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FACULTAD DE QUMICA
ACADEMIA DE QUMICA AGRCOLA
NOMBRE DE LA ASIGNATURA:
SEMESTRE:
5.
CLAVE:
753.
REA DE CONOCIMIENTO:
Bsicas.
ASIGNATURAS PRECEDENTES:
ASIGNATURA SUBSECUENTE:
HORAS POR SEMANA.
Ninguna
TEORA:
0 horas
LABORATORIO:
2 horas
CRDITOS:
2.
Laboratorio de Bioqumica
Vegetal
Prerequisito
CLAVE
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NDICE
Pgina
Introduccin
Objetivo General
12
20
27
Prctica 5 Alelopata
31
34
Prctica (Adicional)Biopolmeros
39
Laboratorio de Bioqumica
Vegetal
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Prerequisito
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Introduccin:
El metabolismo es el conjunto de reacciones qumicas que realizan los seres vivos
para sintetizar sustancias ms complejas a partir de unas ms sencillas, o bien
para degradar las complejas y obtener las simples.
Las plantas poseen metabolismo secundario que les permite producir y acumular
compuestos de naturaleza qumica diversa. Estos compuestos derivados del
metabolismo secundario se denominan metabolitos secundarios, se distribuyen
diferencialmente entre grupos taxonmicos, presentan propiedades biolgicas,
muchos desempean funciones ecolgicas y se caracterizan por sus diferentes
usos y aplicaciones como medicamentos, insecticidas, herbicidas, perfumes o
colorantes, entre otros. Reciben tambin la denominacin de productos naturales.
Objetivo general:
El alumno conocer los principales grupos de metabolitos secundarios de plantas,
as como su utilidad, biosntesis y su degradacin.
Laboratorio de Bioqumica
Vegetal
CLAVE
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Prerequisito
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Nombre de la prctica:
Prctica
Relevamiento Fitoqumico
Realiz:
Esp. en N.V. Laura Luna Martnez
Fecha: 19/01/2012
Pginas
8
Pginas de la
3-11
Revis:
Autoriz:
Dr. Juan Ramiro Pacheco A
Fecha:
Fecha:
Contenido
Pgina
I. INTRODUCCIN
III. OBJETIVO
IV. METODOLOGIA
IV. 1. Material y equipo.
IV. 5. Procedimiento.
V. RESULTADOS.
V.1 Clculos
VI. DISCUSION.
VII. CONCLUSIONES
VIII. BIBLIOGRAFIA
ANEXO
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Vegetal
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Prerequisito
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I. INTRODUCCIN
Los vegetales producen una gran diversidad de sustancias, producto del
metabolismo secundario, algunas responsables de la coloracin y aromas de
flores y frutos, algunas ms estn vinculadas con interacciones ecolgicas.
En los ltimos aos se han utilizado en la industria farmacutica compuestos
aislados de plantas para la produccin de medicamentos. El estudio fitoqumico
preliminar es necesario para la identificacin de compuestos con posible actividad
biolgica.
.
II. CONOCIMIENTOS PREVIOS.
1. Qu es un metabolito?
2. Cul es la diferencia de los metabolitos primarios a los secundarios?
3. Cul es la importancia de saber la constitucin nutricional de una
planta?
III. OBJETIVO
- Identificar metabolitos secundarios en plantas de inters alimenticio y medicinal
mediante pruebas cualitativas.
IV. METODOLOGIA
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IV.5. Procedimiento
1. Preparacin de la muestra para extraccin de compuestos
Moler 30 g del material vegetal seco a analizar y macerar en 100 mL de etanol al
70 % durante una semana.
2. Reconocimiento de grupos funcionales
Alcaloides
Tomar 30 mL del extracto etanlico de la planta, adicionar 5 mL de HCl (10%) y
calentar por 10 min. Enfriar y dividir el filtrado en tres tubos de ensayo; al primer
tubo agregar 5 gotas del reactivo Dragendorff, si existe una coloracin roja a
naranja es positivo. Al segundo tubo agregar 5 gotas del reactivo de Mayer una
coloracin blanco a crema se registra como positivo, y al tercer tubo agregar 5
gotas del reactivo de Wagner, el desarrollo de un color marrn es positivo para
esta prueba.
Cardiotnicos
En un tubo de ensayo colocar 2.5 mL de extracto etanlico, adicionar unas gotas
de solucin de acetato de plomo al 10 %. Calentar la mezcla a bao mara durante
10 min. Despus, agregue 0.5 ml de cloroformo, agitar y separar la capa
clorofrmica en 5 tubos de ensayo, llevar a sequedad.
Adicionar:
- Al primer tubo 1 mL de reactivo de Baljet. (coloracin rojo claro a oscuro o
violeta indica cardenlidos)
- Al segundo: 1 mL de reactivo de Raymond-Marthoud (anillo lactnico de
cardenlidos). Igual coloraciones que reactivo de Baljet
- En el tercero realizar la reaccin de Keller-kiliani. Verde-azulado,
- En el cuarto realizar la reaccin de Liebermann-Burchard. Coloracin verde,
azul verdoso, vira de rojo al azul.
- En el quinto realizar la reaccin de Salkowski. Coloracin amarillo-rojo.
Cumarinas voltiles
En un tubo de ensayo colocar 2 mL de extracto, tapar con un papel filtro
impregnado en solucin diluida de NaOH y llevar a Bao de agua a 100C por
algunos minutos. Remover el papel filtro y examinarlo bajo luz UV, siendo la
fluorescencia amarilla-verdosa indicativa de la presencia de cumarinas.
