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Synergismus scyentifica UTFPR, Pato Branco, 02 (1,2,3,4) .

2007

PRODUO DE LCOOL DE MANDIOCA A PARTIR DE HIDRLISE


ENZIMTICA NATURAL
Deonir Agustini & Henrique Emilio Junior
UTFPR

Resumo - Neste trabalho foi avaliada a utilizao de enzimas naturais -amilase e amilase presentes na batata doce como uma forma de hidrlise do amido da mandioca para
a obteno de etanol, buscando uma alternativa vivel para a produo de lcool a partir
dessa cultura. Para a hidrlise do amido, foi obtida uma massa ralada de mandioca, a qual
foi misturada na proporo adequada soluo natural de enzimas da batata doce e
processada a digesto. O material hidrolisado foi posteriormente submetido fermentao,
em fermentador de bancada por 36 horas a 30oC de temperatura e 100 rpm de agitao,
utilizando levedura de panificao. Foram avaliados os principais parmetros fermentativos
e calculado o rendimento da hidrlise e eficincia da bioconverso. No final do processo foi
observado consumo de 100% dos acares redutores, 99,15% de acares redutores totais e
uma produo em etanol de 3,92% ou 39,19 mL/L. A taxa de converso de amido em
acares fermentescveis foi de 26% na hidrlise e foi obtido uma eficincia de 71,43% no
processo fermentativo.
Palavras-Chave: etanol, hidrlise, fermentao.

PRODUCTION OF ALCOHOL OF CASSAVA STARTING FROM NATURAL


ENZYMATIC HYDROLYZE
Abstract- In this work the use of natural enzymes was evaluated -amylase and -amylase
presents in the sweet potato as a form of hydrolyze of the starch of the cassava for the
ethanol obtaining, looking for a viable alternative for the production of alcohol starting
from that culture. For the hydrolyze of the starch, it was obtained a grated mass of cassava,
which was mixed in the adapted proportion the natural solution of enzymes of the sweet
potato and processed the digestion. The hydrolyzed material was later submitted the
fermentation, in fermentador of having supported for 36 hours to 30oC of temperature and
100 agitation rpm, using bread-making yeast. They were appraised the principal
fermentative parameters and calculated the revenue of the hydrolyze and efficiency of the
bioconversion. In the end of the process it was observed consumption of 100% of the
sugars reducers, 99,15% of sugars total reducers and a production in ethanol of 3,92% or
39,19 mL/L. The rate of conversion of starch in fermentative sugars was of 26% in the
hydrolyze and it was obtained an efficiency of 71,43% in the process fermentation.
KeyWord: ethanol, hydrolyze, fermentation.

1. INTRODUO
O etanol (lcool etlico), CH3CH2OH, um dos
principais lcoois existentes. Trata-se de um lquido
incolor, inflamvel e de odor caracterstico, miscvel em
gua e em outros compostos orgnicos. Apresenta ponto
de fuso de -114,1C e ponto de ebulio de 78,5C, e
densidade de 0,789 g/mL a 20C (REIS, 2006). Possui
vrias aplicaes, sendo as mais comuns o chamado uso
potvel, alimentcio e farmacutico, alm de usos menos
nobres como o industrial (BRINGHENTI, 2004).
A produo de etanol no Brasil, em sua grande maioria,
origina-se do cultivo da cana-de- acar, podendo ser
citado ainda a mandioca como outra opo de matriaprima alcooleira.
A supremacia da cana-de-acar na produo de lcool

est ligada principalmente ao fato dela j possuir os


acares
fermentescveis
que
so
diretamente
metabolizados pela levedura alcolica, no necessitando
de digesto prvia na produo do mosto, como ocorre
com o amido da mandioca (FILHO; MENDES, 2003).
Esse processo de digesto denominado de hidrlise e
baseia-se na transformao do amido ou fcula em
acares fermentescveis. Realiza-se por via qumica ou
biolgica. O processo qumico utiliza cido para a quebra
do amido. J a hidrlise biolgica, de longe a mais
empregada atualmente, faz-se por ao enzimtica ou pela
ao de microbiana de certos fungos (LIMA, 1987).
O processo da fermentao alcolica caracteriza-se como
uma via catablica, na qual h a degradao de molculas
de acar (glicose ou frutose), no interior da clula de

