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Marco Terico

MICROSCOPA PTICA Y LUPA


Profesor:
Dr. Sergio Tapia Mura
Ayudantes:
Roci Aravena Zarate
Nora Contreras Castro
Maycol Rojas Snchez

Valparaso, 2015

Marco Terico N 1: Microscopia ptica y lupa.


1.- Introduccin:
El objetivo de toda ciencia debe ser, el dar explicaciones a los
fenmenos observados y establecer principios generales que permiten
predecir las relaciones entre estos y otros fenmenos.
La palabra microscopio proviene del griego,
mikro (pequeo), scopio
(observar). Sin duda es un instrumento esencial en el que hacer de la biologa, este nos
ha permitido conocer y caracterizar los seres vivos y sus estructuras como las clulas,
estas son de pequeo tamao por lo que es imprescindible el uso del microscopio para
su visualizacin.
La lupa binocular es un instrumento ptico que produce una imagen aumentada
del objeto que se observa a travs de ella. La lupa que vas a utilizar forma una imagen
de un tamao entre 20 y 40 veces mayor que el objeto que observas.
2.- Marco Terico:
Los microscopios son instrumentos que nos permiten observar objetos pequeos
que no se pueden ver a simple vista ni con la ayuda de una lupa, por lo que es
importante sealar que existen una amplia gama de microscopios, los cuales son
especficos para cada funcin y resolucin. Estos son:

Microscopio ptico (MO): tambin conocido como microscopio de luz, siendo el


tipo de microscopio ms utilizado debido a su fcil acceso y manipulacin. Tiene
un lmite de resolucin de cerca de 200 nm, esto se debe a la longitud de onda de la
luz, (0.4 0.7 m). Las clulas observadas bajo este microscopio pueden estar
vivas, fijadas o teidas.

Microscopio electrnico: es aqul que utiliza una fuente de electrones en lugar de


fotones, que son generados por un can de electrones, acelerados por un alto
voltaje y focalizados por medio de lentes magnticos, obteniendo una imagen
ampliada del objeto, generando una mejor visin y ampliacin del mundo
microscpico. Existen dos tipos de microscopios electrnicos:
Microscopio electrnico de transmisin (MET): proyecta electrones que son
dispersados a travs de una fina capa de tejido o material a observar, fijado y
teido con iones de metales pesados, produciendo una imagen en dos
dimensiones sobre una pantalla fosforescente. Este tipo de microscopio
puede aumentar la imagen de un objeto hasta un milln de
veces.
Microscopio electrnico de barrido (MEB): Utiliza un haz
de electrones para obtener una imagen, tiene una gran
profundidad de campo, produciendo imgenes de alta
resolucin, donde las caractersticas ms imperceptibles

de las muestras se pueden estudiar con gran amplificacin, generando una


imagen en tres dimensiones.

Microscopio de fluorescencia: las sustancias fluorescentes absorben luz de una


determinada longitud de onda, y emite luz de una longitud de onda mayor, por lo
tanto si los cortes del tejido son examinados con luz de onda corta (azul o violeta),
cerca del lmite inferior del espectro visible, los componentes fluorescentes del
preparado emitirn una luz de otro color (amarilla, verde). Este tipo de
microscopio permite identificar ciertas sustancias en muy bajas concentraciones,
evidenciando molculas naturales presente en la muestra como la vitamina A,
algunos neurotransmisores y uniones intercelulares.

Microscopio de contraste de fase: permite observar clulas sin colorear, importante


para la observacin de clulas vivas.

Microscopio de luz ultravioleta: la imagen depende de la absorcin de la luz por las


molculas que componen la muestra, la fuente de luz ultravioleta tiene una longitud
de onda de 200nm, por lo tanto puede alcanzar una resolucin de 0,1m. Los
resultados que se obtienen al trabajar con este tipo de microscopio es por medio de
fotografas, las muestras no pueden ser observadas directamente a travs del ocular,
ya que la intensidad de la luz ultravioleta puede daar la retina. Este microscopio
puede captar la presencia de ciertos cidos nucleicos, protenas y dependiendo de la
longitud de onda, se puede cuantificar el DNA y el RNA de cada clula.

Los componentes de un microscopio ptico son:


Parte mecnica:

Soporte: Mantiene la parte ptica del microscopio, conformada por dos partes, el
pie o base: tiene como funcin dar estabilidad y soporte gracias al peso que posee,
y el brazo, es el soporte ubicado entre la base y el sistema ptico, cumple la funcin
de sostn.

Platina: Plataforma metlica horizontal en donde se deposita la muestra


histolgica, posee un orificio en el centro permitiendo el paso de los rayos de luz,
procedentes de la fuente de iluminacin situada por debajo, adems posee un carro
mvil permitiendo de esta manera la movilizacin de la muestra para su
observacin, fijado por dos pinzas las cuales retienen el portaobjetos sobre la
platina y un sistema de tornillos de desplazamiento, que permite mover la
preparacin de delante hacia atrs o de izquierda a derecha y viceversa.

