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EFEITOS DO LASER E DA MICROCORRENTE NA BIOMUDULAO

TECIDUAL

lvaro Carlos Moraes Rodrigues , UNIVAP


Grda Colho e Silva NOVAFAPI, UNIVAP
Renata Amadei Nicolau UNIVAP
Renato Amaro Zngaro UNIVAP

INTRODUO
O tecido sseo possui grande capacidade de reparao, exibe um potencial de
regenerao surpreendente capaz de restaurar perfeitamente sua estrutura original e suas
propriedades mecnicas (SCHENK, 1996). A remodelao deste tecido e sua estimulao
so motivo de diversos estudos nas ltimas dcadas, devido ao interesse de diversos autores
em estabelecer seu comportamento frente a vrios fatores, tanto externos locais como
sistmicos, apoiados no conhecimento das etapas do processo de reparo e sua cronologia
(HECKAMAN et al, 1991). O uso de radiao laser e microcorrente, para a melhoria da
qualidade leses sseas, tem estimulado vrios estudos, pois tais recursos tem se mostrado
eficazes em vrias reas da medicina moderna.
O estmulo do incremento sseo tm sido obtido atravs de vrios meios entre eles:
uso do ultra-som pulsado com baixa intensidade; emprego de campos eletromagnticos
(CANE; BOTTI; SOANA, 1993); e mais recentemente por terapia com laser de baixa
potncia (TLBP) (NICOLAU; ZNGARO; PACHECO, 1998; KUCEROV et al., 2000).
O interesse de estudos acerca da otimizao do processo de reparao ssea se deve
principalmente a possibilidade de uma maior rapidez na reparao da leso. (HECKAMAN
et al, 1991).
De acordo com Fernandes (2004), a terapia com radiao eletromagntica pode ser
aplicada em diversas reas da sade, podendo gerar alteraes fotoqumicas, fototrmicas,
fotomecnicas, fotoeltricas e moduladora no tecido biolgico irradiado. Segundo Marino
et al. (2003), a magnitude do efeito biomodulatrio ou fotobiorregulador atribudo estas
terapias ao interagir com os tecidos podem ter influncia sobre as funes celulares
estimulando ou inibindo atividades bioqumicas ou biofsicas, dependendo de fatores como:
comprimento de onda, freqncia, dose, potncia, intensidade, bem como do intervalo,
tempo, nmero de aplicao, rea, e tipo de leso. Apesar da tcnica de irradiao laser
possuir resultados significantes sua associao com TMC pode promover acelerao sobre
o processo de reparao ssea sem alterar a micro arquitetura do tecido.
METODOLOGIA
A amostra foi composta de 40 ratos machos da raa Wistar. A amostra foi dividida
ao acaso em quatro grupos. Cada qual foi composto por 10 ratos. Realizou-se uma
perfurao padronizada sobre a regio do fmur da perna direita de cortical a cortical com

espessura de 1mm do tipo loja ssea. As leses foram feitas com broca cirrgica para osso,
utilizando-se equipamento de baixa rotao.
As aplicaes da TLBP e da TMC foram iniciadas dez horas aps o procedimento
cirrgico, realizadas com um intervalo de tempo de 48 horas entre cada aplicao sempre
no mesmo horrio. Os animais foram sacrificados em 8 e 16 dias ps-cirurgia.
O grupo I (GI 4) e (GI 8), controle, placebo.
O grupo II (GII 4) e (GII 8), TLBP com o aparelho ligado e TMC no modo placebo.
O grupo III (GIII 4) e (GIII 8), TMC com o aparelho ligado e TLBP no modo placebo.
O grupo IV (GIV 4) e (GIV 8), o quais receberam TLBP associado a TMC, sendo para cada
subgrupo, quatro e oito aplicaes respectivamente.
O protocolo utilizado para irradiao Laser foi, dose empregada de 10 J/cm2 no
modo pontual com exposio de 10 segundos, contnuo, com comprimento de onda de 670
nm (luz visvel), potncia de 30 mW, rea do feixe de 0,05 cm2.
Para a TMC, o protocolo foi intensidade de 100 A, durantes 10 minutos, com freqncia
(F) de 100 Hz, durao do pulso (T) 300 s e modo da corrente alternada com forma de
onda Exponencial. Foram utilizados eletrodos auto-adesivos colocados de forma
contraplanar.
Os resultados histomorfomtricos foram comparados e expressos como mdia
desvio padro e erro padro. Quando o conjunto de dados para a comparao dos grupos
experimentais atendia aos requisitos para a aplicao da estatstica paramtrica, utilizou-se
o teste t de Student. Para a comparao de diferentes momentos, utilizou-se a anlise de
varincia (ANOVA), seguida de teste de Bonferroni. Foram consideradas as diferenas
associadas probabilidade p<0,01. O tratamento estatstico foi operacionalizado pelo
programa GraphPad InStat, verso 3.02.
Para a quantificao das reas representativas do total da rea da superfcie ssea e
rea da superfcie ssea no local da leso, foram digitalizados duas lminas de cada animal,
num total de duas amostras por lminas, analisadas em sua totalidade. Em seguida para a
anlise da rea no stio da leso foram selecionados dois campos de cada imagem do local
da leso a serem ampliadas e digitalizadas para posterior anlise. As imagens digitalizadas
atravs do programa Leica Qwin, foram padronizadas quanto intensidade de luz do
microscpio e altura do condensador.

