue
Parte superior rosa y
s se
turbia,
abajo incoloro
increment traslucida en
an
menor
proporcin
Con
En la parte superior
muchas
presenta hongos y partculas
tiene un color blanco adheridas
el agua.
sin
degradar.
Sin
Negro
cambios
Totalmente incoloro
(Reducido)
Con
partculas
adheridas
20.Marz.
14
5
25.Marz.
14
27.Marz.
14
5
3
Biopelcula
natosa verde
hasta arriba
con hongos
blancos.
Columna de
agua opaca
blanquecina.
Sin cambios
Sin
cambios
Negro y caf
Con
muchas
partculas
adheridas
.
Negro. Hongos en la
parte superior.
Sin
cambios.
Opaco
Opaca
Grisceo
Turbia
Capa
superficial
caf claro e
igual de
opaca
Muy opaca y
turbia con
coloracin
cambiando a
blanco cerca
del
sedimento y
negro el
resto.
Sin cambios.
Gris oscuro
Sin cambios.
Negro
Sin
cambios
3
01.Abr.1
4
Anillos
superficial
caf, color
negro y
traslucida
Sin cambios
Sin cambios
Sin
cambios
Anillos
superficial
caf, color
negro y
opaca
Sin cambios
18. Feb.
14
Equipo
Indicador rdox
Papel
filtro
Columna de
agua
Columna de sedimento
Color
azul.
Turbia
Arenoso.
Morado
Intacto
Traslucida de
color turbio
Negro de olor
desagradable
3
19. Feb.
14
5
3
20. Feb.
14
21. Feb.
14
Con
Rosa en la parte
partculas
superior e incoloro
Ligeramente
oscuras
solo hasta el
opaca
adheridas
fondo.
.
Lnea en la zona
inferior color rosa
Sin
Menos que la 2
fuerte y lo dems
cambios
columna
morado
Se puso
de color
rosa y se
Rosa
Traslucida.
peg al
sediment
o.
Aumento la zona
rosa
Rosa
Negro
Fina.
Capa superior
blanquecina y una
Sin cambios
inferior gris claro el resto
negro
Sin
Interfase
Arenoso, poroso, una
adhesion
acuosa
capa negra encima de la
es y color
traslcida
columna de sedimento y
rosa
(blanco-negra)
posteriormente una
arriba
con el
ligera capa blanca.
sedimento.
Luego columna
de agua rosa,
de abajo hacia
arriba, rosa
Sin
cambios
ligero y luego
muy intenso
3
25. Feb.
14
5
3
04.Marz.
14
5
3
06.Marz.
14
10.Marz.
14
Tena
burbujas
Color rosa
con
Rosa oscuro en la
negro,
parte superior y en
pocas
la parte baja una
partculas
capa color gris.
adheridas
.
Rosa al fondo
seguida de una
sin
ligera capa inferior
cambios
y superficial roja y
el resto morado.
En la parte
superior presenta
un color rosa,
Verde y
posteriormente
desgasta
rosa tenue y
dofinalmente sin
color.
Violeta, Morado,
Violeta e incoloro
Sin
(Descendentement cambios
e)
Presenta en la
Sin
parte superior una
degradar,
franja delgada
presenta
color rosa en la
partculas
parte baja esta
adheridas
incoloro con
.
turbidez.
Sin cambios
Sin cambios
Turbia
Arenoso.
Sin cambios
Sin cambios
Traslucida
Arenoso, en la parte
superior tiene una franja
negra.
Sin cambios
Sin cambios
Traslucida.
Violeta arriba y
abajo morado
Sin
cambios
Opaca
Capa superior
blanquecina y abajo gris
Incoloro en el
fondo rosa, en la
superficie.
Con
partculas
adheridas
Turbia
3
13.Marz.
14
5
3
18.Marz.
14
20.Marz.
14
25.Marz.
14
Con
partculas
adheridas
Rosa
y verde
en la
parte de
arriba.
Crecimien
Arriba anaranjadoto de
rosa y abajo
algas en
morado
la parte
superior
Partculas
En la parte
adheridas
superior presenta
, hasta
un color rosa
arriba
posteriormente un
tiene
color verde.
algas.
Verdosa al
fondo y toda
traslcida.
Opaca
Traslucido.
Morado
Pigmento
s verde
Produccin de
gas y opaca
Parcialmente
reducido, la
superficie oxidada
(rosa).
Con
partculas
adheridas
Turbia
Violeta
Sin
cambios
Partculas
adheridas
y verde
arriba
Turbia verdosa
y ligera capa
rosa hasta
arriba,
traslcida.
En la parte
superior presenta
algas.
Hongos
en el
papel
filtro.
En la parte
superior tiene
un color rosa,
seguido de un
color verde.
Sin cambios.