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microrganismos (leveduras ou bactrias), ate a formao


de etanol e CO2, havendo liberao de energia qumica e
trmica (FILHO; MENDES, 2003). Seu controle feito
pela observao de alguns parmetros, tais como: tempo
de fermentao, temperatura, pH, odor, acares no
mosto, formao do produto desejado, entre outros
(NOGUEIRA; FILHO, 2005).
O presente trabalho prope um processo alternativo para a
produo de etanol a partir do amido de mandioca,
utilizando as enzimas amilolticas naturais presentes na
batata doce como agente hidrolisante, pois as mesmas
apresentam um custo muito menor do que as enzimas
comerciais utilizadas atualmente no processo alcolico
tradicional envolvendo o amido dessa raiz, objetivando
uma reduo nos custos e conseqentemente, a
viabilidade comercial do lcool de mandioca.
2. MATERIAL E MTODOS

acares redutores.
2.2.3. Teor de amido
A determinao do amido no processo foi realizada
atravs de uma hidrlise cida inicial, baseada na
metodologia de Carvalho (2002), citada por Carvalho;
Fernandes & Pires (2006), onde houve a produo
exclusiva de glicose, sendo feita a posterior quantificao
da quantidade deste monossacardeo atravs do mtodo de
Somogyi-Nelson e realizada a devida converso em teor
de amido.
2.2.4. Determinao do pH da massa de mandioca
Esta anlise tem como base a metodologia descrita pelo
Instituto Adolfo Lutz (1985), pela qual feita a leitura
eletrnica do pH de uma soluo de mandioca ralada e
gua (FRANCO, 100 el. al., 2002g).
2.2.5. Determinao do rendimento da hidrlise

2.1. Material

2.2. Mtodos

Para a determinao da eficincia da hidrlise,


consideraram-se os valores de amido que foram
transformados em glicose, atravs da estequiometria dessa
converso:
1mol de glicose = 1mol de H2O + massa de amido, ento:
180,16 g de glicose = 18 g de gua + 162,16 g de amido
ou
100 g de amido teoricamente produz 111,1 g de glicose
(BRINGHENTI, 2004).

As principais etapas do processo esto ilustradas na


Figura 01.

2.2.6. Determinao de acares redutores totais


(ART)

Razes de mandioca (manihot esculenta) e tubrculos de


batata doce (Ipomoea batatas), obtidas no comrcio local,
provenientes da prpria regio, sob a forma in natura,
constituram o material necessrio para preparar o mosto.
Fermento de panificao (Saccharomyces cerevisiae) foi o
microrganismo escolhido para o processo da fermentao
alcolica, objetivando a produo de etanol.

A determinao de acares redutores totais foi


desenvolvida pelo mtodo colorimtrico do fenol
sulfrico (Dubois et. al. 1956), e tem como princpio o
uso de um meio fortemente cido para a dosagem de ART.
2.2.7. Determinao de slidos solveis
Utilizou-se o refratmetro manual para a determinao da
quantidade dos slidos solveis presentes no mosto,
expressos em oBrix.
2.2.8. Determinao de etanol

2.2.1. Teor de umidade da mandioca


O teor de umidade da mandioca foi determinado
gravimetricamente, em estufa 105oC at peso constante,
segundo metodologia preconizada pela AOAC
Association of Official Analytical Chemists (1994) de
acordo com Franco et. al. (2002g).
2.2.2. Determinao de acares redutores (AR)
Os
acares
redutores
foram
quantificados
espectrofotomtricamente pelo mtodo de SomogyiNelson, o qual baseia-se na reduo do cobre pelos

A determinao da concentrao de etanol em soluo,


conforme metodologia descrita pela AOAC Association
of Official Analytical Chemists, feita atravs da reao
de oxidao de um lcool primrio, como o etanol, com
ons dicromato. As leituras espectrofotomtricas
realizadas em 440 nm medem a absoro do dicromato
restante na soluo, aps a reao com etanol.
2.2.9. Determinao de biomassa
A determinao do crescimento celular da levedura
Saccharimyces cerevisiae foi feita atravs do mtodo
espectroscpico, onde feita a leitura da absorbncia da
amostra e comparada com uma curva padro, que
relaciona em diferentes diluies a absorbncia dos

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padres e a concentrao celular.


2.2.10.Determinao do pH no fermentado

diretamente do produto fermentado. Os dados obtidos


durante o perodo da fermentao foram agrupados na
tabela 01.