Figura 1: Imagens digitalizada durante a


mensurao e clculo da rea total. 100x.

Figura 2: Imagens digitalizada ao final


da mensurao e clculo da rea do local
da leso 400x.
As radiografias foram laudadas por um mdico radiologista com anlise cega. Foi
utilizanda como critrio para anlise radiogrfica, uma tabela modificada citada por Cook
et al (1997).
Tabela 1 Escore para avaliao Radiogrfica

Escore
0
1 - 1,5
2 - 2,5
3 - 3,5
4 - 4,5
5

Caracterstica
Nenhuma consolidao ssea.
Consolidao ssea pobre.
Consolidao ssea leve.
Consolidao ssea moderada.
Consolidao ssea acentuada.
Ausncia de sinais radiolgicos de fratura.

RESULTADOS
Os resultados evidenciaram uma melhora no reparo sseo nos grupos experimentais.
Sendo que, em 8 dias po (quatro aplicaes) o grupo tratado com TLBP + TMC (GIV 4)
apresentou diferena estatisticamente significativa(p<0,05) na rea da superfcie osteoide
no local da leso e tambm melhor aspecto de consolidao radiogrfica do reparo sseo
em relao ao grupo controle. J no 16 dia, os grupos tratados com TLBP + TMC e
somente TMC tiveram o melhor resultado do ponto de vista radiolgico quando
comparados com o grupo controle e com os grupo tratado somente com Laser. Esses
resultados indicaram que houve melhor reparo sseo nos grupos tratados quando
comparados com o grupo
Resultados da anlise histomorfomtrica.
Os dados obtidos da anlise histomorfomtrica, no que se refere rea ssea total e
rea ssea no local da leso, esto resumidos nas tabelas 2 e 3, respectivamente. Os valores
esto expressos em mdia erro padro.
No foi observada diferena estatstica entre o grupo controle e os grupos tratados com
laser e/ou microcorrente, em ambos os perodos avaliados, quanto rea ssea total
avaliada (tabela 2).
Observou-se diferena estatstica (p<0,01) entre o grupo controle (GI) e o GIV, em
8 dias ps-operatrios, no local de reparo sseo.. Contudo, no foram identificadas
diferenas estatsticas (p>0,05) entre o GI e os grupos tratados com laser e/ou
microcorrente, aos 16 dias ps-operatrios, no local de reparo sseo (tabela 3).
Tabela 2. rea total de tecido sseo em 8 e 16 dias respectivamente, expressos em m2
GRUPOS

rea ssea total


(mdia erro) 8 dias
261081 20405,63

GI
Controle
G II
242195,6 19874,24
Laser
G III
281545,4 17169,3
microcorrente
G IV
267043,9 42693,63
Laser/microcorrente
Os valores esto expressos em mdia erro padro ** p< 0,01

rea ssea total


(mdia erro) 16 dias
265468,4 12363,4
162157,3 8821,253
249584,6 16442,23
305885,4 88483,93

Tabela 3. Quantidade de tecido sseo no local da leso em 8 e 16 dias respectivamente,

expressos em m2
GRUPOS

rea ssea no local da leso


(mdia erro) 8 dias

GI
1429362 96068,49
Controle
G II
1904313 54709,61
Laser
G III
1678292 74455,8
microcorrente
G IV
2129887 139215,3**
Laser/microcorrente
** p< 0,01 na comparao entre grupo controle vs. Grupos tratados.

rea ssea no local da leso


(mdia erro) 16 dias
2069669 142051,2
2091799 155466
2111205 92342,29
2004166 101305,6