Sin cambios
Mayor
deposici
n de
pigmento
s verdes
Pigmentos
verdes y
traslucida
opaca
Pigmentos
Capa verde, blanca y gris
verdes y opaca
(descendentemente)
3
27.Marz.
14
5
01.Abr.14
Fecha
3
5
Sin cambios
Sin cambios
18. Feb.
14
19. Feb.
14
Morado tenue
Intacto
Turbia
Arenoso.
Morado
Intacto
Traslucida de
color turbio
Negro de olor
desagradable
Columna
totalmente rosa
Sin cambio
Traslcida
Lnea cncava
rosa fuerte
Sin
cambios
Sin cambios
Sin cambios
Traslucida.
Sin cambios
Capa superficial
blanquecina
3
20. Feb.
14
5
Intacto,
Morado y en la
impregnn
parte baja una
dose de
franja color blanca. color
morado.
Lnea convexa
Manchas
color rosa clara en
en la zona
la superficie y la
cercana al
del fondo ms
sedimento
arriba y ms clara
Rosa
Sin
cambios
Rojo en el fondo y
el resto violeta
Sin
cambios
Sin cambios
Sin cambios
Negro
Partculas
adheridas.
En la parte
superior
tiene un
color rosa,
despus un
color
negro.
Turbia.
Rojo en el fondo y
la superficie, en
medio violeta
Sin
cambios
Sin cambios
Capas superficiales
negra y blanquecina
Traslucida.
Fina.
21. Feb.
14
25. Feb.
14
04.Marz.1
4
Turbia
incolora,
posteriorment
Arenoso, gris y con
e rosa y hasta
capa ligera negra hasta
arriba en la
arriba.
superficie una
ligera pelcula
naranja.
En la parte
Presenta
superior tiene un adherencia
color rosa,
s de
posteriormente un partculas.
rosa tenue y
finalmente una
ausencia de color.
3
06.Marz.1
4
10.Marz.1
4
3
13.Marz.1
4
5
3
18.Marz.1
4
5
20.Marz.1
4
25.Marz.1
4
27.Marz.1
4
3
5
Partculas
adheridas
Rosa fuerte y
Biopelcula
al papel
degradndose
hasta arriba.
filtro sin
hacia abajo.
Traslcida.
degradarse
.
En la base
Sin cambios
crecimient
Traslucida
o de algo
Partculas
adheridas,
Rosa, la biopelcula
sin
se fue a fondo del desgaste y
Traslucida
agua.
la
presencia
de hongos.
En la superficie
Depsitos
rosa claro y abajo
Sin cambios
verdes
rosa fuerte
Sin cambios
Rosa claro
Rosa
5
3
Rosa intenso.
Intacto
Sin cambios
Partculas
negras
adheridas
Gradiente
desde rosa
intenso en la
superficie,
traslcida con
algunas
partculas
flotando
Sin
cambios.
Sin cambios.
Superficie rosa y el
resto negro
3
01.Abr.14
Rosa
Negro
Traslucido
turbio
Sin cambios
Sin
Sin cambios
cambios
Sin cambios
DISCUSIN
La columna de Winogradsky es un modelo de ecosistema in vitro, con el que se tiene un
ambiente semejante al de los sedimentos naturales, pero a escala milimtrica, para estudiar a los
microorganismos acuticos y de los sedimentos. Se ha utilizado en el cultivo de enriquecimiento
para el aislamiento de bacterias fototrficas rojas y verdes, de bacterias sulfato reductoras y de
muchos otros anaerobios. En la columna se desarrollan poblaciones de bacterias fotosintticas que
utilizan el sulfuro de hidrgeno como donador de electrones en su metabolismo siendo estas
fotoauttroficas. Para poder ampliar el panorama de estudio y observacin de las columnas, el
tener distintas alturas en la columna permite tener el desarrollo de una zona aerbica,
microaeroflica y de otra anxica, con esto se est sometiendo a la columna a las condiciones que
cada microorganismo necesita para un desarrollo completo del microcosmos. Durante las semanas
de observacin pudimos notar como las 4 columnas fueron cambiando en cuanto su coloracin y
aspecto (Tablas 1-4), teniendo en un inicio los cambios ms significativos durante las primeras 2
semanas, pues se pudo observar rpidamente la formacin de gas en el sedimento (producto de
las fermentaciones que posiblemente se dieron de la materia orgnica), el cambio de color del
indicador que daba indicio del consumo que se tena de oxgeno y cambios en el papel filtro y
columna de agua.
Con respecto a las columnas de la estacin 3, desde el inicio de la segunda semana pudios notar
en las columnas 1, 2 y 3 la presencia de una capa negra encima del sedimento que conforme
pasaba el tiempo se fue acumulando ms. Esta capa se presume, puede deberse a que se est
llevando a cabo la precipitacin de sulfuro frrico como producto de una sulfato reduccin
desasimilatoria llevada a cabo por microorganismos quimioorganohetertrofos y fotolitoauttrofos.