6
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Flavonoides
Colocar en tubo, 2 mL del extracto, algunos fragmentos de Mg y agregar por las
paredes del tubo unas gotas de HCl diluido (HCl al 10 %). Observar la coloracin
que vara para las diferentes estructuras. Flavonas y flavonoles (amarillo a rojo),
flavanonoles (rojo a magenta), flavanonas (rojo, magenta, violeta, azul),
isoflavononas, chalconas y auronas no dan coloracin.
Taninos
En un tubo evaporar 2 mL de extracto y disolver el residuo en 4 ml de agua
destilada. Dividir el contenido del extracto en 4 tubos. Al primer tubo adicionar 1 o
2 gotas de solucin de cloruro frrico al 10 %, una coloracin azul-negro indica la
presencia de taninos hidrolizables, mientras que una coloracin verde-pardo
taninos condensados.
Confirmacin:
Al resto de los tubos adicionar en cada uno:
- 5 gotas de una solucin de gelatina
- 5 gotas de una solucin de gelatina y sal
- 5 gotas de una solucin salina
Aparicin de precipitado blanco en los tubos con soluciones de gelatina y de
gelatina-sal son resultados postivos para test de taninos. Si tambin aparece en la
solucin salina se considera negativo.
Saponinas
En un tubo evaporar 2 mL de extracto, despus agregar 2 ml de agua hirviendo,
enfriar y agitar vigorosamente, dejar reposar 15 minutos. Si la espuma persiste es
un ndice de la presencia de saponinas.
Triterpenos y esteroides
En un tubo colocar 2 mL de extracto, evaporar a sequedad, adicionar 2 ml de
cloroformo, dividir en dos tubos el extracto. En el primer tubo llevar a cabo la
reaccin de Liebermann-Burchard, para ello agregar 5 gotas del reactivo, y
observar el desarrollo de color rosado o prpura, el cual puede cambiar a una
coloracin verdosa. En el segundo tubo realizar la reaccin de Salkowski: 0.5 ml
del extracto se mezcla con 1 ml de cloroformo, deslizar por las paredes del tubo 1
ml de cido sulfrico al 85 %. Colores amarillo a rojo se considera positivo.
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Tabla de Resultados
PRUEBA
DATURA
ARNICA
MANZANILLA
ROMERO
T
VERDE
HIEDRA
Alcaloides
Cardiotnicos
Cumarinas
voltiles
Taninos
Saponinas
Triterpenos y
esteroides
Derivados
antracnicos
V.1. Clculos
N/A
VI. DISCUSIN
VII. CONCLUSIONES
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VIII. BIBLIOGRAFIA
http://www.botanical-online.com/col/manapuya22.htm
Ricardo Vliz, Sully Cruz, Ana Gmez, Vinicio Garca, Luis lvarez,
Armando Cceres, Julio Morales, Oscar Cbar, Carmen Samayoa, Rodolfo
Orozco, Isabel Gaitan. 2006. Caracterizacin de Aceites Esenciales y
extractos de ocho especies Mesoamericanas de Piperaceas y
evaluacin de la actividad biocida para su aprovechamiento como
nuevos recursos aromticos y/o medicinales. Universidad de San Carlos
de Guatemala. Direccin General de Investigacin. Facultad de Ciencias
Qumicas y Farmacia. Instituto de Investigaciones Qumicas y Biolgicas
(IIQB). Pg 22.
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ANEXO
PREPARACIN DE REACTIVOS
R1.- Reactivo de Wagner.
Solucin de yodo en yoduro de potasio: disolver 1.27 g de yodo y 2.0 g de yoduro
de potasio en 5 mL de agua. Llevar la solucin a 100 mL con agua
R2.- Reactivo de Mayer.
Solucin de yoduro de mercurio y potasio.
a.- 1.36 g de HgCl 2/60 mL de H 2O
b.- 5 g de KI/10 mL de H2O
Mezclar y diluir a 100 mL
R3.- Reactivo Dragendorff.
a.- disolver 1.7 g de nitrato de bismuto (III) y 20 g de cido tartrico en 80 mL de
agua.
b.- Disolver 16 g de yoduro de potasio en 40 mL de agua.
Solucin Stock: mezclar partes iguales de a y b. Si se refrigera la solucin Stock
es estable por varios meses.
R4.- Reactivo de Baljet
a.-1 g de cido pcrico/100 ml etanol
b.- 10 g de NaOH/100 mL de H 2O
Reactivo: 1a + 1b
R5. Reactivo de Raymond-Marthound
1 g de m-dinitrobenceno en etanol 100 mL
R6. Reactivo de Liebermann-Burchard
Mezclar 5 mL de anhidrido actico y 5 mL de cido sulfrico concentrado se
agregan cuidadosamente a 50 mL de etanol absoluto, mientras se enfra en bao
de hielo
El reactivo debe estar recin preparado
R7.- Reactivo de Salkowski
1 ml de FeCl3 0.5 M, 50 ml de HCLO4 al 35%.
R8.-Solucin de cloruro frrico
Solucin al 10 % de cloruro frrico en agua destilada
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Nombre de la prctica:
Prctica
Pginas
Pginas de la
Identificacin de Alcaloides; Nicotina y
8
12-19
2
Cafena.
