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Aislamiento de Bacterias de

Salinas

Karen Cordova
988188043
Karencordova@hotmail.it

Hay algn ser capaz de vivir en


el mar Muerto?
280g por litro de agua

microbios amantes de la sal

Las Salinas marinas


Son ambientes de transicion, agua de
mar estancadas, que se evaporan lentamente
por la accion del sol

Salinas de Tarquinia, Italia

Color rojo de las lagunas saladas

lago hillier australia

Salina de Huacho,Peru

A medida que la salinidad se aproxima a la concentracion de sales que permitan el


crecimiento de microorganismos extremos, las aguas se vuelven de color rojizo,
debido al aparecimiento masivo de arqueas halofilas (la coloracion rojiza
proviene de los carotenoides y otros pigmentos.

Bacterias de las Salinas


Son bacterias capaces de vivir en ambientes
salinos, ofrecen una multitud de
aplicaciones en varios campos de la
biotecnologia.
-tipos de bacterias salinas
-Halotolerantes (5g/l)
- Halofilos (extremos > 200g/l, debiles, 5 g/l
moderados 100gl <x>200g/l)
Halobacterium, un
arquea halofilo que
habita en las aguas del
mas muerto.

Clasificacin
A los microorganismos que soportan
condiciones extremas, ya sea de
temperatura, de presin o de salinidad se
les suele llamar extremfilos.
gneros microbios salinas como
Halomonas, Volcaniella, Halovibrio

Bacterias cuadradas

2 x 2 micras

Haloarcula quadrata. da Kessel & Cohn, 1982).


stas bacterias fueron observadas por primera vez por Walby en el 1980.
En el 2004 cuando se identifico una sepa denominada HBSQ001 propuso el
nombe Haloquadratum walsbyui (oren,1999 ;Walsby,2005)

arquea de Walsby
Se dise un medio de cultivo que contena cloruro sdico y
cloruro magnsico muy concentrado, tal y como ocurre en los
cristalizadores.
A ese medio se le aadieron nutrientes para que el
microorganismo pudiera crecer. Pero esos nutrientes deban de
estar presentes en muy baja concentracin, porque de lo
contrario comenzaban a crecer otro tipo de microorganismos
que, al modo de las malas hierbas, impedan el crecimiento de
la Bacteria de Walsby.
En el fondo, el proceso de cultivar un microorganismo en el
laboratorio es muy parecido al de intentar cultivar una planta
silvestre en un invernadero. Un largo proceso de ensayo y error
hasta que uno encuentra las condiciones ideales en las que ese
ser vivo crece.

para qu podran ser tiles estos


microorganismos?
Las bacterias halofilas moderadas han
demostrado ser un grupo de extremofilos
con un gran potencial biotecnologico,
Producen: enzimas, biopolimeros o
solutos compatibles
. presentan propriedades fisiologicas que
facilitan su explotacion comercial.

Enzimas
Varias Hidrolasas
(amilasas,proteasas,nucleasas,
etc)
Nucleasa H producida por
micrococcus Varians.
Amilasa producida por halomonas
meridiana

micrococcus varians

Polmeros
De gran importancia en la industria petrolera.
Gracias a sus propiedades surfactantes y emulsionantes pueden
aumentar la eficacia de los procesos de extraccin de crudo del
subsuelo, incrementando la viscosidad del agua que se inyecta
alrededor de las bolsas, disminuyendo as su tensin superficial.
Las bolsas de petrleo suelen presentar una elevada salinidad, lo
que hace especialmente interesante la utilizacin directa de
bacterias halfilas moderadas productoras de biopolmeros.
H. Eurihalina produce Exopolisacarido,util en proceso de
biorremediacion o en la industria petrolera.