Adems esto se puede apoyar con el olor de las columnas, que olan bastante a cido sulfhdrico,
del cual se genera la reaccin que genera el precipitado de sulfuro frrico. Al generarse ste cido
tambin se forma un gradiente de concentracin del mismo, estando en la parte ms baja a
mayores concentraciones y disminuyendo hacia el borde de las columnas. Esto se observ
principalmente en la columna 2, en la que el oxgeno se agot rpidamente. Este mismo efecto se
observ en las columnas de la estacin 4, pero en menores cantidades y a diferentes tiempos. En
general, las columnas de sacarosa presentaron demasiados cambios durante toda la
experimentacin en ambas estaciones, al final incluso se tornaron negras y la de la estacin tres
tena crecimiento de hongos blancos en la superficie. Al observar esta columna al microscopio, en
la estacin tres realmente solo pudimos identificar un hongo del cual se desconoci la especie,
Chlorellas, bacilos y espiroquetas. Salvo las Chlorellas (que estuvieron tambin en abundancia en
las columnas 1 y 3), podemos llegar a pensar que los microorganismos observados hetertrofos
estaban sobre saturando esta columna con sus desechos ms rpido de lo que estos podan ser
degradados de nuevo y por esto se observaba tan turbia la columna de agua (AQU HAY QUE
PONER ALGO SOBRE SUS OBSERVACIONES AL MICRO EN ESTA COLUMNA)
Un factor de gran importancia es la luz, las columnas se expusieron a esta, para que diversas
poblaciones microbianas fotosintticas se desarrollen. De manera particular para la columna que
contena detergente (columna 3), para las estaciones 3 y 5, que estaba expuesta a la luz present
una coloracin verde, esto se debi a la presencia de cianobacterias y algas, ya que estos crecen
en la superficie aerbica de la columna. Debido a estos microorganismos, que crecieron
principalmente en la superficie, se daba una fototrofia que permita incorporan aunque sea en
pequeas cantidades oxgeno al sistema, pero este nicamente se observaba en la superficie
(color rosa). En sta columna, para la estacin 3 se observaron al microscopio nuevamente
chlorellas y espiroquetas, adems de diatomeas, bacilos, levaduras y un protozooario alargado
que pareca ser un Cyathostominae. Cabe mencionar que fue la columna de esta estacin con
mayo diversidad. AQU TAMBIEN PODRIAN AGREGAR SOBRE SUS OBSERVACIONES AL
MICROSCOPIO.
En la columna sin luz, se observaron los menores cambios durante el estudio; el consumo de
oxgeno era muy poco, la formacin de burbujas en sedimento, se tard ms
y.. En el microscopio, en la estacin 3 se distinguieron bastantes
protozoos flagelados de forma ovalada y con el centro verde claro, en esta columna se esperaban
CONCLUSIN
En general para las 4 columnas de las estaciones 3 y 5 se logr el objetivo de crear un
microcosmos, para saber el desarrollo de ste, pudiendo conocer la variedad microbiana que
presenta el sedimento de las Cascadas de Atrlihuetzia, Tlaxcala.
Podemos darnos cuenta que efectivamente la columna de Winogradsky funciona como un micro
hbitat, de modo que podemos estudiar a baja escala los diferentes tipos de vida microbiana que
hubiera sido muy complicado en su entorno natural. Es importante destacar que la distribucin de
estos organismos es muy importante, y el hecho de que en algunas columnas hayamos encontrado
una diversidad deferente a la que se esperaba o con otra disposicin en el espacio nos hace
pensar efectivamente en eso, que quiz la escala es muy pequea, y por lo cul se est perdiendo
una parte importante de la diversidad.
Se concluye tambin que cada organismo encontrado aporta diferentes caractersticas al medio, de
acuerdo a la regin que habita y es lo que lo hace un medio tan variado, en constante movimiento y
cuidando el afectado equilibrio de ese micro ecosistema.
CUESTIONARIO
1._Describa qu es un indicador de xido- reduccin, de dos ejemplos y mencione los
cambios que se observaran en distintos grados de oxidacin.
Los indicadores de xido-reduccin presentan una coloracin diferente segn su forma oxidada o
reducida. Su comportamiento es similar al de los indicadores utilizados en las tinciones cido-base,
pero cuando estos ltimos son sensibles a las valoraciones de pH de la solucin, los indicadores de
xido-reduccin son sensibles a las variaciones de potencial del sistema. La variacin cromtica
es, a menudo muy clara. Ejemplo de indicadores de xido reduccin es el Azul de metileno y el
Carmn de ndigo. En el caso del Azul de metileno en estado de oxidacin presenta una coloracin
azul y en estado reducido presenta una coloracin incolora. En el caso del Carmn de ndigo en
estado de oxidacin presenta una coloracin azul en estado reducido presenta un color amarillento.