Realiz:
Revis:
Autoriz:
Esp. en N.V. Laura Luna Martnez Dr. Juan Ramiro Pacheco A
Fecha: 19/enero/2012
Fecha:
Fecha:
Contenido
Pgina
I. INTRODUCCIN
13
14
III. OBJETIVO
14
IV. METODOLOGIA
IV. 1. Material y equipo.
15
15
16
16
IV. 5. Procedimiento.
16
18
V. RESULTADOS.
V.1 Clculos
18
19
VI. DISCUSION.
VII. CONCLUSIONES.
19
VIII. BIBLIOGRAFIA
19
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I.
INTRODUCCION.
El trmino alcaloide fue introducido por W. Meisner a principios del siglo XIX para
designar a las sustancias naturales que reaccionan como bases, (del rabe al
kaly, la sosa y del griego eidos, el aspecto). Realmente no existe una definicin
sencilla y precisa de alcaloides, siendo a veces difcil establecer la frontera que
separa los alcaloides de otros metabolitos nitrogenados naturales.
En un principio se definieron como sustancias nitrogenadas, bsicas de origen
natural y distribucin restringida, los alcaloides poseen una estructura compleja.
Se han encontrado 50 alcaloides de los cuales 12 de ellos no se encuentran en
vegetales y por definicin se acostumbra excluirlos del grupo de los alcaloides;
segn algunos autores los alcaloides provienen nicamente del reino vegetal.
Pueden encontrarse como sales de cidos orgnicos y se puede aadir que
biosintticamente se forman a partir de un aminocido.
Estos elementos caracterizan a los que se pueden denominar alcaloides
verdaderos.
TABACOS
El cido nicotnico es el precursor de la nicotina, principal alcaloide de las plantas
txicas como N. tabacum L., N. rustica L y otras variedades de tabaco.
Las hojas de tabaco verde son ricas en glcidos (40%: almidn, pectina, celulosa,
azucares solubles), en protenas y cidos orgnicos (15-20%). El contenido de
alcaloides, muy variable, depende del modo de cultivo y la variedad cultivada (210%, hasta mas de un 15 % en algunos cultivos de N. rustica). El alcaloide
mayoritario es la (S)-(-)-nicotina.
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TE NEGRO
La cafena es la droga de consumo ms popular en todo el mundo. Se estima que
una persona consume en promedio unos 70 mg diarios de cafena (54% contenida
en el caf, 43 % en el te y el restante 3 % en otras formas).
La cafena es naturalmente una droga psicoactiva, lo que significa que tiene la
potencialidad de alterar el pensamiento, el comportamiento y los estados de nimo
de las personas. Pertenece a la categora qumica denominada xantinas que son
drogas estimulantes del sistema nervioso central.
En su forma mas pura la cafena tiene forma de cristales de sabor amargo y se
encuentra en muchas sustancias de uso cotidiano como el caf, el t, el mate, la
cocoa, el chocolate, las bebidas de cola y algunos preparados mdicos (pastillas
para el dolor de cabeza y analgsicos).
Las palabras cafena y caf provienen del rabe gahweb. El caf proviene de una
planta nativa de Etiopa.
1, 3, 7-trimetilxantina
II. CONOCIMIENTOS PREVIOS.
1. Investigar las propiedades fsicas de la nicotina y cafena.
2. Investigar la accin farmacolgica de la nicotina y cafena y los usos de esta en
la industria alimenticia.
3. Cul es el efecto de la nicotina y cafena sobre el cuerpo humano?
4. A qu familia de alcaloides pertenece la cafena, teofilina y la nicotina?
5. Investigue la frmula qumica de la cafena y explique las semejanzas que
encuentra con la teofilina y teobromina.
III. OBJETIVO
Manejar dos tcnicas diferentes para extraccin de alcaloides tomando en cuenta
sus propiedades fisicoqumicas.
Conocer dos diferentes tipos de alcaloides, sus similitudes y diferencias.
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IV. METODOLOGIA
IV.1. Material y equipo
1 Capsula de porcelana
1 Desecador
1 pinzas para crisol
8 vasos de precipitados de 50 mL
1 Microesptula
3 Pipetas graduadas de 10 mL
2 Agitador de vidrio
4 Pipetas graduadas de 10 mL
1 Plato caliente con agitador
1 Embudo pequeo
2 Embudo de separacin de 250 mL
2 Aro
2 Soporte universal
1 Pinzas para bureta
3 Vasos de precipitado de 10 mL
1 Gotero
1 Pipeta sexolgica de 2 mL
1 Pipeta graduada de 1 mL
2 Matraz aforado de 10 mL
1 Jeringa
2 Vasos de precipitados de 25 mL
1 Pipeta sexolgica de 1 mL
1 Vaso de precipitado de 250 mL
1 Probeta de 50 mL
1 Vaso de precipitado de 100 mL
IV. 2. Reactivos y soluciones
Muestra de tabaco
Solucin saturada de Ba(OH) 2 (0.9 g por cada 4.5 mL)
Solucin de benceno-cloroformo 9:1 (27 mL de C6H6, 3 mL de CHCl3)
Carbn activado
Cloruro de calcio anhidro (1 g)
Violeta de metilo (0.2 g)
Clorobenceno (10 mL)
Solucin de HClO4 0.1 M valorada
cido actico glacial (25 mL)
Biftalato de potasio (0.25 g)
T negro (3 bolsas)
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b. Titulacin
Tomar una alcuota de 3 a 5 mL dependiendo el producto obtenido, colocarla en
un vaso de precipitados de 10 mL, aadir dos gotas del indicador violeta de metilo
(0.2 g en 10 mL de clorobenceno)
Enjuagar y llenar la pipeta sexolgica de 2 mL de la solucin valorada de HClO 4
0.1 M (0.083 de HClO 4 aforados a 10 mL en cido actico).
Titular hasta que el color vire de violeta a verde
Hacerlo por triplicado
c. Valoracin
Enjuagar un vaso de precipitados de 10 mL con 5 mL de cido actico glacial y
desecharlo.