Cabezal: Contiene los sistemas de lentes oculares, siendo monocular o binocular.

Revolver: Contiene los sistemas de lentes objetivos, permitiendo girar y cambiar


los objetivos.

Tornillos de enfoque: Mueven la platina hacia arriba y hacia abajo, estos son:
Macromtrico: Se utiliza para conseguir un ajuste aproximado de la imagen a
observar, y el micromtrico permite enfocar correctamente la imagen.
Sistema ptico:

Oculares: Son lentes situado cerca del ojo del observador y que se encuentran en el
cabezal del microscopio, teniendo como funcin principal captar y ampliar la
imagen formada en los objetivos. Podemos encontrar microscopios con un ocular
(monocular) o dos oculares (binocular) que estn unidos mediante un mecanismo
que permite ajustar la distancia interpupilar.

Objetivos: Sistema de lentes que permiten generar una imagen real, invertida y
aumentada. Estos se encuentra cerca de la preparacin, sujetos a un revolver que
permite el cambio de un objetivo a otro. Generalmente se encuentran 4X, 10X, 40X
y 100X lo que indica la cantidad de veces que amplifica una muestra, en este ltimo
se utiliza un aceite de inmersin o aceite de cedro. En la superficie de cada objetivo
se indican sus caractersticas principales, aumento, apertura numrica y llevan
dibujado un anillo coloreado que indica el nmero de aumento (rojo 4x, amarillo
10x, azul 40x y blanco 100x).

Condensador: Es un sistema de lentes con gran apertura, que se encuentra entre la


platina y la fuente de iluminacin, tiene como funcin concentrar los rayos
luminosos sobre la preparacin, generada por la fuente de iluminacin.

Diafragma: Se encuentra situado en el interior del condensador, permitiendo


regular la cantidad de luz que pasa por el condensador.

Foco: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

Fuente luminosa: Es la luz proporcionada por una lmpara ubicada en la base del
microscopio. Se enciende y se apaga con un interruptor y en su superficie externa
puede tener una especie de anillo para colocar filtros que facilitan la visualizacin.

Poder de resolucin: Capacidad de mostrar la imagen en sus detalles ms finos.

Apertura Numerica (AN): Capacidad que tiene el objetivo para captar los rayos
de luz.

Lupa Binocular
Parte ptica:
Consta de cuatro sistemas de lentes; los dos ms prximos a los ojos del
observador se llaman oculares y los dos ms prximos al objeto observado se
denominan objetivos. Se llama lupa binocular por tener dos sistemas oculares, para
observar el objeto con los dos ojos a la vez. Esto permite tener una imagen del objeto en
relieve: es lo que se llama visin estereoscpica. Los oculares estn insertados en dos
cortos tubos. El tubo del lado derecho posee un anillo para corregir la diferencia de
visin que tengamos en nuestros ojos. Los cuerpos de los oculares contienen unos
prismas inversores que dirigen las imgenes a nuestros ojos y pueden girar a derecha e
izquierda para que su separacin coincida con la separacin de nuestros ojos.
Partes de una lupa binocular:

Base o estativo: Base de la lupa.

Platina: Donde se coloca la muestra a observar. Pueden utilizarse de distintos


colores para aumentar el contraste.

Pinzas: para fijar la muestra

Columna: donde se articulan el resto de los componentes

Cuerpo de la lupa, que puede desplazarse verticalmente para que el objeto


observado quede enfocado. Esta operacin se denomina enfocar y se lleva a cabo
con dos tornillos laterales.

Anillo de sujecin, para fijar el cuerpo de la lupa a la altura que estimemos.

Mando de enfoque: tornillos laterales de movimiento simultneo; stos deslizan el


cuerpo de la lupa, lo que permite movimientos el enfoque.

Muestras
No es tan simple observar tejidos o clulas vivas, debido a que los tejidos vivos en
estudio presentan un espesor con el cual la penetracin de la luz es ms difcil, es por
esto que se utilizan generalmente tejidos muertos para su estudio. Los tejidos en general
deben ser fijados, deshidratados, embebidos en una sustancia endurecible (inclusin) y
cortados en finas lminas, adems de emplear colorantes que tian selectivamente los
distintos componentes celulares.
Un concepto importante es el poder de resolucin, este es bsicamente el poder de
distinguir un objeto de otro, siendo la distancia mnima que debe haber entre dos objetos
para que sean percibidos como objetos separados. El poder resolutivo del ojo humano es

de hasta 0.2mm (200 m) entre dos puntos, a una menor distancia solo observaramos
un punto. El poder resolutivo de un microscopio ptico bordea los 0,2 m.