2._ En sus columnas, o en las de sus compaeros se present crecimiento de
microorganismos con coloracin verde o amarilla en la superficie, verde o roja en el fondo?
Mencione a que grupos microbianos pueden pertenecer y explique por qu?
Figura
1.
Un poco por encima, las bacterias reductoras del azufre, que se visualizan como una profunda
capa negra y estn representadas por Desulfovibrio, pueden utilizar estos subproductos de la
fermentacin para su respiracin anaerobia, usando sulfato, u otras formas parcialmente oxidadas
de azufre como el Tiosulfato, generando grandes cantidades de SH 2 en el proceso. Este
SH2 reaccionar con cualquier hierro presente en el sedimento, produciendo sulfuro ferroso, que da
color negro. Es por esto que los sedimentos acuticos son frecuentemente negros.
Por encima del sedimento: en una primera franja, las bacterias verdes del azufre
(como Chlorobium) procesan los sulfatos a azufre y aparecen en una franja verdosa. En otras
zonas cercanas, bacterias como Gallionella procesan el Hierro formando una capa negra que se
forma justamente por debajo de la anterior. Un poco ms arriba, algo ms alejadas por tanto de las
altas concentraciones de sulfhdrico se desarrolla una zona de bacterias prpuras del azufre,
como Chromatium, caracterizada por su color rojo-prpura.
Un poco por encima de esta zona nos encontramos una franja de bacterias prpuras no del azufre,
como Rhodospirillum y Rhodopseudomonas, que adquiere un color rojo-anaranjado. Su mayor o
menor abundancia depender de la cantidad de sulfhdrico que se haya producido y de la cantidad
que, no utilizada por otros organismos, difunda hacia arriba, ya que su presencia inhibe a estas
bacterias. Son anaerobios Fotoorganotrofos que slo pueden realizar la fotosntesis en presencia
de una fuente de carbono orgnico.
La parte superior de la columna de agua puede contener abundantes poblaciones de bacterias de
diferentes tipos. Son organismos aerobios que se encuentran habitualmente en los hbitats
acuticos ricos en materia orgnica (estanques poco profundos, arroyos contaminados, etc).
Suelen ser flagelados, lo que les permite moverse y establecerse en nuevas reas. Puede
desarrollarse tambin microorganismos Fototrficos variados procedentes directamente del agua o
del sedimento utilizado originalmente en el montaje de la columna. La superficie del sedimento
puede presentar en esta zona un ligero color castao. Esta es la parte de la columna ms rica en
oxgeno y ms pobre en azufre. Tambin aqu llegarn por difusin, procedentes del sedimento de
zonas inferiores, ciertas cantidades de SH 2 que ser oxidado a sulfato por bacterias que oxidan
azufre (como Beggiatoa y Thiobacillus). Estas bacterias obtienen energa oxidando el SH 2 a azufre
elemental y sintetizan su propia materia orgnica a partir de CO 2. Por esto se les llama
Quimoauttrofas.
En las zonas superiores pueden crecer tambin Cianobacterias Fotosintticas, lo que se
visualizara cmo un tapete de csped de color verde. Estas bacterias se caracterizan por ser las
nicas que realizan una fotosntesis similar a la de las plantas.
3._ Diga los grupos microbianos (gremios) que se enriquecen en las columnas de acuerdo al
tratamiento que tuvieron (CaSO4, sacarosa, detergente, iluminacin u obscuridad.
Para la columna 1, en la que se adicion el CaSO4 como fuente de azufre e iluminacin, se
favorecieron los quimiolitoauttrofos, fotolitoautotrofos y fotoorganoautotrficos. En la columna con
Madigan, Michael T; Martinko, John, M.; Parker, Jack. Brock Biologa de los
microorganismos. 10 Ed. Pearson Prentice-Hall. Espaa. 607 - 610 p.p.
Indicadores,http://www.carloerbareagenti.com/Repository/DIR005/ES/catchem100_sez2_
indicat_es.pdf (Consultado el 07 de Abril de 2014).
Atlas. R.M, Ecologa microbiana y Microbiologa ambiental. 2 Ed. Pearson Educacin.
Espaa. 429-430 p.p.
Columna
de
Winogradsky.
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/Formadeprepararlacolumnayejemplosdealgun
osmicroorganismosquesepuedenobservar_21240.pdf. (Consultado el 07 de Abril de
2014).
La
columna
de
Winogradsky.
http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioBiodiversidad.htm. (Consultado el 09
de Abril de 2014).