DISCUSSO
No presente experimento, optou-se pela confeco de uma loja ssea de cortical a
cortical para evitar-se erros na profundidade de perfurao. Segundo Parfitt et al. (1987), o
local composto principalmente de tecido sseo cortical, metabolicamente menos ativo que
o tecido sseo trabecular, portanto menos susceptvel a ao de estmulos externos,
contudo, o organismo repararia o defeito sseo sem a necessidade de enxerto ou fixao.
Assim, verificamos o comportamento da reparao deste tipo de defeito, quando submetido
ao tratamento com TLBP e TMC.
Foi utilizado neste estudo o laser GaAlAs, emitindo radiao em 670 nm. Sua
utilizao mostrou-se simples, segura e eficaz pelo fato de possuir caractersticas capazes
de promover efeitos biolgicos(estimula a ao mitoncondrial) sem dano tecidual
(KOLARI, 1985), obviamente observando a dosimetria adequada. Foi utilizada tambm a
microcorrente (100 A), que conforme Craft (1998), capaz de modificar a permeabilidade
da membrana celular passagem de ons, podendo modificar a dinmica e assim promover
o fluxo normal de correntes endgenas. Outro fato que nos levou a eleg-la como
modalidade teraputica foi que na literatura existem poucos estudos de seus efeitos no
reparo sseo.
Segundo Thompsom et al. (2000), o reparo sseo se inicia logo aps a leso, e a
hemorragia causa um hematoma de 6 a 8 horas ps-leso. Movem-se para o local
leuccitos, macrfagos e mastcitos que liberam fatores de crescimento que estimulam o
reparo, sendo que esta atividade se completa em torno de 4 dias. Em 48 horas forma-se o
colar de tecido sseo tecido osteide ao redor do local da leso, por intensa atividade
mittica. Por isso, as bordas da leso apresentam-se arredondadas e com esclerose mais
evidentes na imagem radiogrfica nos grupos tratados do presente experimento
(GARTNER; HIATT, 2003; KITCHEN, 2001 2003). Os resultados obtidos neste estudo,
evidenciam a importncia da aplicao das terapias testadas logo aps a induo da leso,
podendo-se inferir que a associao da TLBP com a TMC otimizam o processo de reparo
sseo, na fase inicial, aos 8 dias PO.
Os resultados obtidos no presente estudo demonstraram atravs de anlise
radiogrfica qualitativa, que a densidade ptica da zona de reparao ssea nos grupos
tratados foi sempre mais expressiva que no grupo controle, em todos os perodos,
demonstrando a estimulao da atividade de sntese ssea no tecido. Outro resultado que
pode ser observado foi que no grupo tratado com TLBP + TMC (8 dias), o efeito

biomodulador das terapias foi superior em ralao aos demais grupos para este mesmo
perodo. Sob anlise radiolgica, percebeu-se que a TMC mostrou resultados semelhantes
ao grupo tratado com TLBP + TMC aos 16 dias PO, demonstrando que conforme o
predomnio do tipo de clula nas diferentes fases do reparo tecidual, a variabilidade
bioeltrica nos diferentes estgios da leso influencia na resposta tecidual, alterando seu
metabolismo (UDUPA; PRASAD 1963).
Alguns estudos realizados utilizando anlise radiogrfica da consolidao ssea
demonstraram que a densidade ptica pode ser aumentada com a TLBP, sendo possvel
analisar e relatar clinicamente o aumento da reparao ssea nos grupos tratados em
comparao com o controle (GLINKOWSKY e ROWTNSKY, 1995; MAREI, 1997;
NAGASAWA et al., 1991; NICOLAU, ZNGARO, PACHECO 1998), sendo que os
resultados do presente estudo corroboram os resultados desses autores.
No presente estudo, os achados radiogrficos evidenciaram melhor reparo sseo nos
grupos experimentais comparados ao grupo controle, tendo mostrado melhor resultado para
o grupo tratado com TLBP + TMC nos estgios iniciais (primeira semana). Este fato foi
confirmado na anlise histomorfomtrica, aos 8 dias PO no grupo tratado com TLBP +
TMC, que apresentou melhor resultado, com diferena estatisticamente significativa (p<
0,05) na osteognese comparada com o grupo controle. Para Nicolau; Zngaro; Pacheco
(1998) em 30 dias no houve diferena entre animais controles e irradiados, o mesmo
acontecendo no estudo de Cafalli et al. (1993).
Na anlise histomorfomtrica, os grupos tratados em 16 dias PO, no apresentaram
diferena estatisticamente significativa entre si e nem quando comparados ao grupo
controle, demonstrando que em organismos em homeostasia, a estimulao do processo de
reparo tende igualdade com tecido no tratados de forma mais tardia. Este fato positivo,
pois um aumento na densidade ssea, acima de condies normais, poderia traduzir-se em
friabilidade do tecido, com conseqente reduo da capacidade plstica do mesmo. Em
termos de reabilitao a consolidao mais acelerada em fases precoces, poderia beneficiar
o processo de osteointegrao de peas metlicas empregadas em reas de leso.
CONCLUSO
Atravs da anlise radiogrfica concluiu-se que estimulao do processo de
reparao ssea nos perodos avaliados tanto com TLBP quanto com TMC, contudo obtmse melhores resultados com a associao de ambas as terapias, o que notrio na
histomorfometria ssea, em 8 dias PO, no local da leso.
Palavras-chave: Laser de baixa potncia; Tecido sseo; Microcorrente; Reparao ssea;
Anlise Histolgica e Radiolgica..
REFERNCIAS
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* Professora do Curso de Fisioterapia da NOVAFAPI, mestranda do curso de psgraduao em Engenharia Biomdica da UNIVAP gerdasilva@yahoo.com
**Mestrando do curso de ps-graduao em Engenharia Biomdica da UNIVAP
acm72rodrigues@yahoo.com.br
*** Professora Doutora da UNIVAP rani@univap.br
****Professor Doutor da UNIVAP zangaro@univap.br

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