A determinao do pH durante a fermentao do mosto


foi realizada diretamente no produto fermentado, sendo os
valores apresentados no prprio fermentador, atravs de
um eletrodo medidor de pH acoplado ao reator.
2.2.11.Rendimento da fermentao alcolica
O clculo da eficincia da fermentao alcolica relaciona
os teores de glicose contidos no mosto e de lcool
presentes no vinho, atravs do quociente entre o
rendimento prtico e o rendimento terico, como expressa
a formula:
E = (Vprtico / Vterico) *100
Onde:
E = eficincia da fermentao alcolica (%);
Vprtico = volume de etanol prtico formado na
fermentao alcolica;
Vterico = volume de etanol terico que deveria ter sido
formado na fermentao alcolica.
3. RESULTADOS E DISCUSSO
3.1. Ensaios prvios fermentao
As anlises realizadas nessa etapa do processo visam
principalmente preparar o produto que ser fermentado,
atravs da caracterizao da matria-prima, sua hidrlise e
correo do mosto, adequando-o as exigncias da
levedura utilizada na fermentao. Os valores obtidos
foram os seguintes:
Teor de umidade da mandioca: 61,55% e 38,45% de
E.S.T. (extrato seco total).
Teor de amido: 31,9% em massa mida e 82,9% na massa
seca.
D pH da massa de mandioca: 6,69.
Rendimento da hidrlise: 26%.
Slidos solveis no mosto: 9oBrix.
Acares redutores (AR) no mosto: 8,53%.
Acares totais (ART) no mosto: 11,06%.
Com a quantificao dos teores de umidade e amido, e
pelo sucesso na converso enzimtica natural do amido
em glicose (26%), certificou-se do emprego da mandioca
para a produo de lcool. As anlises de slidos solveis,
acares redutores e totais possibilitaram o preparo do
produto a ser fermentado, ajustando a quantidade de
substrato presente no mosto levedura e a proporo
mxima de slidos solveis suportados por esse
microrganismo.
3.2. Acompanhamento da fermentao
A fermentao desenvolveu-se durante 36 horas, sendo
que cinco parmetros foram acompanhados durante esse
perodo (biomassa, acares redutores, acares redutores
totais, etanol e pH) atravs de 16 amostras retiradas

Com os dados da tabela anterior, pode ser observado que


houve um discreto crescimento celular da Saccharomyces
cerevisiae devido limitao de substrato presente no
mosto (8,53% de AR e 11,06% de ART), e a baixa
disponibilidade de O2. Observou-se, porm, que a
fermentao processou-se de forma adequada, como
indica o total consumo dos acares redutores e o quase
esgotamento dos acares redutores totais e a conseqente
formao de etanol, produto esperado no processo. A
anlise do pH tambm indica a normalidade da
fermentao, com a queda gradual do mesmo durante as
36 horas.
A relao estabelecida entre o consumo dos substratos do
mosto e a crescente concentrao do produto formado,
ilustra perfeitamente o perfil da fermentao, como pode
ser visto na figura 2.

3.3. Rendimento da fermentao alcolica


A eficincia da fermentao ficou em 71,43%, quando
relacionada quantidade de produto obtido no processo e
o valor terico esperado para o mesmo.
4. CONCLUSO
O rendimento da converso de amido em acares
fermentescveis catalisado pelas enzimas amilolticas

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presentes na batata doce foi considerado bom levando em


conta os gastos reduzidos do processo, alcanando a taxa
de converso de 26%.
Com o acompanhamento dos principais parmetros da
fermentao do mosto obtido pela hidrlise natural,
concluiu-se que a mesma desenvolveu-se de forma
normal, indicada pelo consumo quase que total dos
acares fermentescveis, queda do pH, aumento da
biomassa e produo de etanol, atingindo este, a
quantidade final de 39,19 mL/L ou 3,92%, com uma
eficincia no processo fermentativo de 71,43%.
Portanto, conclui-se que o fator determinante para o
sucesso na produo de etanol a partir da mandioca a
realizao de uma hidrlise eficiente, ou seja, uma alta
converso de amido em acares, pois o processo de
fermentao, seja ele da cana-de-acar ou da mandioca
no apresenta diferenas, basta disponibilidade de
acares fermentescveis no mosto para a converso em
etanol pelas leveduras alcolicas.

5. REFERNCIAS
BRINGHENTI, L. Qualidades do lcool produzido a partir de resduos
amilceos da agroindustrializao da mandioca. Botucatu, 2004. 72 p.
Dissertao (Mestrado em Agronomia)
Faculdade de Cincias
Agronmicas, Universidade Estadual Paulista Jlio de Mesquita Filho ,
2004.
CARVALHO, G.G. P.; FERNANDES, Francisco den de Paiva; PIRES,
Aureliano Jos Vieira. Mtodos de determinao dos teores de amido e
pectina em alimentos animais. Espanha, v. 7, n. 1, p. 1-12, jan. 2006.
FILHO, WGV; MENDES, BP. In: Tecnologia, usos e potencialidades de
tuberosas amilceas Latino Americanas. Fermentao alcolica de razes
tropicais. So Paulo: Fundao Cargill, 2003. v. 3, p. 530-575.
FRANCO, CML, et.al. In: Propriedades gerais do amido. Metodologias
de anlise de amido. So Paulo: Fundao cargill, 2002. v. 1, p. 185-203.
LIMA, U.A.; AQUARONE, E.; BORZANI, W. Biotecnologia:
tecnologia das fermentaes. 4. ed. So Paulo: Edgard Blcher Ltda, v.1.
1987.
NOGUEIRA, A. M.P.; FILHO, W.G. V.. Aguardente de cana. Botucatu:
UNESP, 2005. 71 p.
REIS, J. P. Z. Dosagem de etanol utilizando lcool desidrogenase de
levedura de panificao. Araraquara, 2006. 77 f. Dissertao (Mestrado
em Cincias de Alimentos)
Faculdade de Cincias Farmacuticas,
Universidade Estadual Paulista Jlio de Mesquita Filho , 2006.

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