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6 Seminrio de Iniciao Cientfica

Goinia, de 29 de agosto a 01 de setembro de 2012

VALIDAO DE METODOLOGIA PARA ANLISE E


DETERMINAO DE FSFORO EM GUAS NATURAIS

Resumo: O fsforo encontrado na gua na forma de fosfato, por ser um dos principais nutrientes
para o desenvolvimento de microrganismos, sua disponibilidade um dos responsveis pela
eutrofizao de corpos hdricos. Este estudo objetivou a validao de uma metodologia para anlise e
quantificao do fsforo presente em guas naturais, a metodologia escolhida foi o mtodo
colorimtrico do cido molibdovanadofosfrico, um dos mtodos padro disponvel no Standard
Methods for the Examination of Water and Wastewater. O mtodo consiste na formao de um
complexo colorido entre o fsforo, o molibdnio e o vandio, a intensidade da cor diretamente
proporcional concentrao de fsforo da soluo, as solues foram analisadas em um
espectrofotmetro UV-Vis, FENTO 800 XI. Para a validao do mtodo foi utilizado o Guia para
Qualidade em Qumica Analtica, da ANVISA. A validao avaliou a influncia que a concentrao
dos reagentes para o desenvolvimento de cor na leitura, a reprodutibilidade do mtodo, a linearidade
em grandes e pequenas variaes na concentrao do padro de fsforo na elaborao da curva de
calibrao. A partir dos dados obtidos, foi possvel confirmar que o mtodo adequado para a
quantificao do fosfato total em corpos hdricos. A identificao dos resduos qumicos gerados pela
metodologia validada foi considerada e um Procedimento Operacional Padro (POP) elaborado para
o tratamento do mesmo.

Palavras-chave: Fsforo em guas. Eutrofizao. Validao. Espectroscopia UVVis.


Introduo
O fsforo se apresenta nas guas naturais devido ao aporte por fontes
antropognicas, tais como os despejos domsticos, indstrias, presena de
detergentes fosfatados, excrementos animais e fertilizantes, este elemento
considerado um nutriente essencial no crescimento dos microrganismos sendo
responsvel pela estabilizao da matria orgnica, alm de indispensvel ao
crescimento de algas e plantas aquticas, podendo com isso, em condies
especficas, conduzir a fenmenos de eutrofizao em lagos, rios e represas (VON
SPERLING, 1996). A disponibilidade do fsforo na gua depende da interao
qualitativa e quantitativa entre os sedimentos e a gua, no espao e no tempo
(REYNOLDS & DAVIES, 2001). Segundo a Resoluo CONAMA 357/05, a
concentrao mxima de fsforo total permitida para Rios Classe II de 0,05 mg L-1,
em ambientes intermedirios, com tempo de residncia entre 2 e 40 dias, tributrios
diretos de ambientes lnticos. Existem diferentes metodologias para anlises de
fsforo em gua, dentre elas, algumas utilizam reagentes que precisam de
permisso do Exrcito Brasileiro devido a sua periculosidade, como o caso do
cido perclrico. A validao de uma metodologia se faz necessria para o
entendimento do mtodo, pois garante as caractersticas de desempenho e
demonstra que o mtodo adotado cientificamente coerente.
Objetivos
Este estudo teve como objetivo validar uma metodologia para a determinao
quantitativa de fsforo em amostras de guas naturais h ser realizada nos
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laboratrios de qumica do IFG. A escolha do mtodo a ser adotado prev que o


mesmo cause baixo impacto ambiental.
Metodologia
O estudo consistiu de vrias etapas, sendo a primeira uma anlise de acordo
com referncias da literatura na rea, avaliando-se a possibilidade de implantao
utilizando-se os recursos de reagentes e instrumentos, espectrofotmetro UV-Vis,
presentes nos laboratrios do IFG. A segunda etapa consistiu na avaliao e
otimizao da metodologia seguindo parmetros especificados para tal, de acordo
com o manual da ANVISA. Uma terceira etapa permitiu a avaliao do resduo
produzido durante os ensaios e consequente caracterizao do impacto ambiental
do mesmo.
Resultados e discusso
A escolha do mtodo que melhor se adaptou as condies existentes nos
laboratrios utilizou-se como critrios: a disponibilidade de vidrarias, equipamentos e
reagentes. A metodologia selecionada foi ento o mtodo do cido
molibdovanadofsforico, estabelecida pelo Standard Methods for the Examination of
Water and Wastewater (APHA, 1998).
Este mtodo consiste numa sequncia de reaes que geram como produto
principal um complexo entre o fsforo, na forma de fosfato, o molibdnio, na forma
de molibdato, e o vandio, na forma de vanadato. O complexo confere uma cor
amarela soluo, caracterstica do complexo, a intensidade da colorao
diretamente proporcional concentrao de fsforo, logo, com base nessas
informaes foi possvel quantificar o fsforo presente em uma amostra de gua
natural atravs de um espectrofotmetro UV-Vis, relacionando o valor de
absorbncia da leitura de uma amostra de gua natural e uma curva de calibrao
elaborada com solues padro de fsforo.
O mx= 400 nm para a leitura das amostras, foi definido de acordo com a
literatura (400-490 nm), observando-se o ponto de melhor reprodutibilidade.
A validao do mtodo requer que algumas verificaes sejam realizadas de
modo a garantir que as caractersticas de desempenho sejam entendidas, para um
mtodo cientificamente coerente, sob as condies nas quais ele deve ser aplicado.
O principio do mtodo adotado foi o seguinte: em uma soluo diluda de
ortofosfato, molibdato de amnio reage em condies cidas para formar o cido
molibdofosfrico.
Na
presena
de
vandio,

