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Biologa Aplicada

MICROORGANISMOS
Son considerados microbios o microorganismos, los seres vivos microscpicos consistentes
en una sola clula, es decir unicelulares, as como aquellos que forman agregados celulares
en los cuales todas las clulas son equivalentes (en los cuales no existe diferenciacin
celular).
Los microorganismos se hallan capacitados para acometer una extensa gama de
reacciones metablicas y adaptarse a muchos ambientes diferentes. Por su poco peso
pueden ser transportados por las corrientes de aire y estar en todas partes, pero las
caractersticas del ambiente determinan cules especies pueden multiplicarse.
Las clulas estudiadas en microbologa pueden pertenecer a dos grandes grupos, eucariotas
y procariotas. Las eucariotas constituyen la unidad estructural de protozoarios, hongos y
algas, cuyo tamao las incluye en esta especialidad. Las clulas procariotas son las
bacterias, cuya estructura interna es sencilla. Etimolgicamente el trmino procariota
significa ausencia de membrana celular.
Existen varias clases de microorganismos: mohos, levaduras, bacterias, actinomicetos,
protozoos, algas, virus.
El suelo es uno de los ambientes donde un conjunto ingobernable de microorganismos
compiten entre s para obtener lo que todos ellos necesitan: nutrientes y energa. Al mismo
tiempo, los productos de su metabolismo alteran la composicin qumica del suelo donde
habitan. Ms an, los propios microorganismos evolucionan en respuesta a la presin del
ambiente.
Numerosas especies bacterianas y algunas veces incluso algas microscpicas o protozoos,
proliferan en las superficies expuestas a la humedad formando una biopelcula de
microorganismos contenidos en una matriz de polisacridos, cuyo espesor puede oscilar
entre algunos micrmetros y pocos milmetros, que se adhiere fuertemente a la base. Las
biopelculas se forman en todas las superficies sumergidas, tanto en agua dulce como de
mar, o bien sobre soportes constantemente hmedos tales como paredes de la caera de
agua, pisos o dientes. El 99% de toda la actividad microbiana en un ecosistema abierto
ocurre sobre las superficies.
Los mohos y levaduras forman parte de los hongos. Las levaduras son unicelulares en
condiciones normales mientras que los mohos crecen como un sistema ramificado de
filamentos (micelio).

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Clasificacin de los Microorganismos
La taxonoma de los microorganismos se refiere a las formas de clasificacin con sus
respectivos mtodos. La taxonoma se encarga de la clasificacin, identificacin y
nomenclatura de los organismos.
La clasificacin se relaciona con la agrupacin de los organismos en grupos o taxones en
funcin de semejanzas mutuas o del parentesco evolutivo filogenia. La nomenclatura se
ocupa de la asignacin de nombres a grupos taxonmicos de acuerdo con normas
establecidas. La identificacin determina a que taxn pertenece un determinado organismo.
La base en que se fundamenta la taxonoma microbiana se origina en la investigacin de las
relaciones filogenticas resultantes de la evolucin, la cual desemboc en las tres grandes
categoras o dominios denominados por Carl Woese: Arqueobacterias o archaea,
Eubacterias y Eucariotas.
* Arqueobacteria o Archaea Son las bacterias ms antiguas que se conocen y estn
adaptadas a vivir en ambientes extremos, son de estructura clulas procariota.
* Eubacteria o Bacteria comprende las cianobacterias, los micoplasmas y las llamadas
"bacterias verdaderas", son de estructura clulas procariota.
* Eucariota o Eukarya a este domino pertenecen los microorganismos de los reinos
Protisto: protozoos y algas y del reino Fungi: los hongos filamentosos y los unicelulares
como las levaduras y los organismos del reino Plantas y del reino Animal, son de estructura
celular eucariota.
Estos 3 dominios agrupan a los microorganismos conocidos a excepcin de los
microorganismos acelulares como los virus, viroides y priones. La distancia entre cada uno
de los grupos incluidos en cada dominio indica el grado de parentesco entre ellos.
Aunque el estudio de la legionelosis, nombre con el que se conoce la patologa causada por
las bacterias del gnero Legionella, se inici en el ao 1976, este gnero no fue establecido
hasta tres aos ms tarde. En 1979, los estudios de hibridacin ADN-ADN realizados por
Brenner demostraron que el agente etiolgico de la enfermedad del legionario constitua un
nuevo gnero bacteriano, el gnero Legionella, y denominaron L. pneumophila a la especie
concreta responsable de la enfermedad (Brenner, 1979). El gnero dio nombre a una nueva
familia, Legionellaceae, en la que inicialmente se incluyeron tres gneros, Legionella,
Fluoribacter y Tatlockia. Sin embargo, anlisis posteriores de cidos nucleicos confirmaron
a la familia Legionellaceae como un grupo monofiltico (Figura 1) de la subdivisin
gamma-2 de Proteobacteria (Fields, 2002).