Solutos compatibles
Las bacterias halofilas moderadas acumulan en su citoplasma
determinados compuestos organicos de bajo peso molecular,
que no interfieren con el metabolismo celular solutos compatibles.
Costituyen la base fundamental de la tolerancia a la sal de estos
microorganismos.
Compuestos osmoprotectores.
Ectoina, hidroxiectoina _ efecto protector sobre las enzimas
labiles como la lactato dehidrogenasa y la fructoquinasa.
Cepas de marinococcus
Cepa de H.elongata (bacterial milking)

Bacterial milking
Consiste en someter a las bacterias a cambios
bruscos en la salinidad del medio de cultivo.
Con un primer shock hiperosmotico se
induce la acumulacion citoplasmatica de los
s.c, porsteriormente se elimina la sal del
medio, de manera que la bacteria expulsa el
contenido citoplasmatico, con los solutos
compatibles para compensar el shock
hipoosmotico.

Biodegradacin de residuos
Degradacion de los residuos toxicos, las bacterias halofilas constituyen una importante
alternativa a los tratamientos microbiologicos convencionales en aquellos casos en los
que estos sean ineficaces, como son los procesos industriales que generan aguas
residuales hipersalinas. Esto sucede, por ejemplo, en la produccion de diversas
sustancias quimicas como los pesticidas, determinados productos farmaceuticos y herbicidas,
y los
procesos de extraccion de petroleo y gas.
Oren y Col demostraron la degradacion de varios compuestos aromaticos nitro-sustituidos a
concentraciones salinas de 13 a 14 ppm por las bacterias Halanaerobium praevalens y Orenia
marismortui.
En el 1992, Woolard e Irvine describieron la utilizacion de una biopelicula de bacterias halofilas
moderadas aisladas del gran lago saldo, Utah (EE.UU) e identificada provisionalmente dentro
del genero
Alteromonas , es capaz de degradar varios compuestos toxicos organofosforados.
Posteriormente se aislaron otras cinco de los mas importantes contaminantes industriales:
Cadmio,
cobre, cinc,cromo y mercurio.
Estas cepas, resistentes a metales pesados, podrian emplearse en procesos de
destoxificacion o como bioindicadores de ambientes hipersalinos contamidados

Alimentos Fermentados
Elaboracion de la salsa de soya
intervienen determinadas especies del
genero Tetragenococcus, los granos de
trigo y soya se resuspenden en agua con
NaCl al 19ppm y se dejan durante 9
meses a la oscuridad. T.halophilus se
emplea como indicador de fermentacion,
pudiendo alcanzar una densidad de (diez a
la octava) UFC/ml en la salsa de soya,
que contiene una concentracion
aprocimadamente 3M de NaCl

Tetragenococcus,

Otros usos potenciales


Aun estan siendo objeto de estudio:
---La eliminacin de fosfatos de ambientes hipersalinos.
---procesamiento de residuos hipersalinos provenientes de la industria
del aceite de oliva
---produccin de enzimas de interes en biologa molecular,
antibioticos, o carotenoides de inters para la industria
alimentaria,
----en la recuperacin de los suelos ridos o semiaridos, caracterizados
por condiciones de estrs osmtico (por salinidad,desecacin o frio)
mediante la obtencin de plantas transgenicas capaces de tolerar
altas concentraciones de sal, gracias a los genes implicados en la
osmotolerancia de las bacterias halofilas moderadas. (Transferencia
de los genes de sintesis de ectoina de H elongata a cultivos de
tejidos de Nicotiana tabacum que presentaron una significativa
mayor tolerancia al estres osmotico)

Metodo de filtracion

Terreno de cultivo
Frmula (en gramos por
Instrucciones
litro)

Extracto de
levadura
Triptena
Glucosa
Agar

Suspender 23,5 g en un
litro de agua destilada.
5.0 Calentar a ebullicin con
1.0 agitacin constante.
Distribuir. Esterilizar
15.0 durante 15 minutos a
121C.
pH final: 7.0 0.2
2.5

Preparacin del terreno de coltura

PCA , NaCl, agua destilada

Sal

Tenemos que tener en


consideracin

Salinidad
Temperatura
pH
Oxigeno disuelto
Nutrientes

mar

35g/l

40g/l
80g/l
200g/l

400g/l

cristalizador

Aislamiento de bacterias halofilas

Placas en crecimiento

Gracias por su atencin

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