Colocar en el vaso 10 mL de cido actico glacial y agregarle dos gotas del
indicador cristal violeta (0.5 g de cristal violeta en 10 mL de cido actico
glacial). Agregar desde la pipeta serolgica HClO 4 gota a gota y con agitacin,
hasta la aparicin de turquesa o verde esmeralda; se gastan de 2 a 3 gotas de
cido.
Colocar el mismo vaso de 0.2042 de biftalato de potasio y disolver, dejar caer
nuevamente HClO 4 en cido actico glacial hasta el viraje del indicador al
verde esmeralda o turquesa. El precipitado de perclorato de potasio que se
forma, no afecta la valoracin.
CAFEINA
Colocar tres bolsitas de t negro en un vaso de precipitados de 250 mL (no
romper los sobres), y vierta aproximadamente 15 mL de agua hirviendo.
Colocar el vaso de precipitados en una parrilla y contine calentando por unos
10 minutos ms con agitacin.
Verificar el pH de la disolucin, si ste es alcalino no agregue nada, sin
embargo si el pH es ligeramente cido agregue unas gotas de sosa para que el
pH se de aproximadamente 8, ya que a pH alcalino se encuentra libre al
alcaloide (cafena).
Separar la disolucin y repita el mismo procedimiento dos veces ms para
recuperar la mayor cantidad de cafena.
Dejar enfriar la disolucin para luego realizar la extraccin con 5 mL de
diclorometano, repita la extraccin dos veces ms; no se agite vigorosamente
por que se puede formar una emulsin si la agitacin es muy violenta, en cuyo
caso deber esperar ms tiempo para la separacin de las fases acuosa y
orgnica. Se recolectan las fases orgnicas en un vaso de precipitado de 100
mL y posteriormente se secan con Na2SO4 anhidro (opcional). La fase orgnica
se transfiere a un vaso de precipitados de 50 mL previamente pesados.
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Pruebas de identificacin.
Se preparan los siguientes reactivos:
Wagner: Solucin de Yodo-Yoduro de potasio.
Disolver 0.0508 gr de yodo y 0.4 gr de yoduro de potasio en 1ml de agua
destilada, y llevar la solucin a 20 ml con agua destilada.
Mayer: Solucin de Yoduro de mercurio y potasio.
a) Disolver 0.2267 gr de cloruro de mercurio (III) y 2.5 gr de cido tartrico
en 10 ml de agua destilada.
b) 0.85 gr de yoduro de potasio en 1.7 ml de agua destilada.
Mezclar y diluir a 16 ml.
Dragendorff:
Solucin a: disolver 0.2125 gr de nitrato de bismuto (III) y 2.5 gr de cido tartrico
en 10 ml de agua destilada.
Solucin b: disolver 4 gr de yoduro de potasio en 10 ml de agua destilada.
Solucin Stock: mezclar partes iguales de a y b.
Identificacin: se divide el extracto en 3 partes iguales y se agregan unas gotas de
los reactivos de reconocimiento: Dragendorff, Mayer y Wagner. Una leve turbidez
o precipitado (rojo a naranja, blanco a crema y marrn) evidencia la posible
presencia de los mismos.
IV.6 Diseo experimental (si lo hay)
N/A
V. RESULTADOS
1. Determinar el contenido de nicotina en la muestra.
2. Determinar el contenido de nicotina (en mg) por cigarrillo a partir de los
datos obtenidos.
3. Estime el peso promedio de un cigarro con el contenido mximo de nicotina
posible (sin llegar a ser txico).
4. Cul es el peso de la cafena?
5. Cul es el rendimiento de la cafena?
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Nombre de la prctica:
Prctica
Pginas
Pginas de la
Obtencin y caracterizacin de colorantes
3
7
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naturales.
Realiz:
Revis:
Autoriz:
Esp. en N.V. Laura Luna Martnez Dr. Juan Ramiro Pacheco A
Fecha:18-Ene-2012
Fecha:
Fecha:
Contenido
Pgina
I. INTRODUCCIN
21
21
III. OBJETIVO
21
IV. METODOLOGIA
22
22
22
23
23
IV. 5. Procedimiento.
23
25
V.1 Clculos
VI. DISCUSION.
25
VII. CONCLUSIONES.
25
VIII. BIBLIOGRAFIA
26
20
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I. INTRODUCCION.
Los antocianos son pigmentos naturales pertenecientes al grupo de los
flavonoides, se encuentran presentes en numerosos alimentos, frutos, flores y
verduras, son responsables de la coloracin roja, azul o violeta de numerosas
flores o de ciertas hojas.