formado
o
cido
molibdovanadofosfrico amarelo. A intensidade da cor amarela proporcional
concentrao de fsforo.
A preparao das solues para desenvolvimento de cor e do estoque de
fsforo seguiu o seguinte desenvolvimento:
Soluo de molibdato de amnio 5%: pesou-se 5,0 g de (NH4)6Mo7O24.4H2O,
dissolveu-se em 50 mL de gua destilada quente, deixou-se em repouso por
vrias horas, filtrou-se, dilui-se o filtrado com gua destilada at a marca de
100 mL e a soluo foi estocada em frasco de polietileno.
Soluo de metavanadato de amnio 0,25%: pesou-se 0,250 g de NH4VO3,
dissolveu-se em 50 mL de gua destilada quente, deixou-se esfriar,
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adicionou-se 35 mL de HNO3 concentrado e dilui-se com gua destilada at a


marca de 100 mL.
Soluo de estoque de fsforo 100 mg L-1: pesou-se 0,0439 g de KH2PO4,
anidro. Transferiu-se quantitativamente para um balo volumtrico de 100 mL,
adicionou-se 0,3 mL de H2SO4 concentrado e diluiu-se com gua destilada
at a marca de calibrao, agitando constantemente.
A construo da curva de calibrao foi realizada a partir da transferncia de
alquotas da soluo estoque para bales volumtricos de 50 mL perfeitamente
limpos e secos. Adicionou-se em cada balo 1,0 mL de cada um dos reagentes para
desenvolvimento de cor, homogeneizou-se, aguardou-se 5 minutos e, completou-os
com gua destilada at o trao de aferio. Em seguida, faz-se as leituras de Abs
em um espectrofotmetro. A calibrao do aparelho foi feita utilizando como branco
uma soluo contendo 1,0 mL de cada um dos reagentes, menos o padro, em um
balo de 50 mL. As curvas de calibrao foram elaboradas relacionando a Abs em
funo da concentrao em mg L-1 .
A metodologia escolhida pode ser aplicada em guas naturais devido a sofrer
pouca interferncia, ou nenhuma, dos ons comumente presentes na mesma. Os
principais ons que podem gerar interferncia so: arseniato, fluoreto, sulfeto,
tiossulfatos, ou excesso de molibdatos. Uma grande parte dos ons metlicos s
causam interferncia caso sua concentrao esteja acima de 1000 mg L-1. A
interferncia dos ons Cl- ocorre em concentraes acima de 75 mg L-1 e dos ons
Fe2+ acima de 100 mg L-1.
As curvas padres foram elaborados com 5 e 7 pontos. Para o teste de
robustez foi feita uma alterao na proporo dos reagentes que desenvolvem a cor.
Foram utilizados na proporo de 1:2, molibdato de amnio e metavanadato de
amnio, respectivamente. Como possvel observar na Figura 1, no houve
influncia significativa no resultado.
O mtodo apresentou resposta linear, mesmo para pequenas variaes na
concentrao de fsforo (Grfico 2). As curvas padres foram elaborados com 5 e 7
pontos.

Figura 1: Curva de calibrao: robustez.

Figura 2: Teste de reprodutibilidade.

A avaliao da influncia dos reagentes foi realizada por meio da recuperao


de fsforo amostras de gua de abastecimento pblico, dopada com 600L de
soluo estoque. A percentagem de recuperao foi de 101,2%. Concluindo que h
uma pequena variao, para mais, entre o valor encontrado e o valor esperado.

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O teste de reprodutibilidade do mtodo foi atestado pelo tratamento estatstico


de trs anlises. Os resultados encontram-se na Tabela 1. A figura 2 apresenta os
resultados obtidos para Abs das solues analisadas.
Tabela 1 Teste de Reprodutibilidade

[PO43-]
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
0,8

Abs 1
0,039
0,057
0,077
0,094
0,115
0,132
0,149

ABS 2
0,0424
0,0629
0,0826
0,099
0,1192
0,1381
0,1559

ABS 3
0,038
0,055
0,069
0,088
0,105
0,122
0,137

0,0398
0,0583
0,0762
0,093667
0,113067
0,1307
0,1473

0,00001064
0,00003374
0,00009344
6,0667E-05
0,00010643
0,00013214
0,00018294

CV
CV x 100%
0,000267 0,026734
0,000579 0,057873
0,001226 0,122625
0,000648 0,064769
0,000941 0,094127
0,001011 0,101102
0,001242 0,124196

Concluses
Os resultados obtidos mostram que a metodologia escolhida adequada
finalidade a que se prope, permitindo a quantificao de fsforo em guas naturais.
Agradecimentos
Ao PIBIC/IFG.
Referncias
AMERICAN PUBLIC HEALTH ASSOCIATION. Standard Methods for the
Examination of Water and Wastewater. 20 ed. Washington: APHA, 1998.
Guia para Qualidade em Qumica Analtica: Uma Assistncia Habilitao. Sries
Temticas, ANVISA. Braslia, 2005.
RESOLUO CONAMA N 357, DE 17 DE MARO DE 2005. Disponvel em:
<http://www.mma.gov.br/port/conama/res/res05/res35705.pdf>, acesso em:
20/03/2011.
REYNOLDS, C. S.; DAVIES, P.S. Sources and bioavailability of phosphorus fractions in
freshwaters: a British perspective. Biology Review, v.76, p.27-64, 2001.
VON SPERLING, E. Introduo a Qualidade das guas e ao Tratamento de Esgotos. 2
ed. Belo Horizonte. Departamento de Engenharia Sanitria: UFMG, 1996.

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