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Calor
Todos los microorganismos son susceptibles, en distinto grado, a la
accin del calor. El calor provoca desnaturalizacin de protenas,
fusin y desorganizacin de las membranas y/o procesos oxidativos
irreversibles en los microorganismos.
La efectividad del calor como mtodo de esterilizacin depende de:
Temperatura
Tiempo de exposicin
Radiaciones
Su accin depende de:
Tipo de radiacin
Tiempo de exposicin
Dosis
Ionizantes
Producen iones y radicales libres que alteran las bases de los cidos
nucleicos, estructuras proteicas y lipdicas, y componentes esenciales
para la viabilidad de los microorganismos.
Tienen gran penetrabilidad y se las utiliza para esterilizar materiales
termolbiles (termosensibles) como jeringas descartables, sondas, etc.
Se utilizan a escala industrial por sus costos.
No se utilizan para medios de cultivo o soluciones proteicas porque
producen alteraciones de los componentes.
Ultravioletas
Afectan a las molculas de DNA de los microorganismos debido a que
forman dmeros de pirimidinas adyacentes que inducen errores en la
duplicacin y por lo tanto la prdida de la viabilidad de las clulas.
Son escasamente penetrantes y se utilizan para superficies.
Antispticos
Alcoholes
Lesionan la membrana celular de los microorganismos y
desnaturalizan protenas celulares. Desorganizan la estructura
fosfolipdica.
No destruyen esporas y tienen una accin germicida lenta. Los
alcoholes de cadena corta tienen un efecto nocivo mayor que los de
cadena larga.
Se utilizan en concentraciones del 50 al 70%. Los ms utilizados son
el etanol e isoproplico.
Perxido de Hidrgeno
Es un antisptico dbil, con capacidad oxidante y formadora de
radicales libres.
Actualmente, el perxido de hidrgeno gaseoso se est utilizando
como desinfectante de superficies o descontaminante de gabinetes
biolgicos debido a que no posee las propiedades txicas y
cancerigenas del xido de etileno y formaldehdo.
Oxido de Etileno
Es un agente alquilante que se une a compuestos con hidrgenos
lbiles como los que tienen grupos carboxilos, amino, sulfhidrilos,
hidroxilos, etc.
Es utilizado en la esterilizacin gaseosa, generalmente en la industria
farmacutica. Sirve para esterilizar material termosensibles como el
Calor Hmedo
El calor hmedo produce desnaturalizacin y coagulacin de
protenas. Estos efectos se deben principalmente a dos razones:
El agua es una especie qumica muy reactiva y muchas
estructuras biolgicas (DNA, RNA, protenas, etc) son
producidas por reacciones que eliminan agua. Por lo tanto,
reacciones inversas podran daar a la clula a causa de la
produccin de productos txicos. Adems, las estructuras
secundarias y terciarias de las protenas se estabilizan mediante
uniones puente de hidrgeno intramoleculares que pueden ser
reemplazadas y rotos por el agua a altas temperaturas.
El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor
mucho ms elevado que el aire. Por lo que, los materiales
hmedos conducen el calor mucho ms rpidamente que los
materiales secos debido a la energa liberada durante la
condensacin.
Los parmetros crticos del proceso son temperatura, tiempo y vapor
saturado, siendo la temperatura de referencia para el proceso 121 C.
La seleccin del tipo de ciclo de esterilizacin a emplear depende de la
configuracin del producto y de la capacidad del mismo y del empaque
para soportar las temperaturas y la presin y el calor transferidos.
El AIRE CALIENTE es uno de los mtodos de esterilizacin por calor
seco ms utilizados. Este proceso se lleva a cabo en HORNOS
especiales que permiten la distribucin uniforme del calor en su interior
Esterilizacin en autoclave
Una esterilizacin segura con calor hmedo requiere temperaturas
mayores a las del punto de ebullicin del agua. Estas temperaturas
son comnmente alcanzadas por el vapor bajo presiones elevadas en
un autoclave. Cuando la presin de un gas aumenta, la temperatura
del gas aumenta proporcionalmente. Como el vapor de agua es un
gas, aumentar su presin en un sistema cerrado aumenta su
temperatura. Como las molculas de agua estn ms energizadas, su
penetracin aumenta sustancialmente. Ocupar el autoclave es el
mtodo preferido para la esterilizacin, a menos que el material que se
necesite esterilizar pueda ser daado por el calor o la humedad. Un
ejemplo de esto son algunos plstico que se pueden derretir o algunos
objetos filosos los cuales pierden su filo.