Los antocianos son muy sensibles a las variaciones de pH: generalmente rojos en
medio cido, viran a violeta y despus a azul oscuro cuando el pH se hace
alcalino; la presencia de oxgeno es un factor importante de inestabilidad, la
elevacin de la temperatura produce pardeamiento.
Los antocianos son un tipo de flavonoides complejos que se caracterizan por tener
un importante efecto antioxidante al apoyar la regeneracin de los tejidos,
fomentar el flujo de sangre, reducir el colesterol y promover la formacin de
colgeno, mejorando la circulacin, adems de ser excelentes preventivos contra
el cncer.
II. CONOCIMIENTOS PREVIOS.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
III. OBJETIVO
Realizar pruebas cualitativas que permitan identificar betacianinas y antocianinas
a partir de extractos de frutos (cscara, pulpa y semilla).
Realizar una tincin a partir de un colorante de origen natural de tipo flavonoide.
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IV. METODOLOGIA
IV.1. Material y equipo
5 vasos de precipitados de 100ml.
6 vasos de precipitados de 150 ml.
6 vasos de precipitados de 250 ml.
1 matraz aforado de 250 ml.
1 matraz aforado de 50 ml.
3 embudos de vidrio.
1 embudo de separacin.
2 pipetas graduadas de 5 ml.
2 pipetas graduadas de 10 ml.
3 pipetas pasteur.
1 microesptula.
1 agitador de vidrio.
1 termmetro (0-100 C)
1 piceta.
1 navaja o cuchillo
3 papeles filtro.
Espectrofotmetro UV-vis.
Plato caliente.
Cmara de electroforesis.
Potencimetro.
IV. 2. Reactivos y soluciones
Hidrxido de sodio al 0.5% (p/v).
Sal de mesa.
Agua destilada.
Metanol.
cido actico.
BAW: constituido por n-butanol, cido actico glacial, agua, en proporcin 4:1:5.
Estos solventes sern mezclados en un embudo de separacin, para as poder
obtener la fase orgnica, que es la que nos servir para correr nuestra placa.
HCl al 1 %.
Extracto de tuna, manzana, berenjena y maz morado.
1 gramo de semilla de aguacate seco.
IV. 3. Requerimientos de seguridad
Bata de algodn.
Guantes.
Lentes de seguridad.
Mascarilla para gases.
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IV.5. Procedimiento
1. Antocianinas.
Se trabajar con:
Variedades
Maz morado
Manzana roja
Cscara de berenjena
Antocianina presente
Cianidina-3-b-glucosa
Cinidina 3-arabinosido
Delfinidina 3,5 diglucsido
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Vegetal
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agua y dejar secar. Hacer la prueba de fijacin lavando el pedazo de tela con agua
y jabn.
2. Extraccin de Betacianinas.
Se le retira la cscara al fruto de nopal (tuna), se pica en cuadritos pequeos los
cuales se colocan en el vaso de precipitados, se agregan de 25 a 40 ml de agua
destilada para extraer las betacianinas, para ayudar a la extraccin, machacar con
una varilla de vidrio la pulpa. Dejar que el agua extraiga el colorante durante 10
minutos posteriormente filtrar. Realizar todas las pruebas indicadas en la tabla.
3. Diferenciacin entre antocianinas y betacianinas.
1.- Usar el extracto metanlico obtenido en la parte 1a) y el extracto acuoso de la
parte 1b) como fuente de antocianinas. Usar el extracto acuoso de la parte 2 como
fuente de betacianinas.
2.- Realizar las pruebas siguientes:
Las primeras cuatro pruebas que se muestran en la Tabla siguiente son
suficientes para la mayoria de los propsitos; las dos ltimas pueden realizarse si
el tiempo y el equipo lo permiten.
TABLA. Pruebas para distinguir entre antocianinas y betacianinas*.
Prueba
Respuesta de
Respuesta de
antocianinas
betacianinas
Calentar con HCl 2M por Color estable (puede
El color se desvanece
5 minja 100C.
extraerse con alcohol
isoamlico).
Adicionar unas gotas de Cambia a azul verde y
Cambia a amarillo
NaOH 2M
lentamente palidece
Cromatografa en 1% de Rf pequeo a intermedio Rf grande
HCl acuoso
Cromatografa en BAW
Rf moderado (10-40)
Rf muy pequeo (00-10)
Espectro en el visible
Longitud de onda 537nm Longitud de onda 537nm
Electroforesis en papel a Se mueve hacia el
Se mueve hacia el
pH= 2-4
ctodo
nodo
*Estas pruebas de color pueden llevarse a cabo en extractos crudos del pigmento,
pruebas a la que la tabla hace referencia, los pigmentos purificados podran
comportarse ligeramente diferentes.
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V. RESULTADOS
Llenar la siguiente tabla indicando si las pruebas dieron positivas o negativas para
cada caso, anotando las observaciones correspondientes.
Prueba
Respuesta de
antocianinas y
betacianinas
Respuesta de
betacianinas y
observaciones
25
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VIII. BIBLIOGRAFIA
HARBONE J.B. (1984). Phytochemical Methods. A guide to modern techniques of
plant analysis. Second Edition, Ed. Chapman and Hall.
DEVIA Pineda Jorge Enrique, SALDARRIAGA Diego Fernando.
Proceso para obtener colorante a partir de la semilla del aguacate
Universidad Eafit, enero-marzo, ao/vol. 41, nmero 137, 2005.
Universidad Eafit Medelln, Colombia pp. 36-43.