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Dentro del gnero Legionella se diferencian 48 especies (Tabla 1), de las cuales, hasta el
momento, slo 20 se han identificado como causantes de enfermedad en el hombre.
Basndose en criterios serolgicos, las distintas especies de Legionella se han clasificado
en serogrupos. Los serogrupos 1, 4 y 6 son, de los 15 descritos en L. pneumophila, los que
con mayor frecuencia causan legionelosis.

Tabla 1. Especies y serogrupos de Legionella.

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Caractersticas morfolgicas y fisiolgicas

Las bacterias del gnero Legionella son bacilos gramnegativos, aerobios, no esporulados ni
capsulados. Miden de 0.5 a 0.7 m de dimetro y aproximadamente 2 m de longitud; su
morfologa puede ser bacilar o pleomrfica, a veces con formas filamentosas que pueden
alcanzar una longitud de hasta 20 m. A excepcin de L. oakridgensis, que es inmvil, las
especies restantes son flageladas.
Normalmente poseen un solo flagelo polar, pero tambin se han observado flagelos
subpolares y laterales. Por otro lado, se ha visto que algunas cepas procedentes de
aislamientos primarios presentan pili (Meyer, 1980; Blackmon, 1981; Yu, 1990; Prats,
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2002).En contraste con la mayor parte de las bacterias gramnegativas, en el lipopolisacrido
de la pared de Legionella se encuentran grandes cantidades de cidos grasos de cadenas
ramificadas, como se demuestra por cromatografa gas-lquido (Lambert, 1989; Jantzen,
1993; Prats, 2002).
Estructuralmente se considera una bacteria gramnegativa, pero Legionella se visualiza con
dificultad mediante la tincin de Gram. En el caso de emplear esta tcnica, la fucsina bsica
da un mejor resultado como colorante de contraste que la safranina. La tcnica de Gimnez
es tan rpida como la tincin de Gram y tie el microorganismo de forma ms efectiva (Yu,
1990).

En cuanto a su metabolismo, se trata de bacterias aerobias estrictas, capnoflicas (su

crecimiento en el laboratorio se ve favorecido con una atmsfera que contenga un 3% de
CO 2 ) y relativamente inactivas. La principal fuente de energa la obtienen por el
catabolismo de aminocidos, pero tambin pueden oxidar la glucosa a travs de la va de
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Embden-Meyerhof-Parnas. La produccin de oxidasa es variable. Todas las especies
contienen superxido dismutasa as como catalasa y/o peroxidasa, aunque las reacciones
suelen ser dbiles (Yu, 1990; Prats, 2002).
Un pH cercano a la neutralidad es el ms adecuado para el crecimiento de este gnero
bacteriano. Legionella es termoflica, crece en el agua a temperaturas entre 20 y 50 oC y
posee un desarrollo ptimo a 35oC (Figura 4). A temperaturas inferiores a 20oC
permanecen latentes, sinmultiplicarse, y sobreviven durante un perodo de tiempo variable
entre 40 y 60oC. Mueren a temperaturas superiores a 60oC. La temperatura de crecimiento
ptimo y superiores son inusuales en la naturaleza, aunque frecuentes en instalaciones y
dispositivos acuticos artificiales.