La temperatura alcanzada en el autoclave son 121.5C y una presin
de 15(Lb/in2), por lo tanto el tiempo requerido para la destruccin de
la mayora de las bacterias resistentes es aproximadamente 15 min.
Para objetos ms densos, sern requeridos ms de 30 minutos, sin
olvidar que las condiciones deben de ser controladas cuidadosamente
para asegurar la correcta esterilizacin.
La mayor ventaja que posee este mtodo de esterilizacin es que el
tiempo de exposicin de los materiales a esterilizar es ms corto que
el calor seco.
Ventajas:
Desventajas:
No permite esterilizar soluciones que formen emulsiones con el
agua
Es corrosivo sobre ciertos instrumentos metlicos
Calor Seco
El calor seco produce desecacin de la clula, efectos txicos por
niveles elevados de electrolitos, procesos oxidativos y fusin de
membranas. Estos efectos se deben a la transferencia de calor
desde los materiales a los microorganismos que estn en
contacto con stos. El aire es mal conductor del calor, y el aire
caliente penetra ms lentamente que el vapor de agua en
materiales porosos. La accin destructiva del calor sobre
protenas y lpidos requiere mayor temperatura cuando el material
est seco o la actividad de agua del medio es baja. Esto se debe
a que las protenas se estabilizan mediante uniones puente de
hidrgeno intramoleculares que son ms difciles de romper por el
calor seco.
La estufa de esterilizacin es el artefacto utilizado en los
laboratorios para esterilizar por calor seco. Se requiere mayor
temperatura y tiempo de exposicin que el autoclave. La
Flama directa
Uno de los mtodos ms simples es usar callos microbios
rpidamente. Se usa este mtodo muy comnmente en
laboratorio de microbiologa cuando se esterilizan las asas de
inoculacin.1 Para garantizar efectivamente la esterilizacin se
debe calentar el alambre hasta el rojo vivo. 1 Un principio similar es
usado en la incineracin, una forma efectiva deesterilizar y
eliminar los desechos contaminantes como ropa, bolsas y
desechables.1 La incineracin se ha utilizado desde hace mucho
tiempo para evitar que se propaguen las enfermedades ya que los
cuerpos se queman.
Ventajas:
Desventajas:
Manipulacin:
Desde que el material sale del esterilizador comienza la manipulacin
de los pro- ductos, y esta debe ser siempre la mnima necesaria. Es
importante tener en cuenta antes de tocar los envases que contengan
productos estriles:
Dejarlos enfriar antes de su retirada de los esterilizadores para evitar
condensados.
Las manos deben estar limpias y secas.
Si antes se realiz otra actividad, realizar lavado de manos
exhaustivo.
Quitarse los guantes utilizados para otra actividad y lavarse las
manos.
Transportarse en carros, si el volumen lo requiere, y nunca apoyados a
la ropa de trabajo.
La ropa de trabajo debe estar limpia.
Transporte
Nunca se deben llevar los materiales directamente en la mano a las
estanteras. Para su transporte se deben utilizar carros de fcil
limpieza, de superficie lisa y preferiblemente de polmeros plsticos
termorresistentes. Este tipo de carros acusan menos diferencia de
temperatura con los materiales que los carros de acero inoxidable.En
funcin del recorrido que tenga que hacerse con los carros sepodrn
utilizar:
Carros abiertos
Carros protegidos (con funda protectora)
Carros cerrados
En cualquiera de los casos, los carros se llevarn directamente desde
la CEa la unidad de destino.
Almacenado
Aunque el almacenamiento de los productos estriles se realice en
diferentes zonas del centro de salud, las condiciones debern ser
siempre las mismas.
APLICACIONES:
En
investigacin
de
laboratorios
cientficos
es
empleado