SALINAS Moreno Yolanda, RUBIO Hernndez David, DIAZ Velsquez Antonio
Extraccin y uso de pigmentos del grano de maz (ZEA MAYS I) como colorantes
en yogurt.
Laboratorio de Maz, INIFAP. Depto. De Ingeniera Agroindustrial. Universidad
Autnoma Chapingo, Chapingo, Mx.
SONIA DE PASCUAL Teresa, CELESTINO Santos Buelga and JULIAN C Rivas
Gonzalo.
LC-MS analysis of anthocyanins from purple corn cob
rea de Nutricin y Bromatologa, Facultad de Farmacia, Universidad de
Salamanca, E-37007 Salamanca, Espaa.
26
Laboratorio de Bioqumica
Vegetal
CLAVE
753
Prerequisito
742
Nombre de la prctica:
Actividad antifngica de aceites
Realiz:
Esp. en N.V. Laura Luna Martnez
Fecha:18 Enero 2012
Prctica
4
Pginas
4
Revis:
Autoriz:
Fecha:
Fecha:
Contenido
Pginas de la
27-30
Pgina
I. INTRODUCCIN
28
28
III. OBJETIVO
28
IV. METODOLOGIA
IV. 1. Material y equipo.
28
29
29
29
IV. 5. Procedimiento.
29
30
V. RESULTADOS.
30
V.1 Clculos
30
VI. DISCUSION.
30
VII. CONCLUSIONES.
30
VIII. BIBLIOGRAFIA
30
27
Laboratorio de Bioqumica
Vegetal
CLAVE
Prerequisito
753
742
I. INTRODUCCION.
El inters mostrado en los ltimos aos en reconocer la importancia de los hongos
fitopatgenos y la dificultad para lograr un buen control de los mismos, as como el
aumento de la resistencia a los antifngicos, ha incrementado la investigacin de
alternativas basadas en productos naturales. Muchas especies vegetales
producen aceites esenciales los cuales juegan un papel importante en los
mecanismos de defensa contra el hospedero. Se ha demostrado que los aceites
esenciales y sus compuestos tienen un efecto fungicida, son inocuos para el
medio ambiente , para los consumidores y para el control de enfermedades
poscosecha. La necesidad de reducir el uso de qumicos sintticos en la
agricultura ha incrementado el inters por la posible aplicacin de aceites
esenciales para el control de fitopatgenos.
Laboratorio de Bioqumica
Vegetal
CLAVE
753
Prerequisito
742
Laboratorio de Bioqumica
Vegetal
CLAVE
Prerequisito
753
742
30
Laboratorio de Bioqumica
Vegetal
CLAVE
753
Prerequisito
742
Nombre de la prctica:
Alelopata (prctica investigada y
desarrollada por el estudiante)
Prctica
5
Pginas
3
Pginas de la
31-33
Realiz:
Revis:
Autoriz:
Esp. en N.V. Laura Luna Martnez Dr. Juan Ramiro Pacheco A
Fecha:18 Enero 2012
Fecha:
Fecha:
Contenido
Pgina
I. INTRODUCCIN
32
32
III. OBJETIVO
32
IV. METODOLOGIA
32
32
32
32
33
IV. 5. Procedimiento.
33
33
V. RESULTADOS.
33
V.1 Clculos
33
VI. DISCUSION.
33
VII. CONCLUSIONES.
33
VIII. BIBLIOGRAFIA
33
31
Laboratorio de Bioqumica
Vegetal
CLAVE
Prerequisito
753
742
I. INTRODUCCION.
Muchos investigadores consideran que la dominancia de una especie sobre otra
en un ecosistema natural, se debe no slo a la competencia en s, sin o tambin al
efecto aleloptico entre las plantas. Los efectos alelopticos daan parcial o
totalmente la germinacin y el crecimiento de las plantas, tambin puede ser de
carcter positivo o negativo, directos e indirectos, segn la concentracin de las
sustancias. Los daos parecen estar en dependencia de la influencia de diferentes
factores, como son la especie y variedad, los residuos y plantas afectadas, la
cantidad, el lugar y el clima que sobre ellos acten, los estados nutricionales del
suelo, su actividad microbiana y otras caractersticas. La presencia de cobertura
muerta sobre el suelo, durante muchos aos seguidos, afecta el desarrollo de
determinados cultivos agrcolas; esto es un elemento fundamental en el xito de la
siembra directa, por la supresin de las plantas indeseables.
II. CONOCIMIENTOS PREVIOS.
1. Defina alelopata?
2. Mencione cuantos tipos de alelopata existen y describa cada tipo
III. OBJETIVO
Que el estudiante evale el efecto del uso de metabolitos secundarios en la
germinacin de un cultivo agrcola
IV. METODOLOGIA
IV.1. Material y equipo
Frascos de vidrio de boca ancha
Algodn
Muestras secas de: calndula, organo, manzanilla, albahaca (o los propuestos
por el estudiante)
Molino de cuchillas
Piceta
Semillas de albahaca
IV. 2. Reactivos y soluciones
Agua destilada
IV. 3. Requerimientos de seguridad
Bata de algodn
32
Laboratorio de Bioqumica
Vegetal
CLAVE
Prerequisito
753
742
33
Laboratorio de Bioqumica
Vegetal
Prerequisito
CLAVE
753
742
Nombre de la prctica:
(Adicional) Obtencin de un perfume.