Son bacterias nutricionalmente muy exigentes, por lo que requieren una combinacin nica
de nutrientes dentro de un orden para crecer en el laboratorio. Debido a esta caracterstica
son incapaces de crecer en los medios de cultivo empleados habitualmente en los
laboratorios de Microbiologa. Legionella pneumophila fue aislada por primera vez en agar
Muller-Hinton suplementado con hemoglobina e IsoVitaleX. Los componentes esenciales
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que permitieron un crecimiento en este medio resultaron ser el Fe, contenido en la
hemoglobina, y la L-cistena, aminocido esencial proporcionado por el IsoVitaleX. Estos
refinamientos condujeron al desarrollo del agar Feeley-Gorman, que proporcion mejores
resultados en el crecimiento de la bacteria. Ms tarde, el almidn fue sustituido por carbn
activado para detoxificar el medio y como fuente de aminocidos se utiliz extracto de
levadura. Actualmente, el medio ms utilizado para el cultivo de Legionella es Agar BCYE
(buffered charcoal yeast extract) enriquecido con alfa-cetoglutarato con o sin agentes
selectivos aadidos.
Inicialmente, estos requerimientos nutricionales inusuales parecen contradecir la amplia
distribucin de Legionella en ambientes acuticos. La cantidad de nutrientes que Legionella
requiere para su crecimiento es raramente encontrada en agua dulce pero, si estuvieran
presentes, slo serviran para amplificar bacterias de crecimiento rpido que podran
competir con Legionella. Enrealidad, estos nutrientes representan un ambiente intracelular,
no nutrientes solubles comnmente encontrados en agua dulce. Este aspecto es el que
relaciona ntimamente a Legionella con los protozoos de vida libre como parsito
intracelular.
Relaciones evolutivas entre organismos vivos
En la actualidad se pueden determinar relaciones filogenticas (evolutivas) entre los
microorganismos. Para establecer estas relaciones se utilizan una serie de mtodos basados
en comparaciones de la secuencia de cidos nucleicos, particularmente en la secuencia del
ARN ribosmico (ARNr), esto es, el ARN estructural del ribosoma que constituye la
estructura clave de la clula implicada en la traduccin del ARN.
De hecho, uno de los descubrimientos recientes ms importantes en biologa es que los
cambios en la secuencia nucleotdica del ARN ribosmico (determinados en definitiva por
mutaciones en el ADN que codifica el ARN ribosmico) pueden ser usados como una
medida para establecer relaciones evolutivas entre clulas.
A partir de estudios sobre secuencias de ARN ribosmico se pueden definir tres linajes
celulares evolutivamente diferentes, dos de los cuales presentan estructura procaritica y
uno que es eucaritico. Los grupos o dominios se llaman Eubacteria, Archaea o
Arqueobacteria y Eukarya o Eucariota.
Pese al hecho de que a nivel molecular tanto Eubacteria como Arqueobacteria son
procariotas, los dos grupos difieren evolutivamente entre s tanto como del grupo Eucariota.
Se piensa que los tres grupos se originaron muy pronto en la historia de la vida sobre la
Tierra por divergencias a partir de un organismo ancestral comn, el "antepasado
universal". Eubacteria y Arqueobacteria representan ramas evolutivas que nunca
evolucionaron ms all del nivel microbiano

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Figura 5. Relaciones evolutivas entre los organismos vivos

Identificacin y clasificacin de los microorganismos
Adems de comprender y valorar los orgenes filogenticos de los organismos celulares
resulta importante, ser capaz de identificar y clasificar los microorganismos. Una
identificacin rpida de un microorganismo causante de enfermedades en humanos o
animales es esencial para establecer el tratamiento adecuado del paciente. Se han usado
varios criterios para caracterizar microorganismos y, en la actualidad, se tienen en cuenta
tanto caractersticas celulares como filogenticas para la clasificacin.
Tras un estudio profundo de la estructura y funcin de un microorganismo, incluyendo su
gentica, metabolismo, comportamiento y otras propiedades distintivas, es posible
reconocer un cierto nmero de caractersticas nicas en un microorganismo dado. Una vez
que el organismo ha sido definido en funcin de esa serie de caractersticas propias, recibe
un nombre.