Realiz:
Esp. en N. V. Laura Luna Martnez
Fecha: 18-Enero-2012
Prctica
6
Pginas
5
Revis:
Dr. Juan Ramiro Pacheco A.
Fecha:
Contenido
Autoriz:
Fecha:
Pgina
I. INTRODUCCIN
35
35
III. OBJETIVO
35
IV. METODOLOGIA
36
36
36
36
36
IV. 5. Procedimiento.
37
37
V. RESULTADOS.
Pginas de la
34-38
37
V.1 Clculos
38
VI. DISCUSION.
38
VII. CONCLUSIONES.
38
VIII. BIBLIOGRAFIA
38
34
Laboratorio de Bioqumica
Vegetal
CLAVE
Prerequisito
753
742
I. INTRODUCCION.
Aceites esenciales.
Los aceites esenciales son mezclas de varias sustancias qumicas biosintetizadas
por las plantas, que dan el aroma caracterstico a algunas flores, rboles y
semillas. Son intensamente aromticos, no grasos (por lo que no se enrancian),
voltiles (se evaporan fcilmente) y livianos (poco densos). Son insolubles en
agua, levemente solubles en vinagre, y solubles en alcohol, grasas, ceras y
aceites vegetales. Se oxidan por exposicin al aire. El principal mtodo de
aplicacin de los aceites esenciales es a travs de una dilucin en agua caliente,
para que as el vapor del agua mezclado con las esencias se absorban por medio
del aparato respiratorio.
Otra de las maneras en la que estos aceites pueden ser aplicados es a travs de
la piel utilizando una mezcla de aceites esenciales con aceites vehiculares de
acuerdo a la necesidad, ya que la piel se convierte en un vehculo y a la vez un
protector para introducir los compuestos y propiedades que las plantas poseen sin
tener que correr riesgos de efectos secundarios nocivos.
Estructura qumica.
Estn formados principalmente por terpenoides voltiles formados por unidades de
isopreno unidas en estructuras de 10 carbonos (monoterpenoides) y 15 carbonos
(sesquiterpenoides). Las sustancias responsables del olor suelen poseer en su
estructura qumica grupos funcionales caractersticos: aldehdos, cetonas, steres,
etc.
35
Laboratorio de Bioqumica
Vegetal
CLAVE
753
Prerequisito
742
IV. METODOLOGIA
IV.1. Material y equipo
2 matraces soxhlet
2 cmaras soxhlet
2 refrigerantes soxhlet
1 plato caliente
1 tina
1 recirculador
1 microesptula
2 matraz erlenmeyer de 250 ml
1 probeta 100ml
2 matraces aforados de 50 ml
2 pipetas Pasteur
2 tubos de ensaye
IV. 2. Reactivos y soluciones
300 ml de ter de petrleo
Cscara de limn
Alcohol del 96 %
3.4 g de permanganato de potasio
0.55g de propilenglicol
1.1g de fijador
IV. 3. Requerimientos de seguridad
Bata de algodn.
Guantes.
Lentes de seguridad.
Mascarilla para gases.
IV.4 Disposicin de residuos
El ter de petrleo se destilar y podr reutilizarse.
Los residuos sern desechados en los depsitos correspondientes.
36
Laboratorio de Bioqumica
Vegetal
CLAVE
Prerequisito
753
742
IV.5. Procedimiento
Obtencin del cido graso.
1. se arman los dos aparatos de extraccin soxhlet.
2. Se lava perfectamente el limn y se le quita la cscara.
3. Se coloca la canela y la cscara de limn cada una en un cartucho y
son introducidas a cada una de las cmaras soxhlet.
4. Se agregan 100 ml de ter de petrleo a cada uno de los matraces
soxhlet.
5. Se extrae con el equipo Soxhlet hasta que en la cmara soxhlet se
deje de presentar color (aproximadamente 2 horas).
6. Se retira el matraz soxhlet, el cual contiene el lquido, y se pasa a un
equipo de destilacin para destilar el solvente y obtener el aceite
esencial.
7. Cuidar que no se queme el aceite, para ello se recomienda que se
pase el aceite esencial con un poco de solvente dentro de un tubo de
ensayo para evaporar en bao mara. Se debe procurar que no se
proyecte, ya que el ter de petrleo tiene un punto de ebullicin muy
bajo. La proyeccin de la mezcla nos dara como consecuencia una
prdida parcial o total de nuestro aceite.
Elaboracin del perfume.
1. Para deodorizar el alcohol, se prepara una solucin de
permanganato de potasio al 0.34% en etanol con una pureza del
96 %. Se deja reposar por una semana. Se extrae el alcohol
procurando no revolver con el decantado.
2. Colocar en el matraz aforado de 50 ml 0.22 g de propilenglicol y
0.55g de fijador.
3. Agregar aproximadamente 25ml de alcohol deodorizado.
4. Agregar unas gotas de los aceites esenciales y hacer una propia
reformulacin. Puedes utilizar todos los aceites esenciales que
desees, siempre y cuando no tengan un olor desagradable.
5. Aforar con el alcohol deodorizado y verter en un frasco mbar.
6. Dejar reposar por una semana.
7. Pasada esta, enfriar por una hora.
8. Envasar y etiquetar el perfume.
V. RESULTADOS
Reportar la reformulacin utilizada.
Anotar observaciones.
37
Laboratorio de Bioqumica
Vegetal
CLAVE
753
Prerequisito
742
V.1. Clculos
VI. DISCUSIN
VII. CONCLUSIONES
VIII. BIBLIOGRAFIA
Norma oficial Mexicana NOM-141-SSA1-1995, Bienes y Servicios. Etiquetado para
productos de perfumera y belleza preenvasados.
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-039-SSA1-1993, BIENES Y SERVICIOS.
Productos de perfumera y belleza. Determinacin de los ndices de irritacin
ocular, primaria drmica y sensibilizacin.
QUIMICA ORGNICA, Morrison Robert Thornton, Boyd Robert Neilson, Pearson
Education, 1998, USA.
38
Laboratorio de Bioqumica
Vegetal
CLAVE
753
Prerequisito
742
Nombre de la prctica:
(Adicional) Biopolimeros
Realiz:
Esp. en N.V. Laura Luna M.
Fecha:
Prctica
7
Pginas
7
Revis:
Autoriz:
Dr. Juan Ramiro Pacheco A.
Fecha:
Fecha:
Contenido
Pgina
I. INTRODUCCIN
40
41
III. OBJETIVO
41
IV. METODOLOGIA
42
42
43
43
43
IV. 5. Procedimiento.
43
44
V. RESULTADOS.
Pginas de la
39-45
44
V.1 Clculos
44
VI. DISCUSION.
45
VII. CONCLUSIONES.
45
VIII. BIBLIOGRAFIA
45
39
Laboratorio de Bioqumica
Vegetal
CLAVE
753
Prerequisito
742
I. INTRODUCCION.
Los polmetros sintticos fueron inventados hace aproximadamente 60 aos y
desde entonces se han hecho numerosos progresos en el campo de sus
aplicaciones.
Una de sus caracteristicas es su durabilidad lo cual constituye una desventaja
debido a su persistencia en el medio durante muchos aos, ocupando espacio en
los rellenos sanitarios y causando dao al ambiente por la emisin de gases
cuando se incineran sin los cuidados necesarios. Las investigaciones basadas en
almidones comienzan desde 1970. Leo Hendrik Baekeland inventa plstic o
sinttico en 1900.
La mayora de los polmeros sintticos se producen a partir de compuestos
petroqumicos y sus residuos permanecen en el medio ambiente produciendo un
alto grado de contaminacin y potenciales daos en la vida silvestre. El reciclaje
de los plsticos convencionales es una forma de reducir el problema pero muchos
empaques no pueden reciclarse fcilmente debido a que estn contaminados con
alimentos y tintas, as que es necesario limpiarlos previamente lo cual resulta
costoso.
La goma de ltex est formada por un polmero de cis-1,4-poliisopreno, su peso
molecular oscila entre 200 y 600 kDa y tiene una variacin clonar. El contenido en
goma del ltex puede variar entre 25 y 45 %, dependiendo de factores como la
variedad del rbol, estacin, condiciones ambientales, intensidad de la
explotacin, etc. Este polmero de metil-butadieno o isopreno se puede encontrar
en dos formas isomricas distintas, la forma cis, que constituye el caucho de H.
brasiliensis, mientras que la forma trans se encuentra en la gutapercha (Gutta
percha) y la balata, los cuales tienen menos utilidad y propiedades distintas. Las
cadenas de polmeros, que estn desordenadas, aunque no totalmente, al
someterse a una accin exterior se reordenan, tendiendo a situarse paralelamente
unas a otras, provocando un frotamiento intenso (calor) y una mayor atraccin
intermolecular (fuerzas de Van der Waals), lo cual aumenta la resistencia a la
deformacin con el esfuerzo.
Estructura qumica del ltex natural.
40
Laboratorio de Bioqumica
Vegetal
CLAVE
753
Prerequisito
742
41
Laboratorio de Bioqumica
Vegetal
CLAVE
753
Prerequisito
742
Cantidad
4
2
1
2
1
Cantidad
1
2
1
1
1
5
Centrifuga
Plato caliente
Cantidad
2.6 g
2.5 ml
LTEX
Reactivo
Formaldehdo
Sulfato sdico
Acido frmico
Cantidad
2.7ml
0.1 g
5 ml
42
Laboratorio de Bioqumica
Vegetal
CLAVE
Prerequisito
753
742
43
Laboratorio de Bioqumica
Vegetal
CLAVE
Prerequisito
753
742
Caractersticas
LTEX
a. Por centrifugacin:
Tubo
1
2
Caractersticas
b. Por precipitacin:
Tubo
1 (2 ml acido frmico)
2 (3 ml de acido frmico)
Caractersticas
V.1. Clculos
N/A
44
Laboratorio de Bioqumica
Vegetal
CLAVE
Prerequisito
753
742
VI. DISCUSIN
VII. CONCLUSIONES
VIII. BIBLIOGRAFIA
Davies D. D.; Bioqumica Vegetal; Ediciones Omega S.A., Casanova 220,
Barcelona 1969.
http://bibliotecadigital.ilce.edu.mx/sites/ciencia/volumen2/ciencia3
ASTM D 638-93 (1993). Standard Test Methods for Tensile Properties of Plastic
(Metric) 1. Standard Test Methods for Tensile Propierties of Plastics. American
Society for Teasting and Material: Philadelphia, Pa. 19103.
A.G. Pedrosa; D.S. Rosa, Carbohydrate Polymer. 2005, 59, 1-9.
45