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Los microbilogos usan el sistema binomial de nomenclatura establecido inicialmente
por Linneo para designar animales y plantas. El sistema binomial consta de dos nombres: el
gnero y la especie. El gnero es un nombre que se aplica a ciertos organismos
relacionados; dentro del gnero, cada tipo de organismo recibe un nombre de especie. Los
nombres de gnero y especie se usan siempre juntos para describir un tipo especfico de
organismo, ya sea una clula aislada o un grupo de clulas. La primera palabra corresponde
al nombre cientfico del gnero y se escribe la primera letra con mayscula y en cursiva,
mientras que la segunda palabra corresponde a la especie, la cual se escribe en minsculas y
en cursiva. Por ejemplo, la bacteria Escherichia coli, o abreviadamente E. coli, tiene una
designacin de gnero, Escherichia, y un nombre de especie, coli.
En microbiologa la unidad taxonmica bsica es la especie microbiana, cepa o estirpe
Efectos de los Agentes Fisicos y Quimicos sobre la vida Bacteriana
Todos los microorganismos son afectados por diferentes factores fsicos, entre ellos el ms
importante es la temperatura, pero tambin la presin y otros elementos del medio.
Los microorganismos se clasifican en tres categoras en cuanto a la temperatura ptima que
requieren para llevar a cabo su actividad metablica para su crecimiento:
Psicrfilos: se desarrollan mejor a 10C (+- 5C)
Mesfilos: crecen mejor a 35C (+- 5C)
Termfilos: con ptimo crecimiento a 60C (+- 10C)
Cualquier derivacin de su temperatura ptima de crecimiento, para arriba o para abajo, lo
perjudica. Las temperaturas bajas slo detienen el metabolismo, pero las altas temperaturas,
desarticulan la actividad metablica por afectar la estructura funcional de sus enzimas. Es
por esto por lo cual se usan tanto las altas temperaturas para destruir la vida microbiana.
La temperatura, el agua y la vida estn articuladas entre s, debido a que la vida depende de
todas las reacciones qumicas que constituyen el metabolismo celular, sin embargo, todas
ellas ocurren en un medio acuoso, ya que gran parte del citoplasma celular es agua, y las
reacciones qumicas ocurren en el agua y su eficiencia depende de la temperatura en que se
presenten. La temperatura, la presin, las radiaciones ionizantes, el pH entre otros factores,
controlan las poblaciones de microorganismos del ecosistema, y estos factores tambin
pueden ser usados para controlarlos.
La mayora de las bacterias pueden crecer dentro de un margen de pH de su medio,
manteniendo al mismo tiempo su pH interno ptimo prcticamente constante.
Por ejemplo, Escherichia coli puede crecer bien entre pH 6 y pH 8, pero su pH interno es
siempre 7.6 o muy cercano a ese valor.
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Respecto del margen normal de pH a los que crecen las bacterias, stas se pueden clasificar
en:
Neutrfilas: si crecen de modo ptimo en torno a la neutralidad (entre pH 5.5 y 8)
Acidfilas: si crecen normalmente entre pH 0 y pH 5..
Alcalfilas: si crecen entre pH 8.5 y pH 11.5.
La mayor parte de las bacterias son neutrfilas. Muchas bacterias neutrfilas modifican el
pH del medio, y resisten entornos relativamente cidos o alcalinos. Por ejemplo, algunas
bacterias fermentativas excretan cidos, mientras otras alcalinizan el medio, p. ej.,
produciendo amonio a partir de desaminacin de aminocidos. Por otro lado, la mayor parte
de los hongos y levaduras requieren pHs ligeramente cidos (en torno a 4-5).
Aunque los microorganismos pueden crecer en un margen ms o menos amplio de pH
(alrededor de un ptimo), los cambios bruscos pueden ser lesivos (afectando a la membrana
y al transporte de solutos, e inhibiendo enzimas). Si el pH citoplsmico cae rpidamente
hasta 5 o menos, la bacteria puede morir.
En muchas circunstancias es necesario e indispensable trabajar con o en medios libres de
microorganismos vivos, es decir en ambientes estriles.
Se entiende por esterilizacin la eliminacin completa de todos los microorganismos vivos
que se encuentren en un objeto o material, de tal manera que decir estril es decir sin vida.
Para esterilizar pueden usarse diferentes procedimientos. El proceso de esterilizacin sirve
slo para objetos inanimados, pero no para organismos vivos, puesto que stos no se
pueden liberar de microorganismos, ya que los procedimientos que acaban con la vida
microbiana, tambin acaba con las clulas de ese organismo.
La temperatura es la que mas se utiliza para producir efectos esterilizantes, tanto calor seco
(estufas de esterilizacin, flameado) como calor hmedo (autoclave). Existen distintos
procedimientos de esterilizacin por calor: estufa, flameado, ebullicin, autoclave y
pasteurizacin (aunque esta no logra la esterilizacin total).
Otros procedimientos de esterilizacin son el uso de filtros y las radiaciones.
La desinfeccin es la destruccin o eliminacin de microorganismos peligrosos por agentes
qumicos, desde lavar con agua y jabn y luego aplicar un producto qumico como puede
ser alcohol, soluciones de yodo o soluciones de sales orgnicas de mercurio, como el
merthiolate. Un desinfectante es un producto que destruye o elimina microorganismos en
superficies inanimadas, por otro lado, un antisptico es un producto que destruye la vida de
una bacteria o un virus pero que se puede aplicar en superficies vivas. La antisepsia es el
procedimiento por el cual se detiene el crecimiento bacteriano en una superficie viva.
Asepsia es la ausencia de organismos potencialmente patgenos.
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Existen ciertas sustancias qumicas que influyen negativamente sobre las bacterias,
pudiendo ejercer dos tipos de efectos diferentes:
bactericida: frmaco que destruye microorganismos dentro de un husped.
bacteriosttico: producto que inhibe el crecimiento de los microorganismos en el husped.
Se entiende por quimioterpico al producto resultado de la sntesis qumica que es capaz de
matar microorganismos dentro de un paciente, mientras que un antibitico es el producto de
origen microbiano que es capaz de matar microorganismos dentro de un husped. Es decir
que la diferencia entre un agente quimioterpico y un antibitico es que el quimioterpico
es sintetizado en un laboratorio, mientras que el antibitico es producido por un
microorganismo y mata otros microorganismos.
Existen una gran variedad de antibiticos y quimioterpicos que actan a travs de distintos
mecanismos:
Antibiticos, que interfieren con la biosntesis de la pared celular, como la penicilina y
cefalosporinas, antibiticos que actan sobre la membrana celular, antibiticos que inhiben
la sntesis de protenas, como las tetraciclinas, aminoglucsidos y macrlidos y antibiticos
que actan sobre la sntesis de cidos nucleicos, como las quinolonas.

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